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释放胃泌素的肽化合物
    相关申请的交叉参考
     本申请要求下述每个申请的权益， 并通过引用将其完整地并入本文 ： 2008 年 2 月 19 日 提 交 的 U.S.S.N.61/054,335 ； 2006 年 2 月 10 日 提 交 的 U.S.S.N.11/352,156， 其是 2005 年 6 月 24 日提交的 U.S.S.N.11/165,721 的部分继续申请， 其是 2004 年 4 月 20 日提 交的 U.S.S.N.10/828,925 的部分继续申请， 其是 2003 年 12 月 24 日提交的国际申请 PCT/ US2003/041328 的部分继续申请， 其是 2003 年 1 月 13 日提交的 U.S.S.N.10/341,577 的部 分继续申请， 所有上述申请在此通过引用被完整地并入本文。
     技术领域 本发明涉及用作诊断显像剂或放射治疗剂的新释放胃泌素的肽 (GRP) 化合物。这 些 GRP 化合物用可通过体内光学成像来检测的放射性核素或标记物进行标记， 并包括在标 记物和靶向肽之间使用的新连接基， 这提供改进的药代动力学。
     本发明也描述了通过使用与 GRP 受体结合的配体观察药物对释放胃泌素的肽 GRP 的作用而监测药物活性的方法， 所述药物在体内和体外靶向于特定受体和受体通路。更具 体地， 本发明提供了通过使用与 GRP 受体结合的可以通过某些外部方法检测的配体测量受 体或若干受体以及它们的相关通路活性的方法， 所述通路显示与 GRP 受体的串流。该方法 包括放射性核素成像、 光学成像或配体在体内或体外分布的其它成像方法。
     背景技术
     已知放射性药剂 ( 例如诊断显像剂、 放射治疗剂 ) 用于检测和治疗癌症的应用。 近 年来， 已发现许多用于癌症检测和 / 或治疗的部位定向放射性药剂， 并这些发现随着药学 专业更好地了解这些化合物的特异性、 效力和效用而继续增加。
     靶向治疗， 其中给予药物以使其与在细胞中或在环绕细胞的基质中的特异性受体 或途径相互作用， 在近年来特别是在癌症领域中已取得了进展。 靶向治疗起源于如下想法 ： 在细胞水平单个或有限数量的机理影响给定病理学， 但是明确的是耐药性的发展表明适应 能力可能由异质性和 / 或基因组的不稳定性所推动。尽管有靶标的存在， 靶向药物失败的 一个可能原因是， 如果靶向系统被扰乱， 存在细胞使用或可以使用的代替的系统， 因此允许 细胞逃避破坏 ( 细胞死亡 )， 从而继续发挥功能和存活。
     在最近几年约 65％的 FDA 批准的新肿瘤药物需要在标签中表明在给予与靶标相 互作用的药物之前在患者中的靶标。尽管存在某些单独的卓越的成就， 总体结果未达到最 佳。例如， 在用 治疗乳腺癌中， 其靶向于 HER2/neu(ERBB2 ； EGFR2 ； 表皮生长 因子受体 (EGFR) 家族的成员 )， 大体存在 9％的应答 (30％具有 HER2/neu， 所处理的 30％ 应答 )。对于转移的结肠癌， 靶向于 EGFR 的爱必妥具有 11-14％的应答， 靶向于 VEGFR 的 具有 10％的应答。 这种变化的来源之一是在相同的患者中在原始转移瘤中和不 同转移瘤之间表型和基因型中已知的异质性。
     该异质性可以在肿瘤块的发展之后很快出现， 因为已知癌症细胞是遗传不稳定的， 它可以作为表型的变化而显现， 所述变化由肿瘤细胞在体内所经历的特定的环境所导 致， 或它可以因为之前的治疗效果而显现。
     大多测定基因型或表型的方法包括取活体组织检查样本或血样。 活体组织检查易 于产生在肿瘤内取样误差， 并面临进一步的限制 ： 由于方法的侵入性， 不易从患者的相同肿 瘤中得到多个样本， 也不易从体内多个肿瘤位置得到多个样本。此外， 难于从某些组织 ( 例 如骨 ) 得到活体组织检查样本。这对于转移至骨的乳腺和前列腺癌是特别相关的。易于 获得例如血液或尿液的多个液体样本， 但是这面临它们仅仅提供整个身体的平均信号的缺 陷。优选能够一次审查身体的所有组织并且能用于多种场合的成像方法。
     虽然通常审查一个或最多少量的感兴趣的靶标的固体样本， 但是可以审查大量分 析物的液体样本， 例如通过基因芯片或蛋白质组学芯片测试。虽然可能出现单个物质的给 药和成像可能弱于复合组合， 但是应该注意到， 使用适当的物质可以允许不仅仅审查靶标， 还允许审查组成靶系统的多种调节和信号传递途径。在最佳情况中， 数据提供靶标以及其 相关的系统的功能读出数据。
     尽管很多靶向药物具有靶标， 使用其在低百分比的患者中有效的靶向药物对于那 些无应答的患者是有害的， 不仅在更好的治疗开始之前浪费时间， 而且由于有毒性效果而 没有益处的可能性。 它也是对健康系统资源的浪费。 例如， 在 2007 年， 某些靶向药物的全球 销售额预期是在 $10-30 亿的范围中。 某些肿瘤药物在 2007 年基于第一季度的销售额 (x4) 是 和 亿。 如果这些药物中的大部分用于不应答的患者， 这代表一个巨大的金融耗竭， 并且对于那 些不应答的患者是浪费时间或潜在不良事件。目前使用例如 WHO 或 RECIST 标准的形态学 标准审查存活的增加测量实体瘤应答。 但是， 在治疗开始之后， 甚至在最佳治疗和应答的最 优条件下， 花费相当多的时间才可观察到这类形态学应答， 在此期间最终非应答者的不适 当的治疗可能仍在持续。
     进一步描述受体、 细胞或一组细胞的应答特征的方法是必需的。 在近几年， 在形态 学应答可检测之前或如果肿瘤形态学没有可预期的变化， 日益增多的使用成像在生物化学 水平描述肿瘤的应答特征。
     实施这类生化成像的最普通的方法是使用 F-18 氟代脱氧葡萄糖， 其报道部分是 糖酵解途径 ( 例如葡萄糖代谢 )。尽管已得到了某些有希望的结果， 却面临降低的特异性， 因为在炎症区域摄取也增加， 所述摄取的增加可以与肿瘤同时发生或独立地发生， 并可以 实际上， 糖酵解也是大部分正常组织产生能量的主要形式。 独立地增加或降低肿瘤糖酵解。 因此正常组织可呈现升高的背景， 这可能使得分离来源于肿瘤组织的信号变得困难。 此外， 炎症部位也显示增加的葡萄糖消耗， 其对于某些炎症性癌症 ( 例如乳腺癌 ) 是特殊的问题。 炎症可能与癌症混淆。 此外， 作为对肿瘤治疗的正常应答而被刺激的炎症， 可能被误认为在 肿瘤中糖酵解的增加， 和因此治疗的失败。 此外糖酵解是大多细胞中基础系统之一， 因此是 大多药物靶标很远的下游。最终， FDG 是产生的回旋加速器， 其可以限制它的有效性。
     一般性质的其它两种方法是那些使用 F-18 氟代胸苷测量细胞增殖和 F-18 氟代胆 碱测量脂质周转的方面的方法。每一个这种技术是非常灵敏的， 但是因为每种方法测量代 谢的某些方面也被正常的细胞所利用， 所述方法面临特异性的降低。
     需要提供和指示药物在能量产生的基础水平的上游的靶标上， 更接近药物靶标的效果的试剂。理想地， 需要从多种途径中的一点提供显示对多种药物 / 靶相互作用的效果 的敏感性信息的试剂。
     一种方法是直接测量所怀疑的靶标。例如将作放射性标记， 在用治疗之前和之后测量在患者中的分布。结果显示不能预见基于心肌摄取水 平的心毒性， 仅仅某些已知肿瘤是成像的， 其它的肿瘤可以被鉴别。 没有尝试预见治疗的应 答。 另一方面， 已显示使用放射性标记 F(ab′ )2 片段的 应答。 在体外测试 EGFR 家族的另一成员， EGFR 用于很多临床试验中选择 EGFR 靶向治疗 的患者， FDA 需要选择用 治疗的患者。 尚不清楚其作为应答的预报器的用途。 大 多 EGFR 研究没有得到表明患者的哪些子集可能从 EGFR- 靶向试剂受益最大的数据。在多 种恶性肿瘤中， EGFR 是不同程度过表达的。正在发展许多 EGFR 表达和突变的新测试， 正在 进行大量临床试验以阐明它们在决定 EGFR- 靶向治疗的患者选择中的作用。
     已经在体内用用于治疗表达该靶标的癌症的抗体的放射性标记衍生物 ( 西妥昔 单抗 C225) 和已知配体、 EGF 或小分子抑制剂检测 EGFR 的表达。尽管在某些实例中， 在 肿瘤组织中放射活性的摄取和由独立方法测得的 EGFR 的存在之间存在良好的相关， 没有 尝试预测应答。实际上， 显示特异性的阻断研究 ( 用药物 ) 在将通过靶标成像的配体阻断 摄取的动物的靶向治疗的给药中使得使用靶标的配体将治疗中涉及的靶标成像的一般问 题变得显著。这可能导致与应答没有关系的信号衰减或消失， 除非在靶标占据和应答之间 存在单一和直接关系。从尽管已知靶标的存在而患者的应答低来看显然可能不是这样的。
     对于每一个受体或靶标使用特异性配体的另一个缺陷是， 已批准了很多对于不同 靶标的靶向药物用于更多在临床试验中的常规使用。 所需的潜在大量的配体将加重发展和 批准进程的负担。此外， 即使可能有很多靶向药物， 每种都具有良好的应答， 但是仅仅在患 者的小子集中， 才可以预期多种组合可能是有益的， 其将再次在一个靶标一种显像剂的情 况下， 需要多个方法评价应答的可能性。
     最后， 在很多靶标中已知的突变的出现暗示靶标的存在是不够的， 并且需要功能 阻断的知识。
     因此需要发展测定靶向药物在其靶标功能上的活性的更通用的方法， 优选可以报 告多于一种靶标 / 药物相互作用的活性的方法和显示来自正常组织的最小干扰的对病理 有特异性的方法。
