作为TRPV3调节剂的色原烷衍生物.pdf

本发明提供了作为瞬时受体电位香草素(TRPV)调节剂的色原烷衍生物。特别地，本文所述的化合物可用于治疗或预防由TRPV3调节的疾病、病症和/或障碍。同时，本文也提供了制备本文所述的化合物的方法、在其合成中所用的中间体、其药物组合物以及治疗或预防由TRPV3调节的疾病、病症和/或障碍的方法。

权利要求书
1.   一种式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，
其中虚线(.....)为任选的键；A为取代或未取代的环烷基、芳基、杂芳基或杂环基团；
Y为‑(CHR1)r，其中R1为氢、卤素或者取代或未取代的烷基；
X为氢、硝基、氰基、卤素、取代或未取代的烷基、‑OR2、‑NR3R4、‑C(O)‑R3、‑C(O)O‑R3、‑C(O)NR3R4、‑S(O)pNR3R4或‑S(O)pR3；
R3和R4可相同或不同，独立地选自氢、‑OR2、取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基团或杂环基烷基；
R2选自于由氢、取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基团、环烷基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基或杂环基烷基所组成的组；
‘m’为0‑2的整数，包含两端值；
‘n’为0‑2的整数，包含两端值；
‘p’为0‑2的整数，包含两端值；并且
‘r’为0‑2的整数，包含两端值。

2.   如权利要求1所述的化合物，所述化合物选自：
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑(2‑甲氧基苯基)乙酰胺；
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑(2‑环戊氧基‑3‑甲氧基苄基)乙酰胺；
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑1‑(4‑甲氧基萘基甲基)乙酰胺；
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑[(4‑甲氧基二苯并[b，d]呋喃‑1‑基)甲基]乙酰胺；
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑[(1S)‑1‑苯基乙基]乙酰胺；
(2E)‑2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑亚基)‑N‑[2‑(环戊氧基)苯基]乙酰胺；
N‑(2‑环戊氧基苯基)‑2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酰胺；
N‑(2，6‑二氟苄基)‑2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酰胺；
2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑喹啉‑6‑基乙酰胺；
N‑[4‑(4‑溴苯基)‑1，3‑噻唑‑2‑基]‑2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酰胺；
2‑(6‑甲氧基‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑1‑萘基乙酰胺；
2‑(6‑甲氧基‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑1，3‑噻唑‑2‑基乙酰胺；和
2‑(6‑甲氧基‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑(6‑甲基‑1，3‑苯并噻唑‑2‑基)乙酰胺；或
上述化合物的药学上可接受的盐。

3.   包含如权利要求1或2所述的化合物以及药学上可接受的赋形剂的药物组合物，所述化合物为游离碱或药学上可接受的盐的形式。

4.   如权利要求3所述的药物组合物，其中所述的药学上可接受的赋形剂为载体或稀释剂。

5.   在有需要的受试者体内预防、改善或治疗香草素受体介导的疾病、障碍或综合征的方法，所述方法包括给予所述受试者治疗有效量的如权利要求1或2所述的化合物。

6.   如权利要求5所述的方法，其中与TRPV3功能相关的疾病、障碍、综合征或病症的症状选自于由下述症状组成的组：疼痛；急性疼痛；慢性疼痛；伤害感受性疼痛；神经性疼痛；术后疼痛；牙痛；癌症疼痛；缺血心肌引起的心痛；因偏头痛引起的疼痛；关节痛；神经病变；神经痛；三叉神经痛；神经损伤；糖尿病神经病变；神经退行性疾病；视网膜病变；神经性皮肤障碍；中风；膀胱过敏症；尿失禁；外阴痛；胃肠障碍，如肠易激综合征、胃‑食管反流病、肠炎、回肠炎、胃‑十二指肠溃疡、炎性肠病、克罗恩氏病、乳糜泻；炎性疾病，如胰腺炎；呼吸障碍，如过敏性和非过敏性鼻炎、哮喘或慢性阻塞性肺病；皮肤、眼或粘膜的刺激；皮炎；瘙痒症，如尿毒症瘙痒；发热；肌肉痉挛；呕吐；运动障碍；抑郁症；亨廷顿氏舞蹈病；记忆力减退；脑功能受限；肌萎缩性脊髓侧索硬化(ALS)；痴呆；关节炎；骨关节炎；糖尿病；肥胖症；荨麻疹；光化性角化病；角化棘皮瘤；脱毛症；美尼尔氏病；耳鸣；听觉过敏；焦虑症；和良性前列腺增生。

7.   在有需要的受试者体内治疗疼痛的方法，所述方法包括给予所述受试者治疗有效量的如权利要求1或2所述的化合物。

8.   如权利要求7所述的方法，其中所述疼痛为急性疼痛、慢性疼痛或术后疼痛。

9.   在有需要的受试者体内治疗神经性疼痛的方法，所述方法包括给予所述受试者治疗有效量的如权利要求1或2所述的化合物。

10.   在有需要的受试者体内治疗炎症的方法，所述方法包括给予所述受试者治疗有效量的如权利要求1或2所述的化合物。

说明书作为TRPV3调节剂的色原烷衍生物
技术领域
本专利申请涉及具有瞬时受体电位香草素3(TRPV3)活性的色原烷(chromane)衍生物。
背景技术
离子移动通过细胞膜通过专门的蛋白实现。TRP通道是一个非选择性阳离子通道的大家族，起到协助调控离子流和膜电位的作用。TRP通道被分为包括TRPV家族在内的6个亚家族。TRPV3是TRP通道的TRPV类的成员。
TRPV3是钙通透性的非选择性阳离子通道。除了钙离子，TRPV3通道对其他阳离子、如钠离子而言是通透性的。因此，TRPV3通道通过调节阳离子(如钙离子和钠离子)流来调节膜电位。TRPV3受体在机理上有别于电压门控钙通道。通常，电压门控钙通道对膜去极化进行应答，并打开通道以允许钙离子从胞外基质流入，从而引起胞内钙水平或浓度的增加。相反，非选择性的L型(long‑lasting)TRP通道在离子浓度方面产生更持久的变化，并且该通道是配体门控的(通过化学试剂如2‑氨基乙氧基二苯基硼酸酯[2‑APB]、香草素(vanilloid)和热进行调节)。这些机理上的不同伴随着电压‑门控通道和TRP通道结构上的差异。因此，尽管在多种细胞类型中和应答众多刺激方面有很多不同的通道起到调节离子流与膜电位的作用，认识到不同种类的离子通道之间在结构性、功能和机理方面的显著差异十分重要。
TRPV3蛋白是在皮肤细胞(Peier等，Science(2002)，296，2046‑2049)和背根神经节、三叉神经节、脊髓和脑(Xu等，Nature(2002)，418，181‑185；Smith等，Nature(2002)，418，186‑188)中表达的热敏通道。在角质形成细胞系中，TRPV3的刺激引起炎症介体、如白细胞介素‑1的释放。因此，TRPV3也可在调节由炎症刺激的释放引起的疼痛和炎症中发挥重要作用。如本文所述，尤其是TRPV3蛋白可被用于筛选分析，以鉴别对TRPV3(包括但不限于人TRPV3、小鼠TRPV3、大鼠TRPV3和果蝇TRPV3)的功能进行调节的化合物。US2004/0009537(′537申请)公开了对应于人TRPV3、小鼠TRPV3和果蝇TRPV3的序列。例如，′537申请的序列编号106和107分别对应于人的核酸序列和氨基酸序列。′537申请的序列编号108和109分别对应于小鼠的核酸序列和氨基酸序列。
TRPV3的功能基本上牵涉到疼痛的接收和转导。因此，期望鉴别并制出可调节TRPV3的一种或多种功能的化合物。
WO 2007/056124、WO 2008/140750和WO 2008/033564公开了用于治疗TRPV3介导的多种疾病的TRPV3调节剂、尤其是拮抗剂。
在致力于发现更好的镇痛药的过程中，仍然需要对由TRPV3调节的疾病、病症(conditions)和/或障碍(disorders)进行治疗性处理。
发明内容
本专利申请涉及式(I)的化合物：

