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杀寄生物组合物以及使用方法
    【技术领域】

    本发明涉及用于控制外寄生物的组合物。本发明特定地提供了寄生的包含拟除虫菊酯-和除虫菊酯的制剂，其包含含有二元醇类和/或萜烯类的溶剂系统。

    背景技术

    除虫菊酯是由热带的菊花(除虫菊)族植物中提取的天然化合物。拟除虫菊酯是合成的除虫菊酯的类似物。如US 4,020,181所述的那样，除虫菊酯和拟除虫菊酯都已经被用作控制外寄生物(例如跳蚤、苍蝇和蜱)对动物的侵染的杀虫剂。用于此目的的一种优选的拟除虫菊酯是扑灭司林。

    对于给药而言，拟除虫菊酯或除虫菊酯一般是在液体载体中进行制备，然后将其局部应用于需要减少跳蚤或其它外寄生物的动物上。可取的载体物质是可以与该活性成分进行混合从而可提供能倾倒到动物身上的制剂的溶剂。用于拟除虫菊酯和除虫菊酯的载体物质包括例如芳族石油产品如二甲苯和甲苯、环六亚甲基四胺、醇、玉米油、桉树油和烷基二元醇醚。虽然多数现有技术中包含拟除虫菊酯的杀虫剂制剂仅包含高至50％重量地拟除虫菊酯，但是US 5,236,954公开了拟除虫菊酯制剂，特别是通过使用烷基二元醇醚如二甘醇独甲醚而制得的包含浓度高于50％的扑灭司林的浓溶液的扑灭司林制剂。具有该类高浓度活性成分的杀虫剂组合物使得可以容易地少量地进行应用并仍然为有效剂量。

    高于50％重量活性成分的浓溶液使得局部应用更方便并且在美学上更易接受。浓度越高，用于有效控制外寄生物的剂量就越低。小剂量可被应用到相对较小的皮肤区域上，从而使主体不会被溶剂所包覆。申请的这种制剂和方法特别是可用来对家养的做伴动物如狗进行处理，这是因为当在使用后立即表示亲昵时动物不会滴溶剂或感到粘稠。该类小剂量可以不被被处理动物意识到的进行应用，从而易于给药。虽然该组合物可以以一个或多个小剂量的形式应用到动物的局部区域上，但是拟除虫菊酯可以移位以有效控制相对而言的遍及动物全身的外寄生物侵染。因此，包含高于50％重量的活性成分的制剂有许多活性成分浓度最高仅高至总制剂重量的50％的制剂所不具备的优点。

    活性成分浓度较高时，如例如浓度为65％或高于65％的扑灭司林溶液，在制剂中不存在大量的溶剂，并且已经发现拟除虫菊酯和除虫菊酯在较低的温度下如在低于约20℃的温度下可以从溶液中结晶出来。这带来了一定的问题，因为其意味着在溶液中的和可用来给药于动物的拟除虫菊酯或除虫菊酯的浓度减少。因此，需要可以在较低的温度下能防止拟除虫菊酯或除虫菊酯结晶或可将其结晶最小化的溶剂系统。

    还需要研制一种比目前市场上可得到的产品具有更长的有效期的制剂。显然希望使用在较长的时间内有效的产品，这是因为其效能成本更合算并且在一段时间内在提供有效保护时需要更少的应用。

    本发明的概述

    本发明通过提供用于控制外寄生物侵染的材料和方法而满足了这种需要。

    本发明一方面提供了一种局部应用于动物的杀寄生物组合物，其包含拟除虫菊酯或除虫菊酯和载体，其中所说的载体包含一种萜烯，如d-苧烯。在本发明的另一个实施方案中，该载体还包含一种烷基二元醇醚。优选的烷基二元醇醚包括丙二醇单甲醚、一缩二丙二醇单甲醚、和/或二甘醇一甲醚。特别优选的组合物包含高于组合物总重量50％的拟除虫菊酯或除虫菊酯。更优选的组合物包含至少为组合物总重量约65％的拟除虫菊酯或除虫菊酯。该拟除虫菊酯优选地是扑灭司林。

    本发明的详细描述

    这里所引用的所有参考资料在这里都被整体引入作为参考。

    本发明提供了用于控制在动物特别是家养动物上以及供食用的动物上的外寄生物的组合物，其中所说的家养动物包括狗和猫，而且还包括马，其中所说的供食用的动物如牛、绵羊和猪。可以用该组合物来处理外寄生物以及内寄生物，其中所说的外寄生物包括跳蚤、蜱、畜疥、螨、蚊子、讨厌的东西和咬人的苍蝇、虱、人疾病载体，其中所说的内寄生物是例如犬恶丝虫、钩虫和蠕虫(helmiths)。

    本发明的组合物包含拟除虫菊酯或除虫菊酯和包含萜烯或萜烯衍生物或萜烯或萜烯衍生物的组合的载体和另一种载体如烷基二元醇醚。已经令人吃惊地发现，当用萜烯，如d-苧烯(CAS #5989-27-5)作为载体时，可以将结晶最小化和/或避免结晶。在一个优选的实施方案中，该载体包含一种萜烯和丙二醇单甲醚的组合物，或萜烯和一缩二丙二醇单甲醚(CAS #107-98-2)的组合。优选地，该组合物包含约30％至约70％重量的萜烯或萜烯-烷基二元醇醚组合。

    可用于本发明的拟除虫菊酯包括扑灭司林、苯氧司林、acrinathrin、丙烯除虫菊酯、生物丙稀菊酯、氟氯菊酯、右旋反灭虫菊酯、乙氰菊酯、氯氰菊酯、格林奈、λ格林奈、氟氯氰菊酯、苯醚氰菊酯、凯撒(tralomethrin)、tralocythrin、溴氰菊酯、炔戊菊酯、分朴菊酯、kadethrin、pralleirin、除虫菊酯、灭虫菊、sluvalinate、tefluthrin、四甲司林、transfluthrin、fluvinate、flumethrin和氰戊菊酯。用于本发明的最优选的拟除虫菊酯是扑灭司林(CAS#52645-53-1)。扑灭司林具有391.28克/摩尔的分子量，并且工业的扑灭司林包含约25至80％重量的顺式异构体和约20至75％重量的反式异构体。在本发明的杀虫剂组合物中，工业扑灭司林是适用的并且其优选地具有最小数量为约45％重量的反式异构体和最小数量为约35％重量的顺式异构体。