     在动物系统中治疗的已知通过靶向药物定位的很多受体显示 “串流” 。 “串流” 意指这样一种状态 ： 一种 受体活性的调节影响另一种不直接连接的受体的表达水平或活性。 这种串流不是由密切相 关的酪氨酸激酶 EGFR 和 HER2( 所述 EGFR 和 HER2 当关联配体结合时形成二聚物 ) 的相互作 用所表征的类型， 而是不同类型的受体可以通过细胞内或细胞外途径相互作用的类型。例 如， 已知生长抑素受体的表达水平可以通过雌激素受体的占据和活性来调节。在这种情况 下生长抑素受体是通常位于细胞外膜的 G 蛋白偶联的受体 (GPCR)， 由此起始信号发生， 雌 激素受体通常位于接近于细胞核的位置， 具有细胞核内的活性。雌激素通过核激素受体起 作用， 所述核激素受体在激活后增加激素 - 响应基因的转录和表达。
     研究显示， 在对雌激素的暴露被拮抗剂或部分激动剂阻断之后， 针对于均具有雌 激素和生长抑素受体的两种人乳腺癌细胞系， 每细胞结合的经放射性标记的生长抑素受体
     黏合剂增加。类似增加不存在于具有生长抑素受体而不具有雌激素受体的细胞系中。在开 始抗雌激素治疗之前和之后不久检查了 3 名乳腺癌患者。结果中存在一位患者肿瘤摄取中 的某些降低。
     许多批准的药物直接针对 GPCR， 但是近年来靶向受体酪氨酸激酶 (RTK) 的药物变 得更普通， 并且很多新的癌症药物靶向 RTK。例如， 下列是已知显示串流的 RTK 和某些抑制 它们的作用的批准的药物的部分列表。
     RTK 靶标 药物
     HER2 EGFR EGFR EGFR/HER2 VEGFR2/PDGFR PDGFR EGFR PDGFR/KIT曲妥珠单抗 西妥昔单抗 厄洛替尼 拉帕替尼 索拉非尼 舒尼替尼 吉非替尼 伊马替尼VEGF/VEGFR2 贝伐珠单抗
     由于它们的作用方式， 不预期靶向于 RTK 的药物对 GPCR 具有任何直接作用。
     不广泛分布于正常的成人脑外部组织且已知显示与多种其它受体的串流的一种 受体类型是 GRP 受体家族。在人类中存在 3 种该受体的已知亚型 ： 通过序列相似性鉴别的 BB1(NMBR)、 BB2(GRPR)、 bb3(BRS-3) 和第四个两栖受体 bb4。已经独立证明了在 GRP 受体家 族和诸多 RTK 之间的串流。例如已显示通过激活 TNF-α 转化酶和释放 EGFR 的前体配体之 一双调蛋白， GRP 增 EGFR 的活化。给予 GRP 受体拮抗剂导致 EGF 受体数量的下调。
     在这些和很多其它实施例中， 串流是以 GRPR 至 RTK( 例如 EGFR) 的方向， 即应用 GRPR 激动剂 / 拮抗剂导致 EGFR 信号传导的激活 / 失活。没有获得证明在相反方向， RTK 至 GRPR 的串流的数据， 所述串流可能导致 GRP 受体特异性信号的表达的增加或减少， 所述特 异性信号可能通过体内成像测定。
     靶向 GRP- 受体的放射性药剂
     最近报道了设计为定位在癌性组织中的若干靶向的放射性药剂。 这些较新的放射 性药剂通常由与金属螯合剂连接的靶向剂 (targeting agent) 组成， 它们可以与诊断性金 属放射性核素 ( 如锝、 铟或镓 )， 或者治疗性金属放射性核素 ( 如镥、 钇或铼 ) 螯合 ( 例如 络合 )。金属螯合剂的作用是当放射性药剂递送至目标部位时保留 ( 即螯合 ) 金属放射性 核素。不与金属放射性核素强结合的金属螯合剂将使放射性药剂对其目标应用无效， 因为 金属放射性核素因此不能到达它的目标部位。 因此， 进一步的研发导致发现金属螯合剂， 例 如 Pollak 等人的美国专利 5,662,885 以及 Tweedle 等人的美国专利 6,13,274( 通过引用 将所述文献并入本文 ) 中报道的那些金属螯合剂， 所述螯合剂表现出对金属放射性核素的 强结合亲和力和与靶向剂缀合的能力。因此， 使用 “间隔基” 以在金属螯合剂和靶向剂之间 建立物理分隔的概念被进一步引入， 例如在 Pollak 等人的美国专利 5,976,495 中， 所述文 献在此被引入作为参考。
     靶向剂由于其在体内对某些结合部位的亲和力而起到的作用在于将诊断剂， 例如包含金属放射性核素的放射性药剂定向至检测或治疗的目标部位。典型地， 靶向剂 可以包括表现出对给定受体具有特异性亲和力的蛋白、 肽、 其它大分子或小分子。其它 已知的靶向剂包括单克隆抗体 (MAbs)、 抗体片段 (Fab‘s 和 (Fab)2‘s) 和受体 - 亲和肽 (receptor-avid peptides)。 Donald J.Buchsbaum， “Cancer Therapy with Radiolabeled Antibodies ； Pharmacokinetics of Antibodies and Their Radiolabels ； Experimental Radioimmunotherapy and Methods to Increase Therapeutic Efficacy， ” CRC Press， Boca Raton， Chapter 10， pp.115-140， (1995) ； Fischman 等 人， “A Ticket to Ride ： Peptide Radiopharmaceuticals， ” The Journal of Nuclear Medicine， vol.34， No.12， (Dec.1993)。 这些文献的内容在此被全文引入作为参考。
     近几年来， 已认识到某些癌细胞包含释放胃泌素的肽 (GRP) 受体 (GRP-R)， 其具有 多种亚型。具体而言， 已表明某些类型的癌细胞具有超表达或独特表达的 GRP 受体。由于 这个原因， 已完成许多有关与 GRP 受体家族结合的 GRP 和 GRP 类似物的调查和研究。一种 这样的类似物是铃蟾肽 (BBN)， 一种从蛙皮肤分离的 14 个氨基酸的肽 ( 即十四肽 )， 它类似 于人 GRP， 并以高度特异性与 GRP 受体结合， 并具有类似于 GRP 的亲和力。
     铃蟾肽和 GRP 类似物可以是激动剂或拮抗剂的形式。 GRP 或 BBN 激动剂与 GRP 受体 的结合增加这些癌细胞的细胞分裂速率， 且这些激动剂被细胞内化， 而 GRP 或 BBN 拮抗剂的 结合通常不导致细胞内化或增加细胞分裂速率。这些拮抗剂被设计用于竞争性抑制与 GRP 受体的内源性 GRP 结合， 并减小癌细胞增殖的速率。例如参见 Hoffken， K. ； Peptides in Oncology II， Somatostatin Analogues and Bombesin Antagonists(1993)， pp.87-112。 为此原因， 大量工作已经并正在进行， 意在研发作为拮抗剂的 BBN 或 GRP 类似物。例如 Davis 等人， Metabolic Stability and Tumor Inhibition of Bombesin/GRP Receptor Antagonists， Peptides， vol.13， pp.401-407， 1992。
     在设计用作癌症的诊断或治疗剂的有效化合物中， 药物具有合适的体内靶向和药 代动力学性能是重要的。 例如， 优选放射性药剂、 放射性标记肽被癌细胞高度特异性地摄取 ( 例如通过 GRP 受体 )。此外， 还优选一旦放射性核素定位在癌部位， 则其在那儿保留需要 量的时间以允许成像或为了治疗目的将高度局部化的放射剂量递送至该部位。
     而且， 研发从正常组织有效清除的放射性标记肽对于放射性药剂来说也是一个重 要的因素。如果对动物 ( 例如人 ) 施用用金属放射性核素标记 ( 通过螯合物缀合 ) 的生 物分子 ( 例如 MAb、 Fab 或肽 )， 则大量的金属放射性核素 ( 呈某些化学形式 ) 可能 “截留” 在肾或肝实质中 ( 即没有排泄进入尿或胆汁 )。Duncan 等人， Indium-111-Diethylenetri aminepentaacetic Acid-Octreotide Is Delivered in Vivo to Pancreatic， Tumor Cell， Renal and Hepatocyte Lysosomes， Cancer Research 57， pp.659-671， (Feb.15， 1997)。 对 于较小的放射性标记的生物分子 ( 即肽或 Fab)， 主要的活性清除途径是通过肾， 而肾也可能 保留高水平的放射性金属 ( 即通常＞ 10-15％的注射剂量 )。在肾或肝中保留金属放射性 核素显然是不期望的。 相反， 如果需要较长期的诊断成像或放射治疗高肿瘤摄取， 则通过肾 过快地从血流中清除放射性药剂也是不期望的。
     随后的研究， 例如 Hoffman 等人的美国专利 6,200,546 和 US2002/0054855 的研究 ( 所述文献的内容在此被全文引入作为参考 ) 已尝试通过形成具有通式 X-Y-B 的化合物来 克服这个问题， 其中 X 为能够络合金属的基团， Y 为间隔基上的共价键， 而 B 为结合铃蟾肽激动剂的部分。据报道这些化合物对 GRP 受体具有高结合亲和力， 且其放射性在细胞内长 时间地保持。此外， 正常小鼠的体内研究已表明肾中保留的放射性金属低于本领域中已知 的水平， 大部分的放射性排泄进入尿。
     仍需要可以靶向于 GRP-R 和其亚型， 具有改善的特异性， 并适用于递送诊断部分 ( 例如可检测的标记 ) 和 / 或治疗部分的化合物。
     发明概述