其中，虚线(.....)为任选的键；A为取代或未取代的环烷基、芳基、杂芳基或杂环基团；
Y为‑(CHR1)r，其中R1为氢、卤素或者取代或未取代的烷基；
X为氢、硝基、氰基、卤素、取代或未取代的烷基、‑OR2、‑NR3R4、‑C(O)‑R3、‑C(O)O‑R3、‑C(O)NR3R4、‑S(O)pNR3R4或‑S(O)pR3；
R3和R4可相同或不同，独立地选自氢、‑OR2、取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基团或杂环基烷基；
R2选自于由氢、取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基团、环烷基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基或杂环基烷基所组成的组；
‘m’为0‑2的整数，包含两端值；
‘n’为0‑2的整数，包含两端值；
‘p’为0‑2的整数，包含两端值；并且
‘r’为0‑2的整数，包含两端值。
应当理解的是，式(I)在结构上涵盖了可由本文所描述种类的化学结构考虑到的、包括对映异构体和非对映异构体在内的所有立体异构体以及药学上可接受的盐。
根据一个实施方式，所具体提供的是式(I)的化合物，其中‘A’为取代或未取代的芳基。在这一实施方式中，优选地，‘A’为取代或未取代的苯基或萘基，其中所述的取代基独立地选自卤素(例如，氟或氯)、烷氧基(例如，甲氧基)或环烷氧基(例如，环戊氧基)。
根据另一个实施方式，所具体提供的是式(I)的化合物，其中‘A’为取代或未取代的杂芳基。在这一实施方式中，优选地，‘A’为取代或未取代的噻唑、苯并噻唑、喹啉或二苯并[b，d]呋喃，其中取代基独立地选自卤素、烷基(例如，甲基)、烷氧基(例如，甲氧基)、环烷氧基或卤代苯基(例如，溴苯基)。
根据另一个实施方式，所具体提供的是式(I)的化合物，其中‘Y’为CH2、CH(CH3)或键。
根据另一个实施方式，所具体提供的是式(I)的化合物，其中虚线(.....)为单键或不存在。
根据另一个实施方式，所具体提供的是式(I)的化合物，其中X为卤素(例如，氟或氯)或烷氧基(例如，甲氧基)；并且‘m’为1。
根据另一个实施方式，所具体提供的是式(I)的化合物，其中‘n’为1。
下面为代表性化合物，这些化合物仅用作性质方面的说明，并非意在限定本发明的范围。
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑(2‑甲氧基苯基)乙酰胺；
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑(2‑环戊氧基‑3‑甲氧基苄基)乙酰胺；
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑1‑(4‑甲氧基萘基甲基)乙酰胺；
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑[(4‑甲氧基二苯并[b，d]呋喃‑1‑基)甲基]乙酰胺；
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑[(1S)‑1‑苯基乙基]乙酰胺；
(2E)‑2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑亚基)‑N‑[2‑(环戊氧基)苯基]乙酰胺；
N‑(2‑环戊氧基苯基)‑2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酰胺；
N‑(2，6‑二氟苄基)‑2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酰胺；
2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑喹啉‑6‑基乙酰胺；
N‑[4‑(4‑溴苯基)‑1，3‑噻唑‑2‑基]‑2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酰胺；
2‑(6‑甲氧基‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑1‑萘基乙酰胺；
2‑(6‑甲氧基‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑1，3‑噻唑‑2‑基乙酰胺；和
2‑(6‑甲氧基‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑(6‑甲基‑1，3‑苯并噻唑‑2‑基)乙酰胺；或者
化合物1‑13的类似物、互变异构体、区域异构体(regiomer)、几何异构体、立体异构体、对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐也在考虑之列。
根据另一个实施方式，所具体提供的是式(I)的化合物或其盐，该化合物或其盐以小于10,000nM的IC50值抑制TRPV3功能。在其他实施方式中，所具体提供的是式(I)的化合物或其盐，该化合物或其盐以小于1000nM的IC50值抑制TRPV3功能。
本文还提供了制备本文所述化合物的方法。
具体实施方式
本专利申请提供了可作为TRPV3调节剂的色原烷衍生物以及合成这些化合物的方法。发明人分别考虑了本文所述化合物的药学上可接受的盐、对映异构体和非对映异构体。还分别考虑了包含所述化合物连同药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物，该药物组合物可用于治疗由TRPV3介导的疾病、病症和/或障碍。
本发明由权利要求书进行定义，而非由下文中提供的说明加以限定。在所附的权利要求书中使用的术语在此处的词汇表部分加以定义，但是如果另有明确表述的定义，该权利要求的术语可以以不同的方式使用。
术语“卤素”或“卤代”包括氟、氯、溴或碘。
术语“烷基”是指具有1‑8个碳原子的、仅由碳和氢原子组成且不具有不饱和度的烃链基团，并且通过单键与分子的其余部分连接，例如：甲基、乙基、正丙基、1‑甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基和1，1‑二甲基乙基(叔丁基)。术语“C1‑6烷基”是指具有1‑6个碳原子的烷基链。除非有相反说明或叙述，本文描述或保护的所有烷基都可以是直链或支链的、取代或未取代的。
术语“烯基”是指包含2‑10个碳原子且含有至少一个碳‑碳双键的烃链。烯基基团的非限制性实例包括乙烯基、1‑丙烯基、2‑丙烯基(烯丙基)、异丙烯基、2‑甲基‑1‑丙烯基、1‑丁烯基和2‑丁烯基。除非有相反说明或叙述，本文描述或保护的所有烯基都可以是直链或支链的、取代或未取代的。
术语“炔基”是指具有2至约12个碳原子且具有至少一个碳‑碳三键的烃基基团(具有2‑约10个碳原子的基团是优选的)。炔基基团的非限制性实例包括乙炔基、丙炔基和丁炔基。除非有相反说明或叙述，本文描述或保护的所有炔基基团都可以是直链或支链的、取代或未取代的。
术语“烷氧基”表示通过氧键连接至分子其余部分的烷基基团。这类基团的代表性实例为‑OCH3和‑OC2H5。除非有相反说明或叙述，本文描述或保护的所有烷氧基都可以是直链或支链的、取代或未取代的。