    在本发明杀外寄生物组合物组中，扑灭司林或其它拟除虫菊酯的浓度一般为约30至约95％重量，优选浓度为至少约45％，更优选地为50-75％(重量)。该组合物的剩余部分为载体物质。

    除d-苧烯外，适用于所要求进行处理的本发明的其它萜烯类包括α-蒎烯、β-蒎烯、β-月桂烯和萜烯品油烯。此外，还可以用萜烯衍生物、或类萜作为载体或该载体的一种组分。这里所用的“萜烯衍生物”或“类萜”的术语包括萜烯醇如香叶醇、萜烯品醇和芫荽醇、萜烯醛如香茅醛、以及萜烯酮如长叶薄荷酮，所有这些物质都适于作为要保护的本发明化合物中的载体或该载体的一种组分。

    可以用萜烯、萜烯醇、醛或酮作为本发明组合物的唯一液体载体。或者该载体可以包含萜烯或萜烯衍生物和另一种载体的组合，其中所说的另一种载体如己二醇或烷基二元醇醚。优选的烷基二元醇醚包括丙二醇单甲醚、一缩二丙二醇单甲醚和二甘醇甲醚。如果使用萜烯或萜烯衍生物和烷基二元醇醚的混合物，则可取的混合物包含至少10％重量的萜烯组分。优选地，萜烯与烷基二元醇醚的比例为约3∶1至约1∶3。更优选地，萜烯与烷基二元醇醚的比例为约2∶1至约1∶2。还可以将其它的常规载体与萜烯或萜烯衍生物联用。

    本发明的组合物可以有效地对抗外寄生物而同时对于主体而言仍然是无刺激性和无毒的。因为该组合物可以用高浓度的活性成分来进行制备，所以其可以用少但有效的剂量来容易地进行应用。特别有效的应用方法包括将该组合物应用到主体的一个或多个局部区域上，如通过将组合物的小点应用到动物肩胛骨之间的区域上来将其应用于动物。可以通过将组合物的第二个小点应用到臀部区域上来对较大的动物进行处理。认为拟除虫菊酯组分在相对较短的时间内可发生移位从而有效地覆盖了该主体身体的整个表面。在对动物进行处理时不需要特别的专门技术，所以动物主可以在没有健康护理专业人员的帮助和特别装置的情况下来完成该处理。

    可以根据需要向本发明的组合物中添加其它的惰性成分。该类成分包括涂布剂、增效剂、诱引剂、驱避剂、粘着促进剂、表面活性剂、稳定剂、皮肤调节剂、香料、气味掩蔽剂、taste deterrants、包衣光泽剂(coat sheeners)和着色剂。在本发明的组合物中还可以包含附加的活性成分，如其它杀虫剂和昆虫生长调节剂。

    适宜的涂布剂是特别易于将其本身散布在皮肤上的液体。肉豆蔻酸异丙酯是常用的涂布剂。所需的涂布剂(有时被称为涂布油)的可取的性质对于本领域技术人员而言是十分众所周知的。诱引剂包括信息激素如2，6-二氯苯酚。驱避剂包括香茅醇、diethyl toluimide、邻苯二甲酸二甲酯等等。

    可用于本发明的其它惰性成分有粘着促进剂。粘着促进剂包括羧甲基纤维素、甲基纤维素和其它纤维素衍生物以及淀粉衍生物、聚丙烯酸酯、海藻酸盐、明胶、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、甲基乙烯基醚和马来酸酐的共聚物、聚乙二醇、石蜡、油类、蜡和氢化蓖麻油、胶体硅酸或这些物质的混合物。

    本发明的组合物在正常的情况下不包含表面活性剂，但是如果需要的话也可以包括这些表面活性物质。表面活性剂(包括乳化剂和润湿剂)包括(i)阴离子表面活性剂，如十二烷基硫酸钠、硫酸脂肪醇酯和单二烷基聚乙二醇醚正磷酸酯的单乙醇胺盐，(ii)阳离子表面活性剂，如氯化十六烷基三甲铵，(iii)两亲性的表面活性剂，如N-月桂基-氨基-二丙酸(diproprionate)二钠或卵磷脂，和(iv)非离子表面活性剂，例如，聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯化的脱水山梨醇单油酸酯、脱水山梨醇单硬脂酸酯、乙醇、甘油单硬脂酸酯、聚氧化乙烯硬脂酸酯和烷基苯酚聚乙二醇醚。

    在一些活性化合物的情况中为了防止发生化学降解，还可以使用稳定剂，其包括例如抗氧剂如生育酚、丁基-羟基茴香醚，丁基羟基甲苯和碳二亚胺，例如，2，2-6，6-四异丙基二苯基碳二亚胺)、和清除剂如表氯醇。着色剂包括可溶解于本发明载体中的常规染料，如苏丹红或OilGolden Yellow。

    为了制备本发明的杀虫剂组合物，将拟除虫菊酯加热至65-80℃直至存在的任何晶体都被液化。然后将液体进行混合直至混合均匀。将液体溶剂放到一个独立的未进行加热的容器中。然后向该容器中加入扑灭司林。然后将扑灭司林和载体溶剂混合均匀。在该容器中还可以包含添加剂，如这些上面所列的物质(例如，皮肤调节剂、香料包衣光泽剂、以及涂布剂)，将其进行混合，制成该制剂。