     在本发明的一个实施方案中， 提供用于诊断成像或放射治疗的新的和改进的化合 物。所述化合物包括通过连接基或间隔基与靶向 GRP 受体的肽连接的能够络合药用金属离 子或放射性核素的化学部分 ( 金属螯合剂 )。在另一个实施方案中， 这些化合物包括通过 连接基或间隔基连接到靶向 GRP 受体的肽上的光学标记 (optical label)( 例如光学标记 (photolabel) 或可通过光学成像、 光声成像或光致发光检测的其它标记 )。
     总体而言， 本发明的化合物可以具有下式 ：
     M-N-O-P-G
     其中 M 为金属螯合剂 ( 呈与金属放射性核素络合或不络合的形式 )、 包含例如 18F、 123 124 I-、 I- 或 131I- 的放射性卤素的部分或光学标记， N-O-P 为连接基， 而 G 为靶向 GRP 受体 的肽。 金属螯合剂 M 可以是本领域中已知用于与药用金属离子或放射性核素络合的任 何金属螯合剂。优选的螯合剂包括 DTPA、 DOTA、 DO3A、 HP-DO3A、 EDTA、 TETA、 EHPG、 HBED、 NOTA、 DOTMA、 TETMA、 PDTA、 TTHA、 LICAM、 MECAM、 Aazta 及其衍生物或肽螯合剂， 例如本文讨 论的那些螯合剂。所述金属螯合剂可以与金属放射性核素络合或不络合， 并可以包括任选 存在的间隔基， 如单一氨基酸。 51 67 68
     用于放射成像或放射治疗的优选的金属放射性核素包括 99mTc、 Cr、 Ga、 Ga、 47 51 167 141 111 168 175 140 90 88 153 166 165 166 62 64 67 Sc、 Cr、 Tm、 Ce、 In、 Yb、 Yb、 La、 Y、 Y、 Sm、 Ho、 Dy、 Dy、 Cu、 Cu、 Cu、 97 103 186 188 203 211 212 213 214 225 105 109 117m 149 161 177 Ru、 Ru、 Re、 Re、 Pb、 Bi、 Bi、 Bi、 Bi、 Ac、 Rh、 Pd、 Sn、 Pm、 Tb、 Lu、 198 199 Au 和 Au。 金属的选择根据所需治疗或诊断应用来确定。 例如， 为诊断目的， 优选的放射 64 67 68 99m 111 99m 111 68 性核素包括 Cu、 Ga、 Ga、 Tc 和 In， 特别优选 Tc、 In 和 Ga。 为治疗目的， 优选的放 64 90 105 111 117 149 153 161 166 166 175 177 186/188 射性核素包括 Cu、 Y、 Rh、 In、 mSn、 Pm、 Sm、 Tb、 Dy、 Ho、 Yb、 Lu、 Re 和 199 177 90 Au， 特别优选 Lu 和 Y。用于本发明化合物的优选的螯合剂为 1- 取代的 4， 7， 10- 三羧 甲基 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷三乙酸 (DO3A)。 123 124
     包含例如 18F、 I-、 I- 或 131I- 的放射性标记的卤素的部分优选是描述于 Zhang 等人 J.Nuclear Med.47 ： 492-501(2006) 中的那些之一， 通过引用将其完整地并入本文。
     光学标记 M 可以是本领域中已知的多种光学标记中的任何一种。优选的标记包括 但不限于光学染料， 包括有机发色团或荧光团， 例如花青染料， 吸收光的化合物、 反射和散 射光的化合物以及生物发光分子。
     在一个实施方案中， 连接基 N-O-P 包含至少一个非 α- 氨基酸。
     在另一个实施方案中， 连接基 N-O-P 包含至少一个取代的胆汁酸。
     在另一种实施方案中， 连接基 N-O-P 包含至少一个具有环状基团的非 α- 氨基酸。
     在最优选的实施方案中， M 是金属螯合剂， 并且连接基团 N-O-P 包含至少一个具有 环状基团的非 α 氨基酸。此外， M 可以与放射性或顺磁性金属络合。在一个更优选的实施
     方案中， M-N-O-P-G 是描述于本文的 L70 或 AMBA。在一个特别优选的实施方案中， L70 或 177 177 177 AMBA 与 Lu 络合 ( Lu-AMBA 或 Lu-L70)， 或与通过正电子发射断层摄影术 (PET) 可测定 68 68 的放射性核素， 例如 Ga 络合 ( Ga-AMBA 或 68Ga-L70)。
     所述靶向 GRP 受体的肽可以是 GRP、 铃蟾肽或其任何衍生物或类似物。 在一个优选 的实施方案中， 靶向 GRP 受体的肽为用作激动剂的 GRP 或铃蟾肽类似物。在一个特别优选 的实施方案中， 靶向 GRP 受体的肽为在美国专利 6,200,546 和 US 2002/0054855 中公开的 结合铃蟾肽激动剂的部分， 所述文献在此被引入作为参考。
     也提供了使用本发明化合物的新成像方法。在一个优选的实施方案中， 将 PET 用 于 GRP-R 在组织， 特别是具有 GRP-R 的癌组织中的成像。在一个更优选的实施方案中， 将 68 68 Ga-AMBA 或 Ga-L70 用于 GRP-R 在人体内组织的成像。
     在本发明的一个例示性实施方案中， 提供一种包含制备本发明的诊断剂或治疗剂 所需的所有组分的单瓶或多瓶试剂盒。
     还提供一种用于制备诊断显像剂的新方法， 所述方法包括如下步骤 ： 向可注射成 像介质中加入包含本发明化合物的物质。
     还提供一种使用本发明的化合物进行放射治疗的新方法， 所述方法用于治疗或延 缓涉及 GRP 受体过表达的病症的进展， 所述病症例如癌症， 所述癌症例如乳腺癌和前列腺 癌。 还提供了一种用于制备放射治疗剂的新方法， 所述方法包括如下步骤 ： 向可注射治疗介 质中加入包含本发明化合物的物质。 在优选的实施方案中， 在上述方法中使用 177Lu-AMBA 或 Lu-L70。
     提供了改进的施用本发明的标记化合物的方法， 作为通过本发明的标记化合物增 加表达 GRP 的靶组织的靶向性的方法。
     本发明人出人意料地发现， 通过某些 RTK 或雌激素受体的配体或拮抗剂 ( 包括例 如靶向于这类受体的癌症药物 ) 调节所述 RTK 或雌激素受体的活性， 影响 GPCR 的活性， 特 别是受体的 GRP 家族的活性。 因此通过 GRP 受体成像 ( 或其它测定 GRP 受体中变化的方法 ) 测定该活性能够间接评价受定向于这些 RTK 或雌激素受体的治疗干预影响的 RTK 或雌激素 受体的活性。因此， 本发明提供检测与 GRP 受体的串流， 特别是在 RTK 或 “其它靶” 至 GRPR 方向的串流的方法， 所述方法用于表达 GRPR( 原发和转移瘤 ) 的广谱人实体瘤， 所述肿瘤包 括， 但是不限于乳腺癌和前列腺癌。特别地， 通过与上述受体串流的 GRP 受体的特异性信号 的表达变化测定所述效果， 评价采用众多类型治疗剂中的任一种的治疗剂对这类受体 ( 例 如 RTK 受体或雌激素受体 ) 功能的效果， 所述治疗剂靶向 RTK 受体或雌激素受体 ( 例如 RTK 抑制剂、 雌激素抑制剂 )， 在正常的临床状况 ( 剂量和时间表 ) 下给药。本发明提供了通过 在体内 GRP 受体特异性信号活性增加、 减少或不变预期治疗反应的功能性指证。在一个优 选的实施方案中， 本发明靶向 GRP-R 的化合物与可通过例如 SPECT 或 PET 测定的诊断放射 性核素络合， 其用于监测 GRP 受体 ( 或 M 是包括放射性卤素的结构部分， 其可以被测定以监 68 测 GRP-R 反应 ) 中的变化。在一个特别优选的实施方案中， 给予 Ga-AMBA 或 68Ga-L70 并使 其成像以测定在体内 GRP-R 信号活性的变化。
     本发明也提供了， 在体外使用 GRP 受体的放射性标记或其它可测定的标记的激动 剂或拮抗剂， 针对 GRP 受体家族的活性变化筛选新药的方法。在一个优选的实施方案中， 本 发明靶向 GRP-R 的化合物与可通过例如 SPECT 或 PET( 或 M 是包括放射性卤素的结构部分，11其可以被测定以监测 GRP-R 响应 ) 测定的诊断性放射性核素络合。在一个特别优选的实施 方案中， 给予 68Ga-AMBA 或 68Ga-L70 并使其成像以测定体内 GRP-R 信号活性的变化。本发明 也提供了， 使用 GRP 受体的放射性标记激动剂或拮抗剂将 GRP 受体家族在体内的活性成像 以监测靶向与 GRP-R 串流的受体的药物的治疗效果的方法。在一个优选的实施方案中， 本 发明的放射性标记靶向 GRP-R 的化合物与可通过例如 SPECT 或 PET( 或 M 是包括放射性卤 素的结构部分， 其可以被测定以监测 GRP-R 反应 ) 测定的诊断性放射性核素络合。在一个 特别优选的实施方案中给予 68Ga-AMBA 或 68Ga-L70 并使其成像以测定体内 GRP-R 信号活性 的变化。
     附图的简要说明
     图 1A 是实施例 I 所述的由 A( 甲基 -(3β， 5β)-3- 氨基胆烷 -24- 酸酯 ) 和 B((3β， 5β)-3- 氨基胆烷 -24- 酸 ) 合成中间产物 C((3β， 5β)-3-(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基胆 烷 -24- 酸 ) 的一系列化学反应的图示。