术语“环烷基”表示3至约12个碳原子的非芳香单环或多环环系，如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。多环环烷基基团的实例包括但不限于全氢化萘基、金刚烷基和降冰片基基团、桥环基团或螺双环基团(例如，螺(4，4)壬‑2‑基)。除非有相反说明或叙述，本文描述或保护的所有环烷基都可以是取代或未取代的。
术语“环烷基烷基”是指具有3至约8个碳原子的、直接连接到烷基基团上的含有环状环的基团。环烷基烷基基团可以在烷基中的任意碳原子处连接到主结构，从而产生稳定的结构。这类基团的非限制性实例包括环丙基甲基、环丁基乙基和环戊基乙基。除非有相反说明或叙述，本文描述或保护的所有环烷基烷基都可以是取代或未取代的。
术语“环烯基”是指具有3至约8个碳原子的、具有至少一个碳‑碳双键的含有环状环的基团，如环丙烯基、环丁烯基和环戊烯基。除非有相反说明或叙述，本文描述或保护的所有环烯基都可以是取代或未取代的。
术语“芳基”是指具有6‑14个碳原子的芳族基团，包括单环、双环或三环的芳香体系，如苯基、萘基、四氢萘基、茚满基和联苯基。除非有相反说明或叙述，本文描述或保护的所有芳基都可以是取代或未取代的。
术语“芳基烷基”是指直接结合在如上述定义的烷基上的如上述定义的芳基基团，例如‑CH2C6H5或‑C2H4C6H5。
术语“杂环基”和“杂环环”、“杂环基团”是指由碳原子和选自氮、磷、氧和硫的1‑5个杂原子组成的稳定的3‑15元环基。为了本发明的目的，杂环环基团可以是单环、双环或三环环系，可以包括稠合环系、桥接环系或螺环系并且杂环环基团中的氮、磷、碳、氧或硫原子可任选地被氧化成各种氧化态。此外，氮原子可任选地被季铵化；并且该环基团可为部分或完全饱和的(即，杂环或杂芳基)。这类杂环环基团的实例包括但不限于：吖丁啶基、吖啶基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并二氧杂环己基、苯并呋喃基、咔唑基、噌啉基、二氧戊环基、吲哚嗪基、萘啶基、全氢化氮杂基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、酞嗪基、吡啶基、蝶啶基、嘌呤基、喹唑啉基、喹噁啉基、喹啉基、异喹啉基、四唑基、咪唑基、四氢异喹啉基、哌啶基、哌嗪基、2‑氧代哌嗪基、2‑氧代哌啶基、2‑氧代吡咯烷基、2‑氧代氮杂基、氮杂基、吡咯基、4‑哌啶酮基、吡咯烷基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噁唑基、噁唑啉基、噁唑烷基、三唑基、茚满基、异噁唑基、异噁唑烷基、吗啉基、噻唑基、噻唑啉基、噻唑烷基、异噻唑基、奎宁环基、异噻唑烷基、吲哚基、异吲哚基、吲哚啉基、异吲哚啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、喹啉基(quinolyl)、异喹啉基(isoquinolyl)、十氢异喹啉基、苯并咪唑基、噻二唑基、苯并吡喃基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、呋喃基(furyl)、四氢呋喃基、四氢吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、硫代吗啉基、硫代吗啉基亚砜、硫代吗啉基砜、二氧磷杂环戊基、噁二唑基、苯并二氢吡喃基和异苯并二氢吡喃基。杂环环基团可以在任意杂原子或碳原子处连接到主结构，从而产生稳定的结构。除非有相反说明或叙述，本文描述或要求保护的所有杂环基基团可以是取代或未取代的，包括更复杂的亚结构中所含有的杂环基基团。
术语“杂环基烷基”是指直接连接到烷基基团上的杂环环基团。杂环基烷基可以在烷基基团中的任意碳原子处连接到主结构，从而产生稳定的结构。
术语“杂芳基”，是指芳香族杂环环基团。杂芳基环基可以在任意杂原子或碳原子处连接到主结构，从而产生稳定的结构。除非有相反说明或叙述，本文描述或保护的所有杂芳基可以是取代或未取代的，包括更复杂的亚结构中所含有的杂芳基。
术语“杂芳基烷基”是指直接连接到烷基基团上的杂芳环基团。杂芳基烷基基团可以在烷基基团中的任意碳原子处连接到主结构，从而产生稳定的结构。
除非另有规定，本文中使用的术语“取代”是指基团或部分具有一个或多个连接至该基团或部分的结构骨架的取代基，这些取代基包括但不限于：羟基、卤素、羧基、氰基、硝基、氧代(＝O)、硫代(＝S)、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳基烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的环烯基烷基、取代或未取代的环烯基、取代或未取代的氨基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基烷基环、取代或未取代的杂芳基烷基、取代或未取代的杂环环、取代或未取代的胍、‑COORx、‑C(O)Rx、‑C(S)Rx、‑C(O)NRxRy、‑C(O)ONRxRy、‑NRxCONRyRz、‑N(Rx)SORy、‑N(Rx)SO2Ry、‑(＝N‑N(Rx)Ry)、‑NRxC(O)ORy、‑NRxRy、‑NRxC(O)Ry、‑NRxC(S)Ry、‑NRxC(S)NRyRz、‑SONRxRy、‑SO2NRxRy、‑ORx、‑ORxC(O)NRyRz、‑ORxC(O)ORy、‑OC(O)Rx、‑OC(O)NRxRy、‑RxNRyC(O)Rz、‑RxORy、‑RxC(O)ORy、‑RxC(O)NRyRz、‑RxC(O)Ry、‑RxOC(O)Ry、‑SRx、‑SORx、‑SO2Rx和‑ONO2，其中Rx、Ry和Rz独立地选自氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳基烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的环烯基、取代或未取代的氨基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代的杂环基烷基环、取代或未取代的杂芳基烷基、或者取代或未取代的杂环环。
术语“治疗”状态、障碍或病症包括：(a)预防或延缓状态、障碍或病症的临床症状的出现，所述状态、障碍或病症在患有或易患有所述状态、障碍或病症的受试者中发展但尚未经历或显示出所述状态、障碍或病症的临床或亚临床症状；(b)抑制所述状态、障碍或病症，即，阻止或减轻疾病或其至少一种临床或亚临床症状的发展；或(c)消除疾病，即，造成所述状态、障碍或病症或其至少一种临床或亚临床症状消退。
术语“受试者”包括哺乳动物(尤其是人类)和其他动物，如家畜(例如家庭宠物，包括猫、狗)和非家畜(如野生动物)。
“治疗有效量”是指当给予至需要治疗状态、障碍或病症的受试者时，足以对作为给药目标的受试者产生效果的化合物的量。“治疗有效量”随着化合物、疾病、其严重程度以及待治疗的受试者的年龄、体重、身体状况和响应性(responsiveness)而变化。