    在本发明的优选实施方案中，扑灭司林被加热至约65℃。将2∶1至1∶2的d-苧烯和丙二醇单甲醚的混合物放置在一个干净的储罐中，向其中加入扑灭司林丙将其混合均匀。在已经将扑灭司林制成这种简单的液体混合物后，将该混合物作为制备其它物理状态的局部制剂的起点。例如，可以添加胶凝剂从而制备出凝胶和溶胶形式的局部制剂。可以添加气体，从而制备出可以以气溶胶的形式进行传递的局部制剂。可以向该液体混合物中加入其它配制物质从而制备出软膏和糊剂。

    本发明的杀虫剂组合物适用于大多数哺乳动物，包括人、马、牛、长颈鹿和家养的做伴动物如狗。因为其这种无毒性，其可以用于年龄较小的动物以及成年的动物，其中所说的年龄较小的动物例如3星期大的动物。其还可以有效地对抗各种寄生物，包括蜱、跳蚤、苍蝇、羊蜱蝇、和螨。

    本发明的组合物特别适用于马和其它大型哺乳动物，这是因为与包含50％重量或小于50％重量拟除虫菊酯的组合物相比，其所需剂量要小得多。本发明的杀虫剂组合物可用于控制节肢动物、昆虫和螨外寄生物如跳蚤、蜱、苍蝇、羊蜱蝇、和螨。其最优选地是用于控制狗身上的蜱和跳蚤。

    该组合物可以通过组合物局部应用的常规方法来应用到主体动物上，例如通过将小体积的液体组合物滴加到哺乳动物身体上来进行应用。使用高浓度组合物的一个优点是仅需要小体积的制剂。以这种方式进行应用的组合物看起来表现出迁移的行为，其中的拟除虫菊酯组分可转移到动物身体的其它区域。这种迁移或涂布作用确保了在进行外寄生物控制时可将拟除虫菊酯给药到相对而言的整个动物体表上。

    拟除虫菊酯浓度高于50％重量的制剂可以以单剂量包装的形式进行包装。例如，包含扑灭司林和溶剂乙醇的液体制剂的1立方厘米(cc)的单剂量可以被包装于可折叠的1cc管子中。因为该制剂避免使用强有机溶剂如二甲苯、环己酮、和甲苯，所以在管材方面有更多的选择。单剂量容器使得动物主在进行贮藏和清理时更为方便。可以将多剂量液体制剂包装于容量大于1cc的容器中。高浓度组合物还可以降低用于较大动物时所需多剂量容器以及单剂量容器的尺寸。可以方便地使用在US 5,344,018中所描述类型的包装集合。

    因为该组合物具有高浓度的拟除虫菊酯，这种点或线的少量应用在给药后三至二十四小时内和给药后高至四星期的时间内可以有效地控制昆虫和蛛形纲动物寄生物对哺乳动物的侵染。这种方法无毒并且该高浓度的组合物对动物的皮肤没有刺激性。虽然产生有效杀虫剂活性所需本发明组合物的必需数量取决于动物的大小和特定组合物的精确浓度以及传递能力，已经发现1立方厘米(cc)体积的优选液体组合物对体重低于15kg的狗有效。优选的65％重量的扑灭司林的1至2毫升的体积可以传递65-130mg扑灭司林。在狗体重大于15kg时，已经发现在肩胛骨之间使用1cc 65％重量扑灭司林的组合物并在尾基部使用另外1mL是有效的。在一优选实施方案中，对于主体每公斤体重，可以使用约33或更多毫克的组合物。

    用如下的实施例来对本发明进行更特别的描述，这些实施例只是对本发明进行说明，这是因为本领域技术人员可以对其进行许多修改和变化是显而意见的。

                           实施例

                           实施例1

                             A                  B

    成分             ％重量  质量(g)  ％重量 质量(g)

    扑灭司林

                       65.00     680.63     65.00    680.63   (纯度为0.955％)

    d-苧烯             35.00     319.37*   11.55    115.50

    丙二醇单甲醚

                       -          -         23.45    203.87*

                       100.00    1000.00    100.00   1000.00

    *该产品是以100％的活性成分进行制备的。纯度的调节是用该产品的主要惰性物来进行的。

    将扑灭司林放到容器中，然后向其中加入溶剂成分(成分们)。开始进行搅拌，连续搅拌五分钟或搅拌至该溶液成为均匀的溶液，可以根据需要进行加热以使扑灭司林溶解。将该容器的内容物包装玻璃容器中，密封，并进行适宜的标记。

                                实施例2

                     A                B                C

    成分    ％重量  质量(g) ％重量  质量(g) ％重量 质量(g)

    扑灭司林

    (纯度为    65.00    68.71     65.00     68.71     65.00   68.71

    0.946％)

    香叶醇     35.00    31.29*   23.35     23.35     17.50   17.5

    丙二醇

    单甲醚     -        -         11.65     7.95**   17.50   13.79**

               100.00   100.00    100.00    100.00    100.00  100.00

    *该产品是以100％的活性成分进行制备的。纯度的调节是用香叶醇来进行的。

    **这些产品是用100％的活性成分进行制备的。纯度调节是用丙二醇单乙醚进行的。

    这些制剂是用实施例1的方法来进行制备的。

                               实施例3

    进行这些研究以查明对于扑灭司林而言，某些溶剂或溶剂混合物是否比甲基卡必醇具有更好的溶剂性质。

    对一些类型的溶剂进行评估。选择在冷藏器[4℃和]和冷冻器[-10℃]温度下表现出良好的溶解性的这些溶剂，其同时是已经被EPA批准用于动物的溶剂(40 C.F.R.§180.1001(e))。    所评估的溶剂    来源己二醇[2-甲基-2，4-戊二醇]Shell Chemical甲基卡必醇[二甘醇一甲醚]Union CarbideDowanolPM[丙二醇单甲醚]Dow ChemicalDowanolDPM[一缩二丙二醇单甲醚]Dow Chemicald-苧烯[1-甲基-4-异丙烯基-1-环己烯]Florachem Corp.

