一种治疗糖尿病的药物组合物.pdf

摘要
申请专利号：	CN200810031546.8	申请日：	2008.06.20
公开号：	CN101606936A	公开日：	2009.12.23
当前法律状态：	授权	有效性：	有权
法律详情：	专利权的转移IPC(主分类):A61K 31/445变更事项:专利权人变更前权利人:中南大学变更后权利人:湖南希尔天然药业有限公司变更事项:地址变更前权利人:410013 湖南省长沙市麓山南路932号变更后权利人:425000 湖南省永州市凤凰园向荣工业村登记生效日:20130118\|\|\|专利权人的姓名或者名称、地址的变更IPC(主分类):A61K 31/445变更事项:专利权人变更前:湖南希尔天然药业有限公司变更后:湖南希尔天然药业有限公司变更事项:地址变更前:425000 湖南省永州市凤凰园向荣工业村变更后:425000 湖南省永州市冷水滩区陶源路458号\|\|\|授权\|\|\|实质审查的生效IPC(主分类):A61K 31/445申请日:20080620\|\|\|公开
IPC分类号：	A61K31/445; A61K31/40; A61P3/10	主分类号：	A61K31/445
申请人：	中南大学
发明人：	周应军; 曾光尧; 蒋梅香
地址：	410013湖南省长沙市麓山南路932号
优先权：
专利代理机构：	长沙正奇专利事务所有限责任公司	代理人：	卢宏
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内容摘要

本发明涉及一种药物组合物，具体地是一种用于治疗糖尿病的药物组合物。本发明组合物中含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin)和1，2，5-三脱氧-1，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)，其中1-deoxynojirimycin和Fagomine的重量比例为0.5～5∶1。本发明涉及的药物组合物较单一降糖化合物效果更好，可用于治疗和预防糖尿病及其并发症。

权利要求书

1.  一种治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于该组合物中含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin)和1，2，5-三脱氧-1，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)，其中1-deoxynojirimycin和Fagomine的重量比例为0.5～5∶1。

2.  根据权利要求1中所述的药物组合物，含有1-脱氧野尻霉素的重量百分比大于1％。

3.  根据权利要求1中所述的药物组合物，其特征在于1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin)和1，2，5-三脱氧-1，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)的优选重量比例为2～5∶1。

4.  根据权利要求1至3之一中所述的治疗糖尿病药物组合物，其特征在于可以含有其他有降血糖活性的化合物或提取物。

5.  根据权利要求4所述的治疗糖尿病药物组合物，其特征在于所说的其他有降血糖活性的化合物可以是选自磺脲类、双胍类、噻唑烷二酮类化学药品，提取物可以是选自从桑科植物分离纯化的桑叶黄酮类成分、银杏叶提取物、苦瓜提取物，以及茶多酚提取物。

