芳香二脒类具杀菌活性的化合物及其用途.pdf

1.  芳香二脒类具杀菌活性的化合物，其特征在于该化合物的结构通式为：

其中：R₁＝H，OCH₃


2.  如权利要求1所述的芳香二脒类具杀菌活性的化合物，其特征在于，所述的化合物可加工成为适合喷雾使用的各种剂型或制剂；
各种剂型或制剂中各物质的重量百分比为：

  剂型  化合物％  填料或溶剂％  表面活性剂％  可湿性粉剂    20～90    0～74    1～10  乳油或可溶性浓剂    5～50    40～95    0～35  水悬浮剂    10～50    40～84    1～20  粉剂    1～25    70～99    0～5  粒剂或片剂    1～95    5～99    0～15  水剂    2～95    5～98    0～10
其中的填料是白炭黑、膨润土、硅澡土及本领域人员公知的物质中的一种或几种混合物；溶剂是甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、水及本领域人员公知的物质中的一种或几种混合物；表面活性剂是本领域人员公知且常用的各类表面活性物质的一种或几种的混合物。

3.  如权利要求2所述的具杀菌活性的化合物，其特征在于，所述的由化合物组成的各种剂型或制剂中，还另外加入0.1％～70％的其他常用的或本领域公知的杀菌活性物质的一种。

4.  权利要求1所述的芳香二脒类具杀菌活性的化合物作为农用杀菌剂在防治植物病原菌的应用。

5.  如权利要求4所述的应用，在化合物的结构通式中，当R₁为H，R₂为脒基，n为3时，即为4，4’-二脒基-1，3-二苯氧基丙烷；
在化合物结构通式中，当R₁为OCH₃，R₂为脒唑基，n为2时，即为4，4’-二脒唑基-1，3-(2，2’-二甲氧基)二苯氧基丙烷。

芳香二脒类具杀菌活性的化合物及其用途
技术领域
本发明涉及农用杀菌剂范畴，特别涉及芳香二脒类具杀菌活性的化合物及其应用。
背景技术
植物病原菌对植物的生长有很大的危害，每年均给农业生产造成巨大的损失。为防治植物病害的发生，减少由其造成的损失，人们研究出了大量具杀菌及抑菌活性的化合物，用于防治和减轻植物病害的发生。
灰霉属病菌包括葡萄孢菌(B.cinera)、葱葡萄孢菌(B.allii)葱鳞葡萄孢菌(B.squamous)等，其中灰葡萄孢菌(B.cinera)是一种危害严重的植物病原菌。灰霉病菌能侵染多种植物，其中很多植物是重要的农作物。易受灰霉病菌侵染的植物有：鲜果实植物如草霉、葡萄、苹果和柑桔等；蔬菜如甘蓝、胡萝卜、黄瓜、西红柿、莴苣等；观赏植物如玫瑰、秋海棠、菊花、天竺葵、郁金香等。灰霉病的侵染可导致大面积植物死亡，从而造成巨大的损失。
发明内容
针对上述现有技术存在的缺陷或不足，本发明的目的在于，提供一种芳香二脒类具杀菌活性的化合物及其用途，该化合物属于一类全新的化合物，对灰霉病有特效，可作为农用杀菌剂在防治植物病原菌的应用。
本发明的芳香二脒类具杀菌活性化合物，以下列两个化合物为具体例子：4，4’-二脒基-1，3-二苯氧基丙烷；4，4’-二脒唑基-1，3-(2，2’-二甲氧基)二苯氧基丙烷在治疗几种动物疾病时已得到应用，本发明是首次将其应用到植物病原菌的防治中，即作为农用杀菌剂使用。
本发明所采用的技术方案是，芳香二脒类具杀菌活性的化合物，其特征在于该化合物的结构通式为：

