一种干扰素阴道泡腾片及其制备方法 【技术领域】
本发明涉及一种阴道泡腾片及其制备方法，更具体的说，涉及一种干扰素阴道泡腾片及其制备方法。
背景技术
泡腾片，这一在我国相对较新的剂型，目前正在药品和保健品生产中得到更多的应用，并被许多生产企业和消费者所关注。
由于妇科病毒感染有较高的发病率，用药市场较大。干扰素是目前公认的具有广谱抗病毒活性的药物，疗效确切。目前妇科消炎药剂型以栓剂、洗剂为主，近年来栓剂的份额在逐渐扩大。如果能够利用泡腾片的药物溶解度高、起效快、疗效确切等优点，则可以开发出适合于妇科局部用药的具有起效快、吸收完全、不伤粘膜等特点的泡腾片，其溶解速度将会比栓剂快，吸收比栓剂好，使用比栓剂方便。
【发明内容】
本发明提供了一种干扰素阴道泡腾片，它含有干扰素和辅料。所述的干扰素优选是重组人干扰素α2b。
在上述的干扰素阴道泡腾片中，所述的辅料包括泡腾剂、填充剂、崩解剂和粘合剂。所述的泡腾剂优选是酒石酸、硼酸和碳酸氢钠，所述的填充剂优选是淀粉，所述的崩解剂优选是羧甲基淀粉钠，所述的粘合剂优选是聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K-30。
在上述的干扰素阴道泡腾片中，每1000片干扰素阴道泡腾片中优选含有下述组分：
重组人干扰素α2b 5×107～5×109IU
硼酸 80～150g
酒石酸 50～110g
淀粉 220～270g
碳酸氢钠 90～150g
羧甲基淀粉钠 10～30g
硬脂酸镁 5～15g
PVP K30水溶液 适量
本发明还提供了一种制备干扰素阴道泡腾片的方法，它包括下述步骤：
(1)将淀粉、酒石酸、硼酸分别干燥；
(2)将PVP K30溶于水中，制成溶液；
(3)称取权利要求5所述量地酒石酸、硼酸，加入权利要求5所述量1/2的淀粉，混匀，加入权利要求5所述量的干扰素，混匀，再用PVPk30水溶液做粘合剂制软材，过筛制粒；
(4)另取权利要求5所述量的碳酸氢钠，加入权利要求5所述量1/2的淀粉，用PVP k30水溶液做粘合剂制软材，过筛制粒；
(5)将步骤(3)和(4)中制备的两种颗粒分别于40-45℃鼓风干燥4-6小时，测定水分含量为0.5％-1％时，取出，过筛整粒；
(6)加入权利要求5所述量的硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠，混匀，冲模压片，调整片重。
在本发明的制备方法中，通过选择上述辅料，使压片机冲模加压之前的片剂原料具有一定的流动性，药物能定量地填充到模孔中去；并且具有一定的粘合性便于压制成型，同时还具有一定的润滑性，使压制成的片剂外表光洁美观，且具有一定的崩解性及硬度等。而且，这些辅料还具有下述优点：理化性质稳定，不与干扰素发生反应，对其生物学活性无破坏、干扰作用；不影响干扰素的含量测定，不影响干扰素在片剂中的溶出和生物利用度；对阴道无剧烈刺激作用；价廉易得。
具体的说，干扰素泡腾片的主要辅料具有下述性质作用：
泡腾基质片——酒石酸、硼酸和碳酸氢钠：酸(如柠檬酸、酒石酸等)和碳酸盐遇水后发生化学作用产生二氧化碳，气体从片剂内部释放出来导致了片剂的迅速崩解，这是泡腾片的主要原理。选用硼酸，主要有以下几方面的作用：①作为酸源；②硼酸对干扰素有一定保护作用；③硼酸具有抑菌作用。因此，选用硼酸。同时添加酒石酸，目的是为了增加发泡量。
崩解剂和粘合剂——羧甲基淀粉钠(CMS-Na)、聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVPK-30)。羧甲基淀粉钠：中国药典(2000版)二部已收载。为无毒安全的口服辅料，现广泛用作片剂和胶囊剂的崩解剂。为自由流动的粉末，能分散于水，在水中的体积能膨胀300倍。
PVP K30是一种水溶性合成高分子化合物，具有优良的生理惰性和生物相容性。其一经问世就广泛应用于医药工业中，成为最主要的三大药剂新辅料之一。常用作片剂和颗粒剂的粘合剂。
淀粉在药剂中主要用作稀释剂、填充剂、粘合剂等。已广泛用作片剂等的制备。
【具体实施方式】
下面以实施例进一步解释本发明，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。
实施例1～3制备重组人干扰素α2b阴道泡腾片
配方的选择：
重组人干扰素α2b阴道泡腾片的配方(1000片)
实施例1 实施例2 实施例3
重组人干扰素α2b 5×107IU 5×108IU 5×109IU
硼酸 80g 130g 150g
酒石酸 50g 80g 110g
淀粉 220g 240g 270g
碳酸氢钠 90g 120g 150g
羧甲基淀粉钠 10g 20g 30g
