用于防治蔬菜立枯丝核病的土壤添加物 本发明涉及一种用于防治蔬菜立枯丝核病的组合物，尤其涉及一种可以显著抑制蔬菜立枯丝核病发生率且不会对蔬菜产生毒伤现象的土壤添加物。
豌豆立枯丝核病(由Rhizoctonia solani AG-4引起)是夏季豌豆栽培的主要限制因素，属于重要的土壤传染病害之一。因为立枯丝核病的防治工作，常常受制于土壤环境、R.solani的习性与栖群动态及作物遗传因子的影响，防治工作相当困难；因此，学者们为了突破防治立枯丝核病的瓶颈，除了加强抗病选种、育种、栽培技术的改良、农业化学药剂的施用及寻找拮抗微生物等防治策略之外，也利用土壤添加物来降低立枯丝核病的发生，借以保护植物的健康。
利用有机土壤添加物虽然可以提供植物营养物质、改良土壤理化性质及抑制病害的发生，但是每公顷的农田至少必需施用14-28吨的有机土壤添加物，才能达到防治作物根部病害的效果。并且有机土壤添加物的肥效缓慢，如果发酵不完全时，经常会导致农作物根部的毒伤。反之，利用无机添加物，除了直接快速促进作物的生长及抑制植物病原菌外，农田施用无机添加物地量远少于有机土壤添加物的用量。惟重复地施用化学肥料(即无机添加物)会加速土壤有机质的耗损，并促使土壤的物理、化学及生物性质劣化，造成作物的生产力下降。
为了避免有机及无机添加物个别施用的缺陷，并考虑采纳两者的优点，因此，长期以来人们尝试结合有机及无机添加物，藉以开发出具防治豌豆立枯丝核病的合成土壤添加物(formulated soil amendment)。虽然发明人过去发展出名为S-Ⅱ的混合物，可以有效防治多种土媒作物病害，但是对于防治豌豆立枯丝核病的效果不佳。后来发明人再开发出另一种酸性合成土壤添加物SF-21混合物，可以有效降低南方松苗立枯丝核病的族群密度及控制松苗立枯丝核病的发生，惟SF-21混合物不适宜应用在蔬菜立枯丝核病的防治工作。
有鉴于目前缺乏适当的土壤添加物，可以用来防治蔬菜的立枯丝核病，因此发明人积极地潜心研究及试验，收集国内、外各种低廉的有机及无机资材，试验筛选出具抑制R、solani危害蔬菜发生立枯丝核病的材料，并考虑作物植株成长及避免毒伤等因素，调制出综合性的添加物配方，藉以帮助豌豆、甘蓝及萝卜等蔬菜植株的发育及防治立枯丝核病的发生。
本发明之主要目的是提供一种可以有效防治蔬菜立枯丝核病的土壤添加物。
本发明的技术方案在于提供了一种用于防治蔬菜立枯丝核病的土壤添加物，该土壤添加物主要由采收过香菇的香菇太空包废弃物、氧化钙、丙烯醇、鱼粉、肉骨粉、血粉、菜子粕及硝酸铵混合而成。
该土壤添加物的配方可以为：鱼粉16-26公斤、肉骨粉9-18公斤、血粉2-8公斤、菜子粕1-3公斤、硝酸铵2-6公斤、氧化钙2-6公斤、香菇太空包废弃物18-31公斤及丙烯醇10倍液20-30公升。
该土壤添加物的比较好的配方为：鱼粉20公斤、肉骨粉15公斤、血粉5公斤、菜子粕2公斤、硝酸铵4公斤、氧化钙4公斤、香菇太空包废弃物25公斤及丙烯醇10倍液25公升。
经过试验证明鱼粉、肉骨粉、血粉、菜子粕及硝酸铵之混合物具有抑制豌豆立枯丝核病发生的作用，并且香菇太空包废弃物也具有微弱抑制R、solaniAG-4的效果且可以促进或不影响豌豆植株的生长。搭配以氧化钙组成的混合物，施用于土壤，可有效抑制豌豆立枯丝核病的发生，并且不会对豌豆植株产生毒伤的现象。
进一步，再于上述混合物混入丙烯醇，组合成新混合物。利用该新混合物的丙烯醇，除提高香菇太空包废弃物内部所含Trichoderma spp的菌量数与竞争性，以及提高防治豌豆立枯丝核病的效果外，还可以进一步防治甘蓝及萝卜等蔬菜的立枯丝核病。
下面以试验说明的方式，详细说明本发明配方的步骤及成份：
