紫茎泽兰多糖用于抗菌或抗病毒的用途.pdf

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摘要
申请专利号:

CN200810147890.3

申请日:

2008.12.17

公开号:

CN101422481A

公开日:

2009.05.06

当前法律状态:

终止

有效性:

无权

法律详情:

未缴年费专利权终止IPC(主分类):A61K 31/715申请日:20081217授权公告日:20110810终止日期:20111217|||授权|||实质审查的生效|||公开

IPC分类号:

A61K31/715; A61P31/04; A61P31/10

主分类号:

A61K31/715

申请人:

四川大学

发明人:

高 平; 苏文涛; 皮宁宁; 苏东海

地址:

610207四川省成都市双流县川大路二段2号

优先权:

专利代理机构:

代理人:

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内容摘要

本发明涉及紫茎泽兰多糖用于抗菌或抗病毒的用途,尤其是涉及紫茎泽兰多糖制备具有抗菌或抗病毒作用的药物用途。本发明所涉及的紫茎泽兰多糖对多种细菌或病毒有抑制作用,例如枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、普通变形杆菌、痢疾志贺菌、白色念珠菌或副流感病毒等。可以采用现有技术公知的方法将本发明的紫茎泽兰多糖制成药物组合物,以及任何一种药剂学上可接受的剂型,如颗粒剂、口服液、胶囊、片剂、注射剂、粉剂等药物组合物等。

权利要求书

1、  紫茎泽兰多糖用于抗菌或抗病毒的用途。

2、
  紫茎泽兰多糖制备具有抗菌或抗病毒作用的药物用途。

3、
  根据权利要求1或2所述的用途,其中在抗菌的用途中,紫茎泽兰多糖的用量为≥10.0mg/ml;在抗病毒的用途中,紫茎泽兰多糖的用量为≥10mg/kg。

4、
  根据权利要求1或2所述的用途,其中在抗菌的用途中,紫茎泽兰多糖的用量为10.0—30.0mg/mL;在抗病毒的用途中,紫茎泽兰多糖的用量为30mg/kg或100mg/kg。

5、
  根据权利要求1或2所述的用途,其中紫茎泽兰多糖是通过如下步骤制备的:
(1)将紫茎泽兰原料进行水煮,浓缩水煮液,得浓缩粗提取液,加入醇沉淀,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;
(2)紫茎泽兰多糖粗沉淀物用水溶解,再用sevag法除去游离的蛋白质,该除去蛋白质的步骤反复进行3-9次,浓缩,醇析沉淀,沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚分别洗涤,得到去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物;
(3)去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物经透析或超滤的方法分离,去除小分子杂质,得到多糖分子量在3000一130000道尔顿之间的紫茎泽兰多糖精制提取液,浓缩,加入醇沉淀,收集精制沉淀物;
(4)紫茎泽兰多糖精制沉淀物经干燥得到紫茎泽兰多糖精制提取物;所述的醇为甲醇、乙醇或丙醇。

6、
  根据权利要求1或2所述的用途,其中紫茎泽兰多糖是通过如下步骤制备的:
(1)将紫茎泽兰原料加水浸泡0.5-2小时后微波2次提取、提取液浓缩,得浓缩粗提取液,加入醇沉淀,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;
(2)紫茎泽兰多糖粗沉淀物用水溶解,再用sevag法除去游离的蛋白质,该除去蛋白质的步骤反复进行3-9次,浓缩,醇析沉淀,沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚分别洗涤,得到去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物;
(3)去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物经透析或超滤的方法分离,去除小分子杂质,得到多糖分子量在3000一130000道尔顿之间的紫茎泽兰多糖精制提取液,浓缩,加入醇沉淀,收集精制沉淀物;
(4)紫茎泽兰多糖精制沉淀物经干燥得到紫茎泽兰多糖精制提取物;所述的醇为甲醇、乙醇或丙醇。

7、
  根据权利要求1或2所述的用途,其中紫茎泽兰多糖是通过如下步骤制备的:
(1)将紫茎泽兰原料加水浸泡0.5-2h后微波2次提取、提取液浓缩,得浓缩粗提取液,加入醇沉淀,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;
(2)紫茎泽兰多糖沉淀物经透析或超滤的方法分离,去除小分子杂质,得到多糖分子量在3000一130000道尔顿之间的紫茎泽兰多糖精制提取液,浓缩,加入醇沉淀,收集精制沉淀物;
(3)紫茎泽兰多糖精制沉淀物经干燥得到紫茎泽兰多糖精制提取物;所述的醇为甲醇、乙醇或丙醇。