     图 1B 是实施例 I 所述的合成 N-[(3β， 5β)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 胆烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰 基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋 氨酰胺 (L62) 的连串反应的图示。 图 2A 是实施例 II 所述的合成 N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮 杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L70) 的连串反应的图示。
     图 2B 是实施例 II 所述合成 N-[4-[2-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮 杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙氧基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L73)、 N-[3-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨 酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L115) 和 N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯基乙酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L116) 的连串反应的总图示。
     图 2C 是在实施例 II 所述合成 N-[4-[2-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙氧基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L73) 的图 2B 的合成反应中所用的连接基的化学结构。
     图 2D 是在实施例 II 所述合成 N-[3-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙 氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L115) 的图 2B 的合成反应中所用的连接基的化学结构。
     图 2E 是在实施例 II 所述合成 N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮 杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯基乙酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰
     基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L116) 的图 2B 的合成反应中所用的连接基的化学结构。
     图 2F 是实施例 II 所述的合成 N-[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 甘氨酰基 -4- 哌啶羰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨 酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L74) 的连串反应 的图示。
     图 3A 是实施例 III 所述的合成中间产物 (3β， 5β)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸 (C) 的一系列化学反应的图示。
     图 3B 是实施例 III 所述的合成 N-[(3β， 5β)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十 二 烷 -1- 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 ]-12， 24- 二 氧 代 胆 烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L67) 的连串反应的图示。
     图 3C 是实施例 III 所述的 (3β， 5β)-3- 氨基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸 (B) 的化学 结构。
     图 3D 是实施例 III 所述的 (3β， 5β)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸 (C) 的化学结构。
     图 3E 是 实 施 例 III 所 述 的 N-[(3β， 5β)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十 二 烷 -1- 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 ]-12， 24- 二 氧 代 胆 烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L67) 的化学结构。
     图 4A 是 实 施 例 IV 所 述 的 获 得 中 间 产 物 (3β， 5β， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基 甲 氧 基 ) 氨 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 -12- 羟 基 胆 烷 -24- 酸 (3a) 和 (3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 (3b) 的反应流程的图示。
     图 4B 是 实 施 例 IV 所 述 的 合 成 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-12- 羟基 -24- 氧代 胆烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L63) 的连串反应的图示。
     图 4C 是实施例 IV 所述的合成 N-[(3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-7， 12- 二羟 基 -24- 氧代胆烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘 氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L64) 的连串反应的图示。
     图 4D 是 实 施 例 IV 所 述 的 (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 (2b) 的化学结构。
     图 4E 是实施例 IV 所述的 (3β， 5β， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基 ] 乙 酰基 ] 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 (3a) 的化学结构 ；
     图 4F 是实施例 IV 所述的 (3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨 基 ] 乙酰基 ] 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 (3b) 的化学结构。
     图 4G 是实施例 IV 所述的 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1，4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-12- 羟基 -24- 氧代胆 烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L63) 的化学结构。
     图 4H 是 实 施 例 IV 所 述 的 N-[(3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十 二 烷 -1- 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 ]-7， 12- 二 羟 基 -24- 氧代胆烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘 氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L64) 的化学结构。
