一种食、药用菌菌种的快速制备方法 本发明属于微生物领域,是涉及一种食、药用菌菌种的培养和制备方法。
目前,食、药用菌菌种的制备方法有多种,一般都是固体和液体两种制备方法。现有固体菌种的制备方法,具有制作工艺复杂,培养周期长,成本较高,现有液体菌种的制备方法,具有技术难度大,设备投资较大,成品率低,成本较高等缺点。
本发明的目的是提供一种制备工艺简单,培养周期短,成本低廉,菌种质量高的一种固体食、药用菌菌种的制备方法。
本发明的技术方案是将高分子树脂、稀土、过氧化钙、骨粉、贝壳粉、等十几种原料注装于立体微孔发菌器内,通过外加高磁富养水,经高温灭菌、无菌接种、恒温培养,即制成菌种。使用过的菌种,再经过晒干,加补高磁富养水,达到培养基的多次利用。
其具体制备方法如下:
1、制取立体微孔发菌器:图1是采用硬质塑料制成的立体微孔发菌器,长12-50厘米[1],下部尖端,外围直径4-6毫米[3],内圆菌腔直径2.5-4毫米[4],表面具有无数个发菌微孔[2]。
2、制取永久培养基质:采用高分子树脂5-20%、稀土0.005-0.02%、过氧化钙1-8%、骨粉30-80%、贝壳粉10-30%,将原料按比例配合拌匀,即制成永久培养其质。
3、制取高磁富养水:采用木焦油0.01-0.1%、豆粉5-20%、玉米粉5-30%、麦麸5-20%、葡萄糖25-30%、磷酸二氢钾0.1-1%、硫酸镁0.1-0.5%、1500-2000高斯磁化水10000毫升、PH5-6,将原料按不同菌种的营养需求,经配合拌均即制成高磁富养水。
4、制取菌种:将永久培养基质注装于立体微孔发菌器内,即制成菌种培养基。将培养基浸泡在高磁富养水中1-15分钟,取出凉干,每300支为一捆装入菌种袋内。经高压20分钟,常压120分钟蒸气灭菌。冷即后,在无菌条件下进行立体多点接入菌种。置于25℃恒温条件下培养一段时间即制成为一级种菌种。再按上述方法进行二、三级菌种的转接制备,即制成食、药用菌菌种。
5、培养基的再次利用:将栽培使用过的菌种晒干,再加补高磁富养水、再经高温灭菌、无菌接种、恒温培养,即可再次制成高品质的食、药用菌菌种,如此可反复利用上百次,培养基使用期限可达3-6年。
本发明的积极效果是成本低廉、菌丝生长快速、培养周期短、质量高、出菇早、工艺简单、便于机械化生产、使用方便、易推广。
实施例:
以制取平菇食用菌菌种为例。
1、采用硬质塑料制成长20厘米[1],下部尖端,外围直径4毫米[3],内圆菌腔直径2.5毫米[4]。表面具有无数个发菌微孔[2]。即制成立体微孔发菌器。
2、取高分子树脂50克、稀土0.1克、过氧化钙10克、骨粉700克、贝壳粉300克,将这些原料混合拌匀,即制成永久用培养基质。
3、取1500高斯磁化水1000毫升、木焦油0.1克、硫酸镁0.1克、磷酸二氢钾0.5克、葡萄糖20克、玉米粉20克、豆粉10克、PH5.5,经混合拌匀即制成高磁富养水。
4、将永久培养基质注装于立体微孔发菌器内,制成培养基,依每捆300支浸泡于高磁富养水中5-15分钟捞出凉干表面的水,装入菌种袋内,经高压121℃20分钟,常压2小时蒸气灭菌。灭菌后,当料温降至30℃以下时,取常规PDA平菇母种,在无菌条件下,经液化,用移液器分五点立体接入菌种袋内。置于25℃恒温条件下培养5-8天,菌丝即可长满袋,即制成平菇一级菌种,再用同样的方法转接制备二、三级菌种,每袋插接5支菌种,再经培养,即制成栽培用平菇菌种。
5、将栽培使用过的平菇菌种抽出晒干,浸泡于高磁富养水中10-15分钟,取出晾干表面的水,经高温灭菌,无菌接种,25℃恒温培养。即再次制成菌种,菌种质量不减,如此反复可利用上百次。培养基使用期限可达3-6年。