    溶剂都得自其基本制造商或通过Ashland Chemical获得。

    在下面3A-3D的各实施例中，用实施例1的方法将扑灭司林溶解于该溶剂或溶剂混合物中。将这些溶液倒入到带有螺旋顶盖的100mL管中。将这些管放置在冷水浴中并使之在该浴温度下进行平衡。在该溶液在该浴中达到平衡后，用扑灭司林晶体作为晶种对该制剂进行接种。然后对该被接种的制剂进行充分振荡，重新放置到该浴中并使之在该浴中放置24小时。然后对该制剂进行结晶检查，然后在对该溶液进行全面地搅动并重新将其在该浴中再放置另一段时间。在发生另外的结晶后对上清液进行取样。分析该上清液样品中的扑灭司林浓度以及反式/顺式异构体比例。

                               实施例3A

    为了测定扑灭司林在不同溶剂中的相对溶解度，获得一种冷温浴，并最初将其设置在25℃。(该水浴包含二元醇和水的混合物但是具有低于-15℃的凝点。)

    扑灭司林的最初溶液被制备为含70％的扑灭司林。用纯扑灭司林进行补偿，使得工业扑灭司林与溶剂的典型比例为74.3％重量的扑灭司林比25.7％重量的溶剂。

    当没有发生结晶时，向溶液中再添加扑灭司林使扑灭司林的浓度达到75％并将浴温降低到20℃。在两种温度下，都用扑灭司林晶体对溶液进行接种。在24小时后，检查管中的各溶液产生结晶的相对数量。在发生结晶的样品中，从小瓶中将上清液样品吸出来并将浴温降低到15℃。

    对样品进行分析以测得扑灭司林的浓度和反式/顺式异构体比例。当一些样品在15℃下完全变为固体时，将浴温升至17.5℃。从在己二醇和甲基卡必醇(二甘醚一甲醚)的溶液中取样。

    初步研究的结果(表1)证明d-苧烯是优秀的扑灭司林溶剂，这是因为在d-苧烯溶液中产生的结晶较少。对于扑灭司林而言，其在溶剂丙二醇单甲醚和一缩二丙二醇单甲醚中的溶解度好于在甲基卡必醇中的溶解度。这些两种二元醇醚对扑灭司林都表现出了良好的溶解性，但是在低温研究中丙二醇单甲醚产生的结晶比一缩二丙二醇单甲醚少(表3)。

                               表1

    d-苧烯  温度    扑灭司林    反式异     构体    顺式异     构体  反式/顺   式比例           注解  初始    70.43％  40.89％    29.54％  1.38％在25℃下没有发生结晶作用，所以又向该产品中加入了5％的扑灭司林。仍然没有发生结晶，所以两次在25℃下，然后一次在20℃下向溶液中加入扑灭司林晶体。在最低温度--15℃下，结晶保留在溶液中。  25℃    75.29％  43.76％    31.53％  1.39  20℃    74.84％  43.37％    31.47％  1.38  17.5℃    NA  NA    NA  NA  15℃    NA  NA    NA  NA

    己二醇  温度   扑灭司   林  反式异  构体  顺式异  构体 反式/顺式    比例           注解  初始    71.09％  41.32％    29.77％    1.39在25℃下没有发生结晶作用，所以又向该产品中加入了5％的扑灭司林。仍然没有发生结晶，所以两次在25℃下向溶液中加入扑灭司林晶体。在25℃下在第二次加入扑灭司林晶体后晶体留存在溶液中。该溶液在20℃下完全凝固。在将管在17.5℃下放置24小时后将样品取出。该产品在17.5℃下大部分为固体。该产品在15℃下是固体。  25℃    75.02％  43.67％    31.35％    1.39  20℃    NA   NA    NA    NA  17.5℃    74.37％   48.47％    25.09％    1.87  15℃    NA    NA    NA    NA

    一缩二丙二醇单甲醚  温度   扑灭司   林   反式异   构体  顺式异  构体  反式/顺   式比例           注解  初始    70.35％    40.94％  29.41％    1.39在25℃下没有发生结晶作用，所以又向该产品中加入了5％的扑灭司林。仍然没有发生结晶，所以两次在25℃下向溶液中加入扑灭司林晶体。在25℃下在第二次加入扑灭司林晶体后晶体留存在溶液中。该产品在15℃下变成固体。在此温度下没有进行测定。  25℃    75.39％    43.74％  31.66％    1.38  20℃    75.15％    43.60％  31.55％    1.38  17.5℃    NA    NA   NA    NA  15℃    73.83％    43.79％  30.03％    1.46

    丙二醇单甲醚  温度扑灭司林  反式异  构体  顺式异  构体 反式/顺  式比例          注解  初始  70.78％  40.22％   29.55％    1.40在25℃下没有发生结晶作用，所以又向该产品中加入了5％的扑灭司林。仍然没有发生结晶，所以两次在25℃下，然后一次在20℃下向溶液中加入扑灭司林晶体。在较低温度下，结晶保留在溶液中。该产品在15℃下大部分为固体，但是仍然有足够的液体以供吸取样品进行测定。  25℃  75.66％  43.88％   31.79％    1.38  20℃  74.84％  43.78％   31.06％    1.41  17.5℃  NA   NA   NA    NA  15℃  74.85％  43.54％   31.31％    1.39

    二甘醇一甲醚  温度   扑灭司林   反式异   构体  顺式异  构体  反式/顺   式比例           注解  初始    69.70％    40.91％  28.79％    1.42在25℃下没有发生结晶作用，所以又向该产品中加入了5％的扑灭司林。仍然没有发生结晶，所以两次在25℃下向溶液中加入扑灭司林晶体。在25℃下在第二次加入扑灭司林晶体后晶体留存在溶液中。该溶液在20℃下表现出一点结晶作用，其在15℃下变成固体。在将其在17.5℃下放置24小时后对该产品进行取样。在15℃下没有进行取样。  25℃    74.90％    43.56％  31.34％    1.39  20℃    75.02％    43.81％  31.22％    1.40  17.5℃    74.44％    45.73％  28.71％    1.59  15℃    NA    NA  NA    NA