     图 5A 是实施例 V 所述的合成 4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙 氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L71) 和反 式 -4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 环己基羰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L72) 的连串反应的一般图示， 其中连接基分别来自图 5B 和 5C。
     图 5B 是用于图 5A 所示和实施例 V 所述的化合物 L71 的连接基的化学结构。
     图 5C 是用于如图 5A 所示和实施例 V 所述的化合物 L72 的连接基的化学结构。
     图 5D 是实施例 V 所述的用铃蟾肽 [7-14](B) 官能化的 Rink 酰胺树脂的化学结构。
     图 5E 是实施例 V 所述的反式 -4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 环己烷甲酸 (D) 的化学结构。
     图 6A 是实施例 VI 所述的合成中间产物连接基 2-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯甲酸 (E) 的反应流程的图示。
     图 6B 是如实施例 VI 所述的合成中间产物连接基 4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰 基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 硝基苯甲酸 (H) 的反应流程的图示。
     图 6C 是实施例 VI 所述的合成 N-[2-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙 氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L75) 的图示。
     图 6D 是实施例 VI 所述的合成 N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 硝基苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L76) 的图示。
     图 7A 是实施例 VII 所述的合成中间产物连接基 [4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ] 羰 基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯氧基 ] 乙酸 (E) 的反应流程的图示。
     图 7B 是实施例 VII 所述的合成 N-[[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯氧基 ] 乙酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L124) 的图示。
     图 7C 是实施例 VII 所述的 N-[[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯氧基 ] 乙酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L124)的化学结构。
     图 8A 是实施例 VIII 所述的合成中间产物 4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨 基 ] 甲基 ]-3- 甲氧基苯甲酸 (E) 的反应流程的图示。
     图 8B 是实施例 VIII 所述的合成 N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮 杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 甲氧基苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L125) 的图示。
     图 8C 是实施例 VIII 所述的 N-[[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 甲氧基苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L125) 的化学结构。
     图 9A 是实施例 IX 所述的合成 3-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基苯甲酸 (B) 的反应的图示。
     图 9B 是实施例 IX 所述的合成 6-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基萘甲酸 (C) 的反应的图示。 图 9C 是实施例 IX 所述的合成 4-[[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 甲基氨基 ] 苯甲酸 (D) 的反应的图示。
     图 9D 是实施例 IX 所述的合成 N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮 杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯基乙酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L146)、 N-[3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰 基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L233)、 N-[6-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 萘甲酰基 ]-L- 谷 氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨 酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L234) 和 N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二 烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 甲基氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L235) 的反应的图示。
     图 10A 是实施例 X 所述的合成 7-[[ 双 (1， 1- 二甲基乙氧基 ) 氧膦基 ] 甲基 ]-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 10- 三乙酸 4， 10- 双 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯 H 的反应的图 示。
     图 10B 是实施例 X 所述的合成 N-[4-[[[[[4， 10- 双 ( 羧甲基 )-7-( 二羟基氧膦基 ) 甲基 -1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷 氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰 基 -L- 蛋氨酰胺 (L237) 的反应的图示。
     图 11A 是实施例 XI 所述的合成 N， N- 二甲基甘氨酰基 -L- 丝氨酰基 -[S-[( 乙酰基 氨基 ) 甲基 ]]-L- 半胱氨酰基 - 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L238)
     的反应的图示。
     图 11B 是实施例 XI 所述的合成 N， N- 二甲基甘氨酰基 -L- 丝氨酰基 -[S-[( 乙酰 基氨基 ) 甲基 ]]-L- 半胱氨酰基 - 甘氨酰基 -(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟 基 -24- 氧代胆烷 -24- 基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘 氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L239) 的反应的图示。
     图 12A 是实施例 XII 所述的合成 4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基 -3- 甲氧基苯甲酸 (A) 的反应的图示。
     图 12B 是实施例 XII 所述的合成 4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基 -3- 氯苯甲酸 (D) 的反应的图示。
     图 12C 是实施例 XII 所述的合成 4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基 -3- 甲基苯甲酸 (E) 的反应的图示。
