一种冠心宁药物制剂的制备方法 技术领域 本发明涉及中药制剂的制备方法， 具体地说是由丹参、 川芎植物有效成分组成的 中药制剂的制备方法。
背景技术
冠心宁注射液含有丹参和川芎的有效提取物的中药制剂。自 70 年代开发研制成 水针剂在国内上市已有 30 多年的历史， 是临床常用的治疗心脑血管病的中药注射剂， 具有 改善冠脉循环和抗血凝作用， 能显著增加冠脉血流量， 改善心肌供血， 预防和减少血栓的形 成， 使栓塞范围缩小。主要用于冠心病、 心绞痛的治疗。现上市的冠心宁注射液就是按照药 品标准 WS3-B-3267-98 制备的。其具体制备方法是 ： 丹参、 川芎按照 2000g ∶ 2000g 配伍。 以上二味， 加水煎煮三次， 第一次 2 小时， 第二、 三次各 1.5 小时， 合并煎液， 滤过， 滤液浓缩 至约 2000ml， 用乙醇沉淀处理二次， 第一次使含醇量达 75％， 第二次为 85％， 每次加乙醇后 均冷藏放置， 滤过， 合并滤液， 浓缩至约 700ml， 用注射用水稀释至 4000ml， 用稀盐酸调节 pH 值至 3.2， 冷藏， 滤过， 用 10％氢氧化钠溶液调节 pH 值至 6.8， 浓缩至 1000ml， 冷藏， 滤过， 再 调节 pH 值至 6.8， 煮沸 30 分钟， 加活性炭 0.2％， 稍冷， 滤过， 滤液调节 pH 值至 6.8， 加注射 用水使成 1000ml， 灌封， 灭菌， 即得。该方法简单、 易操作， 但药品稳定性差， 质量不易控制， 尤其是临床疗效有待进一步提高。发明内容
本发明的目的就是要提供一种新的冠心宁药物制剂的制备方法， 以进一步提高该 药物的治疗效果。
本发明的目的是这样实现的 ：
本发明所提供的冠心宁药物制剂的制备方法， 包括以下步骤 ：
(a) 药物组份为丹参、 川芎， 其重量份比为 1 ～ 3 份∶ 1 ～ 3 ；
(b) 取丹参药材， 粉碎， 加入 5 ～ 8 倍生药量的水煎煮 2 ～ 4 次， 每次 1 ～ 2 小时， 合并煎液， 滤过， 减压回收， 将得到的浓缩液注入大孔吸附树脂柱， 先用 5 ～ 8 倍量柱体积的 纯化水洗脱， 再用 4 ～ 10 倍量柱体积 10 ～ 30％乙醇洗脱， 弃去洗脱液， 然后用 50 ～ 95％ 乙醇洗脱， 收集 4 ～ 8 倍量柱体积的洗脱液 ； 将得到的洗脱液浓缩， 干燥， 粉碎， 即得丹参提 取物 ；
(c) 取川芎药材， 粉碎， 加入 4 ～ 10 倍生药量的 50 ～ 90％的乙醇进行加热回流提 取 2 ～ 4 次， 每次 1 ～ 2 小时 ； 合并提取液， 减压回收溶剂 ； 将得到的浓缩液注入大孔吸附树 脂柱， 先用 4 ～ 8 倍量柱体积的纯化水洗脱， 再用 2 ～ 6 倍量柱体积 10 ～ 20％乙醇洗脱， 弃 去洗脱液， 然后用 30 ～ 50％乙醇洗脱， 收集 2 ～ 6 倍量柱体积的洗脱液 ； 浓缩， 干燥， 粉碎， 即得川芎提取物 ；
其中所述的大孔吸附树脂可为以苯乙烯和二乙烯苯为主要原料交联的非极性、 弱 极性或极性树脂， 包括 ： D 系列、 HPD 系列、 SP 系列以及 NKA 型和 AB-8 型 ； D 系列优选 D101，HPD 系列优选 HPD100， SP 系列优选 HP-20 ；
所述的干燥方式可以为烘干、 真空干燥、 喷雾干燥或冷冻干燥。
(d) 以上述丹参提取物、 川芎提取物为活性成份， 加入药理上允许使用的药物载 体， 制备成各种形式的药物制剂。如片剂、 胶囊剂、 丸剂、 颗粒剂、 输液、 冻干粉针。