8、
  根据权利要求1或2所述的用途,其中紫茎泽兰多糖对如下细菌或病毒具有抑制作用:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、藤黄微球菌(Kocuria rosea)、大肠埃希菌(Escherichia coli)、沙门氏菌(Salmonella paratyphi-A)、普通变形杆菌(Proteus vulgaris)、痢疾志贺菌(Shigella dysenteriae)、白色念珠菌(Candidaalbicans)或副流感病毒(parainfluenzavirus,PIV)。

说明书

紫茎泽兰多糖用于抗菌或抗病毒的用途
一.技术领域
本发明涉及一种紫茎泽兰多糖、特别是涉及一种从紫茎泽兰植株中提取得到的紫茎泽兰多糖在抗菌、抗病毒方面的用途,属于药用天然产物领域。
二.背景技术
紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng)为一种菊科泽兰属多年生草本植物,俗称飞机草、魔鬼草。原产于墨西哥,于上世纪四十年代经澳大利亚进入我国南部,现已广泛分布于云南、海南、广西、贵州、西藏、四川等省。同时,紫茎泽兰含有有毒物质,常使马、牛、羊等放牧家畜误食中毒甚至死亡。紫茎泽兰给所到之地的农业、牧业及林业等造成了难以挽回的巨大损失,对紫茎泽兰进行有效的开发利用,变害为利,应该具有重大的经济和社会意义。在利用紫茎泽兰生物活性成分的研究方面,主要集中于昆虫拒食活性、植物生长的双向调节作用、杀虫和杀菌活性等。目前开发利用紫茎泽兰已公开的方法中,尚未见利用制备多糖及其用途的报道。多糖是一类具有广泛生物活性的生物大分子物质,目前已有300多种多糖类化合物从天然产物中被分离。大量研究显示,多糖类物质具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、抗辐射、抗炎、抗疲劳和抗衰老等作用,植物多糖是其中极为重要的一个类别。植物活性多糖具有广泛的研究和开发利用价值。本发明利用紫茎泽兰提取活性多糖,拓宽了紫茎泽兰天然产物的开发利用途径,为紫茎泽兰的资源化提供一种有效利用的方法,有利于提高紫茎泽兰综合利用的经济价值。
三.发明内容
本申请人经过多年的悉心研究,发现了紫茎泽兰多糖在抗菌或抗病毒方面具有良好的效果。
因此,本发明提供一种紫茎泽兰多糖用于抗菌或抗病毒的用途。
此外,由于本发明的紫茎泽兰多糖对多种细菌和病毒均具有良好的抑制作用,因此本发明还提供一种紫茎泽兰多糖制备具有抗菌或抗病毒作用的药物用途。
此外,本发明还提供紫茎泽兰多糖在制备具有抗菌或抗病毒作用的饲料添加剂或饲养动物的保健品的用途。
本发明的紫茎泽兰多糖在医药工业上可用做抗菌、抗病毒治疗剂及预防剂的原料。
上述用途中的紫茎泽兰多糖是通过如下方法制备的,具体为:
方法A:
(1)将紫茎泽兰原料进行水煮,浓缩水煮液,得浓缩粗提取液,加入醇沉淀,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;
(2)紫茎泽兰多糖粗沉淀物用水溶解,再用sevag法除去游离的蛋白质,该除去蛋白质的步骤反复进行3-9次,浓缩,醇析沉淀,沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚分别洗涤,得到去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物;
(3)去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物经透析或超滤的方法分离,去除小分子杂质,得到多糖分子量在3000—130000道尔顿之间的紫茎泽兰多糖精制提取液,浓缩,加入醇沉淀,收集精制沉淀物;
(4)紫茎泽兰多糖精制沉淀物经干燥得到紫茎泽兰多糖精制提取物;所述的醇为甲醇、乙醇或丙醇,优选乙醇;
或者方法B:
(1)将紫茎泽兰原料加水浸泡0.5-2h(小时)后微波2次提取、提取液浓缩,得浓缩粗提取液,加入醇沉淀,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;
(2)紫茎泽兰多糖粗沉淀物用水溶解,再用sevag法除去游离的蛋白质,该除去蛋白质的步骤反复进行3-9次,浓缩,醇析沉淀,沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚分别洗涤,得到去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物;
(3)去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物经透析或超滤的方法分离,去除小分子杂质,得到多糖分子量在3000—130000道尔顿之间的紫茎泽兰多糖精制提取液,浓缩,加入醇沉淀,收集精制沉淀物;
(4)紫茎泽兰多糖精制沉淀物经干燥得到紫茎泽兰多糖精制提取物;所述的醇为甲醇、乙醇或丙醇,优选乙醇。