本发明是为一种防治蔬菜立枯丝核病的组合物配方，其主要是收集国内、外各种低廉的有机及无机资材，利用实际试验的方式，筛选出具有抑制R.solani危害蔬菜发生立枯丝核病的材料，再考虑作物植株成长及避免毒伤等因素，调制出综合性的组合物，可以有效帮助豌豆及甘蓝等蔬菜植株的发育成长及防治立枯丝核病的发生。
首先，采得豌豆立枯丝核病之患病植株，以2％水琼脂培养基分离得R.solani AG-4之PR-03-04及PR-Ⅱ-02两菌株，再依“马铃薯-土壤培养基法”制造R.solani PR-03-04及PR-Ⅱ-02之接种源，随后将在马铃薯土壤培养基内的两种病菌接种源，分别再与灭菌过的砂质土壤以1∶100的比例，均匀拌合成大量的病菌土备用；
其次，筛选出具有抑制豌豆立枯丝核病的有机及无机添加物：
A、不同有机添加物R.solani AG-4缠据单叶豆种子的影响：
将无菌砂质土壤与病菌土以9∶1(w/w)的比例均匀拌合后，分别添加2％(w/w)的肉骨粉、血粉、甘蓝粉、菜子粕、玉米粕、鱼粉、大蒜粉、葱粉、蓖麻粕、糖蜜、香菇太空包废弃物、蚵壳粉、花生粕、粗糠、米糠、黄豆粕、枇杷叶粉、布袋莲粉及小麦粉等有机添加物，拌合盛装于温室的培植盆内，早、晚浇水经过一星期的时间，利用单叶豆种子缠据法，评估有机添加物的抑菌效果。
注：单叶豆种子缠据法：
逢机取土样100克，装于250cc的烧杯内，调整土壤水份含量为12-15％(w/w)之间，然后将浸渍过500ppm拉草之单叶豆(Alyciarpus vaginalisDC)种子60粒分别均匀与土壤拌合，并以两层塑料纸裹住烧杯口。随即将烧杯移至24℃的恒温箱中，经48小时后，每一处理随机取种子40粒排列置于含300ppm链酶素的2％水琼脂平板上(内径9公分)，其中每皿平板放置种子20粒，每处理有四重复。在24℃、20-24小时后，利用肉眼和显微镜检查R.solani AG-4缠据种子的百分率。
[结果]经过试验发现肉骨粉、血粉、菜子粕、鱼粉、香菇太空包废弃物、花生粕、粗糠、黄豆粕及蓖麻粕等九种有机添加物，均具有显著抑制R.solani AG-4缠据单叶豆种子的结果，因此，选择此九种有机添加物作进一步的筛选调制试验。
B、不同浓度有机添加物对R.solani AG-4缠据单叶豆种子的影响：
将含有10％病菌土的砂质分别添加0％、0.25％、0.5％、0.75％及1％(w/w)的肉骨粉、血粉、菜子粕、鱼粉、香菇太空包废弃物、花生粕、粗糠、黄豆粕及蓖麻粕等九种有机添加物，并调整土壤含水量介于12-15％(w/w)之间，以过一个星期的时间，再利用前揭的种子缠据法，评估这些有机添加物的抑菌效果。
[结果]经过试验发现添加肉骨粉、血粉、菜子粕、鱼粉等四种有机添加物各0.5％(w/w)时，即可表现出抑制豌豆立枯丝核病菌缠据单叶豆种子的效果，因此筛选出此四种抑制豌豆立枯丝核病菌效果最佳的有机添加物。
C、不同浓度有机添加物对豌豆植株生长的影响：
将砂质土壤分别添加0％、0.25％、0.5％、0.75％及1％(w/w)的肉骨粉、血粉、菜子粕、鱼粉、香菇太空包废弃物、花生粕、粗糠、黄豆粕及蓖麻粕等九种有机添加物，并调整土壤含水量介于12-15％(w/w)之间，再分别装入培植盆中，经过一星期后，每盆直播豌豆种子五颗，每一处理各有四重复，于播种一星期之后记录种子的出土率、于播种二星期之后记录植株的高度及计算每盆植株的平均高度。
[结果]经过试验发现添加0.25-0.5％(w/w)的肉骨粉、血粉、菜子粕、鱼粉、粗糠、及香菇太空包废弃物等有机添加物，不会影响豌豆种子萌芽后的出土率与株高。至于添加花生粕、黄豆粕、血粉、菜子粕、鱼粉及肉骨粉的比率超过0.75％(w/w)以上，会抑制豌豆种子的发芽及株高。
D、不同无机添加物对R.solani AG-4缠据单叶豆种子的影响：