     图 12D 是实施例 XII 所述的 N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 甘氨酰基 ] 氨基 ]-3- 甲氧基苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L240) 的化学结构。 图 12E 是实施例 XII 所述的化合物 N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 甘氨酰基 ] 氨基 ]3- 氯苯甲酰基 ]L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L241) 的化学结构。
     图 12F 是实施例 XII 所述的 N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 甘氨酰基 ] 氨基 ]3- 甲基苯甲酰基 ]L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨 酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 - 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L242) 的化学结构。
     图 13A 是实施例 XIII 所述的合成 4-[N， N’ - 双 [2-[(9-H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰 基 ] 氨基乙基 ] 氨基 ]-4- 氧代丁酸 (D) 的反应的图示。
     图 13B 是实施例 XIII 所述的合成 N-[4-[[4-[ 双 [2-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙基 ] 氨基 -1， 4- 二氧代丁基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L244) 的反应的图示。
     图 13C 是实施例 XIII 所述的化合物 L244 的化学结构。
     图 14A 和图 14B 是实施例 XLIII 所述的结合和竞争曲线的图示。
     图 15A 是实施例 LV 所述的放射治疗实验结果的图示。
     图 15B 是实施例 LV 所述的其它放射治疗实验结果的图示。
     图 16 是 N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙 酰基 ] 甘氨酰基 ] 氨基 ]-L- 赖氨酰基 -(3， 6， 9)- 三氧杂十一烷 -1， 11- 二甲酸 -3， 7- 二脱 氧 -3- 氨基胆酸 ]-L- 精氨酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰 基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L65) 的化学结构。
     图 17 是 N-[2-S-[[[[[12α- 羟基 -17α-(1- 甲基 -3- 羧基丙基 ) 本胆烷 -3β- 氨 基甲酰基甲氧基乙氧基乙氧基乙酰基 ]- 氨基 -6-[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮
     杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 己酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L66) 的化学结构。
     图 18A 是 N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰 基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L70) 的化学结构。
     图 18B 是 N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十 二 烷 -1- 基 ]-3- 羧基丙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L114) 的化学结构。
     图 18C 是 N-[4-[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ]-2- 羟 基 -3- 丙氧基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘 氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L144) 的化学结构。
     图 18D 是 N-[(3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙氧基乙氧基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-7， 12- 二羟基胆 烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L69) 的化学结构。
     图 18E 是 N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯基乙酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰 基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L146) 的化学结构。
     图 19 公开了可以用于制备如实施例 LVI 所述的化合物 L64 和 L70 的中间产物的 化学结构。
     图 20 是实施例 LVI 所述的利用分段偶联制备 L64 的图示。
     图 21 是制备 (1R)-1-( 双 {2-[ 双 ( 羧甲基 ) 氨基 ] 乙基 } 氨基 ) 丙烷 -3- 甲 酸 -1- 羧基 - 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰 基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L201) 的图示。
     图 22A 是用于制备 L202 的化学中间产物的化学结构的图示。
     图 22B 是制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-4- 肼基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰 基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋 氨酰胺 (L202) 的图示。
     图 23A 是用于制备 L203 的化学中间产物的化学结构的图示。
     图 23B 是制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙 氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L203) 的图示。
     图 24 是制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-4- 氨基苯甲酰基 - 甘氨酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L204) 的图示。图 25 是制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-4- 氨基苯甲酰基 - 甘氨酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L205) 的图示。
     图 26A 是用于制备 L206 的化学中间产物的化学结构的图示。
     图 26B 是制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-[4’ - 氨基 -2’ - 甲基联苯 -4- 羧 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰 基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L206) 的图示。
     图 27A 是用于制备 L207 的化学中间产物的化学结构的图示。
     图 27B 是制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-[3’ - 氨基 - 联苯 -3- 羧基 ]-L- 谷 氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰 基 -L- 蛋氨酰胺 (L207) 的图示。
