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一种含美洲大蠊提取物的明胶海绵及其制备方法
    【技术领域】

    本发明涉及医药技术领域，具体来讲涉及一种含美洲大蠊提取物的明胶海绵及其制备方法。

    背景技术

    据文献记载，美洲大蠊是蜚蠊科中体积最大的昆虫，原产于南美洲，美洲大蠊是传统的中药材，以干燥和鲜成虫入药，其性塞味咸，有毒，有辛辣味，有散瘀、消积、解毒、利水、消肿等功能；主治儿童疳积、扁桃腺炎、身体包块、痈疮肿痛和蜈蚣、毒蛇咬伤等。

    近年来随着科技不断地发展，经多年研究发现，美洲大蠊表皮含有巩膜质和甲壳质，溴、锌、镍、猛、钾、钙、钛、氯、硫、硅、铝、镁等元素；肌肉水解13种氨基酸；其醇提取物对癌细胞有明显的抑制作用，对心血管疾病具有明显的疗效。此外，身体贮藏维生素B₁、B₂，烟酸和抗坏血酸等，淋巴含海藻糖、海藻糖酶、糖蛋白、肌醇、原儿茶酸葡萄甙等。全体含麦角硫因、龙虾肌碱、胡芦巴碱、甘氨酸、甜菜碱、肛碱、三甲胺、腺嘌呤等。临床主要应用有：治疗儿童疳积、治痈疮肿毒、治蜈蚣伤、治无名肿毒、治虫蛇咬伤。还有美洲大蠊与草药配伍可辅助治疗结肠癌。美洲大蠊提取物可治乙型肝炎，提取物AT-2制剂可主治原发性肝癌、心血管疾病等。

    公告号为CN 100525781C，名称为“美洲大蠊提取物、含该提取物的药物组合物及其制备方法”和公开号为CN1943600A，名称为“含有美洲大蠊及其乙醇提取物的药物组合物及其新用途”是申请人于2006年申请的两项和美洲大蠊提取物相关的专利文献，其公开了美洲大蠊提取物的制备方法和部分医药用途，近年来，随着对美洲大蠊提取物的进一步研究，美洲大蠊提取物在医药上的用途得到了进一步的发展。

    明胶海绵是由明胶制成的白色或微黄色海绵状物。按照海绵剂的组成来分的话，明胶海绵属于蛋白质胶原类海绵。可作为吸收性海绵，只要是用于人体的能产生蛋白酶的器官和组织，基本上是可以被人体吸收的。明胶海绵用于治疗口腔术后、鼻中隔糜烂、鼻出血、鼻(鼻窦)、内镜术后等术腔填塞必不可少，明胶海绵作为新型的填塞物，它的高亲水性，高膨胀性，使用方便等特点被广泛应用，而普通的明胶海绵在临床治疗中发现它的止血效果仍不理想，尤其在取出时出血较多。

    【发明内容】

    本发明的目的在于克服上述技术不足，提供一种有效提高止血效果的含美洲大蠊提取物的明胶海绵及其制备方法。

    本发明的目的通过以下技术方案来实现的：一种含美洲大蠊提取物的明胶海绵，其特征在于：所述含美洲大蠊提取物的明胶海绵主要是由含美洲大蠊提取物的混合物和明胶海绵组成，每1×1×0.5cm单位面积的明胶海绵含有美洲大蠊提取物的混合物0.5～1g。优选配比含量为0.75g。

    所述含美洲大蠊提取物的明胶海绵还包括纯化水和甘油，以1000g重量计的美洲大蠊提取物，其配比为：美洲大蠊提取物∶纯化水∶甘油＝1000g∶800～1200ml∶4～6ml。优选配比为：美洲大蠊提取物∶纯化水∶甘油＝1000g∶1000ml∶5ml。