本专利申请中描述的化合物可形成盐。构成本专利申请一部分的药学上可接受的盐的非限制性实例包括无机碱衍生的盐、有机碱的盐、手性碱的盐、天然氨基酸的盐和非天然氨基酸的盐。就式(I)所述的全部化合物而言，本专利申请延及其立体异构形式和其混合物。只要现有技术教导了特定的立体异构体的合成或分离，本专利申请的各种立体异构体形式可以通过本领域已知的方法相互分离，或者可以通过立体专一性或不对称合成得到给定的异构体。本文描述的化合物的互变异构形式和混合物也在考虑之列。
药物组合物
本专利申请的药物组合物含有至少一种本文所述的化合物以及至少一种药学上可接受的赋形剂(如药学上可接受的载体或稀释剂)。优选地，所考虑的药物组合物以足以抑制受试者体内的TRPV3受体的量含有本文所述的化合物。
所考虑的受试者包括例如：活细胞和包括人在内的哺乳动物。本发明的化合物可与药学上可接受的赋形剂(如载体或稀释剂)结合或由载体稀释，或封装在胶囊、药囊(sachet)、纸或其他容器形式的载体内。
合适的载体的实例包括但不限于：水、盐溶液、醇、聚乙二醇、多羟基乙氧基化的蓖麻油、花生油、橄榄油、明胶、乳糖、石膏粉、蔗糖、糊精、碳酸镁、糖、环糊精、直链淀粉、硬脂酸镁、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸或纤维素低烷基醚、硅酸、脂肪酸、脂肪酸胺、脂肪酸单甘油酯和二甘油酯、季戊四醇脂肪酸醚、聚氧乙烯、羟甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。
所述载体和稀释剂可包含缓释材料，如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯(单独使用或与石蜡混合)。
该药物组合物还可包含一种或多种药学上可接受的辅助剂、润湿剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、影响渗透压的盐、缓冲剂、甜味剂、矫味剂、着色剂或上述的任意结合。还可对本发明的药物组合物进行制剂，从而在通过本领域已知程序向受试者给药后，提供活性成分的快速、持续或延迟的释放。
本文所述的药物组合物可以通过本领域已知的常规技术制备。例如，活性化合物可以与载体混合或由载体稀释，或封装在安瓿、胶囊、药囊、纸或其他容器形式的载体内。当载体用作稀释剂时，它可以是起到活性化合物的辅料、赋形剂或介质作用的固体、半固体或液体材料。活性化合物可以吸附在粒状固体容器上，例如在药囊中。
药物组合物可以是常规的形式，例如胶囊、片剂、气雾剂、溶液、悬浮液或局部施用的产品。
给药途径可为有效地运送本发明的活性化合物至适当的或期望的作用位点的任意途径。合适的给药途径包括但不限于：口服给药、鼻部给药、肺部给药、口腔含化给药、皮下(subdermal)给药、皮内给药、经皮给药、胃肠外给药、直肠给药、储库式给药、皮肤下(subcutaneous)给药、静脉内给药、尿道内给药、肌内给药、鼻内给药、眼部给药(如使用眼用溶液)或局部给药(如使用局部软膏)。
固体口服制剂形式包括但不仅限于：片剂、胶囊(软明胶或硬明胶)、糖衣丸(含有粉末或丸状形式的活性成分)、锭剂(troches and lozenges)。具有滑石和/或碳水化合物载体或粘结剂等的片剂、糖衣丸或胶囊尤其适合于口服应用。液体制剂包括但不限于糖浆剂、乳剂、软明胶和无菌的可注射液体，如水性或非水性的液态悬浮液或溶液。对于胃肠道外应用，可注射的溶液或悬浮液制剂尤其适合。优选具有溶于多羟基化蓖麻油的活性化合物的水性溶液。
相关领域的技术人员可确定治疗本文所述的疾病和障碍所用的化合物的合适剂量。通常通过以来自动物研究的初步证据为基础而进行的人的剂量范围研究，来定出治疗剂量。剂量必须足够产生期望的治疗益处而不引发不想要的副作用。例如，TRPV3调节剂的日剂量可从0.1mg/kg到约30.0mg/kg。本领域技术人员可很好利用并调整给药模式、剂型、合适的药用赋形剂、稀释剂或载体。所有的变化和改进都被认为包含在本发明的范围内。
治疗方法
本发明提供了用于治疗由TRPV3调节的疾病、病症和或障碍的化合物和其药物制剂。本专利申请进一步提供了通过向有需要的受试者给予治疗有效量的本发明的化合物或药物组合物，对所述受试者体内由TRPV3调节的疾病、病症和/或障碍进行治疗的方法。
人们认为由TRPV3调节的疾病、病症和/或障碍包括但不限于：疼痛；伤害感受性疼痛(nociceptive pain)；牙痛；缺血心肌引起的心痛；因偏头痛引起的疼痛；急性疼痛；慢性疼痛；神经性疼痛；术后疼痛；因神经痛引起的疼痛(例如，疱疹后神经痛或三叉神经痛)；因糖尿病性神经病变引起的疼痛；牙痛和癌症疼痛；炎症疼痛病症(例如关节炎和骨关节炎)；关节痛；神经病变；神经退行性疾病；视网膜病变；神经性皮肤障碍；中风；膀胱过敏症；尿失禁；外阴痛(vulvodynia)；胃肠障碍，如肠易激综合征、胃‑食管反流病、肠炎、回肠炎、胃‑十二指肠溃疡、炎性肠病、克罗恩氏病、乳糜泻(celiac disease)；炎性疾病，如胰腺炎；呼吸障碍，如过敏性和非过敏性鼻炎、哮喘或慢性阻塞性肺病；皮肤、眼或粘膜的刺激；皮炎；瘙痒症，如尿毒症瘙痒；发热；肌肉痉挛；呕吐；运动障碍；抑郁症；亨廷顿氏舞蹈病；记忆力减退；脑功能受限；肌萎缩性脊髓侧索硬化(ALS)；痴呆；关节炎；骨关节炎；糖尿病；肥胖症；荨麻疹；光化性角化病；角化棘皮瘤(keratocanthoma)；脱毛症(alopecia)；美尼尔氏病；耳鸣；听觉过敏(hyperacusis)；焦虑症；和良性前列腺增生。由TRPV3调节的其他疾病、病症和/或障碍记载在例如：WO2007/056124；Wissenbach，U.等，Biology of the cell(2004)，96，47‑54；Nilius，B.等，Physiol Rev(2007)，87，165‑217；Okuhara，D.Y.等，Expert Opinion on Therapeutic Targets(2007)，11，391‑401；Hu，H.Z.等，Journal of Cellular Physiology，(2006)，208，201‑212；和本文引用的参考文献中；所有文件通过整体引用的方式并入本文并用于所述目的。
通用制备方法
本文所述的化合物(包括通式(I)的化合物和具体实例)利用本领域普通技术人员已知的技术制备。本文所述的化合物通过方案1中描述的反应顺序(reaction sequences)制备。可以想见，所有可能的立体异构体也包含在本发明的范围内。
用于下述反应方案的原料是可商购的，或可根据本领域技术人员已知的方法或通过本文所公开的方法制备。通常，本发明的化合物可通过如下反应方案制备，其中所有的符号如上述所定义。
式(I)的化合物可根据合成方案1制备。在碱(如吡咯烷或哌啶)存在的情况下，式(1)的2‑羟基苯乙酮与式(2)的环酮在醇溶剂中缩合，生成式(3)的螺环酮；在Wittig反应条件下，该螺环酮与式(4)的磷酰基乙酸三烷基酯(其中R为烷基)反应，生成式(5)的丙烯酸酯(其中R为烷基)。将式(5)的化合物水解，然后催化加氢(任选)，生成式(6)的化合物。在适合的偶联剂存在的情况下，通过将式(6)的羧酸与合适的式(7)的胺偶联，制备通式(I)的化合物。或者，在适合的碱存在的情况下，中间体(6)的酰氯可与式(7)的胺偶联，生成通式(I)的化合物。
方案1