或者方法C:
(1)将紫茎泽兰原料加水浸泡0.5-2h后微波2次提取、提取液浓缩,得浓缩粗提取液,加入醇沉淀,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;
(2)紫茎泽兰多糖沉淀物经透析或超滤的方法分离,去除小分子杂质,得到多糖分子量在3000—130000道尔顿之间的紫茎泽兰多糖精制提取液,浓缩,加入醇沉淀,收集精制沉淀物;
(3)紫茎泽兰多糖精制沉淀物经干燥得到紫茎泽兰多糖精制提取物;所述的醇为甲醇、乙醇或丙醇,优选乙醇。
所述制备方法中的紫茎泽兰原料为紫茎泽兰全草粉碎物;
所述方法A(1)紫茎泽兰的水煮是将紫茎泽兰在蒸馏水中煎煮;加入5—20倍紫茎泽兰重量的蒸馏水;煎煮在沸腾下进行,煎煮提取1—4次至有效成分充分提取出来,每次1—5小时;
所述方法B(1)与C(1)紫茎泽兰原料加水浸泡0.5-2h后微波2次提取是指将紫茎泽兰样品先在常温下浸泡0.5-2h,用微波1次提取后将残碴加相同体积水再浸泡0.5-2h,然后微波2次提取;所述微波提取处理条件为微波功率300-800W,料液重量比为1:5-20,微波提取时间2-10min;
所述方法A和B中醇析沉淀使用的醇为75%—95%的醇,醇的用量为浓缩液的2—5倍体积量,所述的醇为甲醇、乙醇或丙醇;
所述方法A和B中的浓缩为将提取液浓缩至原体积的1/2—1/5,浓缩采用加热浓缩、减压浓缩或薄膜蒸发浓缩,优选在50-70℃下采用薄膜蒸发浓缩。
所述方法A(2)和B(2)中用sevag法除去蛋白质,其具体方法为:将由氯仿和正丁醇按体积比5:1构成的Sevag试剂与多糖溶液按1:5的体积比加入,加入试剂后震荡20—30分钟,使试剂与溶液充分混合,离心后去除交界处沉淀的蛋白,如此反复3-9次;
所述方法A(3)和B(3)及(2)中多糖沉淀物经透析或超滤的方法分离、去除小分子杂质,均指沉淀物用水充分溶解后进行,优选透析方法,所述的透析使用自来水或去离子水;
所述干燥为加热干燥、冷冻干燥或喷雾干燥。
上述紫茎泽兰多糖、紫茎泽兰多糖水溶液,可以采用现有技术公知的方法制成含有紫茎泽兰多糖提取物或紫茎泽兰多糖的药物组合物,以及任何一种药剂学上可接受的剂型,如颗粒剂、口服液、胶囊、片剂、注射剂、粉剂等药物组合物等。
通过上述方法制备的紫茎泽兰多糖在抑制细菌和病毒方面具有想好的效果。在抗菌的用途中,紫茎泽兰多糖的用量为≥10.0mg/ml,优选为10.0—30.0mg/mL;在抗病毒的用途中,紫茎泽兰多糖的用量为≥10mg/kg,优选为30mg/kg或100mg/kg。
采用本发明方法得到的紫茎泽兰多糖呈固态浅棕色,易溶于热水,不溶于乙醇,平均分子量在3万—8万之间,总糖含量为60—95%。可以制成任何一种药剂学上所说的剂型。
本发明方法得到的紫茎泽兰多糖原料易得,方法简单,生产成本低,产品多糖含量较高,质量稳定、易于控制。
具体实施方式
实施例1
取紫茎泽兰粉碎全草适量,用5倍量蒸馏水加热回流,提取3次,每次提取时间分别为3、2、1小时,合并三次提取液,150目双层滤布过滤,滤液在70℃下使用薄膜蒸发浓缩至原体积的1/3;搅拌下向浓缩提取液中加入5倍75%的乙醇,将浓缩提取液中的多糖沉淀出,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;向多糖粗沉淀物中加入蒸馏水溶解,使之充分复溶,用sevag法去蛋白,反复进行9次,浓缩(方法同上),浓缩液中加入5倍75%的甲醇进行醇析沉淀,沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚分别洗涤,得到去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物;将多糖沉淀溶于水,分别用清水和二次蒸馏水透析,得到多糖分子量在3000—130000道尔顿之间的紫茎泽兰多糖精制液。该紫茎泽兰多糖精制液可以进一步制备为各种药学上可接受的组合物及各种剂型。
如果需要,得到的紫茎泽兰多糖精制液还可以进一步醇沉精制,方法为:在搅拌下再加入5倍75%的乙醇,静置析出沉淀,沉淀经冷冻干燥得紫茎泽兰多糖固体。
所得紫茎泽兰多糖颜色为淡棕色,总糖含量为90%。
实施例2
取紫茎泽兰粉碎全草适量,用20倍量蒸馏水加热回流,提取4次,每次提取时间分别为3、2、1小时,合并三次提取液,100目双层滤布过滤,滤液在50℃下使用薄膜蒸发浓缩至原体积的1/5;搅拌下向浓缩提取液中加入2倍95%的乙醇,将浓缩提取液中的多糖沉淀出,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;向多糖粗沉淀物中加入蒸馏水溶解,使之充分复溶,用sevag法去蛋白,反复进行3次,浓缩(方法同上),浓缩液中加入3倍85%的甲醇进行醇析沉淀,沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚分别洗涤,得到去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物;将多糖沉淀溶于水,加热至70℃溶解,趁热滤出不溶物,滤液经超滤精制,得到多糖平均分子量为3000—80000的紫茎泽兰多糖精制液。该紫茎泽兰多糖精制液可以进一步制备为各种药学上可接受的组合物及各种剂型。