    含美洲大蠊提取物的明胶海绵的制备方法，包括以下步骤：

    ①、美洲大蠊提取物的制备：

    a、粗碎：将干燥的美洲大蠊进行粉碎，制得美洲大蠊粗粉，备用；

    b、浸泡：按照每100kg的粗粉加入3～5倍量的水，在70～78℃的温度条件下浸泡0.5～2小时制得粗粉混合液，备用；其中，优选方案为：加入水的量为4倍量，浸泡时间为1小时，浸泡温度为74℃；

    c、三次提取：粗粉混合液采用煎煮的方法进行三次提取，对粗粉混合液进行第一次提取时，提取时间为7～9小时；然后向经第一次提取后的余液中加入余液2～4倍量的水后进行第二次提取，提取时间为5～7小时；最后向经第二次提取后的余液中加入余液2～4倍量的水后进行第三次提取，提取时间为3～5小时，分别制得三次的提取液，备用；

    d、第一次过滤：将三次的提取液合并混合，然后进行过滤制得一级滤液，备用；

    e、第一次浓缩：将一级滤液浓缩至70～90℃时相对密度为1.05～1.25的一级浓缩液，备用；

    f、醇化处理：向一级浓缩液中逐渐加入浓度为93～97％w/w的乙醇，并充分搅拌，使其含醇量达到45～55％为止，在70～90℃的温度条件下保温20～40分钟，然后静置10～14小时，制得醇化液，备用；

    g、第二次过滤：将醇化液弃去上层油脂，下层药液进行过滤制得二级滤液，备用；

    h、第二次浓缩：将二级滤液进行乙醇回收处理后，浓缩至70～90℃时相对密度为1.15～1.30的二级浓缩液，备用；

    i、膏剂制备：将二级浓缩液在常压条件下浓缩至水分≤25～35％的膏剂，即得含美洲大蠊提取物，备用；

    ②、成药：按照美洲大蠊提取物∶纯化水∶甘油＝1000g∶800～1200ml∶4～6ml的重量比向美洲大蠊提取物中加入纯化水和甘油；充分搅拌均匀，制得含美洲大蠊提取物的混合物，备用；然后将制得的混合物按照每1×1×0.5cm单位面积的明胶海绵含有美洲大蠊提取物的混合物为0.5～1g的配比涂抹于明胶海绵上，即得成药。

    本发明制备方法简单，充分发挥了美洲大蠊提取物的作用，有效提高了口腔术后、鼻中隔糜烂、鼻出血、鼻(鼻窦)、内镜术后等术后的止血效果，降低了出血率，减轻患者痛苦，有效缩短了患者病程。

    【具体实施方式】

    以下结合实施例的具体实施方式再对本发明的上述内容作进一步的详细说明：

    一种含美洲大蠊提取物的明胶海绵，其特征在于：所述含美洲大蠊提取物的明胶海绵主要是由含美洲大蠊提取物的混合物和明胶海绵组成，每1×1×0.5cm单位面积的明胶海绵含有美洲大蠊提取物的混合物0.5～1g。优选配比含量为0.75g。

    所述含美洲大蠊提取物的明胶海绵还包括纯化水和甘油，以1000g重量计的美洲大蠊提取物，其配比为：美洲大蠊提取物∶纯化水∶甘油＝1000g∶800～1200ml∶4～6ml。优选配比为：美洲大蠊提取物∶纯化水∶甘油＝1000g∶1000ml∶5ml。

