一种人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂及用途.pdf

本发明公开了一种人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂，其配方组分如下：促黄体素释放激素类似物0.1－1％，17α－羟基孕酮3－10％，胆固醇75－95％，纤维素1－19％；在所述配方组分中加1－3％的植物油，均匀混合，用特制的模具制成圆柱状药丸。本发明用于埋植石斑鱼体内，以诱导其性腺发育成熟达到排卵和排精，以适应石斑鱼人工育苗产业化及大规模养殖对种苗的需求。

1、  一种人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂，其特征在于其主要配方组分如下：
促黄体素释放激素类似物                    0.1-1％
17α-羟基孕酮                             3-10％
胆固醇                                    75-95％
纤维素                                    1-19％

2、  根据权利要求1所述的人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂，其特征在于在所述配方组分中加1-3％的植物油。

3、  根据权利要求2所述的人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂，其特征在于所述的药丸为圆柱状。

4、  一种权利要求1所述的人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂的用途，其特征在于用作埋植于石斑鱼体内以诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的外源性药物。

5、  根据权利要求5所述的人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂的用途，其特征在于每公斤鱼体重的植入剂量为20-30mg。

6、  根据权利要求5所述的人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂的用途，其特征在于所述药丸埋植于鱼体背部两侧肌肉内，其范围在头部鳃盖上缘后10-15cm，位于第一至第五背鳍条之间离背鳍基部3-5cm处。