实验
通过下述实例对本发明作了进一步说明，这些实例不以任何方式视为在公开内容的范围上加以限制，而仅是意在进行说明。因此，本领域技术人员将会明白如何通过对下述实例、取代基、试剂或条件进行各种改变，来根据所公开的内容对实验和实施例进行进一步的实施。
中间体
中间体1
(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酸：

步骤1：6‑氯螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4(3H)‑酮：在室温下，先后向5′‑氯‑2′‑羟基苯乙酮(5.0g，29.308mmol)在甲醇(50ml)中搅拌后的溶液中添加吡咯烷(4.16g，58.616mmol)和环丁酮(4.1g，58.616mmol)。将反应混合液在氮气下加热回流14h。在减压下蒸去溶剂，将得到的残余物用水(100ml)稀释，并将该混合物酸化至pH 4.0。用氯仿(3×100ml)萃取该混合物。用水(100ml)、盐水(50ml)洗涤合并后的有机萃取液，并用无水硫酸钠干燥。用处于石油醚中的15％乙酸乙酯，将蒸去溶剂后得到的残余物通过硅胶柱色谱进行纯化，生成6.3g白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.69‑1.88(m，5H)，1.96‑2.04(m，1H)，2.88(s，2H)，6.91(d，J＝9.0Hz，1H)，7.38(d，J＝6.6Hz，1H)，7.76(s，1H)。
步骤2：(2E)‑(6‑氯螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4(3H)‑基亚基)乙酸乙酯：用15min的时间，向氢化钠(431mg，17.897mmol)在无水四氢呋喃(25ml)中经搅拌和冷却的混合物中添加磷酰基乙酸三乙酯(4.03g，17.897mmol)。将反应混合液搅拌30min，然后将6‑氯螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4(3H)‑酮(2g，8.948mmol)加入到无水四氢呋喃中。在氮气下，于相同的温度将反应混合液搅拌24h。用甲醇和水稀释反应混合液，并将产物萃取进入乙酸乙酯(3×100ml)中。用水(100ml)、盐水洗涤有机层，干燥(Na2SO4)并浓缩生成3.54g的粗产物，直接用于下一步骤。
步骤3：(2E)‑(6‑氯螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4(3H)‑亚基)乙酸：在室温下，向(2E)‑(6‑氯螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4(3H)‑基亚基)乙酸乙酯(3g，10.22mmol)在乙醇(30ml)中搅拌后的溶液中添加1N氢氧化钠溶液(30ml)。将反应混合液在室温下搅拌2h。将在减压下蒸去溶剂后得到的残余物用1NHCl酸化。将期望产物萃取进入乙酸乙酯(3×50ml)中，用水(100ml)、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩生成2.6g白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.68‑1.78(m，5H)，1.86‑1.96(m，1H)，3.96(s，2H)，6.36(s，1H)，6.80(d，J＝8.1Hz，1H)，7.22(d，J＝9.3Hz，1H)，7.51(s，1H)。
步骤4：(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酸：在室温下，向(2E)‑(6‑氯螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4(3H)‑亚基)乙酸(2.5g，9.444mmol)在乙酸乙酯(25ml)中搅拌后的溶液中添加10％Pd/C(50mg)。在Paar氢化设备中，于40psi氢气压力下将反应混合液搅拌12h。通过硅藻土床过滤反应混合液，将滤液干燥(Na2SO4)并浓缩，生成2.45g白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.68‑1.78(m，5H)，1.86‑1.96(m，1H)，2.09‑2.21(m，2H)，2.29‑2.38(m，1H)，2.99(d，J＝13.2Hz，1H)，3.44(br s，1H)，6.73(d，J＝8.1Hz，1H)，7.04(d，J＝9.3Hz，1H)。
中间体2
(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酸：

