香精油在防治螺杆菌属生物体所致胃肠道感染的用途 本发明涉及一种用于预防或治疗螺杆菌属生物感染的含香精油的营养组合物，该组合物的生产方法，该组合物在生产预防或治疗螺杆菌属生物感染用药物或功能食品中的用途，以及治疗螺杆菌属生物感染的方法，该方法包括含有效量组合物的药物或功能食品的消费或给药。
词语“包含”在本说明书的上下文中指“在众多的其他东西中，包括”。它并不表示“仅由……组成”。
由螺杆菌属生物体(GHLOs)引起的感染被认为影响了约50％的全球人口。确定某个体是否被感染包括许多因素。这包括遗传因素、环境因素、饮食习惯、感染者的年龄和涉及的细菌幽门螺杆菌的种类。35％的感染病例可能导致慢性浅表性胃炎；10-15％可能导致胃溃疡；0.1％～1％的可能导致萎缩性胃炎由此又会导致胃癌；剩余病例可能导致麦牙糖淋巴肿瘤。另外，人们提出，幽门螺杆菌与成人中包括心血管疾病(动脉缺血/动脉粥样化)、自动免疫系统疾病(风湿性关节炎/甲状腺免疫疾病)、慢性风疹、肝病(硬化和肝性脑病)以及胆囊结石(Cag+strains)等的其他疾病地生长有关。另外，人们提出，幽门螺杆菌在小孩中与其他疾病的发展有关，包括食物变态反应和缺铁性贫血病(稀少)。
由GHLOs致感染的流行率是很高的：据估计，发达国家5～15％的小孩和20～65％的成人会被感染。发展中国家这些数字基本上更高，其中0～20岁的年龄组中有13～70％，超过30岁的年龄组中有70～94％。总之，估计超过25亿人被感染。
群居动物也被GHLOs感染。在狗中最常见的GHLOs是H.bizzozeronii和H.salomonis。对猫来说，最常见的GHLOs是H.heilmannii和猫螺杆菌。另外，已知猫能够把H.heilmannii传染给人类。
因此，显然需要一种有效的组合物用于防治GHLO感染。
本发明正是针对以上提出的问题的。
令人惊奇的是，人们已经发现，某些香精油对GHLOs有效。具体地说，人们惊奇地发现，某些香精油具有非常强的效果。另外人们还惊讶地发现，许多香精油对特定的GHLOs具有非常强的效果。
香精油(EO)是植物次级新陈代谢的芳香产品。其一般能够通过水蒸气蒸馏从植物(叶、茎、花、树皮和树根)中分离出，在室温下为油状液体。一般地，蒸馏出的液体是一种挥发性的化合物(VC)如酚、醇、醛、萜烯等的复杂混合物。EO的活性是随所存在的VC组成不同而变化，也随所来源的植物生长的地理和气候不同而变化。
一些EOs已经被作为香料用于食物饮料中或用于食物储存，在使用浓度下使用被认为是安全的。
WO00/03606公开了将含Eos的组合物用于宠物食品中作为呼吸清凉剂的用途。其效果是基于描述EOs的甜味。WO00/03606也公开了(实施例2中)桉树油对细菌犬嘴卟啉单胞菌、产气韦荣氏球菌、类杆菌属oralis和具核梭杆菌的生长具有抑制效用。然而，文献并未公开或指出，香精油对GHLOs的生长具有抑制作用，也没指出香精油能够用于防治GHLOs感染。
DE19716660公开了一种含有香精油和/或植物提取物如桉树油(对治疗胃肠溃疡和胃炎很有效)用于治疗幽门螺杆菌感染的中草药制剂。该文献并未公开或提出该发明实施方案的具体香精油与其它香精油相比具有超强的效果。相比而言，其仅简单地公开了对幽门螺杆菌细菌生长能抑制和/或杀灭的、基于植物的制剂，其至少含有至少一种下述香精油和提取物作为活性成分：桉树、茴芹和茴香香精油以及生姜根块、金丝桃、姜黄根茎、苦艾、小矢车菊、药蜀葵根、朝鲜蓟叶、莎草根茎、Haronga madgascarensis、匍匐风铃草、甘草、蒲公英、卡瓦胡椒粉(Piper methysticum)和肉桂的提取物。此处并未公开或声明能从逻辑上或明确地获得本发明的具体主题。