    含美洲大蠊提取物的明胶海绵的制备方法，包括以下步骤：

    ①、美洲大蠊提取物的制备：

    a、粗碎：将干燥的美洲大蠊进行粉碎，制得美洲大蠊粗粉，备用；

    b、浸泡：按照每100kg的粗粉加入3～5倍量的水，在70～78℃的温度条件下浸泡0.5～2小时制得粗粉混合液，备用；其中，优选方案为：加入水的量为4倍量，浸泡时间为1小时，浸泡温度为74℃；

    c、三次提取：粗粉混合液采用煎煮的方法进行三次提取，对粗粉混合液进行第一次提取时，提取时间为7～9小时；然后向经第一次提取后的余液中加入余液2～4倍量的水后进行第二次提取，提取时间为5～7小时；最后向经第二次提取后的余液中加入余液2～4倍量的水后进行第三次提取，提取时间为3～5小时，分别制得三次的提取液，备用；

    d、第一次过滤：将三次的提取液合并混合，然后进行过滤制得一级滤液，备用；

    e、第一次浓缩：将一级滤液浓缩至70～90℃时相对密度为1.05～1.25的一级浓缩液，备用；

    f、醇化处理：向一级浓缩液中逐渐加入浓度为93～97％w/w的乙醇，并充分搅拌，使其含醇量达到45～55％为止，在70～90℃的温度条件下保温20～40分钟，然后静置10～14小时，制得醇化液，备用；

    g、第二次过滤：将醇化液弃去上层油脂，下层药液进行过滤制得二级滤液，备用；

    h、第二次浓缩：将二级滤液进行乙醇回收处理后，浓缩至70～90℃时相对密度为1.15～1.30的二级浓缩液，备用；

    i、膏剂制备：将二级浓缩液在常压条件下浓缩至水分≤25～35％的膏剂，即得含美洲大蠊提取物，备用；

    ②、成药：按照美洲大蠊提取物∶纯化水∶甘油＝1000g∶800ml～1200ml∶4～6ml的重量比向美洲大蠊提取物中加入纯化水和甘油；充分搅拌均匀，制得含美洲大蠊提取物的混合物，备用；然后将制得的混合物按照每1cm×1cm×0.5cm单位面积的明胶海绵含有美洲大蠊提取物的混合物为0.5～1g的配比涂抹于明胶海绵上，即得成药。

    实施例1

    按照上述方法进行实施，将干燥的美洲大蠊粗碎，每100Kg粗粉加300Kg水，浸泡0.5小时后，温度约在70℃，提取三次，第一次7小时；第二次加水200Kg，提取5小时；第三次加水200Kg，提取3小时；合并三次提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.05～1.08(70℃)时，加入浓度为93％w/w的乙醇，使成含醇量为40％，70℃保温搅拌20分钟，静置10小时，弃去上层油脂，下层药液过滤，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.15～1.18(70℃)，常压浓缩至水分≤25％的膏，按照美洲大蠊提取物∶纯化水∶甘油＝1000g∶800ml∶4ml的重量比向美洲大蠊提取物中加入纯化水和甘油；充分搅拌均匀，制得含美洲大蠊提取物的混合物，备用；然后将制得的混合物按照每1cm×1cm×0.5cm单位面积的明胶海绵含有美洲大蠊提取物的混合物为0.5g的配比涂抹于明胶海绵上，即得成药。

    实施例2

    按照上述方法进行实施，将干燥的美洲大蠊粗碎，每100Kg粗粉加500Kg水，浸泡2小时后，温度约在78℃，提取三次，第一次9小时；第二次加水400Kg，提取7小时；第三次加水400Kg，提取5小时；合并三次提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.22～1.25(90℃)时，加入浓度为97％w/w的乙醇，使成含醇量为55％，90℃保温搅拌40分钟，静置14小时，弃去上层油脂，下层药液过滤，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.27～1.30(90℃)，常压浓缩至水分≤35％的膏，按照美洲大蠊提取物∶纯化水∶甘油＝1000g∶1200ml∶6ml的重量比向美洲大蠊提取物中加入纯化水和甘油；充分搅拌均匀，制得含美洲大蠊提取物的混合物，备用；然后将制得的混合物按照每1cm×1cm×0.5cm单位面积的明胶海绵含有美洲大蠊提取物的混合物为1g的配比涂抹于明胶海绵上，即得成药。