本发明所述的药物载体可选自常规的药用辅剂， 如赋形剂、 崩解剂、 黏合剂、 润滑 剂、 抗氧化剂、 包衣剂、 着色剂、 芳香剂、 表面活性剂等。
以上述丹参提取物、 川芎提取物为活性成份， 加入水、 蔗糖、 山梨醇糖、 果糖等可制 备成口服液体制剂。也可以乳糖、 葡萄糖、 蔗糖、 甘露醇糖等为赋形剂 ； 以淀粉等为崩解剂 ； 以硬脂酸、 滑石粉等为润滑剂 ； 明胶、 聚乙烯醇为结合剂制备成片剂或胶囊剂。
上述丹参提取物、 川芎提取物还可与生理盐水、 葡萄糖溶液或盐水与葡萄糖组成 的混合载体制备成注射液。
制备上述制剂时， 可使用常规的制剂技术
采用本发明方法制备的冠心宁药物， 其功能主治， 以及用法用量可完全参照 WS3-B-3267-98 药品标准执行。
本发明方法中优选的药物制剂为胶囊剂或注射液。 本发明通过冠心宁药物制备方法的改进， 提纯了丹参和川芎的有效成分， 去除了 药物原材料中的蛋白质、 鞣质等大分子物质和其它无效杂质， 提高了有效成分的含量， 由此 使药物疗效得到进一步的提高， 增强了用药的安全性和可靠性。
本发明经药效学实验表明， 按照本发明方法制备的药物制剂能够改善心肌缺血， 能够提高心肌缺血犬冠脉流量和心肌血流量， 降低冠脉阻力， 降低心肌耗氧量， 可适用于治 疗冠心病、 心绞痛等症。其治疗效果优于目前上市的冠心宁注射液。
具体实施方式
以下实施例用于对本发明作进一步的说明， 但并不以此对本发明的保护范围进行 限制。
实施例 1
取丹参药材 20000g， 粉碎， 加入 6 倍生药量的水煎煮 3 次， 第一次 2 小时， 第二、 三 次各 1.5 小时， 合并煎液， 滤过， 减压回收， 将得到的浓缩液注入 D101 型大孔吸附树脂柱， 先 用 6 倍量柱体积的纯化水洗脱， 再用 6 倍量柱体积 15％ (v/v) 乙醇洗脱， 弃去洗脱液， 然后 用 60％ (v/v) 乙醇洗脱， 收集 5 倍量柱体积的洗脱液 ； 将得到的洗脱液浓缩， 干燥， 粉碎， 即 得丹参提取物 ；
取川芎药材 20000g， 粉碎， 加入 6 倍生药量的 60％ (v/v) 的乙醇进行加热回流提 取 3 次， 每次 2 小时 ； 合并提取液， 减压回收溶剂 ； 将得到的浓缩液注入 D101 型大孔吸附树 脂柱， 先用 4 倍量柱体积的纯化水洗脱， 再用 5 倍量柱体积 15％乙醇洗脱， 弃去洗脱液， 然后 用 40％乙醇洗脱， 收集 4 倍量柱体积的洗脱液 ； 浓缩， 干燥， 粉碎， 即得川芎提取物 ；
将上述丹参提取物、 川芎提取物， 按照以下配方制备成口服片剂 ：
丹参提取物 200g
川芎提取物 100g
淀粉 200g0.05％ PVP 乙醇溶液 (30％ ) 适量
硬脂酸镁 30g
取上述比例丹参提取物、 川芎提取物和淀粉混合均匀， 以 0.05 ％ PVP 乙醇溶液 (30％ ) 制软材， 18 目筛制粒， 干燥后整粒， 加入硬脂酸镁， 混匀， 压片。
实施例 2
取丹参药材 20000g， 粉碎， 加入 8 倍生药量的水煎煮 2 次， 第一次 2 小时， 第二 1.5 小时， 合并煎液， 滤过， 减压回收， 将得到的浓缩液注入 HPD100 型大孔吸附树脂柱， 先用 5 倍 量柱体积的纯化水洗脱， 再用 4 倍量柱体积 20％乙醇洗脱， 弃去洗脱液， 然后用 80％醇洗 脱， 收集 6 倍量柱体积的洗脱液 ； 将得到的洗脱液浓缩， 干燥， 粉碎， 即得丹参提取物 ；