通过如中间体1中所述的类似过程，由5′‑氟‑2′‑羟基苯乙酮和环丁酮经4步反应来制备标题化合物，生成白色固体；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.66‑1.74(m，2H)，1.88‑1.95(m，1H)，2.05‑2.14(m，3H)，2.26‑2.34(m，1H)，2.37‑2.44(m，1H)，2.48‑2.56(m，1H)，2.96(dd，J＝4.2，15.6Hz，1H)，3.35(br s，1H)，6.74‑6.82(m，3H)。
中间体3
(6‑甲氧基‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酸：

步骤1：6‑羟基螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑(3H)‑酮：通过如中间体1的步骤1中所述的类似过程，由2′，5′‑二羟基苯乙酮(10g，65.724mmol)和环丁酮(13.29ml，131.44mmol)在吡咯烷(10.79ml)存在的情况下制备标题化合物，生成10g产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.63‑1.73(m，2H)，1.84‑1.95(m，2H)，2.05‑2.15(m，2H)，2.23‑2.33(m，2H)，6.85(d，J＝8.7Hz，1H)，7.06(d，J＝9.0Hz，1H)，7.33(s，1H)。
步骤2：6‑甲氧基螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4(3H)‑酮：向6‑羟基螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑(3H)‑酮(8g，39.215mmol)在干燥二甲基甲酰胺(150ml)中搅拌后的溶液中添加碳酸钾(16.28g，117.64mmol)和碘甲烷(4.88ml，78.431mmol)，在氮气气氛下将反应混合液在室温搅拌2h。反应完成后，用水(100ml)稀释该反应混合液，用乙酸乙酯(3×300ml)萃取，用水(3×100ml)、盐水(60ml)洗涤合并后的有机层，然后干燥(Na2SO4)、过滤并浓缩，生成8.13g产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.67‑1.77(m，1H)，1.85‑1.97(m，1H)，2.11‑2.18(m，2H)，2.23‑2.34(m，2H)，2.87(s，2H)，3.77(s，3H)，6.88(d，J＝9.6Hz，1H)，7.06(d，J＝8.7Hz，1H)，7.25(s，1H)。
步骤3：通过如中间体1的步骤2‑4中所述的类似过程，由6‑甲氧基螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4(3H)‑酮制备最终的化合物；1H NMR(300MHz，DMSO‑d6)δ1.53‑1.65(m，2H)，1.78(br s，1H)，1.96‑2.05(m，3H)，2.18‑2.23(m，2H)，2.30‑2.39(m，1H)，2.93(d，J＝15.9Hz，1H)，3.18(br s，1H)，3.64(s，3H)，6.64(s，2H)，6.75(s，1H)。
中间体4
1‑[2‑(环戊氧基)‑3‑甲氧基苯基]甲胺盐酸盐：

步骤1：2‑(环戊氧基)‑3‑甲氧基苯甲醛肟：向2‑(环戊氧基)‑3‑甲氧基苯甲醛(3g，13.636mmol)在乙醇中搅拌后的溶液中添加盐酸羟胺(1.758g，27.277mmol)和氢氧化钠水溶液(18ml，34.091mmol)。在氮气气氛下，将反应混合液回流6h。在减压下蒸去溶剂，并将反应混合物用水稀释。用氯仿(3×200ml)萃取产物，将合并后的有机层用水(3×100ml)、盐水(50ml)洗涤，然后干燥、过滤并在真空下浓缩，生成3.12g的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.58‑1.64(m，4H)，1.66‑1.72(m，4H)，3.84(s，3H)，4.86(br s，1H)，6.89(d，J＝8.1Hz，1H)，6.99(t，J＝7.8Hz，1H)，7.31(d，J＝7.8Hz，1H)，8.43(s，1H)。
步骤2：1‑[2‑(环戊氧基)‑3‑甲氧基苯基]甲烷胺盐酸盐：在室温下，向2‑(环戊氧基)‑3‑甲氧基苯甲醛肟(3g，12.448mmol)在甲醇(10ml)中搅拌后的溶液中添加催化量的兰尼镍(0.30g)。在Paar氢化设备中，于50psi氢气压力下将反应混合液搅拌3h。将反应混合液通过硅藻土床过滤，再干燥(Na2SO4)、过滤并浓缩，得到粗产物。然后将粗产物溶解于乙酸乙酯中，在10℃下向该溶液中滴加处于乙酸乙酯中的盐酸，搅拌20min，然后过滤并干燥，生成2.86g的产物，H NMR(300MHz，DMSO‑d6)δ1.57‑1.63(m，4H)，1.65‑1.72(m，4H)，3.81(s，3H)，3.94(s，2H)，4.90(br s，1H)，7.08(s，3H)，8.39(br s，3H)。
中间体5
1‑(4‑甲氧基‑1‑萘基)甲胺盐酸盐：

通过如中间体4中所述的类似过程，由4‑甲氧基‑1‑萘甲醛(1g，5.376mmol)经2步反应制备标题化合物，生成1.27g作为盐酸盐的产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.85(s，3H)，4.26(s，2H)，6.68(d，J＝7.2Hz，1H)，7.40(br s，2H)，7.53(d，J＝7.8Hz，1H)，7.64(d，J＝7.5Hz，1H)，8.19(d，J＝6.6Hz，1H)。
中间体6
1‑(4‑甲氧基二苯并[b，d]呋喃‑1‑基)甲胺盐酸盐：

通过如中间体4中所述的类似过程，由4‑甲氧基‑二苯并[b，d]呋喃‑1‑甲醛(3g，13.274mmol)经2步反应制备标题化合物，生成2.97g作为盐酸盐的产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.07(s，3H)，4.63(s，2H)，7.16(d，J＝8.1Hz，1H)，7.36(d，J＝7.8Hz，1H)，7.44(t，J＝6.6Hz，1H)，7.56(t，J＝7.5Hz，1H)，7.66(d，J＝7.5Hz，1H)，8.22(d，J＝7.8Hz，1H)。
实施例
用于制备(3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑(2‑甲氧基苯基)乙酰胺衍生物的通用过程：
方法A
向(3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酸衍生物(1.0mmol)和芳基胺盐酸盐(1.0mmol)在二氯甲烷中搅拌后的混合物中添加3‑(3‑二甲基氨基丙基)‑1‑乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI·HCl)(1.3mmol)、1‑羟基苯并三唑(HOBt)(1.3mmol)和三乙胺(3.4mmol)。在室温下将反应混合物搅拌12h。反应完成后，用水稀释反应混合物并用氯仿萃取，合并后的有机层用水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)、过滤并在真空下浓缩生成产物。
方法B
步骤1：向(3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酸衍生物(1.0mmol)在二氯甲烷中搅拌后的溶液中添加草酰氯(1.5mmol)和催化量的N，N‑二甲基甲酰胺。在氮气气氛下，将反应混合物在室温下搅拌2h。在减压下蒸去溶剂和过量的草酰氯，生成粘稠固体状的酰氯，该酰氯直接用于偶联反应而无需纯化。
步骤2：用15min的时间，于0℃向芳基胺(1.0mmol)和三乙胺(1.7mmol)在二氯甲烷中经搅拌并冷却后的混合物中添加处于二氯甲烷中的步骤1中间体(1.0mmol)。使反应混合物加热至室温，并在氮气下于相同的温度搅拌2h。用水稀释反应混合物，再用氯仿萃取产物。将合并后的有机层用水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)、过滤并在真空下浓缩生成产物。
实施例1
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑(2‑甲氧基苯基)乙酰胺：

如方法B所述，在三乙胺(225μl，1.624mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(10ml)中，通过由中间体1制备的(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酰氯(230mg，0.812mmol)与2‑甲氧基苯胺(100mg，0.812mmol)的偶联制备标题化合物，生成159mg灰白色固体产物。IR(KBr)3301，2941，1656，1542，1247，1030，742cm‑1；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.62‑1.75(m，2H)，1.81‑1.89(m，1H)，2.02‑2.10(m，3H)，2.33‑2.48(m，3H)，3.04(dd，J＝4.8，9.6Hz，1H)，3.50(br s，1H)，3.81(s，3H)，6.72(d，J＝8.7Hz，1H)，6.85(d，J＝8.1Hz，1H)，6.93‑7.04(m，3H)，7.14(s，1H)，7.75(br s，1H)，8.37(d，J＝6.9Hz，1H)；ESI‑MS(m/z)372.25(M+H)+。
实施例2
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑(2‑环戊氧基‑3‑甲氧基苄基)乙酰胺：