     图 28 是 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-[1， 2- 二氨基乙基 - 对苯二甲酰 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰 基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L208) 的图示。
     图 29A 是用于制备 L209 的化学中间产物的化学结构的图示。
     图 29B 是制备 L209 的图示。
     图 30A 是用于制备 L210 的化学中间产物的化学结构的图示。
     图 30B 是 L210 的化学结构。
     图 31 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 - 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰 基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋 氨酰胺 L211 的化学结构。
     图 32 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L212 的化学结构。
     图 33 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨 酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -1- 蛋氨酸羧酸酯 L213 的化学结构。
     图 34 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -D- 苯丙氨酰基 -L- 谷氨酰胺 酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋 氨酰胺 L214 的化学结构。
     图 35 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 精氨 酰基 -L- 亮氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 天冬酰胺酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨 酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L215 的化学结构。
     图 36 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 - 精氨酰 基 -L- 酪氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 天冬酰胺酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰 基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L216 的化学结构。
     图 37 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 赖氨 酰基 -L- 酪氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰 基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L217 的化学结构。
     图 38 是 L218 的化学结构。
     图 39 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -D- 苯丙氨酰基 -L- 谷氨酰胺 酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 - 氨 基戊基 L219 的化学结构。
     图 40 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丝氨酰基 -L- 缬氨酰基 -D- 丙氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L220 的化学结构。
     图 41 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -D- 苯丙氨酰基 -L- 谷氨酰胺 酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 亮 氨酰胺 L221 的化学结构。
     图 42 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -D- 酪氨酰基 -L- 谷氨酰胺 酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 -β 丙氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 苯丙氨酰 基 -L- 正亮氨酰胺 L222 的化学结构。
     图 43 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 谷氨酰 胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 -β 丙氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 苯丙氨酰 基 -L- 正亮氨酰胺 L223 的化学结构。
     图 44 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨 酰基 -L- 丙氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 亮氨酰胺 L224 的化学结 构。
     图 45 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 丝氨酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L225的化学结构。
     图 46 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 组氨酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L226 的化学结构。
     图 47 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 丝氨酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L227 的化学结构。
     图 48 是 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L228 的化学结构。
     图 49A 是如实施例 LVII 所述合成 (3β， 5β， 7α， 12α)-3-(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 (B) 的反应的图示。
     图 49B 是 如 实 施 例 LVII 所 述 合 成 N-[3β， 5β， 7α， 12α]-3-[[[2-[2-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙氧基 ] 乙氧基 ] 乙 酰基 ] 氨基 ]-7， 12- 二羟基 -24- 氧代胆烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙 氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L69) 的反应的 图示。
     图 50 是如实施例 LVIII 所述合成 N-[4-[2- 羟基 -3-[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 丙氧基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙 氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L144) 的反应 的图示。
     图 51 是 L300 的化学结构。
     图 52 是 L301 的化学结构。
     图 53 是如实施例 LXII 所述制备 L500 的图示。
     图 54 是如实施例 LXIII 所述制备 L501 的图示。
     图 55 是对照组与 177Lu-AMBA(177Lu-L70) 处理一段时间的小鼠出现瘀斑的图示。
     图 56 是测定对照组与 177Lu-AMBA(177Lu-L70) 处理一段时间的小鼠出现瘀斑的试 验中对照组小鼠的图片。
     图 57 是测定对照组与 177Lu-AMBA(177Lu-L70) 处理一段时间的小鼠出现瘀斑的试 验中试验组小鼠的图片。
     图 58 是 GRP 受体串流路径的图表。
     图 59 显示通过 68Ga-AMBA 进行癌症的靶向和成像。
     申请中使用的缩写词