                           实施例3B

    在已经测定了扑灭司林在各种纯溶剂中的相对溶解度后，开始进行第二项研究以测得是否较好的溶剂的混合物会增强扑灭司林在溶液中的溶解度。进行试验的溶剂混合物是：一缩二丙二醇单甲醚/d-苧烯和丙二醇单甲醚/d-苧烯。

    以2∶1、1∶1、1∶2的比例对这些溶剂混合物进行评估，然后以8∶2和9∶1的比例对其进行评估(第一个数字指的是二元醇醚类中的一种，第二个数字指的是d-苧烯)。扑灭司林在这些混合物中的浓度从55％变到75％扑灭司林w/w。在所有的情况中，考虑扑灭司林的纯度，从而使纯扑灭司林的浓度为上面所给出的百分比。

    将这些扑灭司林溶液放置在低温水浴中(0、5、10、20和25℃)并对其进行接种。这使得在特定的温度下产生了扑灭司林在所给定的溶液混合物中的饱和溶液。然后用这些数据来决定带有最低温度溶解度的扑灭司林的制剂。

    混合溶剂研究[表2至5]表明d-苧烯与任意一种二元醇醚的混合物可产生一种其中扑灭司林在低温下具有比在这项研究中所用的任何单一溶剂中都好的溶解度的溶液。该数据还表明随着温度的降低，在d-苧烯和丙二醇单甲醚以及d-苧烯和一缩二丙二醇单甲醚的混合物中，存留在溶液中的顺式异构体的数量高于这些溶剂中任何一种单独使用时存留在溶液中的顺式异构体的数量。

    表2扑灭司林在丙二醇单甲醚[PM]和二甘醇一甲醚[DM]中的溶解度.扑灭司林  初始％                   PM                    DM仍然留在溶液中的扑灭  司林％ 25℃时反式 /顺式异构  体比例  结晶**仍然留在溶液中的扑灭  司林％  25℃时反式/  顺式异构体    比例  结晶    50    51.28    1.28    无    49.43    1.24  无    55    56.19    1.28    无    53.98    1.23  无    60    60.99    1.24    无    61.10    1.22  无    65    66.71    1.22    无    64.25    1.25  无    75    75.82    1.21    无    74.53    1.30  无仍然留在溶液中的扑灭  司林％ 20℃时反式 /顺式异构  体比例  结晶仍然留在溶液中的扑灭  司林％  20℃时反式/  顺式异构体    比例  结晶    50    50.60    1.28    无    50.55    1.24  无    55    55.54    1.29    无    55.14    1.23  无    60    61.27    1.25    无    60.05    1.31  无    65    66.25    1.23    无    64.85    1.31  无    75    76.84    1.23    无    74.20    1.39  结晶仍然留在溶液中的扑灭  司林％ 10℃时反式 /顺式异构  体比例  结晶仍然留在溶液中的扑灭  司林％  10℃时反式/   顺式异构体     比例  结晶    50   未试验   未试验    无    46.80    1.82    1/4    55   未试验   未试验    少量    50.72    2.08    1/2    60    59.08    1.51    1/3    56.17    1.97    2/3    65    61.63    1.99    1/2    NA    NA    2/3    75    72.22    2.05    2/3    NA    NA    3/4仍然留在溶液中的扑灭  司林％ 5℃时反式/ 顺式异构体    比例    结晶仍然留在溶液中的扑灭  司林％  5℃时反式/  顺式异构体    比例  结晶    50    46.61    1.77    无    46.00    1.90    1/4    55    52.71    1.60    少量    51.74    1.82    1/2    60    56.69    1.94    1/3    55.09    2.24    ＞90％    65    61.50    1.98    1/2    60.22    2.26    ＞90％    75    70.89    2.21    ＞90％    未试验    未试验    ＞90％

    表3在0℃下扑灭司林在二元醇醚/d-苧烯混合物中的溶解度.                  在PM*/d-苧烯中的70％的扑灭司林溶剂混合物中  的d-苧烯％  反式异构体％  顺式异构体％  总扑灭司林％   反式/顺式异构    体比例    100％    47.35    17.26    64.61    2.74    67％    46.85    18.51    65.94    2.50    50％    47.10    18.84    65.36    2.53    33％    48.05    17.15    65.20    2.80    0％    41.31    16.60    57.91    2.49                  在PM*/d-苧烯中的65％的扑灭司林溶剂混合物中的d-苧烯％反式异构体％顺式异构体％总扑灭司林％反式/顺式异构    体比例    100％    42.85    17.42    60.27    2.46    67％    52.56    18.89    61.45    2.25    50％    42.04    19.70    61.74    2.13    33％    42.89    16.53    59.42    2.60    0％    38.96    13.70    52.65    2.85                  在DPM**/d-苧烯中的70％的扑灭司林溶剂混合物中的d-苧烯％反式异构体％顺式异构体％总扑灭司林％反式/顺式异构    体比例    100％    47.35    17.26    64.61    2.74    67％    46.28    19.77    66.05    2.34    50％    46.47    19.19    65.66    2.42    33％    无数据    无数据    无数据    无数据    0％    48.53    15.71    64.24    3.09            在DPM**/d-苧烯中的65％的扑灭司林溶剂混合物中的d-苧烯％反式异构体％顺式异构体％总扑灭司林％反式/顺式异构    体比例    100％    42.85    17.42    60.27    2.46    67％    41.62    19.77    61.33    2.11    50％    42.64    18.91    61.55    2.26    33％    42.48    19.17    61.65    2.22    0％    43.33    14.92    58.25    2.90