如方法A所述，在EDCI·HCl(238mg，1.248mmol)、HOBt(190mg，1.242mmol)和三乙胺(460μl，3.312mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过中间体1(207mg，0.828mmol)与中间体4(200mg，0.828mmol)的偶联制备标题化合物，生成157mg白色固体产物；IR(KBr)3279，2938，1646，1478，1269，1077cm‑1；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.50‑1.67(m，5H)，1.81‑2.06(m，6H)，2.09‑2.19(m，4H)，2.28‑2.39(m，1H)，2.75‑2.82(m，1H)，3.40(br s，1H)，3.83(s，3H)，4.47(d，J＝6.0Hz，2H)，4.95(br s，1H)，6.03(br s，1H)，6.68(d，J＝8.7Hz，1H)，6.82‑6.90(m，2H)，6.95‑7.04(m，3H)；ESI‑MS(m/z)468.46(M‑H)‑。
实施例3
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑1‑(4‑甲氧基萘基甲基)乙酰胺：

如方法A所述，在EDCI·HCl(192mg，1.008mmol)、HOBt(154mg，1.008mmol)和三乙胺(375μl，2.686mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过中间体1(178mg，0.671mmol)与中间体5(150mg，0.671mmol)的偶联制备标题化合物，生成103mg白色固体产物；IR(KBr)3289，2933，1632，1480，1092，760cm‑1；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.42‑1.68(m，5H)，1.80‑1.85(m，1H)，2.03‑2.16(m，3H)，2.74‑2.81(m，1H)，3.44(br s，1H)，3.98(s，3H)，4.76‑4.90(m，2H)，5.66(br s，1H)，6.65‑6.73(m，2H)，6.96‑7.04(m，2H)，7.33(d，J＝8.7Hz，1H)，7.46‑7.55(m，2H)，7.92(d，J＝7.8Hz，1H)，8.28(d，J＝8.1Hz，1H)；ESI‑MS(m/z)434.40(M‑H)‑。
实施例4
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑[(4‑甲氧基二苯并[b，d]呋喃‑1‑基)甲基]乙酰胺：

如方法A所述，在EDCI·HCl(109mg，0.569mmol)、HOBt(87mg，0.569mmol)和三乙胺(158μl，1.138mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过中间体1(121mg，0.455mmol)与中间体6(100mg，0.379mmol)的偶联制备标题化合物，生成64mg白色固体产物；IR(KBr)3292，2934，1630，1479，1274，747cm‑1；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.50‑1.67(m，3H)，1.90‑2.02(m，3H)，2.17‑2.29(m，3H)，2.79(dd，J＝4.8，9.6Hz，1H)，3.47(br s，1H)，4.05(s，3H)，4.83‑4.98(m，2H)，5.68(br s，1H)，6.65(d，J＝8.1Hz，1H)，6.91‑7.04(m，3H)，7.16(d，J＝7.8Hz，1H)，7.35(t，J＝7.2Hz，1H)，7.46(d，J＝7.8Hz，1H)，7.62(d，J＝8.4Hz，1H)，7.96(d，J＝7.8Hz，1H)；ESI‑MS(m/z)475.90(M)+。
实施例5
2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑[(1S)‑1‑苯基乙基]乙酰胺：

如方法B所述，在三乙胺(172μl，1.238mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过中间体1的酰氯(117mg，0.412mmol)与(S)‑(‑)‑α‑甲基苄基胺(50mg，0.412mmol)的偶联制备标题化合物，生成98mg白色固体产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.52‑1.61(m，4H)，1.85(br s，1H)，1.98‑2.05(m，4H)，2.27‑2.38(m，3H)，2.72(br s，1H)，3.42(br s，1H)，5.17(br s，1H)，5.69(br s，1H)，6.70(d，J＝8.7Hz，1H)，7.00‑7.09(m，2H)，7.31(s，5H)。
实施例6
(2E)‑2‑(6‑氯‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑亚基)‑N‑[2‑(环戊氧基)苯基]乙酰胺：

如方法A所述，在EDCI·HCl(163mg，0.851mmol)、HOBt(130mg，0.851mmol)和三乙胺(157μl，1.134mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过(2E)‑(6‑氯螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4(3H)‑基亚基)乙酸乙酯(中间体1的步骤2)与2‑(环戊氧基)苯胺(120mg，0.681mmol)(150mg，0.565mmol)的偶联制备标题化合物，生成95mg白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.53‑1.65(m，8H)，1.74‑1.90(m，4H)，2.22‑2.30(m，2H)，2.47‑2.57(m，2H)，3.50(s，2H)，4.67(br s，1H)，6.75(d，J＝8.1Hz，2H)，6.85‑6.96(m，2H)，7.04‑7.10(m，2H)，8.32(d，J＝7.8Hz，1H)。
实施例7
N‑(2‑环戊氧基苯基)‑2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酰胺：

如方法B所述，在三乙胺(188μl，1.353mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过中间体2的酰氯(121mg，0.451mmol)与2‑(环戊氧基)苯胺(80mg，0.451mmol)的偶联制备标题化合物，生成89mg白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.53‑1.60(m，1H)，1.64‑1.75(m，6H)，1.81‑1.90(m，4H)，1.92‑2.07(m，3H)，2.30‑2.42(m，3H)，3.02(dd，J＝4.8，9.6Hz，1H)，3.52(br s，1H)，4.81(br s，1H)，6.74‑6.81(m，2H)，6.87‑7.04(m，4H)，7.76(br s，1H)，8.36(d，J＝8.1Hz，1H)。
实施例8
N‑(2，6‑二氟苄基)‑2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酰胺：

如方法B所述，在三乙胺(388μl，2.793mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过中间体2的酰氯(250mg，0.931mmol)与2，6‑二氟苄基胺(133μl，1.117mmol)的偶联制备标题化合物，生成219mg白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.58‑1.70(m，3H)，1.79‑1.89(m，1H)，2.00‑2.07(m，2H)，2.16‑2.21(m，2H)，2.29‑2.39(m，1H)，2.75(q，J＝5.1Hz，1H)，3.43(br s，1H)，4.51‑4.66(m，2H)，6.66‑6.77(m，3H)，6.89(t，J＝7.8Hz，2H)，7.19‑7.29(m，1H)。
实施例9
2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑喹啉‑6‑基乙酰胺：