    实施例3

    按照上述方法进行实施，将干燥的美洲大蠊粗碎，每100Kg粗粉加400Kg水，浸泡1小时后，温度约在74℃，提取三次，第一次8小时；第二次加水300Kg，提取6小时；第三次加水300Kg，提取4小时；合并三次提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.20(80℃)时，加入浓度为95％w/w的乙醇，使成含醇量为50％，80℃保温搅拌30分钟，静置12小时，弃去上层油脂，下层药液过滤，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.20～1.25(80℃)，常压浓缩至水分≤30％的膏，按照美洲大蠊提取物∶纯化水∶甘油＝1000g∶1000ml∶5ml的重量比向美洲大蠊提取物中加入纯化水和甘油；充分搅拌均匀，制得含美洲大蠊提取物的混合物，备用；然后将制得的混合物按照每1cm×1cm×0.5cm单位面积的明胶海绵含有美洲大蠊提取物的混合物为0.75g的配比涂抹于明胶海绵上，即得成药。

    实施例4

    按照上述方法进行实施，将干燥的美洲大蠊粗碎，每100Kg粗粉加420Kg水，浸泡0.8小时后，温度约在76℃，提取三次，第一次7.5小时；第二次加水380Kg，提取5.5小时；第三次加水380Kg，提取3.5小时；合并三次提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.09(78℃)时，加入浓度为94％w/w的乙醇，使成含醇量为48％，76℃保温搅拌35分钟，静置13小时，弃去上层油脂，下层药液过滤，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.16～1.18(76℃)，常压浓缩至水分≤28％的膏，按照美洲大蠊提取物∶纯化水∶甘油＝1000g∶900ml∶5.5ml的重量比向美洲大蠊提取物中加入纯化水和甘油；充分搅拌均匀，制得含美洲大蠊提取物的混合物，备用；然后将制得的混合物按照每1cm×1cm×0.5cm单位面积的明胶海绵含有美洲大蠊提取物的混合物为0.94g的配比涂抹于明胶海绵上，即得成药。

    临床试验例：

    采用明胶海绵填塞24～48h内抽取填塞物，病人均无明显出血。在抽取填塞物时，其中仅36例需要患者低头按压出血侧鼻翼止血，出血量＜10ml，一般均在5min内自凝达到止血，其余均未见明显出血现象。本组所有病人在填塞过程中均无任何过敏或其他不良反应发生。

    一、一般资料：

    口腔术后、鼻中隔糜烂、鼻出血、鼻(鼻窦)、内镜术，以鼻中隔糜烂病患为例，其人数见表，符合诊断标准。随机分为治疗组和对照组，男女不等，年龄1～50岁；两组患者年龄、性别和病程经统计学处理，差异无显著性意义，具有可比性。

    二、治疗方法：

    治疗组：本方案明胶海绵，外用，填塞于鼻内。

    对照组：一般常用油纱条，外用，填塞于鼻内。

    将80例患者随机分成A、B两组，A组40例，其中男性29例，女性11例，平均年龄36岁；B组40例，其中男性27例，女性13例，平均年龄34.6岁。两组患者差异无统计学意义，具有可比性。

    A组：本方案明胶海绵填塞术腔，24h后完全取出。

    B组：普通明胶海绵填塞术腔，24h后完全取出。

    效果评价指标：术后24h内出血情况，24h后按上述方法取出填塞物后出血情况。评价标准：单侧鼻腔。

    表中：“-”表示无出血；

    “+”表示出血量0～5ml；

    “++”表示出血量5～30ml

    “+++”表示出血量30～50ml；

    “++++”表示出血量50ml以上。

    结果：两组术后24h内出血情况见表1，术后24h后取出填塞物时出血情况见表2。

    表1两组在术后24h内出血情况n(％)

    

    注：出血情况A组明显好于B组，差异有统计学意义。

    表2两组在术后24h后取出填塞物时出血情况(％)

    

    注：A组88％不出血或少量出血，而B组只有24％少量出血，差异有统计学意义。