其中：R₁＝H，OCH₃

本发明的其它特点是，所述的具杀菌活性的化合物可制成各种剂型或制剂，用于喷雾使用；
各剂型中各组成物质的重量百分比为：

  剂型    化合物％    填料或溶剂％    表面活性剂％  可湿性粉剂    20～90    0～74    1～10  乳油或可溶性浓  剂    5～50    40～95    0～35  水悬浮剂    10～50    40～84    1～20  粉剂    1～25    70～99    0～5  粒剂或片剂    1～95    5～99    0～15  水剂    2～95    5～98    0～10
所述的具杀菌活性的化合物组成的各种制剂，其中的填料可以是白炭黑、膨润土、硅澡土等本领域工作人员公知的物质中的一种或几种混合物；溶剂可以是甲醇、乙醇、正(异)丙醇和水等本领域工作人员公知的物质中的一种或几种混合物；表面活性剂可以是本领域人员公知且常用的各类表面活性物质的一种或几种的混合物。
所述的具杀菌活性的化合物组成的各种制剂，还可加入0.1％～70％的其他杀菌活性物质。
所述的各种制剂中加入的其他杀菌活性物质，是在本领域常用的或本领域人员公知的杀菌活性物质的一种。
本发明的另一个特点是，可将其应用于防治植物病原菌，作为农用杀菌剂使用；
在化合物的结构通式中，当R₁＝H，R₂为脒基，n为3时，即为4，4’-二脒基-1，3-二苯氧基丙烷；当R₁＝OCH₃，R₂为脒唑基，n为3时，即为4，4’-二脒唑基-1，3-(2，2’-二甲氧基)二苯氧基丙烷。
四、具体实施方式
以下详述本发明的实施过程。
具杀菌活性的化合物，其特征在于该化合物的结构通式为：
包括化合物的结构通式为：

其中：R₁＝H，OCH₃

所述化合物具杀菌活性的机理是：化合物能和病原菌的双链DNA小沟结合，尤其和富含A、T碱基对的区域。许多植物病原菌，特别是植物灰霉属病菌的DNA为双链结构，富含A、T碱基对，因此对植物灰霉病有特效，并对DNA结构与灰霉病菌结构特点相同的植物病原菌也有很好的防效。
本发明具杀菌活性化合物的应用，其特征在于该化合物可配制成各种剂型及制剂形态，用于田间防治植物病原菌。各制剂中各成分的重量百分比为：
  剂型    化合物％    填料或溶剂％    表面活性剂％  可湿性粉剂    20～90    0～74    1～10  乳油或可溶性浓  剂    5～50    40～95    0～35  水悬浮剂    10～50    40～84    1～20  粉剂    1～25    70～99    0～5  粒剂或片剂    1～95    5～99    0～15  水剂    2～95    5～98    0～10
其中的填料是白炭黑、膨润土、硅澡土等本领域工作人员公知的物质中的一种或几种混合物；溶剂是甲醇、乙醇、正(异)丙醇和水及本领域工作人员公知的物质中的一种或几种混合物；表面活性剂可以是本领域人员常用且公知的各类表面活性物质的一种或几种的混合物。
由化合物组成的各种制剂，其特征在于各制剂中还可加入0.1～70％的其他杀菌剂活性物质。各种制剂中加入的其他杀菌活性成份，可以是在本领域常用的，为本领域人员公知的杀菌活性物质。
各制剂形态中有效成份的含量可根据本发明涉及的具体化合物和其理化性质确定，各制剂可采用当前常用地农药田间使用技术在田间使用，而这些当前常用的农药田间使用技术对本领域人员是公知的。
本发明可通过如下实施例给出：
实施例1：化合物结构通式中，当R₂为n为3，R₁为H时(以下简称W1)，结构式为：

实施例2：化合物结构通式中，当R₂为n为3，R₁为H时(以下简称W2)，结构式为：

实施例3：化合物结构通式中，当R₁为H，R₂为n为3时(以下简称W3)，结构式为：

实施例4：化合物结构通式中，当R₁为OCH₃，R₂为n为3时(以下简称W4)，结构式为：

实施例5：化合物结构通式中，当R₁为OCH₃，R₂为，n为4时(以下简称W5)，结构式为：

实施例6：化合物结构通式中，当R₁为OCH₃，R₂为n为5时(以下简称W6)，结构式为：

实验实施例1
在离体条件下，化合物W1、W2、W3、W4、W5和W6对多种植物病原菌有效。将各化合物用无菌水配制成10mg/L的药剂，以番茄灰霉病菌、番茄叶霉病菌、番茄早疫病菌、白菜黑斑病菌、小麦赤霉病菌等12种植物病菌为供试生物，将1ml药液加到9ml的PDA培养基中混合均匀，倒入高温灭菌的培养皿中制成带药培养基，待培养基凝固后，每个培养基平面放入1个供试菌饼，对照放1个供试菌饼(直径为4mm)，每个处理3次重复，根据对照生长情况，用十字交叉法测量供试菌落直径，用下述公式计算抑制率，结果见表1