硬脂酸镁 5g 10g 15g
PVP K30水溶液 适量 适量 适量
制备工艺：
(1)将淀粉、酒石酸、硼酸分别60℃干燥2小时后，过100目筛，备用；
(2)将PVP K30溶于纯化水中制成5％的溶液，备用；
(3)称取配方量的酒石酸、硼酸，加入1/2的淀粉混匀，加入配方量的干扰素，混匀，再用5％的PVP K30水溶液做粘合剂制软材，过20目筛制粒；
(4)另取配方量的碳酸氢钠，加入配方量1/2的淀粉，用5％的PVP K30水溶液做粘合剂制软材，过20目筛制粒；
(5)两种颗粒分别于42-45℃鼓风干燥4-6小时，测定水分含量为0.5％-1％时，取出，过20目筛整粒；
(6)加入配方量的硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠混匀，用椭圆的异形冲模压片，片重调整为0.6g；
(7)包装即得成品。
实施例4 初步稳定性试验
根据重组人干扰素α2b注射液的贮存条件：2-8℃，避光保存。考虑阴道泡腾片剂型的特殊性，所以对该制剂进行了影响因素实验，以考察本品在强光、高温、高湿条件下的稳定性，为产品贮藏条件提供实验依据。同时进行了加速和长期稳定性实验。考察项目参照中国药典(2000版)，选择外观，效价，pH值和崩解时限。
分别在光照4500Lx+500Lx(冷藏干燥)、高湿RH75％(冷藏避光)、高温40℃(避光干燥)条件下的结果表明：本品对湿度非常敏感，高湿(75％)第5天外观已不合格，外表面发生泡腾现象，第10天药片变得疏松，崩解时限降低，所以建议采用双铝箔包装以隔绝空气中的水分对产品质量的影响。同时，本品对温度也较敏感，高温(40℃)第10天效价降至0天的70％，贮存时应采用冷藏(2-8℃)。
加速稳定实验的结果表明，本品在市售包装，温度25±2℃，相对湿度60±10％的条件下放置6个月，效价有下降的趋势，但仍在合格范围，而其他检项与0月比较均没有显著性差异，表明选用的内包装材料对产品的质量没有影响，其密封性和避光性均符合要求，且不影响产品的内在质量。同时，本品对温度敏感，应冷藏保存。
本品在市售包装，温度6±2℃，相对湿度60±10％的条件下，长期试验12个月各项重点指标均没有变化，表明本品在上述条件下稳定，长期试验仍在继续。
综合上述影响实验、加速、长期稳定实验结果，重组人干扰素α2b阴道泡腾片的条件为2-8℃避光保存，有效期初步暂定为18个月。
实施例5 安全性评价
急性毒性试验：
选用性成熟健康雌性家兔，随机分为四组，每组6只，即基质片组，泡腾片高、中、低剂量组(阴道一次性给药5.0×105IU/只、10.0×105IU/只、15.0×105IU/只)，每只家兔的平均体重为2.75Kg，折算等效剂量，分别相当于临床用药量的24倍，48倍，72倍(临床日用量为5.0×105IU/人，按60Kg计算)。连续观察14天。
给药后至观察期满，无1例动物出现中毒症状及死亡。各组动物毛发光泽、四肢活动自如，饮食饮水及排便正常，全身状态良好，体重均有增加。用药局部皮肤粘膜颜色正常，无充血、红肿，无异常分泌物。表明重组人干扰素α2b泡腾片属实际无毒物质。
长期毒性试验：
选用性成熟健康雌性家兔，随机分为四组，即基质片组、空白对照组、泡腾片高、低剂量组。泡腾片组阴道分别给予最低剂量5.0×105IU/只和最高剂量15.0×105IU/只，按动物平均体重2.75Kg，根据动物等效剂量折算后分别相当于临床用量的24倍，72倍(临床用量为5.0×105IU/60Kg人)。每天定时给药1次，连续30天。动物自由摄食、饮水。停药后恢复2周。
观察指标：每2周称量动物体重，观察动物饮食情况，活动状态，毛发、粪便等。于给药后2周、4周和停药后2周分别采血检查血常规、肝、肾功能，取主要脏器作病理学检查：心、肝、脾、肺、肾、脑、阴道、子宫、卵巢等并同时测定脏器系数。
结果表明，重组人干扰素α2b阴道泡腾片经家兔阴道给药相当于临床人日用量的24倍和72倍未见毒性反应。各剂量及时间点除血常规个别指标略有改变，病理组织学及脏体比未见明显变化。长期使用重组人干扰素α2b泡腾片相当于临床用量72倍未见毒性作用。
过敏性试验：
将健康24只豚鼠随机分成4组，即阴道泡腾片组、基质片组、阳性对照组和阴性对照组，每组6只。重组人干扰素α2b阴道泡腾片的剂量为1.2×104IU/只。经过致敏，刺激，观察豚鼠对该药物的过敏性反应。
阴道泡腾片组、基质片组和阴性对照组在刺激注射后15分钟内均没有出现如竖毛、呼吸困难、打喷嚏、干呕或咳嗽、锣音、抽搐、虚脱或死亡等任一现象，判定过敏反应为阴性。阳性对照组在刺激注射后15分钟内均出现不同程度上述过敏现象，判定过敏反应为阳性。