说明书

一种治疗糖尿病的药物组合物
技术领域
本发明涉及一种药物组合物，具体地是一种用于治疗糖尿病的药物组合物。
背景技术
1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin)和1，2，5-三脱氧-1，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)是桑科植物的枝、叶、皮或蚕沙中含有的含氮生物碱成分。
1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin)化学名称为3，4，5-三羟基-2-羟甲基四氢吡啶。该化合物已经商品化，可以从市场上购得，有非常多的厂家提供该化合物，例如上海融禾医药科技发展有限公司。
1，2，5-三脱氧-1，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)现今没有公开销售的商品，文献报道日本北陆大学的Naoki Asano等人通过提取、反复柱层析、重结晶的办法获得([J].Carbohydrate Research，253(1994)235-245)。
国内外的研究和报道表明，桑科植物的生物碱提取物具有抑制血糖升高和提高葡萄糖耐受量的作用，其中1-deoxynojirimycin能和小肠中的麦芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶等α-糖苷酶结合，使双糖不能进一步分解，从而抑制餐后血糖急剧升高；Fagomine除具有糖苷酶抑制剂作用外，还可能通过增加胰岛素的释放而引起血糖降低。
降糖的化学药品，磺脲类如格列本脲、格列齐特等，双胍类如二甲双胍等，噻唑烷二酮类如曲格列酮、罗格列酮等，均已经商品化应用于临床；桑叶黄酮提取物、银杏叶提取物化合物、苦瓜提取物、茶多酚提取物等在市场上均有销售，如湖南今汉生物医药技术有限公司、韶关市居民制药有限公司等多家医药和提取物生产厂家均可供应。
发明内容
本发明的目的是要提供一种效果更好的降低血糖的药物组合物。
本发明组合物中含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin)和1，2，5-三脱氧-1，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)，其中1-deoxynojirimycin和Fagomine的重量比例为0.5～5∶1。
其中优选的比例是1-deoxynojirimycin和Fagomine的重量比例为2～5∶1。
本发明首次对含有不同配比1-deoxynojirimycin和Fagomine的组合物降低血糖的作用进行了研究，发现两者在一定的比例范围内有很好的协同降糖作用。根据本发明的实施例，选择了协同降糖作用较好的配比。
本发明还研究了上述组合物与其他降血糖化合物联合使用的协同降血糖作用。1-deoxynojirimycin和Fagomine组合物和其他降血糖物质联合应用比其他降血糖物质或上述两者组合单独应用更有效的降低高血糖大鼠灌胃蔗糖后的血糖值。
上述含有1-deoxynojirimycin和Fagomine的药物组合物可以制成各种制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、滴丸剂、口服液等。制备的方法可以采用常规的辅料和方法。
研究结果表明，本发明涉及的药物组合物较单一降糖化合物效果更好，可用于治疗和预防糖尿病及其并发症。
具体实施方案
实施例1
1-deoxynojirimycin和Fagomine配伍对α-D-葡萄糖苷酶抑制活性的测定
1、药物：1-deoxynojirimycin，Fagomine，自制。
2、试剂：磷酸二氢钾，氢氧化钠，碳酸氢钠，对硝基苯基葡萄糖苷(PNPG)，还原型谷胱甘肽，α-D-葡萄糖苷酶蔗糖。
3、仪器：TU-1901紫外可见光分光光度计。
4、试验方法与结果
(1)磷酸钾缓冲液配制：磷酸二氢钾0.68120g溶于25mL蒸馏水中得贮备液1，NaOH0.2g溶于25mL蒸馏水中得贮备液2，吸取贮备液1(25mL)加入贮备液2(11.8mL)，摇匀，稀释至100mL即得磷酸钾缓冲液。
(2)Na₂CO₃终止液：Na₂CO₃ 10.6g→100mL蒸馏水(1mol/L)
(3)PNPG：17.47mg→2mL蒸馏水(0.029mol/L)
(4)还原型谷胱甘肽：2.10mg→2mL蒸馏水(1.05mg/mL)
(5)α-D-葡萄糖苷酶：0.5mg→1mL蒸馏水(0.5mg/mL)
(6)1-deoxynojirimycin贮备液：3.24mg→1mL蒸馏水(20μmol/mL)
(7)Fagomine贮备液：3.00mg→1mL蒸馏水(20μmol/mL)
(8)糖苷酶抑制剂样品溶液配制：
1-deoxynojirimycin贮备液250μL，蒸馏水稀释至1mL，贮备液1。
Fagomine贮备液250μL，蒸馏水稀释至1mL，贮备液2。
贮备液1、2按表2中比例进行配伍：
(9)α-D-葡萄糖苷酶抑制活性的测定反应
按表1顺序添加试剂反应，测定吸光度值，按以下公式计算样品的α-糖苷酶抑制率。

表1 α-糖苷酶抑制率测定试验设计

(10)结果：见表2。
表2 1-deoxynojirimycin和Fagomine不同配比对α-糖苷酶抑制率试验

DNJ∶Fag配比 1∶0 5∶1 2∶1 1∶1 1∶2 1∶5 0∶1 DNJ∶Fag样品液体积(μL) 30∶0 25∶5 20∶10 15∶15 10∶20 5∶25 0∶30 α-糖苷酶抑制率％ 44％ 59％ 54％ 48％ 42％ 33％ 21％

注：表中1-deoxynojirimycin简称DNJ，Fagomine简称Fag。
5、结论：试验结果表明，Fagomine对1-deoxynojirimycin抑制α-糖苷酶有协同作用(1-deoxynojirimycin和Fagomine的总量不变)，在1-deoxynojirimycin∶Fagomine配比在0.5～5∶1时，可较好的抑制α-糖苷酶，其中配比在2～5∶1时明显明显优于单独使用同浓度1-deoxynojirimycin的效果。
实施例2
不同剂量组合物对自发性高血糖小鼠血糖及血清胰岛素的影响
1、药物：1-deoxynojirimycin，Fagomine，自制，试验前用蒸馏水配制成所需要的浓度(组合物中1-deoxynojirimycin和Fagomine的浓度总和与单独配制Fagomine或1-deoxynojirimycin的浓度相同)。格列本脲，湖南洞庭药业股份有限公司。
2、动物：NOD小鼠，体重25-35g，由北京大学医学部实验动物中心。试验前测定血糖，选择血糖值高于11.1mmol/L的动物进行试验。
3、测定仪器：怡成血糖测试仪，北京怡成生物电子技术有限公司研制。
4、主要试剂：¹²⁵I-胰岛素放射免疫分析盒，中国原子能科学院同位素研究所生产。
5、试验方法与结果
(1)对小鼠血糖的影响：NOD小鼠，空腹6h后，测定血糖，选择血糖值高于11.1mmol/L的动物70只，随机分为7组，分别灌胃给予下列药物：①对照组(蒸馏水)；②格列本脲组(50mg/kg)；③-⑤不同配比的组合物(20mg/kg，药物比例不同，总量不变)。连续给药14天，第14天给药前空腹6h，给药后1h动物取血，用怡成血糖测试仪测定动物血糖值，用放射免疫法测定血清胰岛素。结果见表3-4。
表3  药物组合物对自发性高血糖小鼠血糖的影响(X±SD)