将含有10％病菌土的砂质土壤分别添加0.5％(w/w)的尿素、硝酸铵、硫酸铵、硫酸铵铝、硝酸钾、氯化钾、磷酸氢二钾、亚磷酸及氧化钙等化合物，并以不添加任何物质者当作对照组，在温室外(摄氏24-32度)经过一星期，利用种子缠据法评估这些无机添加物的抑菌效果。
[结果]经过试验发现添加0.5％(w/w)的尿素、硝酸铵、硫酸铵铝及亚磷酸，抑制R.solani AG-4缠据单叶豆种子的效果最佳。
接着调配抑制豌豆立枯丝核病之合成土壤添加物配方，利用筛选出的四种低浓度即可抑制豌豆立枯丝核病的添加物，调配成一种合成土壤添加物(命名为“FB混合物”)，其配方内容为：鱼粉20公斤、肉骨粉15公斤、血粉5公斤、菜子粕2公斤。并于FB混合物打碎均匀混合后，再分别加入亚磷酸、尿素、硝酸铵、硫酸铵铝等四种无机添加物各4公斤，组成FB-P、FB-U、FB-N及FB-A四种混合物。然后将FB、FB-P、FB-U、FB-N及FB-A五种混合物按0％、0.25％、0.5％、0.75％及1％(w/w)的比例，分别与含10％病菌土的砂质土壤均匀混合，在温室(摄氏24-32度)经过一星期，利用种子缠据法评估各种合成土壤添加物的抑菌效果。
同时将FB、FB-P、FB-U、FB-N及FB-A五种混合物按0％、0.25％、0.5％、0.75％及1％(w/w)的浓度，分别与含10％病菌土的砂质土壤均匀混合，并播种豌豆种子，经过四星期后，调查豌豆植株罹患立枯丝核病的百分率及观察植株的高度与有无肥伤的症状。
[结果]经过试验发现添加尿素及硝酸铵可以增强FB混合物抑制豌豆立枯丝核病菌缠据单叶种子的效果，但添加硫酸铵铝及亚磷酸之FB混合物，无法改善抑制豌豆立枯丝核病菌缠据单叶豆种子的效应。进一步评估FB-P、FB-U、FB-N及FB-A四种混合物对防治豌豆立枯丝核病的效果及对豌豆植株生长的影响，发现FB-N混合物抑制豌豆立枯丝核病的表现最佳，并且不会对豌豆植株的生长产生伤害的影响。
依据前述试验的结果，以FB-N混合物为基础，进一步修正调配抑制豌豆立枯丝核病之合成土壤添加物配方，调配出FBN-05、FBN-5A、FBN-5R及FBN-5P四种混合物，并依据前述的种子缠据法及豌豆幼苗罹病法，分别比较四种混合物配方对于抑制R.solani AG-4及防治豌豆立枯丝核病之效果。其中FBN-05混合物的组成配方为：鱼粉20公斤、肉骨粉15公斤、血粉5公斤、菜子粕2公斤、硝酸铵4公斤、生石灰(氧化钙)4公斤、香菇太空包废弃物25公斤及自来水25公升；至于FBN-5A、FBN-5R及FBN-5P混合物的配方，分别是以丙烯醇10倍液、脱克松2000倍液及宝克隆2000倍液，取代FBN-05混合物中的自来水外，其他的组成份完全与FBN-05混合物配方相同。
将前述的FBN-05、FBN-5A、FBN-5R及FBN-5P等四种混合物施用于农田进行田间试验，发现这四种混合物都不会引起豌豆根部的毒伤；尤其是FBN-5A混合物的丙烯醇可以提高香菇太空包废弃物内部所含Trichoderma spp.的菌量数与竞争性。FBN-5A混合物不仅最具有抑制R.solani AG-4缠据单叶豆种子的作用及防治豌豆立枯丝核病的效果外，并且可以进一步防治甘蓝及*葡等蔬菜之立枯丝核病，诚为一种防治蔬菜立枯丝核病的最佳添加物配方。
综上所述，本发明将采收过香菇的香菇太空包废弃物(原组成基质含有锯木屑、米糠、淀粉、过磷酸钙及碳酸钙等丰富有机质及无机物)，混入氧化钙及丙烯醇后，添加于含有鱼粉、肉骨粉、血粉、菜子粕及硝酸铵之FB-N混合物中，组合成一种命名为“FBN-5A混合物”的合成土壤添加物，只要于含有病原菌的土壤中，施用低量的FBN-5A混合物，即可有效抑制蔬菜立枯丝核病的发生，并且不会产生对蔬菜植株产生毒伤的现象，在同类的防治技术及添加物配方中，均未见有类似的发明或发表，确实为一种防治蔬菜立枯丝核病之绝佳添加物配方。