因此，本发明的第一方面提供一种营养组合物，其中含有选自胡萝卜种子、肉桂皮、丁香、孜然芹、桉树、柚子、危地马拉柠檬香草、麦卢卡树油、牛至(vulgaris)鼠尾草、香草、龙嵩、百里香的香精油，以及上述两种或更多的组合和/或从这些香精油中的一种分离出来的化合物，其中化合物选自α-蒎烯、β-蒎烯、香芹酚、柠檬醛、香茅醛、草蒿脑、丁子香酚、桉油精、金合欢醇、乙酰乙酸香叶酯、香叶醇、姜油树脂、异丁子香酚、柠檬油精、芳樟醇、薄荷醇、橙花醇、紫苏醛、麝香草酚、反-2-己烯醛以及其中两种或更多种组合用于由胃螺杆菌属生物体感染的预防或治疗。
本发明的第二方面提供本发明实施方案的组合物的生产方法，其包括按所需数量将组分混合的步骤。
本发明的第三方面提供本发明实施方案的组合物在生产用于预防或治疗胃螺杆菌属生物体感染的功能性食品或药物生产中的应用。
本发明的第四方面提供预防或治疗胃螺杆菌属生物体感染的方法，其中包括将含有有效含量的本发明实施方案的组合物的功能性食品或药物进行消费或给药步骤。
柚子香精油的实施方案优选来自于粉红柚或白柚。
百里香香精油的实施方案优选来自于百里香(红)或百里香(vulgaris)。
优选组合物的一个实施方案包括两种或更多种香精油的组合和/或两种或更多种从香精油中分离出来的化合物的组合。
组合物的一个实施方案优选包括一种选自本领域已知的载体、稀释剂或赋形剂。
本发明组合物的一个实施方案优选适合于人的消费。另一种实施方案适合于群居动物消费。
香精油优选通过水蒸气蒸馏获得。合适的起始原料例如有：上面提及的包括草、香料、水果和茶。
本发明的一个优点在于其提供了一种组合物，其中的油在酸性的pH下具有很高的溶解度和活性，这就提供了一种优势：它们能够包含到酸性配方中(如酸牛奶)。另外，从中获得的化合物或油是天然的不需要人工合成的化合物。
本发明的另外一个优势在于其提供了具有协同增效活性(抗GHLOs)的不同EOs的混合物。
本发明还有另一个优势在于其提供了经口服向胃局部供给EOs的方法。这就克服了需要使用对抗感染的侵入性外科疗法。
本发明的其他特征和优点描述在本发明优选实施方案中，并由此可以显而易见，该优选实施方案是参考附图在下文中提出的，其中：
图1显示的是经一小时的孵育后，EOs的MBC测定值(MBC＝最低细菌浓度：细菌被杀灭的最低浓度(次培养基中没有生长))。
图2显示的是经24h的孵育后EOs的MBC测定值。
图3和4显示的是pH值对胡萝卜EO活性的影响。图3表示幽门螺杆菌脲酶测试结果，图4显示的是幽门螺杆菌生存能力的测试结果。显然地，胡萝卜EO在酸性pH值下更有活性。
图5和6显示的是pH值对柠檬香草EO活性的影响。图5表示幽门螺杆菌脲酶测试结果，图4显示的是幽门螺杆菌生存能力的测试结果。显然地，柠檬香草EO在酸性pH值下更有活性。
在不希望受理论束缚之下，假定EOs的作用机制可能涉及细菌隔膜完整性的改变(亲酯性化合物)，其增大了可渗透性和细胞内组分的渗漏。另外，它们可能涉及负责能量生产、结构组分的合成和/或DNA合成的酶系统的损害。而且，它们可能涉及破坏遗传物质。
用于限定所给物质的抑制能力的参数有：1)最低抑制浓度(MIC)(阻止细菌生长的最低浓度)，和2)最低细菌浓度(MBC)(杀灭细菌(次培养基中不生长)的最小浓度)。按照这种关系：MIC≤MBC？
使用了下面的分析方法：
a)在琼脂固体介质中扩散(盘抑制化验)；和
b)液体介质化验(用于MBC测定)
H.pylori中MBC的测定是通过把细菌和不同EO稀释液在pH值为7.4放置在一起1h或24h，铺板3～5天(固体介质次培养基)，并计算菌落单位(CFU)。然后结果用幽门螺杆菌(log10CFU/ml)对EO浓度(g/l)作图。从图(如图1和2所示)可以清楚地看到，1h的孵育后EOs对细菌的生存能力已经有显著的影响，所选择的EOs在体外显然是幽门螺杆菌的强效抑制剂。
下表显示的是对照数据，说明本发明所用的EOs和纯化合物与本发明范围之外的EOs相比，具有非常强的效果。