取川芎药材 20000g， 粉碎， 加入 8 倍生药量的 80％的乙醇进行加热回流提取 2 次， 每次 2 小时 ； 合并提取液， 减压回收溶剂 ； 将得到的浓缩液注入 D101 型大孔吸附树脂柱， 先 用 8 倍量柱体积的纯化水洗脱， 再用 4 倍量柱体积 10％乙醇洗脱， 弃去洗脱液， 然后用 35％ 乙醇洗脱， 收集 4 倍量柱体积的洗脱液 ； 浓缩， 干燥， 粉碎， 即得川芎提取物。
将上述丹参提取物、 川芎提取物， 按照以下配方制备成胶囊剂 ：
配方 ： 丹参提取物 100g
川芎提取物 200g
微晶纤维素 100g
硬脂酸镁 24g
取上述比例丹参提取物、 川芎提取物、 微晶纤维素和硬脂酸镁混合均匀， 灌装胶 囊。
实施例 3
取丹参药材 2000g， 粉碎， 加入 5 倍生药量的水煎煮 4 次， 第一次 2 小时， 第二、 三 次各 1.5 小时， 第四次各 1 小时， 合并煎液， 滤过， 减压回收， 将得到的浓缩液注入 HP-20 型 大孔吸附树脂柱， 先用 7 倍量柱体积的纯化水洗脱， 再用 8 倍量柱体积 20％乙醇洗脱， 弃去 洗脱液， 然后用 75％乙醇洗脱， 收集 8 倍量柱体积的洗脱液 ； 将得到的洗脱液浓缩， 干燥， 粉 碎， 即得丹参提取物 ；
取川芎药材 2000g， 粉碎， 加入 10 倍生药量的 70％的乙醇进行加热回流提取 3 次， 每次 2 小时 ； 合并提取液， 减压回收溶剂 ； 将得到的浓缩液注入 HP-20 型大孔吸附树脂柱， 先用 4 倍量柱体积的纯化水洗脱， 再用 4 倍量柱体积 20 ％乙醇洗脱， 弃去洗脱液， 然后用 30％乙醇洗脱， 收集 4 倍量柱体积的洗脱液 ； 浓缩， 干燥， 粉碎， 即得川芎提取物。
将上述丹参提取物、 川芎提取物， 按照以下配方制备成注射液 ：
配方 ： 丹参提取物 200g
川芎提取物 200g
注射用水 适量
将丹参提取物和川芎提取物混合后用注射用水稀释至 4000ml， 用稀盐酸调节 PH 值至 3.2， 冷藏， 滤过， 用 10％氢氧化钠溶液调节 PH 至 6.8， 浓缩至 1000ml， 冷藏， 滤过， 再调 节 PH 至 6.8， 煮沸 30 分钟， 加活性炭 0.2％， 稍冷， 滤过， 滤液调 PH 值至 6.8， 加注射用水使 成 1000ml， 灌封， 灭菌， 即得。
本发明的有益效果通过以下试验得到了验证。以下实验例是对本发明方法制备的药物制剂进行的药效学研究。
实验例 1 对大鼠心肌缺血作用的比较
SD 大鼠 30 只， 雄性， 体重 250-350g， 实验动物随机分为 5 组， 空白对照组 ( 等容 量生理盐水 )、 冠心宁注射液组 (0.03ml/kg)， A 组 (18mg/kg)， B 组 (18mg/kg)， C 组 (18mg/ kg)。6 只 / 组， 戊巴比妥纳 (30mg/Kg) 腹腔注射麻醉， 仰卧固定， 气管插管， 连接呼吸机， 潮 气量 1ml， 频率 14 次 /min， 呼吸比 3 ∶ 1。调节生理刻录仪， 右颈总动脉插管， 连接压力转换 器测量动脉收缩压 (SBP) 舒张压 (BDP)。连接肢体导联测定 ECG II， 待稳定后记录各参数 正常值， 左胸部去毛消毒， 沿左锁骨中线， 在第 3 或第 4 肋间开胸， 暴露心脏， 剪开心包， 轻压 右侧胸廓， 微微挤出心脏， 在左心耳下缘距肺动脉圆锥根部约 2mm， 以左冠状静脉为标志， 将 无损缝合针刺入心肌约 0.5mm， 结扎左冠状动脉前降支。 立即将心脏送回胸腔， 胸外按摩， 缝 合胸腔， 待自主呼吸恢复后拔掉呼吸机。静脉注射给药， 在其后 0、 10、 30、 60、 90、 120min 分 别记录各项指标。