注：1、与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01(t检验)。
2、表中1-deoxynojirimycin简称DNJ，Fagomine简称Fag。
表4  药物组合物对自发性高血糖小鼠血清胰岛素的影响(X±SD)

注：1、与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01(t检验)。
2、表中1-deoxynojirimycin简称DNJ，Fagomine简称Fag。
6、结论：1-deoxynojirimycin单独应用可显著降低NOD小鼠血糖，且优于Fagomine单独应用降低血糖的效果；1-deoxynojirimycin单独应用NOD小鼠的血清胰岛素影响不大，Fagomine单独应用可显著提高血清胰岛素水平；
其中1-deoxynojirimycin与Fagomine配比为2～5∶1的组合物既能提高NOD小鼠的血清胰岛素水平，又可显著降低NOD小鼠血糖，降血糖效果明显优于同浓度1-deoxynojirimycin或Fagomine的单独应用，说明二者组合应用具有协同作用。
此外，根据此药效试验结果，1-deoxynojirimycin与Fagomine组合物的有效剂量约相当于人日服用120mg组合物，每次服用约40mg，以优选比例2～5∶1计算，其中每次服用时含1-deoxynojirimycin最少约25mg以上，从方便病患服用和减少服用量出发，采用片剂或胶囊，最多每次服用5片或5粒胶囊(总重最多以2500mg计)，因此1-deoxynojirimycin的含量在药物混合物中，含量以大于1％为宜。
实施例3
与其他降血糖物质联合应用试验
1、药物：1-deoxynojirimycin和Fagomine混合物(2∶1)，自制，试验前用蒸馏水配制成所需要的浓度；拜糖平，拜尔医药保健有限公司；儿茶素，银杏叶提取物，桑叶黄酮，湖南今汉生物医药技术有限公司。
2、动物：动物：SD大鼠，体重180-220g，雌雄各半，由湖南医药工业研究所提供。造模方法：大鼠禁食24h后，小剂量静脉注射链脲霉素25mg/kg，每周一次，同时加高热量饲料喂养诱发II型糖尿病，于第2次注射后1周测定血糖，选择空腹血糖大于7.8mmol/L的动物进行试验。
3、试剂：链脲霉素，美国Sigma公司产品。造模前用柠檬酸缓冲液(PH＝4.0)，于低温下配制；蔗糖，分析纯。
4、仪器：稳步倍加型血糖监测仪。
5、试验方法与结果：SD大鼠，禁食不禁水24h后，静脉注射链脲霉素25mg/kg，每周一次，同时加高热量饲料喂养诱发II型糖尿病，于第2次注射后1周测定血糖，选择空腹血糖大于7.8mmol/L大鼠90只，进行试验。随机分为9组(n＝10)，第一组为对照组，等体积蒸馏水灌胃，第二组为拜糖平组；其余各组为1-deoxynojirimycin和Fagomine混合物(混合物比例为2∶1，表内以DF表示)和其他不同降血糖物质的组合；按以上剂量灌胃给予试验药物，连续14天，第14天给药前空腹6h，按以上剂量给药的同时均灌胃蔗糖5.0g/kg，测定给糖前及给糖后1.0小时大鼠的血糖，实验室温度20℃～25℃。试验结果见表5。
表5  组合物对链脲霉素诱发高血糖大鼠灌胃蔗糖后血糖值的影响

注：与对照组给药后比较：*P＜0.05；**P＜0.01
6、结论：1-deoxynojirimycin和Fagomine组合物和其他降血糖物质联合应用比其他降血糖物质或DF组合单独应用更有效的降低高血糖大鼠灌胃蔗糖后的血糖值。