                                        表1  化合物对不同植物病原菌的抑制效果
                                                   抑制率(％)  样  品    番茄灰    霉病菌    (3d)    番茄叶    霉病菌    (3d)    番茄早    疫病菌    (3d)    白菜黑    斑病菌    (4d)    黄瓜枯    萎病菌    (4d)    苹果干    腐病菌    (4d)    辣椒疫    霉病菌    (4d)    烟草赤    星病菌    (3d)    南瓜枯    萎病菌    (3d)  W1    96.8    53.2    66.1    96.4    30.4    90.4    40.9    93.3    38.1  W2    97.8    73.2    68.7    98.7    56.6    93.6    67.8    95.8    78.5  W3    76.8    48.9    65.6    87.5    30.2    87.3    35.6    76.9    36.8  W4    98.7    69.8    76.8    98.7    46.9    92.6    48.7    95.7    56.8  W5    96.9    83.9    86.3    98.9    86.4    95.1    86.7    96.6    88.9  W6    78.5    56.2    67.8    88.6    56.4    88.6    63.5    85.2    59.7
实验实施例2：
实施例2中的化合物W1、W2、W3、W4、W5和W6对多种植物病原菌有效。将各化合物溶于5％的polyethylene Glycol中，喷于植物上，在24℃下凉干。然后接种病原菌，定殖5-7天，检查病原菌的生长情况。防治效果用0(对照)至10(100％)的指数来表示，结果见表2。
               表2  化合物对不同病菌的防治效果
  浓度(PPM)    B.Cinera(苹果)    B.Cinera    (葡萄叶)    S.nodorum    (小麦叶片)    W1  200    9    9    8  60    9    8    6  20    8    7    4  6    7    6    0    W2  200    10    0    3  60    9    0    0  20    8    0    0  6    6    0    0    W3  200    8    9    8  60    7    8    7  20    7    7    6  6    5    5    0    W4  200    10    10    10  60    9    9    8  20    8    9    7  6    7    7    7    W5  200    10    10    9  60    9    9    8  20    8    9    7  6    7    8    6    W6  200    8    9    7  60    8    7    7  20    6    7    6  6    6    6    0
实验实施例3：
将W1、W2、W3、W4、W5和W6用本发明的制剂配制方法，配制成2％水剂，在大田进行了防治植物病原菌的试验，用常用杀菌剂扑海因和速克灵为对照药剂，清水为对照，不同浓度药液喷雾后的防治效果见表3、表4。
在实验中，对于化合物组成的各种制剂、填料或溶剂、表面活性剂的重量百分比，以及加入其他杀菌活性物质的百分比，按本发明的技术方案配制，均可达到理想的效果。
黄瓜、番茄灰霉病发生及防治效果调查，主要以果实为调查对象。每小区采用5点取样，每点调查2～3株，每株调查3～5个果实并根据以下分级标准进行记录。根据以下分级标准记录叶片发病情况，据病情指数计算防治效果，以DMRT法分析各处理间的差异显著性。
0级：果实无病斑；
1级：病斑直径小于1cm；
3级：病斑直径1～2cm；
5级：病斑直径2～3cm；
7级：病斑直径3～4cm；
9级：病斑直径大于5cm。
施药前调查灰霉病的病情基数，施药后调查果实病情并记录。