如果需要,得到的紫茎泽兰多糖精制液还可以进一步醇沉精制,方法为:在搅拌下再加入3倍90%的丙醇,静置析出沉淀,沉淀经加热干燥得紫茎泽兰多糖固体。
所得紫茎泽兰多糖颜色为淡棕色,总糖含量为77%。
实施例3
取紫茎泽兰粉碎全草适量,用5倍量蒸馏水浸泡2h,在微波功率为600W,料液重量比为1∶5,微波提取时间2min的处理条件下,用微波1次提取后将残碴加相同体积水再浸泡1h,然后微波2次提取;合并2次提取液,150目双层滤布过滤,滤液在70℃下使用减压浓缩至原体积的1/3;搅拌下向浓缩提取液中加入5倍75%的乙醇,将浓缩提取液中的多糖沉淀出,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;向多糖粗沉淀物中加入蒸馏水溶解,使之充分复溶,用sevag法去蛋白,反复进行9次,浓缩(方法同上),浓缩液中加入5倍75%的甲醇进行醇析沉淀,沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚分别洗涤,得到去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物;将多糖沉淀溶于水,分别用清水和二次蒸馏水透析,得到多糖分子量为3000—130000的紫茎泽兰多糖精制液。该紫茎泽兰多糖精制液可以进一步制备为各种药学上可接受的组合物及各种剂型。
如果需要,得到的紫茎泽兰多糖精制液还可以进一步醇沉精制,方法为:在搅拌下再加入5倍75%的乙醇,静置析出沉淀,沉淀经冷冻干燥得紫茎泽兰多糖固体。
所得紫茎泽兰多糖颜色为淡棕色,总糖含量为95%。
实施例4
取紫茎泽兰粉碎全草适量,用20倍量蒸馏水浸泡0.5h,在微波功率为300W,料液重量比为1∶20,微波提取时间10min的处理条件下,用微波1次提取后将残碴加相同体积水再浸泡1h,然后微波2次提取;合并2次提取液,100目双层滤布过滤,滤液在50℃下使用薄膜蒸发浓缩至原体积的1/5;搅拌下向浓缩提取液中加入2倍95%的乙醇,将浓缩提取液中的多糖沉淀出,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;向多糖粗沉淀物中加入蒸馏水溶解,使之充分复溶,用sevag法去蛋白,反复进行5次,浓缩(方法同上),浓缩液中加入4倍90%的甲醇进行醇析沉淀,沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚分别洗涤,得到去蛋白后的紫茎泽兰多糖沉淀物;将多糖沉淀溶于水,加热至70℃溶解,趁热滤出不溶物,滤液经超滤精制,得到多糖平均分子量为3000—80000的紫茎泽兰多糖精制液。该紫茎泽兰多糖精制液可以进一步制备为各种药学上可接受的组合物及各种剂型。
如果需要,得到的紫茎泽兰多糖精制液还可以进一步醇沉精制,方法为:在搅拌下再加入3倍90%的丙醇,静置析出沉淀,沉淀经加热干燥得紫茎泽兰多糖固体。
所得紫茎泽兰多糖颜色为淡棕色,总糖含量为83%。
实施例5
取紫茎泽兰粉碎全草适量,用20倍量蒸馏水浸泡1h,在微波功率为800W,料液重量比为1:20,微波提取时间10min的处理条件下,用微波1次提取后将残碴加相同体积水再浸泡1h,然后微波2次提取;合并2次提取液,100目双层滤布过滤,滤液在50℃下使用薄膜蒸发浓缩至原体积的1/5;搅拌下向浓缩提取液中加入2倍95%的乙醇,将浓缩提取液中的多糖沉淀出,收集紫茎泽兰多糖粗沉淀物;将多糖沉淀溶于水,加热至70℃溶解,趁热滤出不溶物,滤液经超滤精制,得到多糖分子量为3000—130000的紫茎泽兰多糖精制液。该紫茎泽兰多糖精制液可以进一步制备为各种药学上可接受的组合物及各种剂型。
如果需要,得到的紫茎泽兰多糖精制液还可以进一步醇沉精制,方法为:在搅拌下再加入3倍90%的丙醇,静置析出沉淀,沉淀经加热干燥得紫茎泽兰多糖固体。
所得紫茎泽兰多糖颜色为淡棕色,总糖含量为60%。
将上述实施例5方法所制得的紫茎泽兰多糖进行如下试验:
I.抗菌活性实验:
方法利用打孔器将滤纸制成直径5mm的圆形纸片,灭菌备用。将紫茎泽兰多糖分别配制成10.0、15.0、20.0、25.0、30.0mg/mL浓度的溶液,以不加多糖为对照,过滤除菌备用。用移液器分别吸取各种菌悬液200L,涂布均匀在倒好的平皿培养基上。用不同浓度的紫茎泽兰多糖溶液浸泡圆形滤纸片片刻,取出待略干后,等距离贴于培养基平板上,重复三次。置培养箱中,37℃培养细菌24h,在28℃条件下培养真菌48h。然后测定抑菌圈直径,计算平均值。
结果见表1。结果显示,紫茎泽兰多糖溶液对表中试验菌均具有显著抑制活性。
表1紫茎泽兰多糖对细菌的抑制作用
(抑菌圈直径,mm)