左冠状动脉节扎制作大鼠心肌缺血模型， 从大鼠心电图 J 点变化看， 进行组间 t 检 验， 结果表明， 冠心宁注射液和 A、 B、 C 组都具有一定降低 J 点的作用， 与生理盐水组比较均 有显著差异 (P ＜ 0.05 或 P ＜ 0.01)。各组对心肌缺血均有不同程度的保护及恢复作用， A、 B、 C 组比较， 差异不显著 (P ＞ 0.05)， 冠心宁注射液组与 B 组比较差异显著 (P ＜ 0.05)。 说明 A、 B、 C 组的治疗作用均强于冠心宁注射液。结果见表 1。
表 1 各组对冠脉结扎大鼠心电图 J 点变化的影响mV×10-2注： 与生理盐水组比较 ： *P ＜ 0.05， **P ＜ 0.01
实验例 2 对犬急性心肌缺血冠脉流量的影响
健康成年 Beagle 犬， 30 只， 体重 12kg±2kg， 普通级， 雌雄不拘。 随机分为生理盐水 组、 冠心宁注射液组 (0.5ml/kg)， A 组 (， 0.3g/kg)， B 组 (0.3g/kg)， C 组 (0.3g/kg)。麻醉下 结扎犬冠状动脉左前降支造成急性心肌缺血模型。动物称重后以 3％戊巴比妥钠 30mg/kg
静脉麻醉。 固定， 气管插管， 接 DG 电动人工呼吸机， 待开胸后行机械通气， 呼吸频率 16 ～ 18 次 /min， 潮气量 350 ～ 550mL。 分离左侧颈动脉， 插入动脉插管 ( 管内充满 1000U/ml 的肝素 生理盐水 )， 以测量动脉血压。分离颈静脉， 插入静脉插管至冠状静脉窦 ( 管内充满 1000U/ ml 的肝素生理盐水 )， 以备抽血用。分离股静脉， 插管并予以生理盐水补液。监测、 记录心 电图 (ECG) 变化。沿腹部正中线开腹， 分离十二指肠并穿棉线， 以备给药用。沿胸骨左缘第 4 肋间开胸， 暴露心脏， 剪开心包并作心包吊床。分离冠状动脉左旋支， 放置 25mm 内径的电 磁血流量仪探头， 连接于 MFV-3200 电磁血流量仪上， 测量冠脉流量 (CBF)。 以上指标均同步 记录于 RM-6000 八道生理仪。以左冠状动脉前降支第 2 ～ 3 分支间游离冠状动脉， 并在其 下穿 2 根丝线， 备用于二步结扎。首次结扎前 2min， 利多卡因 5mg/kg， 股静脉注射预防心律 失常。在结扎时将一段直径 1mm 的钢丝插入第 1 松结内。完全结扎后 15min 开始记录， 作 为用药前对照值， 经十二指肠给予配制好的等体积实验药物或生理盐水。分别于给药前和 给药后 10、 30、 60、 90、 120min 记录冠脉流量， 计算心肌血流量。
A、 B、 C 组和冠心宁注射液组犬的 CBF 动态曲线下降明显， 均有提高心肌缺血犬心 肌血流量的趋势， A、 B、 C 组和冠心宁注射液组心肌缺血犬的冠脉流量保持平衡， 与冠心宁注 射液组比较， A、 B、 C 组在给药 60min 后呈显著性差异 (P ＜ 0.05)， B 组优于冠心宁注射液 组。结果见表 2。
表 2 各组对急性心肌缺血犬心肌血流量的影响ml(min·100g)注： 与生理盐水组比较 ： ΔP ＜ 0.05
实验例 1、 实验例 2 中的冠心宁注射液组采用的药物为按照 WS3-B-3267-98 制备的 注射液。A 组采用的药物为实施例 1 所制备的片剂。B 组采用的药物为实施例 3 所制备的 注射剂。C 组采用的药物为实施例 3 所制备的胶囊剂。
从上述是试验可以看出， 本发明方法制备的冠心宁药物制剂其疗效优于按照现有 技术制备的冠心宁药物。
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