    表4在5℃下扑灭司林在二元醇醚/d-苧烯混合物中的溶解度.              在PM*/d-苧烯中的70％的扑灭司林溶剂混合物中的d-苧烯％反式异构体％顺式异构体％总扑灭司林％反式/顺式异构    体比例    100％    45.98    20.06    66.05    2.29    67％    42.93    25.40    68.33    1.69    50％    43.83    25.82    69.65    1.70    33％    44.48    22.89    67.36    1.94    0％    47.00    17.79    64.79    2.64               在PM*/d-苧烯中的65％的扑灭司林溶剂混合物中的d-苧烯％反式异构体％顺式异构体％总扑灭司林％反式/顺式异构    体比例    100％    39.89    23.33    62.73    1.71    67％    38    26.13    64.86    1.48    50％    73    24.22    64.05    1.65    33％    39.82    22.53    63.08    1.8    0％    40.55    16.24    59.51    2.66                在DPM**/d-苧烯中的70％的扑灭司林溶剂混合物中的d-苧烯％反式异构体％顺式异构体％总扑灭司林％反式/顺式异构    体比例    100％    45.98    20.06    66.05    2.29    67％    43.23    26.15    69.38    1.65    50％    43.33    25.16    68.48    1.72    33％    44.17    24.98    69.64    1.77    0％    47.52    18.04    65.56    2.64                 在DPM**/d-苧烯中的65％的扑灭司林溶剂混合物中的d-苧烯％反式异构体％顺式异构体％总扑灭司林％反式/顺式异构    体比例    100％    39.89    23.33    62.73    1.71    67％    38.43    27.11    65.55    1.42    50％    39.36    25.47    64.83    1.55    33％    39.40    24.52    63.92    1.61    0％    42.89    17.64    60.53    2.43

    表5在10℃下扑灭司林在二元醇醚/d-苧烯混合物中的溶解度.                在PM*/d-苧烯中的70％的扑灭司林溶剂混合物中 的d-苧烯％  反式异构体％  顺式异构体％  总扑灭司林％  反式/顺式异构    体比例    100％    41.18    28.12    69.30    1.46    67％    43.87    25.17    69.04    1.74    50％    44.59    23.82    68.40    1.87    33％    45.07    22.74    67.80    1.98    20％    45.56    22.76    66.92    1.94    10％    45.66    21.04    66.70    2.17    0％    NA    NA    NA    NA                在PM*/d-苧烯中的65％的扑灭司林溶剂混合物中的d-苧烯％反式异构体％顺式异构体％总扑灭司林％反式/顺式异构    体比例    100％    38.32    27.56    65.88    1.39    67％    38.14    27.82    65.95    1.37    50％    38.95    25.51    64.45    1.53    33％    40.13    23.77    63.89    1.70    20％    39.03    25.33    64.35    1.54    10％    40.43    21.65    62.08    1.87    0％    NA    NA    NA    NA                在DPM**/d-苧烯中的70％的扑灭司林溶剂混合物中的d-苧烯％反式异构体％顺式异构体％总扑灭司林％反式/顺式异构    体比例    100％    41.18    28.12    69.30    1.46    67％    44.62    23.36    67.98    1.91    50％    44.50    22.29    66.70    2.00    33％    45.26    22.12    67.38    2.05    20％    45.69    22.02    67.71    2.08    10％    46.10    20.85    66.95    2.21    0％    46.54    20.04    66.58    2.32                 在DPM**/d-苧烯中的65％的扑灭司林溶剂混合物中的d-苧烯％反式异构体％顺式异构体％总扑灭司林％反式/顺式异构    体比例    100％    38.32    27.56    65.88    1.39    67％    39.43    25.50    64.92    1.55    50％    39.27    25.04    64.30    1.60    33％    41.55    23.39    64.93    1.78    20％    40.37    23.10    63.46    1.75    10％    41.06    20.36    61.42    2.02    0％    41.29    21.61    62.90    1.91

    *PM-丙二醇单甲醚

    **DPM-一缩二丙二醇单甲醚

                           实施例3C

    开始第三项研究以测定在该溶剂混合物中是否可增加较低浓度的扑灭司林的溶解度。这项研究是用d-苧烯和丙二醇单甲醚的溶剂混合物在-15℃下进行的。制备扑灭司林在d-苧烯和丙二醇单甲醚的溶剂混合物中的30％的溶液并将其放置在冷的浴温下。

    所用的溶剂系统是：

    100％d-苧烯

    2∶1d-苧烯/丙二醇单甲醚；

    1∶1d-苧烯/丙二醇单甲醚；

    1∶2d-苧烯/丙二醇单甲醚；

    1∶4d-苧烯/丙二醇单甲醚；和

    100％丙二醇单甲醚。

    将温度调节至-15℃。将溶液放置在该浴中，使其结晶并达到平衡。将上清液溶液进行取样和分析以测定扑灭司林的浓度和异构体比例。

    这项研究的结果(表6)表明在-15℃下在30％的扑灭司林初始浓度下也观测到了在扑灭司林浓度高于50％时所观测到的溶解度现象。即，在-15℃的较低温度下，当与单独使用该溶剂中的任何一种时的相司的初始浓度相比时，在混合溶剂中顺式异构体的溶解度增加。虽然良明在这种温度下扑灭司林的总溶解度低于最初的30％，但是这种顺式异构体的增加使得扑灭司林在这些溶剂混合物中的总溶解度增加。

                                 表6在制剂中的d-苧烯％在溶液中的扑灭司林％反式/顺式异构体比例    100    25.93    2.05    67    27.51    1.66    50    27.20    1.75    33    25.32    2.05    20    24.78    2.33    0    23.57    2.83