II.抗病毒活性:
以副流感病毒(parainfluenzavirus,PIV)滴鼻感染小鼠,观察紫茎泽兰多糖对感染病毒小鼠的死亡率、生存时间的影响。
方法:60只昆明小鼠,分为6组,每组10只,分别为正常对照组,病毒对照组,利巴韦林组(100mg/kg),紫茎泽兰多糖高剂量组(100mg/kg),紫茎泽兰多糖中剂量组(30mg/kg),紫茎泽兰多糖低剂量组(10mg/kg)。除正常对照组外,其余组的小鼠均在乙醚轻度麻醉下,鼻腔内接种0.03mL/只相当于2~5倍LD50含副流感病毒的鸡胚尿囊液。紫茎泽兰多糖各组及利巴韦林组于病毒感染前1d和感染前2h灌胃给药各1次,以后2次/d,0.2mL/次,共给药5d。病毒对照组及正常对照组按同法给予等量蒸馏水。自病毒感染后连续观察15d,逐日观察并记录小鼠发病和死亡数,计算死亡率、死亡保护率、平均存活天数。
结果如表2所示,病毒对照组的死亡率为100%,平均存活天数只有5.9d,表明造模成功。利巴韦林组能显著降低被副流感病毒感染后小鼠的死亡率(P<0.01),显著延长其存活时间(P<0.01)。紫茎泽兰多糖各剂量组对病毒感染小鼠的死亡率均有一定的保护作用,并能延长病毒感染小鼠的平均存活天数,表现出明显的量效关系,其中紫茎泽兰多糖30、100mg/kg剂量组与病毒对照组相比具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。
表2紫茎泽兰多糖对感染病毒小鼠的死亡率、生存时间的影响(x±s,n=10)
 