若试药前未发病(即病情基数为0)，则按下式计算相对防效。

                  表3  2％化合物水剂防治黄瓜灰霉试验结果
    药剂    浓度    平均病情指数    防治效果(％)    差异显著性    (α＝0.05)    W1    50PPM    10.59    61.9    c    100PPM    7.44    68.0    b    200PPM    5.56    79.8    a    W2    50PPM    9.59    61.9    c    100PPM    8.44    66.0    b    200PPM    5.86    78.8    a    W3    50PPM    10.89    41.9    c    100PPM    9.44    61.0    b    200PPM    6.56    66.8    a    W4    50PPM    9.79    65.9    c    100PPM    8.74    71.0    b    200PPM    5.36    80.8    a    W5    50PPM    10.19    59.9    c    100PPM    8.44    67.0    b    200PPM    5.26    79.8    a    W6    50PPM    11.98    52.9    c    100PPM    9.44    66.0    b    200PPM    7.56    72.8    a    扑海因    1000倍液    7.17    74.2    a    空白对照    -------    27.8    ------    ------
                   表4  2％化合物水剂防治蕃茄灰霉试验结果
    药剂    浓度    平均病情指数    防治效果(％)  差异显著性  p_0.05    p_0.01    W1    50PPM    0.097    62.11  c         C    100PPM    0.084    67.19  b         B    200PPM    0.064    75.00  a         A    W2    50PPM    0.092    65.11  c         C    100PPM    0.074    69.19  b         B    200PPM    0.054    79.00  a         A    W3    50PPM    0.098    58.11  c         C    100PPM    0.084    63.19  b         B    200PPM    0.066    69.00  a         A    W4    50PPM    0.089    64.11  c         C    100PPM    0.076    78.29  b         B    200PPM    0.058    80.20  a         A    W5    50PPM    0.091    65.11  c         C    100PPM    0.075    69.19  b         B    200PPM    0.047    82.70  a         A    W6    50PPM    0.098    61.11  c         C    100PPM    0.088    66.19  b         B    200PPM    0.068    71.00  a         A    速克灵    1500倍液    0.14    45.31  d         D    空白对照    -------    0.256    ------  -----     -----
实验实施例4：
将W1、W2、W3、W4、W5和W6用本发明的制剂配制方法，配制成5％可溶性粒剂，在大田进行了防治豇豆灰霉病菌试验，用常用杀菌剂速克灵为对照药剂，清水为对照，不同浓度药液喷雾后的防治效果见表5。
在实验中，对于化合物组成的各种制剂、填料或溶剂、表面活性剂的重量百分比，以及加入其他杀菌活性物质的百分比，按本发明的技术方案配制，均可达到理想的效果。
每小区对角线5点取样，每点选2株共10株。根据以下分级标准记录叶片发病情况，据病情指数计算防治效果，以DMRT法分析各处理间的差异显著性。
病叶分级标准：
0级：无病斑；1级：病部占叶面积的5％以下；3级：病部占叶面积的6-15％；5级：病部占叶面积的16-25％；7级：病部占叶面积的26-50％；9级：病部占叶面积的50％以上。

若试药前未发病(即病情基数为0)，则按下式计算相对防效。

                       表5  5％化合物可溶性粒剂防治豇豆灰霉病药效(叶片)
  药剂  名称  施药  浓度(mg/L)  药前  病指(％)               第2次施药后7天               第4次施药后7天    病情    指数(％)  防效  (％)  差异显著  性    病情    指数(％)  防效  (％)  差异显著  性  0.05    0.01  0.05    0.01  W1  200  0    1.35  80.66  a  A    2.50  76.98  a  A  100  0    1.78  74.50  b  B    3.01  72.28  b  B  50  0    2.82  59.60  c  C    4.65  57.18  c  C  W2  200  0    1.27  83.62  a  A    2.42  79.98  a  A  100  0    1.68  76.53  b  B    2.81  75.08  b  B  50  0    2.23  61.62  c  C    4.35  59.18  c  C  W3  200  0    1.65  72.66  a  A    2.58  73.91  a  A  100  0    1 98  70.50  b  B    3.21  70.23  b  B  50  0    2.96  52.60  c  C    4.75  55.17  c  C  W4  200  0    1.15  85.61  a  A    2.43  82.98  a  A  100  0    1.58  78.50  b  B    2.81  79.61  b  B  50  0    2.72  63.60  c  C    4.05  67.18  c  C  W5  200  0    1.25  82.66  a  A    2.38  83.68  a  A  100  0    1.48  78.57  b  B    2.81  79.87  b  B  50  0    2.72  60.60  c  C    4.25  65.19  c  C  W6  200  0    1.45  79.66  a  A    2.59  75.97  a  A  100  0    1.68  75.50  b  B    3.31  70.08  b  B  50  0    2.72  61.67  c  C    4.85  52.19  c  C  50％速克  灵  500  0    1.91  72.64  b  B    3.18  70.72  b  B  空白  清水  0    6.98  -    10.86  -
实验实施例5：
将W1、W2、W3、W4、W5和W6用本发明的制剂配制方法，配制成2％乳油，在大田进行了防治草莓灰霉病菌试验，用常用杀菌剂40％菌核净为对照药剂，清水为对照，不同浓度药液喷雾后的防治效果见表6。
在实验中，对于化合物组成的各种制剂、填料或溶剂、表面活性剂的重量百分比，以及加入其他杀菌活性物质的百分比，按本发明的技术方案配制，均可达到理想的效果。
调查方法采取平行线2行取样，每行调查1.5cm以上果子的发病情况，按以下分级标准对果实灰霉病的发生分级。据病情指数计算防治效果，以DMRT法分析各处理间的差异显著性。
0级：果实不发病；
1级：病斑占整个果实面积的5％以下；
3级：病斑占整个果实面积的6％～15％；
5级：病斑占整个果实面积的16％～25％；
7级：病斑占整个果实面积的26％～50％；
9级：病斑占整个果实面积的50％以上。