                           实施例3D

    本研究的目的是要测定在20℃下扑灭司林的溶解度。制备在丙二醇单甲醚中的70％的扑灭司林溶液。对工业的扑灭司林和最初的70％的溶液进行取样来测定扑灭司林的浓度和反式/顺式比例。将该溶液放置在该浴中，并不断进行搅拌。将浴温降至0℃。在溶液中发生结晶后，将浴温升至20℃并使进行着搅拌的结晶浆液平衡三天。在此时间之后，连续几天对上清液进行取样。通过过滤将晶体从液体层中分离出来，然后将该结晶用石油醚进行洗涤。对所得的所有样品——上清液和结晶进行分析，分析总扑灭司林含量和反式/顺式异构体比例。对该结晶进行洗涤以除去任何可能会对其分析造成污染的残余溶液。

    该研究的结果如表7所示。这些数据表明扑灭司林在丙二醇单甲醚中具有良好的溶解度。但是，正如已经用所有的扑灭司林溶液所观测到的那样，如果温度足够低，则顺式异构体将从溶液中结晶并沉淀出来。这种实验的结果表明在20℃时扑灭司林具有高于70％的溶解度，但是异构体比例移动有利于反式异构体，同时在这种温度下由溶液产生顺式异构体。

                                   表7  扑灭司林％反式/顺式异构体比例工业扑灭司林的测定    96.89    1.3470％溶液的初始测定    72.86    1.34在达到平衡后进行的测定    72.93    1.41在达到平衡后的第2天    72.96    1.41结晶的测定 100％顺式异构体    0

    在低温下的实施例3A-3D的结果证明扑灭司林在d-苧烯中表现出最大的溶解度。所实验溶剂降低溶解度的次序为：

    (a)d-苧烯

    (b)丙二醇单甲醚

    (c)一缩二丙二醇单甲醚

    (d)二甘醇一甲醚

    (e)2-甲基-2，4-戊二醇(己二醇)

    在混合溶剂系统中在各温度下扑灭司林顺式异构体的溶解度表现出不寻常的和出乎意料的增加。在低于50％的浓度时，与其在各相同溶剂中的溶解度相比，扑灭司林在混合溶剂中继续表现出增加的溶解度。

    扑灭司林以高于70％的浓度溶解于丙二醇单甲醚中，但是在扑灭司林的浓度在溶液中高于约70％时，顺式异构体在0℃下结晶并且在20℃下仍为结晶。

    扑灭司林的反式异构体在所选择的溶液中具有非常高的溶解度。当与纯溶剂的溶液相比时，顺式异构体在溶剂混合物中具有增加的溶解度。

                           实施例4

    在5种溶剂或溶剂混合物中对65％扑灭司林的功效进行了评估。将各组6只狗(3＜15kg和3≥15kg)随机分成下面7个治疗组中。

    治疗组                 制剂

    1                        65％在d-苧烯中的扑灭司林.

    2                        65％在d-苧烯和DowanolPM(丙二醇

                             单甲醚)(2∶1)混合物中的扑灭司林.

    3                        65％在d-苧烯和DowanolPM(1∶1)混

                             合物中的扑灭司林.

    4                        65％在d-苧烯和DowanolPM(1∶2)混

                             合物中的扑灭司林.

    5                        65％在DowanolsPM中的扑灭司林.

    6                        65％在甲基卡必醇(用于狗的杀虫剂

                             Defend EXSpot)中的扑灭司林

    7                        未进行处理的对照.

    各治疗组包含3条重量＜15kg的狗和3条重量≥15kg的狗。对各条狗进行一种治疗应用。将1.0mL试验制剂应用到重量＜15kg的各条狗的颈部的背部皮肤上。将1.0mL试验制剂应用到重量≥15kg的各条狗的颈部的背部皮肤上并将1.0mL应用到臀部的背部皮肤上。

    在研究的第-6、-1、4、11、18、25和32天将跳蚤(100只饥饿的成年猫蚤，猫节头蚤)放到各只狗的身上。在研究的第-1、3、9、16、23和30天将蜱(50只饥饿的成年美洲花蜱)放到各只狗的身上。在研究的第3、7、14、21、28、和35天对跳蚤进行计数。将蜱进行定位、计数并将其从狗身上除去。其后，用一种非常细的跳蚤梳给狗梳毛，在对各只狗进行至少五分钟梳毛或梳理至找不到活蚤为止的同时除去活跳蚤并对其进行计数。

    已经进行了跳蚤和蜱计数的个体(个体们)对于所指定的各狗的治疗组而言是“盲目的”。在用任何制剂进行处理后都没有观察到皮肤刺激的迹象。

    用几何平均值用Abbott’s公式来对功效进行测定：

    对抗猫头节蚤的各种制剂的功效如表8所示。

                                       表8    溶剂                        功效％(跳蚤)  第3天  第7天  第14天第21天第28天第35天  d-苧烯    90    100    100    90    88    49  PM/d-1 1∶2    95    98    100    96    98    63  PM/d-1 1∶1    90    99    100    95    97    75  PM/d-1 2∶1    90    100    99    98    95    81  DowanolPM    94    100    100    99    98    81  甲基卡必醇    89    100    98    96    48    减低  对照    (81)    (82)    (81)    (80)    (82)    (77)

    PM＝DowanolPM(丙二醇单甲醚)

    d-1＝d-苧烯

    ()-表示寄生物/对照狗的几何平均数(n＝6)

    包含DowanolPM的制剂在处理后3天内表现出90％-95％的初始功效。在处理后28天内观察到包含DowanolPM的制剂的高水平的功效(93％-100％)，然后在处理后35天该功效降至63％-81％。在35天后，包含DowanolPM的各种制剂之间在跳蚤/狗的对数均值之间没有观测到显著差异(p＞0.05)。

    仅包含d-苧烯的扑灭司林制剂表现出与DowanolPM制剂相似的功效，但是在4周后其功效降至88％。用在d-苧烯中的扑灭司林制剂进行处理时在处理5周后跳蚤/狗的对数均值与对照之间没有显著差异(p＞0.05)。

    相反，在甲基卡必醇(用于狗的DefendExspot杀虫剂)中的65％的扑灭司林对抗跳蚤的初始功效在进行处理3天后为约90％。在进行处理后的3周内，其对抗跳蚤的功效为96％-100％。但是，在处理4周后用在甲基卡必醇中的65％的扑灭司林进行处理的跳蚤/狗的对数平均数与对照之间没有显著差异(p＞0.05)。