表1说明用EOs获得的结果，表2说明的是使用在EOs中发现的纯化合物获得的结果。表3说明的是本发明组合物实施例中MBC对一般浓度的结果。表4说明对幽门螺杆菌抑制的MBC(24h)研究的结果：EOs对提取物。
表1
EOs对幽门螺杆菌的抑制作用 固体介质中扩散(cm) 液体介质 香精油1/10在EtOH中 1/10在PG中 MBC g/L胡罗卜种子 1,6 0,75 0,02肉桂皮 6,3 4,5 0,04丁香 没有 3 0,1孜然芹 0 1,2 0,1桉树 1,2 1 ＞0.1柚(粉红) 扩散 0,9 0,1柚(白色) 1,7 0,8 0,1危地马拉柠檬香草 2,9 3,2 0,04麦卢卡树油 没有 2 0,04牛至(vulgaris) 扩散 1,5 0,04鼠尾草 0 0,65 0,1香草 1,3 2,5 0,04龙嵩 0 0,7 0,1百里香(红) 没有 1,9 0,1百里香(vulgaris) 1,2 1,2 0,040cm→≤0.6cm(盘直径)＝没有抑制作用
表2
液体介质 纯化合物 MBC g/L MBC ppm α-蒎烯 0,1 100 β-蒎烯 0,1 100 香芹酚 0,04 40 柠檬醛 0,04 40 香茅醛 0,1 100 草蒿脑 0,1 100 丁子香酚 0,1 100 桉树醇 ＞＞0.1 ＞＞100 金合欢醇 0,04 40 乙酰乙酸香叶酯 ＞＞0.1 ＞＞100 香叶醇 0,1 100 姜油树脂 ≤0.02 ≤20 异丁子香醇 0,04 40 柠檬油精 0,1 100 芳樟醇 0,1 100 薄荷醇 ＞＞0.1 ＞＞100 橙花醇 0,04 40 紫芳醛 ≤0.02 ≤20 麝香草酚 0,1 100 反-2-己烯醛 0,04 40
表3 用量(Fenaroli) 香精油 MBC(24h) ppm 饮料 ppm 酒精饮料 ppm 汤剂 ppm 食物 ppm胡罗卜种子 20 4 14 22(肉)肉桂皮 40 38,24 572,6 25 288.9(焙烘物)丁香 100 14,50 198 9,86孜然芹 100桉树 ＞100 2,17 2,07 1958(糖果)柚(粉红) 100 276,4 132,8 860(焙烘物)柚(白色) 100 276,4 132,8 860(焙烘物)危地马拉柠檬香草 40 8,99 8,94 36.2(焙烘物)麦卢卡树油 40牛至(vulgaris) 40鼠尾草 100 10,21 5,32 34.24(焙烘物)香草 40龙嵩 100 133 154 146(奶制品)百里香(红) 100 4,97 5,05 2,95 2.95(焙烘物)百里香(vulgaris) 40 4,98 5,02 29.78(焙烘物)马鞭草 40
表4 MBC(24h) g/L 牛至香精油 0,04 牛至-PG提取物 1,0 牛至-MCT提取物 ＞1.0 柠檬香草香精油 0,04 柠檬香草-PG提取物 1 柠檬香草-MCT提取物 ＞1.0
在一个实施方案中，本发明实施方案的营养组合物含有蛋白质源。食用蛋白质优选作为蛋白质源。食用蛋白质可以是任何合适的食用蛋白质；例如，动物蛋白(如乳蛋白、肉蛋白和鸡蛋蛋白)；植物蛋白(如大豆蛋白、麦蛋白、大米蛋白，和豌豆蛋白)；游离氨基酸混合物；或其组合。乳蛋白如酪蛋白、乳清蛋白、和大豆蛋白是特别优选的。
组合物中也可以含有碳水化合物和/或脂肪源。
一个组合物的实施方案优选含有油脂源。油脂源优选提供约5～55％的组合物能量；例如约20％～50％的能量。构成油脂源的油脂可以是任何合适的脂肪或脂肪混合物。植物油特别合适；例如，大豆油、棕榈油、椰子油、红花油、葵花子油、玉米油、低芥酸菜子油、卵磷脂等。如果需要，也可以加入动物脂肪如乳脂。