一种人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂及用途
技术领域
本发明涉及一种水产养殖中人工诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精的缓释催产剂，本发明还涉及该缓释催产剂的用途。
背景技术
石斑鱼隶属鲈形目(Perciformes)，鮨科(Serranidae)，石斑鱼属(Epinephelus)，全世界400多种，我国大陆沿海已记录45种(祝茜，1998)，其个体发育中普遍存在先雌后雄的现象，雌性性腺分批成熟多次产卵，产卵量少，转性雄鱼排精量少，持续排精时间短。
石斑鱼的人工繁殖属于世界性海水养殖难题之一，而石斑鱼的性腺发育成熟和最后排卵、排精又是人工繁育的关键。石斑鱼为名贵海水经济鱼类。是目前我国沿海地位重要的海水经济鱼类，具有病害少、生长快、肉质鲜美、营养丰富等特点，深受各地消费者的喜爱，是很好的养殖对象，养殖经济效益巨大。目前，养殖所需的种苗主要依靠捕捞天然苗，由于种苗供不应求，石斑鱼养殖受到极大的限制。从70年代开始，国内外不少学者都致力于石斑鱼的人工繁殖研究，但多集中在石斑鱼的性转化方面。有关诱导雌性石斑鱼排卵和雄性石斑鱼成熟及提高精子质量方面的报道极少，尤其是利用LHRH-A缓释催产剂诱导雌性或雄性石斑鱼排卵或排精的研究尚未见报道，也未见相关专利。
利用外源激素处理是控制养殖鱼类性腺发育成熟的重要而可靠方法，最常用的是利用促性腺激素释放激素的类似物(GnRHa)刺激脑垂体释放促性腺激素(GtH)，诱导性腺性类固醇激素的生成和精卵的排放。对鱼类直接注射或投喂外源激素，(在体内)会很快被代谢清除，如反复注射或投喂，对鱼刺激大，也浪费药品(造成环境污染)。若使用LHRH-A缓释催产剂，既能加快鱼性腺发育，又能减少操作次数、减轻对鱼的刺激、节约药品。我们在实际生产中发现养殖的雌性石斑鱼排卵失败和雄性石斑鱼排精量少且持续排精的时间短，影响受精质量。本研究试图通过埋植LHRH-A缓释催产剂，诱导雌性石斑鱼排卵和雄性石斑鱼增加精液量及延长排精时间。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于埋植石斑鱼体内的缓释催产剂及用途，以诱导其性腺发育成熟达到排卵和排精，以适应石斑鱼人工育苗产业化及大规模养殖对种苗的需求。
本发明所提供的人工诱导石斑鱼性腺发育成熟的缓释催产剂配方组分是经过多年的筛选而确定的，该缓释制剂配方组分如下：
促黄体素释放激素类似物(Luteinizing hormone releasing-hormone analogue)
                                                               0.1-1％
17α-羟基孕酮(17α-hydroxyprogesterone，17α-P)                3-10％
胆固醇(Cholesterol)                                            75-95％
纤维素(Cellulose)                                              1-19％
本发明的人工诱导石斑鱼性腺发育成熟的缓释催产剂是通过植入鱼体内的外源性药物，一般作成药丸的形式，可以在所述配方组分中加1-3％的植物油，用模具压制成圆柱状。
本发明的缓释催产剂采用以下工艺步骤制备：
(1)将促黄体素释放激素类似物、17α-羟基孕酮、胆固醇、纤维素按上述组分比例均匀混合；
(2)在上述混合物中加入1-3％植物油调制成粘团状，然后将其锤打挤压成药丸；
(3)将成形后的药丸放于灭菌干燥培养皿中，在无菌条件下干燥，放入冰箱保存备用。
本发明所制备的药物用作埋植于石斑鱼体内、以诱导石斑鱼性腺发育成熟及排卵和排精；每公斤鱼体重的植入剂量为20-30mg；药丸埋植于鱼体背部两侧肌肉内，其范围在头部鳃盖上缘后10-15cm，位于第一至第八背鳍条之间离背鳍基部3-5cm处。
本发明的缓释催产剂除了可以诱导石斑鱼性腺发育成熟外，还可用于诱导其他多次产卵性海水鱼类的性腺发育成熟。埋植前先测量每尾鱼的体长和体重，并鉴定年龄，检查确定性腺发育状况，根据年龄、体重及性腺发育状况确定埋植剂量。埋植的部位在头后背部两侧肌肉内，经过反复试验证明该部位埋植效果最佳。植入药丸时，用亲鱼夹把已适度麻醉的亲鱼固定好，将适量药丸埋植入鱼体背部肌肉，伤口部位用适量消炎药物涂盖，完成后将已植入药丸的亲鱼放入事先备好的水槽药浴浸泡，待苏醒后缓慢放入强化培养池。经过以上操作植入本发明的催产剂的亲鱼不仅100％存活，而且性腺发育效果十分理想。
采用本发明的缓释催产剂背部肌肉埋植法，经试验，能有效促进雌性和雄性石斑鱼性腺的发育成熟。雌性石斑鱼性腺100％成熟，排卵率高；雄性石斑鱼100％成熟排精，精液量是对照组的3-5倍，精子活力好。2002年5-6月期间，20尾3龄雌性赤点石斑鱼用本发明的缓释催产剂进行埋植，埋植后第20天，有10尾排卵，埋植后第30天又有8尾排卵，排卵率高达90％，而同一批对照组的20尾亲鱼在第30天只有4尾排卵，排卵率只有20％。2003年4-6月用本发明的缓释催产剂埋植的20尾雄性赤点石斑鱼100％成熟排精，精液量是对照组的3-5倍。精子的活力强，精子寿命长达50分钟，快速运动达35分钟之久，受精率80％以上。
具体实施方式
实施例一
取促黄体素释放激素A₂(LHRH-A₂)1％、17α-羟基孕酮(17α-hydroxyprogesterone，17α-P)3％、胆固醇(Cholesterol)90％、纤维素(Cellulose)4％混合，加2％植物油充分混合均匀，采用模具制成圆柱状药丸。实验用亲鱼用2-苯氧基乙醇或麝香酚麻醉，根据鱼体大小和性腺发育状况，确定缓释催产剂用量，用特制的推进器将定量的缓释催产剂推入背部肌肉内，伤口部位用消炎药消炎后，将鱼放入呋喃唑酮药液中浸泡，(待鱼苏醒后，)缓慢移入强化培育池或网箱中。经过以上操作植入缓释药丸的亲鱼不仅100％存活，而且雌性亲鱼100％成熟或排卵；雄性亲鱼100％成熟排精，精液量是对照组的3-5倍。
实施例二
取促黄体素释放激素A₂(LHRH-A₂)0.5％、17α-羟基孕酮(17α-hydroxyprogesterone，17α-P)5.5％、胆固醇(Cholesterol)75％、纤维素(Cellulose)18％及1％植物油混合均匀，制成圆柱状药丸，实验用亲鱼用2-苯氧基乙醇或麝香酚麻醉，根据鱼体大小和性腺发育状况，确定缓释催产剂用量，用特制的推进器将定量的缓释催产剂推入背部肌肉内，伤口部位用消炎药消炎后，放入盛有呋喃唑酮等药液中浸泡，缓慢移入强化培育池或网箱中.经过以上操作植入缓释药丸的亲鱼不仅100％存活，而且雌性亲鱼100％的成熟或排卵；雄性亲鱼100％成熟排精，精液量是对照组的3-5倍。
实施例三
取促黄体素释放激素A₃(LHRH-A₃)0.1％，17α-羟基孕酮(17α-hydroxyprogesterone，17α-P)8％，胆固醇(Cholesterol)80％，纤维素(Cellulose)9.9％及2％植物油混合均匀，制成圆柱状药丸。实验用亲鱼用2-苯氧基乙醇或麝香酚麻醉，根据鱼体大小和性腺发育状况，确定缓释催产剂用量，用特制的推进器将定量地缓释催产剂推入背部肌肉内，伤口部位用消炎药消炎后，放入盛有呋喃唑酮药液浸泡，(待鱼苏醒后，)将鱼缓慢移入强化培育池或网箱中。经过以上操作植入缓释药丸的亲鱼不仅100％存活，而且雌性亲鱼100％的成熟或排卵；雄性亲鱼100％成熟排精，精液量是对照组的3-5倍。受精率达80％以上。