结果表明重组人干扰素-2b泡腾片不引起豚鼠过敏反应。
局部刺激性试验：
选用性成熟健康雌性家兔，体重2.5～3.0Kg，随机分为泡腾片高、中、低剂量组、基质片组和空白对照组，每组4只。高、中、低三个泡腾片组剂量分别为5.0×105IU/只、10.0×105IU/只、15.0×105IU/只，折算等效剂量分别相当于临床用量的24倍，48倍，72倍(临床用量为5.0×105IU/60Kg人)。基质片组给与相同规格的片剂基质。空白对照组用无菌棉签探入动物阴道中，保持相同时间。
观察时间：单次刺激试验给药24小时后处死动物；多次刺激试验每天固定时间给药1次，连续1周。于末次给药后24小时处死动物，取出阴道局部组织，观察充血、红肿等现象。大体观察后，经固定液固定，进行病理组织学检查。
结果表明，重组人干扰素α2b泡腾片对家兔阴道粘膜无明显刺激作用。
药理学试验：
选用健康Wistar雌性大鼠40只，随机分为四组，每组10只。即对照组、泡腾片高、中、低剂量组15.0×105IU/Kg、10.0×105、5.0×105。大鼠麻醉后固定，常规手术，进行气管、颈动脉插管，测定心率、血压、呼吸、心电指标。阴道给药，记录给药前及给药后3～360分钟的各项指标。
结果表明，重组人干扰素α2b阴道泡腾片对大鼠心电图的各波形、心率、血压、呼吸无明显影响。
选用健康Wistar雌性大鼠40只，随机分为四组，每组10只。即对照组，泡腾片高、中、低剂量组15.0×105IU/Kg、10.0×105、5.0×105。阴道给药采用旷场行为试验法观察动物自发及探究行为。
结果表明，重组人干扰素α2b阴道泡腾片阴道给药对大鼠自发及探究行为无明显影响。
实施例6 有效性评价
主要药效学试验：采用HSV-2病毒液感染豚鼠阴道制备阴道炎模型，将模型豚鼠随机分为泡腾片高、中、低剂量组，阳性对照组(无环鸟苷ACV)和阴性对照组五组，对重组人干扰素α2b阴道泡腾片治疗作用进行药效学分析。泡腾片高、中、低剂量分别为1.2×105IU/只、1.2×104IU/只和1.2×103IU/只；阳性对照组给ACV750mg/Kg(250mg/只)、阴性对照组给以0.5ml生理盐水，阴道给药9天，每天1次。给药后连续观察15天。每天记录豚鼠感染HSV-2后死亡数和死亡时间，计算死亡保护率和延长生命率。三个剂量的泡腾片组动物死亡率均显著下降，阴道内感染症状得到缓解，且随该药剂量增加而作用增大，呈量效关系，重组人干扰素α2b阴道泡腾片中剂量组与无环鸟苷组作用近似。
结果表明重组人干扰素α2b阴道泡腾片12×104IU/只、1.2×104IU/只和0.12×104IU/只，每日1次于阴道给药，连续9日对HSV-2型单疱病毒性阴道炎有明显抑制作用。
实施例7质量控制评价
(一)外观检查
本品为白色或类白色片，外观完整光洁，色泽均匀。
(二)鉴别试验
用中和法或免疫印记法或免疫斑点法测定，结果为阳性。
(三)pH值
随机抽取本品2片，研细，置50ml水中，搅拌，待气泡消失后，依法测定(《中国生物制品规程》2000年版)为4.0-6.0。
(四)崩解时限
取本品6片，依法检查(《中国药典》2000年版二部附录XA)，符合规定。
(五)融变时限
取本品3片，依法检查(《中国药典》2000年版二部附录XB)，符合规定。
(六)发泡量
取本品10片，依法测定(《中国药典》2000年版附录IA)，符合规定。
(七)重量差异
取本品20片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定各片的重量。每片重量与平均片重相比较，超出重量差异±5％的药片不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。
(八)脆碎度
取本品约6.5g，吹风机吹去脱落的粉末，精密称重，置脆碎仪中转动100次，减失重量不得过1％，且不得检出断裂，龟裂及粉碎的片。
(九)微生物限度检查
取本品适量，依法测定(《中国药典》2000年版二部附录XI J)，细菌总数小于100个/g；霉菌、酵母菌不得检出；金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌不得检出。
(十)效价测定
取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于干扰素α2b25万IU)，置25ml量瓶中，用测定培养液定容至刻度，充分溶解后混匀，取药液离心(10000rpm，10min)，取上清，按《重组人干扰素α1b制造及检定规程》附录的方法(《中国生物制品规程》(2000版))进行测定、用国家标准品校准确定效价。干扰素效价为标示量的80％～150％。