如方法B所述，在三乙胺(171μl，1.229mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过中间体2的酰氯(110mg，0.409mmol)与6‑氨基喹啉(65mg，0.451mmol)的偶联制备标题化合物，生成99mg白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.64‑1.70(m，3H)，1.75‑1.88(m，1H)，2.06‑2.12(m，2H)，2.37‑2.42(m，2H)，2.50‑2.55(m，1H)，3.04(dd，J＝4.8，10.2Hz，1H)，3.57(br s，1H)，6.77‑6.89(m，3H)，7.37‑7.42(m，1H)，7.50(d，J＝8.1Hz，1H)，7.76(s，1H)，8.07(dd，J＝7.8，10.2Hz，2H)，8.40(s，1H)，8.82(s，1H)。
实施例10
N‑[4‑(4‑溴苯基)‑1，3‑噻唑‑2‑基]‑2‑(6‑氟‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)乙酰胺：

向中间体2(100mg，0.399mmol)在二甲基甲酰胺(5ml)中搅拌后的溶液中先后添加4‑(4‑溴苯基)‑1，3‑噻唑‑2‑胺(122mg，0.679mmol)、二环己基碳二亚胺(122mg，0.598mmol)和N‑羟基琥珀酰亚胺(67mg，0.598mmol)。在氮气下，将反应混合物加热至80℃并保持24h。冷却反应混合物至室温，并通过硅藻土床过滤残余物。用乙酸乙酯(3×50ml)萃取产物，再用水、盐水洗涤合并后的有机层，然后干燥(Na2SO4)。使用处于石油醚中的5％乙酸乙酯，通过硅胶柱色谱对减压蒸发后得到的粗产物进行纯化，生成79mg灰白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.45‑1.55(m，2H)，1.58‑1.70(m，2H)，1.84‑1.90(m，1H)，1.98‑2.10(m，2H)，2.16‑2.22(m，1H)，2.31‑2.38(m，1H)，2.77(dd，J＝4.2，10.8Hz，1H)，3.40(br s，1H)，6.56(d，J＝8.7Hz，1H)，6.72‑6.79(m，2H)，7.13(s，1H)，7.47(d，J＝8.1Hz，2H)，7.60(d，J＝8.4Hz，2H)，10.42(br s，1H)。
实施例11
2‑(6‑甲氧基‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑1‑萘基乙酰胺：

如方法B所述，在三乙胺(291μl，2.095mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过中间体3的酰氯(195mg，0.698mmol)与1‑氨基萘(100mg，0.698mmol)的偶联制备标题化合物，生成128mg白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.63‑1.70(m，2H)，1.76‑1.84(m，2H)，2.03‑2.10(m，3H)，2.34‑2.40(m，2H)，2.73‑2.80(m，1H)，3.09(q，J＝4.8Hz，1H)，3.60(br s，1H)，3.72(s，3H)，6.73‑6.82(m，2H)，7.45‑7.52(m，5H)，7.66(d，J＝8.1Hz，1H)，7.82(d，J＝7.5Hz，1H)，7.96(d，J＝7.2Hz，1H)。
实施例12
2‑(6‑甲氧基‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑1，3‑噻唑‑2‑基乙酰胺：

如方法B所述，在三乙胺(149μl，1.068mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过中间体3的酰氯(100mg，0.356mmol)与2‑氨基‑1，3‑噻唑(35mg，0.356mmol)的偶联制备标题化合物，生成85mg白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.62‑1.71(m，2H)，1.88(br s，1H)，2.05‑2.12(m，3H)，2.30‑2.41(m，2H)，2.59‑2.67(m，1H)，3.19(q，J＝4.8Hz，1H)，3.58(br s，1H)，3.69(s，3H)，6.68‑6.75(m，3H)，6.93‑6.70(m，1H)，7.28‑7.35(m，1H)。
实施例13
2‑(6‑甲氧基‑3，4‑二氢螺[色烯‑2，1′‑环丁]‑4‑基)‑N‑(6‑甲基‑1，3‑苯并噻唑‑2‑基)乙酰胺：

如方法B所述，在三乙胺(254μl，1.826mmol)存在的情况下，在二氯甲烷(5ml)中，通过中间体3的酰氯(170mg，0.608mmol)与6‑甲基‑1，3‑苯并噻唑‑2‑胺(100mg，0.608mmol)的偶联制备标题化合物，生成80mg白色固体产物；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.60‑1.68(m，3H)，1.86(br s，1H)，1.98‑2.05(m，3H)，2.28‑2.35(m，2H)，2.46(s，3H)，2.55‑2.60(m，1H)，3.10(q，J＝4.8Hz，1H)，3.55(br s，1H)，3.66(s，3H)，6.61(br s，1H)，6.69‑7.77(m，2H)，7.17(d，J＝7.8Hz，1H)，7.53‑7.60(m，2H)。ESI‑MS(m/z)409.43(M+H)+。
药理活性
根据Tóth，A.，Kedei，N.，Wang，Y.和Blumberg，P.M.，Life Sciences，(2003)，73，487‑498记载的改进过程筛选本发明的示例性实施例的TRPV3活性。可通过本领域技术人员已知的其他方法和步骤进行化合物的筛选。这些筛选方法可见于下述文献：(a)Hu，H.‑Z.等J.Biol.Chem.(2004)，279，35741‑35747；(b)Smith，G.D.等Nature(2002)，418，186‑190；(c)Peier，A.M.等Science(2002)，296，2046‑2049。
使用45钙吸收分析筛选TRPV3拮抗剂：
以对放射性钙的2‑氨基乙氧基二苯基硼酸酯(2‑APB)诱导的细胞吸收的抑制，考察TRPV3受体激活的抑制。将测试化合物溶解在二甲亚砜(DMSO)中，制备20mM的原液(stock solution)，然后使用含有1.8mM CaCl2的DMEM/F‑12普通培养基(plain medium)稀释，获得所需浓度。反应中的DMSO终浓度为0.5％(v/v)。表达CHO细胞的人TRPV3在含有10％FBS、1％青霉素‑链霉素溶液和400μg/ml G‑418的DMEM/F‑12培养基中生长。在分析之前24h，将细胞接种在96孔板中，使得在实验当天获得～50,000个细胞/孔。用测试化合物将细胞处理10分钟，然后用4分钟加入终浓度为500μM的2‑APB和5μCi/ml 45Ca+2。使用含有1％Triton X‑100、0.1％脱氧胆酸盐和0.1％SDS的缓冲液洗涤并裂解细胞。在加入液体闪烁剂(scintillant)后，在Packardt Top count中测量裂解液中的放射性。绘制浓度响应曲线，作为在缺少测试拮抗剂下获得的最大响应％。使用GraphPad PRISM软件，通过非线性回归分析，可以从浓度响应曲线计算出IC50值。
使用上述分析过程测试制备的各化合物，获得的结果示于表1。浓度为1.0μM和10.0μM下的抑制％示于表1中。
表1：本发明化合物的体外筛选结果