组别剂量/mgkg-1死亡率死亡率(%)死亡保护率(%)存活天数正常对照组-00**-15.00±0.00**病毒对照组-10100-5.40±0.85利巴韦林组10000**10015.00±0.00**多糖高剂量组100220**8012.32±1.35**多糖中剂量组30440*6010.86±3.21**多糖低剂量组10880207.50±3.6

注:与病毒对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
上述实验结果表明,本发明的紫茎泽兰多糖在各种剂量下,具有显著的抗菌和抗病毒活性。
本发明的紫茎泽兰多糖的制备方法和用途已经通过具体的实施例进行了描述。本领域技术人员可以借鉴本发明的内容适当改变原料、工艺条件等环节来实现相应的其它目的,其相关改变都没有脱离本发明的内容,所有类似的替换和改动对于本领域技术人员来说是显而易见的,都被视为包括在本发明的范围之内。
本发明紫茎泽兰多糖测定方法及稳定性实验例如下:
1.本发明实施例1—5的紫茎泽兰多糖1ml浓度10%的溶液,加苯酚一硫酸试剂呈桔红色,加葱酸试剂呈蓝绿色,说明制备得到的为多糖。
2.稳定性实验:采用留样观察法,将浓度为10%,50%,80%的样品分别贮藏于3—5℃、20—25℃、33—37℃的恒温箱中,隔月取样观察,1年内外观色泽无变化,无沉淀物。
3.总糖量的测定方法:精密称取D—葡萄糖0.20g于250ml容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,为标准品溶液。精密吸取标准品溶液0.5、1、2、3、4、5ml,加蒸馏水稀释至25ml,得不同浓度的标准品溶液。精密吸取标准品溶液2ml,加5%的苯酚水溶液1ml,缓缓加入浓硫酸5ml,摇匀,放冷至室温,以1mls%的苯酚水溶液为空白,在490nm下测定吸收度,绘制标准曲线。然后取多糖样品,按标准液配制的方法配制成样品液,同法操作,测定吸收度,从标准曲线计算其总糖含量。
本发明利用凝胶渗透色谱法(GPC)测定实施例1—5的紫茎泽兰多糖分子量,方法如下:
色谱条件:TSKG-5000PW×L凝胶柱,TSKG—3000PWxL凝胶柱;流动相为0.02mol/LKH2PO4溶液,PH6.0;流速0.6ml/min:柱温40℃:进样20ul:标样为己知分子量的葡聚糖标准品(Dextran,Sigma公司);检测器为Waters2410示差折光检测器。
测定方法:将已知分子量的葡聚糖标准品分别用流动相配制成1.0mg/ml的溶液,进样量为20ul,记录色谱图,用BreezeGPC软件以标准葡聚糖分子量的对数logMw对洗脱体积Elution Volume进行回归处理。将多糖样品用流动相配制成1.0mg/ml的溶液,进样20ul,测得多糖样品的保留时间,利用标准曲线求得多糖分子量。

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本发明涉及紫茎泽兰多糖用于抗菌或抗病毒的用途,尤其是涉及紫茎泽兰多糖制备具有抗菌或抗病毒作用的药物用途。本发明所涉及的紫茎泽兰多糖对多种细菌或病毒有抑制作用,例如枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、普通变形杆菌、痢疾志贺菌、白色念珠菌或副流感病毒等。可以采用现有技术公知的方法将本发明的紫茎泽兰多糖制成药物组合物,以及任何一种药剂学上可接受的剂型,如颗粒剂、口服液、胶囊、。

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