                              表6  2％化合物乳油对草莓灰霉病防治效果
  药剂  名称    施药浓度    (mg/l)  药前  病指  (％)                                施药后第d天            3d            7d           14d  病指(％)  防效(％)  病指(％)  防效(％)  病指(％)    防效(％)  W1    100  1.68  4.60  69.89  5.47  76.09  4.37    84.49    200  1.76  4.09  82.76  5.62  78.89  3.58    89.08  W2    100  1.88  4.53  71.79  5.17  79.25  4.37    84.49    200  1.76  3.89  85.76  5.52  80.89  3.68    88.08  W3    100  1.78  4.63  66.79  5.47  76.09  4.57    80.49    200  1.96  4.29  71.76  5.72  76.89  3.87    79.98  W4    100  1.78  4.57  72.79  5.37  77.90  4.37    84.49    200  1.96  4.29  71.76  5.64  76.89  3.92    89.78  W5    100  1.78  4.20  76.79  5.07  82.59  4.37    88.49    200  1.96  4.29  78.83  5.62  85.89  3.38    89.92  W6    100  1.78  4.56  64.77  5.49  76.09  4.37    84.49    200  1.96  4.29  76.66  5.72  83.89  3.68    89.38  40％菌核净wp    800  2.10  5.79  64.36  7.02  73.53  5.36    83.83  对照  2.26  17.40  28.52  35.47
实验实施例6：
将2％化合物W2和5％乙霉威，采用本发明的制剂配制方法，配制成7％的混合杀菌剂，在大田进行了防治番茄灰霉病菌试验，用常用杀菌剂50％速克灵为对照药剂，清水为对照，不同浓度药液喷雾后的防治效果见表7。
在实验中，对于化合物组成的各种制剂、填料或溶剂、表面活性剂的重量百分比，以及加入其他杀菌活性物质的百分比，按本发明的技术方案配制，均可达到理想的效果。
                                 表7  7％W2乙霉威混剂防治番茄灰霉病药效(果实)
  药  剂  供试浓  度  (mg/L)  药前  病指  ％    第2次施药    后7天    差异显著性    第4次施药    后7天  差异显著性    病指％  防效  (％)    0.05    0.01    病指    ％    防效(％)  0.05   0.01  7％W2乙  霉威混  剂  200  0    0.09  78.57    a    A    2.32    80.41  a  A  100  0    0.13  70.05    c    C    3.11    73.73  b  B  50  0    0.19  54.76    d    D    4.20    64.53  c  C  速克灵  500  0    0.11  74.81    b    B    2.46    80.22  a  A  空白  对照  -  0    0.42  -    11.84    -
实验实施例7：
将4％化合物W1和15％多菌灵，采用本发明的制剂配制方法，配制成19％的混合杀菌剂，在大田进行了防治番茄灰霉病菌试验，用常用杀菌剂50％多菌灵为对照药剂，清水为对照，不同浓度药液喷雾后的防治效果见表8。
在实验中，对于化合物组成的各种制剂、填料或溶剂、表面活性剂的重量百分比，以及加入其他杀菌活性物质的百分比，按本发明的技术方案配制，均可达到理想的效果。
表8 19％W1多菌灵混剂防治番茄灰霉病药效(果实)

实验实施例8：
将2％化合物W5和10％嘧菌胺，采用本发明的制剂配制方法，配制成12％的混合杀菌剂，在大田进行了防治番茄灰霉病菌试验，用常用杀菌剂40％施佳乐SC为对照药剂，清水为对照，不同浓度药液喷雾后的防治效果见表9。
在实验中，对于化合物组成的各种制剂、填料或溶剂、表面活性剂的重量百分比，以及加入其他杀菌活性物质的百分比，按本发明的技术方案配制，均可达到理想的效果。
表9 12％W5嘧霉胺混剂防治番茄灰霉病药效(果实)
药  剂供试浓度(mg/L)药前病指第2次施药后7天差异显著性第4次施药后7天差异显著性    病指    (％)    防效     (％)  0.05   0.01    病指    (％)   防效(％)  0.05 0.0112％W5嘧霉胺混剂  200  100  50  0  0  0    8.32    9.42    12.43    78.40    75.55    67.73    a    b    c    A    B    C    15.12    17.64    21.45    76.84    73.88    67.14    a    b    c    A    B    C40％施佳乐SC  500  0    9.25    75.99    b    AB    17.35    73.42    b    B空白对照  -  0    38.52    -    65.28    -