    将美洲钝眼蜱(美洲花蜱)与扑灭司林制剂接触3天(第3天计数)、4天(第7天计数)或5天(第14、21和28天计数)。如表9所示，在3天内与各种扑灭司林进行进行接触的蜱中有约58％(范围：49％-65％)的蜱被杀死。在对狗进行处理后2周的时间内，与各种制剂接触4或5天的蜱几乎全部被杀死。在治疗后3周的时间内，DowanolPM和d-苧烯制剂的功效降至约87％(范围：78％-94％)并且在治疗4周后进一步降至约62％(范围：45％-72％)。

    在治疗3周后，DowanolPM、DowanolPM/d-苧烯2∶1和DowanolPM/d-苧烯1∶1制剂对抗美洲钝眼蜱的功效分别为88％、94％和88％。但是，在治疗3周后，DowanolPM和DowanolPM/d-苧烯1∶1制剂的功效与90％没有显著差异。

    在蜱与狗的制剂接触4天后，甲基卡必醇制剂对抗美洲钝眼蜱的功效(第7天计数)为98％。在对狗处理2周后功效降至87％。但是，在对狗进行处理2周后观测到的87％的功效与90％没有显著差异(D＞0.10)。

                                          表9    溶剂                   功效％(美洲钝眼蜱)  第3天第7天  第14天  第21天  第28天  d-苧烯    65    96    97    88    46  PM/d-1 1∶2    59    99    91    78    64  PM/d-1 1∶1    61    98    95    88*    59  PM/d-1 2∶1    57    97    87    94    68  DowanolPM    56    95    98    88*    72  甲基卡必醇    49    98    87*    78    8  对照    (31)    (27)    (22)    (29)    (21)

    PM＝DowanolPM(丙二醇单甲醚)

    d-1＝d-苧烯

    ()-表示寄生物/对照狗的几何平均数(n＝6)

    *表示功效％与90％没有显著差异(p＞0.10)

                           实施例5

    这项研究比较了在现场使用条件下当以一个点的形式进行应用时各种杀虫剂制剂对抗狗身上的猫蚤、猫节头蚤和褐色犬蜱、血红扇头蜱的功效的持续时间。

    将四十条各重量在2.2kg至31.5kg之间并且包括两种性别的饲养狗随机分成四组，每十只为一组。四个治疗组如下：

    在35％DowanolPM(丙二醇单甲醚)中的65％的扑灭司林

    阴性对照：未进行处理的狗

    阳性对照：DefendEXspot(在甲基卡必醇中的65％的扑灭司林)

    在(1∶1)35％Dowanol PM和d-苧烯中的65％的扑灭司林

    在该研究的第0天对治疗组1、3和4进行一种治疗应用。通过将1.0mL试验制剂(杀虫剂的局部点)应用到狗肩胛骨之间的背部皮肤上来对各只重量＜15kg的狗进行处理。通过将1.0mL试验制剂应用到狗肩胛骨之间的部位皮肤上并将1.0mL试验制剂应用到狗尾基部的直接相对的后面的皮肤上而来用2.0mL试验制剂对体重≥15kg的各条狗进行处理。

    在该研究的-5、-1、5、12、19、26、33和40天用100饥饿的成年跳蚤(两种性别)和50只节的成年褐色犬蜱(两种性别)对狗进行传染。

    在处理2天后并且每周一次地在各次侵染后2天时将跳蚤和蜱进行计数并除去。将蜱进行定位、计数并将其从狗身上除去。然后，用一种非常细的跳蚤梳给狗梳毛，在对各只狗进行至少五分钟梳毛或梳理至找不到活蜱为止的同时除去活跳蚤并对其进行计数。已经进行了跳蚤和蜱计数的个体(个体们)对于所指定的各狗的治疗组而言是“盲目的”。通过用两个人进行试验来确保该试验的盲目性：一个人从处理组将狗带过来，由第二个人——研究者对其进行进行观测。

    每天都对狗的健康情况进行检查，看有没有疾病和不良反应的迹象。在各次传染时都对治疗部位进行观测并对刺激迹象进行计数。

    用Abbott′s公式(见实施例4)来测定功效。结果如表10和11所示。

                                                          表10    溶剂                           功效％(猫蚤)   第2天   第7天    第14天   第21天  第28天  第35天  第42天    PMa    93.1    99.1    99.0    99.5    96.2    94.1    82.2    Pm/d-1b 1∶1    93.0    98.4    96.7    92.4    74.9    64.6    -    MCc    91.5    98.3    99.2    94.5    92.4    83.9    68.6

                                                      表11    溶剂                         功效％(褐色犬蜱)    第2天    第7天    第14天   第21天   第28天   第35天   第42天    PMa    85.4    99.3    99.1    95.3    92.6    13.4    91.7    Pm/d-1b 1∶1    89.4    99.6    100    98.4    91.8    90.0    75.5    MCc    100    98.6    98.8    95.0    94.3    94.3    91.7

    a-丙二醇单甲醚

    b-d-苧烯

    c-甲基卡必醇

    通过溶剂的组合产生的对抗跳蚤的高等级功效可以在进行处理后持续21天并且在21天和28天之间出乎意料地下降。在本实施例中类似地，在进行处理后35天内，在功效开始逐渐降低之前，通过溶剂的组合产生的对抗跳蚤的高等级功效会持续存在。表8-11所示的结果表明用于扑灭司林的组合溶剂除冷溶解度的优点外还可以有效地控制外寄生物。

    可以对本发明进行许多修改和变化，其不会脱离本发明的主旨和范围，因为其对本领域技术人员而言是显而易见的。这里所描述的特定实施方案仅仅是进行举例说明，本发明仅受所附权利要求的限制，其全部范围等于该类被授权的权利要求。