油脂源可以是适用于食品的任何油脂或脂肪。典型的油脂源包括乳脂，红花油，蛋黄油脂，低芥酸菜子油，橄榄油，椰子油，棕榈油，棕榈仁油，棕榈油酸甘油脂，葵花子油，鱼油，和含有长链的、聚不饱和脂肪酸的微生物发酵油。这些油可以是高油形式如高油葵花子油和高油红花油。油脂源也可以是来自于如棕榈油、中链甘油三酸酯(MCT)的提取物的形式，和如花生四烯酸、亚油酸、棕榈酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸、亚麻酸、油酸、月桂酸、癸酸、辛酸、己酸等的脂肪酸酯形式。
优选油脂源含有中链的甘油三酸酯；例如，约占油脂源重量的15～35％。
优选油脂源中n-6比n-3脂肪酸的比优选约为5∶1～15∶1；例如约8∶1～10∶1。
也可以向营养组合物中加入碳水化合物源。优选其能够提供营养组合物约40～80％的能量。任何合适的碳水化合物都可以使用，如蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖浆固体、麦牙糖糊精或其混合物。
如果需要，也可以加入膳食纤维。如果添加，优选其占营养组合物至多约5％的能量。膳食纤维可以是来自任何合适的来源，包括例如大豆、豌豆、燕麦、果胶、瓜尔胶、阿拉伯树胶、果糖寡糖或其混合物。
营养组合物中可以加入合适的维生素和矿物质，其含量以满足合适的要求为度。
如果需要，营养组合物中还可以加入一种或多种食用级乳化剂；例如二乙酰酒石酸甘油单酯和二酯、卵磷脂和甘油单酯或二酯或其混合物。同样地，也可以加入合适的盐和/或稳定剂。
营养组合物优选是肠用性的；例如为粉末，液体浓缩物，或即饮饮料的形式。如果需要生产粉末化的营养配方，可将均相化混合物转到合适的干仪器如喷雾干燥器或冷冻干燥器中，使其转化成粉末。
液体食品中可以加入所述实施方案的组合物，例如饮料、汤剂、液体茶、发酵牛奶、乳凝块、大豆基产品、非牛奶发酵产品，或用于临床营养的营养补剂。
另外，固体食品中也可以加入实施方案组合物，例如汤剂、干(died)茶、奶粉、酸奶、新鲜干酪、大豆基产品、糖果条、蜜饯、早餐麦片薄片或条，或用于临床营养的营养补剂。
在糖果制品中也可以加入实施方案的组合物，例如糖或甜化饮料。
下面的实施例仅仅是用于举例说明，而不应该作为本申请主题的限制。除非明确指出，百分数和份数都是指重量份或重量百分数。
实施例1：营养组合物
把所需的组分混合在一起就制得组合物，其组成如下所示：茶基加味饮料％水89HFCS10粉化茶0.2茶精0.2EO混合物0.2(0.01-0.5)
EO混合物含有从肉桂皮、丁香、粉红柚、白柚、柠檬香草、马鞭草、麦卢卡树提取的香精油(单独一种或两种或两种以上联合使用)。
实施例2：营养组合物
把所需的组分混合在一起就制得组合物，其组成如下所示：蔬菜汤％土豆片50脱水蔬菜20玉米淀粉20花生油9.8EO混合物0.2(0.01-0.5)
EO混合物含有从胡萝卜种子、丁香、孜然芹、麦卢卡树、牛至、鼠尾草、香草、百里香(红的和vulgaris)、龙嵩提取的香精油(一种EO单独使用或两种或两种以上联合使用)。实施例3：营养组合物把所需的组分混合在一起就制得组合物，其组成如下所示：高沸糖％水11结晶糖40葡萄糖浆40脂肪8.6乳化剂0.2EO混合物0.2(0.01-0.5)
EO混合物含有从肉桂皮、丁香、粉红柚、白柚、柠檬香草、马鞭草、桉树提取的香精油(一种EO单独使用或两种或两种以上联合使用)。
在每个实施例中，EO混合物＝在合适的食用级载体(溶剂、糖浆、乳液)中的本发明实施方案EOs的组合。优选包括从一种香精油分离出来的至少一种纯化合物。
EO的最大含量优选为5000ppm，含有1～100％EO(s)/0～99％载体。
应该理解到，对于本领域的技术员来说，对此处介绍的优选实施方案的各种变化和改进是显而易见的。在不脱离本发明的精神和范围以及不降低其附带优点的情况下，就能够作出这些变化和改进。因此，这些变化和改进被附加的权利要求所覆盖。