     下面是用于本发明实施例的化学治疗剂的列表， 涉及串流的靶标、 已批准的化学 治疗剂适用癌症的类型以及适用的临床试验的部分列表 ：
     ●他莫昔芬 (4OH-TAM) ： 抑制雌激素结合 ( 雌激素受体调节剂 -SERM) ； 批准用于 乳腺癌的治疗 ； 在临床试验中用于前列腺癌、 卵巢癌、 骨癌、 肝癌和晚期实体瘤。
     ●吉非替尼 ： 激酶抑制剂 ： EGFR ； 抑制细胞内酪氨酸激酶的磷酸化 ； 批准用于非小 细胞肺癌 (NSCLC) ； 在临床试验中用于乳腺癌、 前列腺癌、 卵巢癌、 食管癌、 脑癌、 肝癌和肾 癌。
     ●达沙替尼 ： Src 家族激酶抑制剂 ； 批准用于 CML ； 在临床试验中用于乳腺癌、 前列 腺癌、 脑癌、 肝癌、 肺癌和结肠直肠癌。
     ●拉帕替尼 ： 双重激酶抑制剂 ： EGFR 和 HER2/ErbB2( 和 ErbB3) ； 批准用于乳腺癌 ； 在临床试验中用于前列腺癌、 卵巢癌、 结肠直肠癌、 脑癌， 以及晚期实体瘤。
     ●伊马替尼 ： 多激酶抑制剂 ： Bcr-Abl 酪 氨 酸 激 酶 ； 也 抑 制 PDGF、 干细胞因子 (SCF) 和 Kit， 并且抑制 PDGF- 和 SCF- 介导的细胞事件 (cellular event) ； 批准用于 CML 和 胃肠基质瘤 (GIST) ； 在临床试验中用于乳腺癌、 卵巢癌和前列腺癌。
     ●厄洛替尼 ： 激酶抑制剂 ： EGFR ； 批准用于 NSCLC 和胰腺癌 ； 在临床试验中用于 HER2 阴性的乳腺癌、 前列腺癌、 食管癌、 结肠直肠癌和脑癌。
     ●索拉非尼 ： 多激酶抑制剂 ： PDGFRba/VEGFR1， 2， 3/KIT， FLT3/EGF/Ras/Raf 激酶 ； 批准用于肝细胞癌 (HCC) 和肾细胞癌 (RCC) ； 在临床试验中用于乳腺癌、 前列腺癌、 脑癌和 晚期实体瘤。
     ●舒尼替尼 ： 多激酶抑制剂 ： EGFR、 HER2， ErbB3 ； PDGFα 和 β ； 干细胞因子受体 (KIT) ； FLT3 ； CSF-1R ； 嗜神经因子受体 (RET) ； 批准用于 RCC 和 GIST ； 在临床试验中用于乳 腺癌、 前列腺癌、 脑癌、 结肠直肠癌和晚期实体瘤。
     ●阿那曲唑 ： 芳化酶抑制剂， 阻断雌激素 / 雌二醇 ( 例如肿瘤产生的雌激素 ) 的产 生； 批准用于乳腺癌 ； 在临床试验中用于卵巢癌和晚期乳腺癌。
     ●硼替佐米 ： 蛋白酶体抑制剂 ； 阻断泛素途径， 导致程序性细胞死亡 ； 批准用于 多种骨髓瘤 ； 在临床试验中用于乳腺癌、 前列腺癌、 子宫颈癌、 卵巢癌、 脑癌、 结肠直肠癌、 NSCLC 和晚期实体瘤。
     发明详述
     在以下说明书中， 将进一步详细描述本发明的各方面。 为了进行解释， 给出了特定 的结构构型和细节以使本发明被全面理解。但是， 本领域技术人员还可以明显看出可以在 不采用特定细节的情况下实施本发明。 而且， 可以省略或简化已知的特征， 其目的在于不使 本发明不明确。
     在本发明的一个实施方案中， 提供用于诊断成像或放射治疗的新的和改进的化合 物。所述化合物包括通过连接基或间隔基连接到靶向 GRP 受体的肽上的光学标记或能够络 合药用金属离子或放射性核素的化学部分 ( 金属螯合剂 )。
     一般地， 本发明的化合物可具有下式 ：
     M-N-O-P-G
     其中 M 为金属螯合剂 ( 呈与金属放射性核素络合或不络合的形式 )、 光学标记或包 18 123 124 131 含放射性标记的卤素 ( 例如 F、 I-、 I- 或 I-) 的结构部分。N-O-P 为连接基， 而G为 靶向 GRP 受体的肽。在以下讨论中描述各金属螯合剂、 光学标记、 连接基和靶向 GRP 受体的 肽。
     在本发明最优选的实施方案中， M 是金属螯合剂， 连接基 N-O-P 包含至少一个具有 环状基团的非 α 氨基酸。在另一个优选的实施方案中， M 是本文式 8 的金属螯合剂 ( 优选 Aazta 螯合剂或其衍生物 )， 连接基 N-O-P 包含至少一个具有环状基团的非 α 氨基酸。在 一个更优选的实施方案中， M-N-O-P-Q 是本文描述的 L70 或 AMBA。在一个特别优选的实施 177 方案中， L70 或 AMBA 与 Lu 络合 (177Lu-AMBA 或 177Lu-L70)， 或与可通过正电子发射断层摄 68 68 影术 (PET) 测定的放射性核素 ( 例如 Ga) 络合 ( Ga-AMBA 或 68Ga-L70)。
     在本发明的另一实施方案中， 提供一种能够将光学标记或金属螯合剂连接到靶向 GRP 受体的肽上的新的和改进的连接基或间隔基。一般地， 本发明的连接基可以具有以下 式：
     N-O-P
     其中 N、 O 和 P 中的每一个在整个说明书中定义。
     发现符合本文定义的标准的化合物与本领域中已知的其它靶向 GRP 受体的肽缀 合物相比具有改进的药代动力学性能。例如， 包含本发明的连接基的化合物在血流中保留 更长时间， 并因此具有比先前已知的化合物更长的半衰期。较长的半衰期在医药上是有益 的， 因为它允许更好的肿瘤靶向， 从而用于诊断成像， 特别是用于治疗应用， 其中癌细胞和 肿瘤接收更大量的放射性标记的肽。此外， 本发明化合物具有比现有技术的化合物改进的 组织受体特异性。
     此外， 本发明包括增加本发明的标记化合物至表达 GRP 受体的靶组织的靶向性的 方法， 包括在本发明的标记化合物给药之前或期间给予适当量的靶向 GRP 受体的肽或缀合 物。类似地， 本发明包括本发明标记化合物的改进的给药方法， 其中最优选靶向肿瘤， 包括 在本发明的标记化合物给药之前或期间给予适当量的靶向 GRP 受体的肽或缀合物。已经发 现这类之前或共同给药使非靶向 GRP- 受体饱和， 降低它们靶与 GRP 受体竞争 ( 例如， 肿瘤 ) 组织的能力。
     本发明也提供了检测与 GRP 受体的串流， 特别是在 RTK 或 “其它靶” 至 GRPR 方向 的串流的方法， 用于表达 GRPR 的人广谱实体瘤 ( 原发瘤和转移瘤 )， 所述实体瘤包括， 但是不限于乳腺癌和前列腺癌。特别地， 本发明能够评价， 用靶向于 RTK 受体或雌激素受体 ( 例 如 RTK 抑制剂、 雌激素抑制剂 ) 的治疗剂的众多类型中的任一种的治疗在正常的临床状况 ( 剂量和时间表 ) 下给药时， 可以对这类受体 ( 例如 RTK 受体或雌激素受体 ) 具有的功能的 效果， 如通过在 GRP 受体显示串流的特异性信号的表达的变化所测定。本发明提供了通过 在体内 GRP 受体特异性信号的活性增加、 减少或不变预期的治疗反应的功能性指证。本发 明也提供了在体外使用 GRP 受体的放射性标记或通过其它方式可测定的标记的激动剂或 拮抗剂， 针对 GRP 受体家族活性变化， 筛选新药的方法。本发明也提供了在体内使用 GRP 受 体的放射性标记激动剂或拮抗剂将 GRP 受体家族的活性成像的方法。特别地， 本发明构思 了如 US 7,226,577( 通过引用将其并入本文 ) 所描述的放射性标记铃蟾肽类似物的用途， 以得到体内成像 (PET 和 / 或 SPECT) 以改善患者管理。
     1A. 金属螯合剂
     术语 “金属螯合剂” 指与金属原子形成络合物的分子， 其中该络合物在生理条件下 是稳定的。也就是说， 该金属将在体内与螯合剂主链保持络合。更具体地， 金属螯合剂是与 放射性核素金属络合而形成在生理条件下稳定的金属络合物的分子， 并且其还具有至少一 个用于与连接基 N-O-P 缀合的反应官能团。该金属螯合剂 M 可以是本领域中已知用于络合 药用金属离子或放射性核素的任何金属螯合剂。 该金属螯合剂可以与金属放射性核素络合 或不络合。而且， 该金属螯合剂可以包括任选的间隔基， 例如单一的氨基酸 ( 例如 Gly)， 其 不与金属络合， 但在金属螯合剂和连接基之间存在物理分隔。
     本 发 明 的 金 属 螯 合 剂 可 以 包 括， 例 如， 线 性、 大 环、 三 联 吡 啶 和 N3S、 N2S2 或 N4 螯 合 剂 ( 还 参 见 U.S.5,367,080、 U.S.5,364,613、 U.S.5,021,556、 U.S.5,075,099、 U.S.5,886,142， 所述文献的内容在此被全文引入作为参考 ) 和本领域中已知的其它螯 合剂， 包括但不限于 HYNIC、 DTPA、 EDTA、 DOTA、 TETA 和双氨基双硫醇 (BAT) 螯合剂 ( 还 参 见 U.S.5,720,934)。 例 如 在 美 国 专 利 6,143,274、 6,093,382、 5,608,110、 5,665,329、 5,656,254 和 5,688,487 中描述了 N4 螯合剂， 所述文献的内容在此被全文引入作为参考。 在 PCT/CA94/00395， PCT/CA94/00479、 PCT/CA95/00249 和美国专利 5,662,885、 5,976,495 和 5,780,006 中描述了某些 N3S 螯合剂， 所述文献的内容在此被全文引入作为参考。该螯合剂 还可以包括螯合配体巯基 - 乙酰基 - 甘氨酰基 - 甘氨酰基 - 甘氨酸 (MAG3) 的衍生物， 它包 含 N3S， 以及 N2S2 系统， 例如 MAMA( 一酰胺单胺二硫醇 )、 DADS(N2S 二胺二硫醇 )、 CODADS 等。 这些配体系统和多种其它配体在 Liu 和 Edwards， Chem Rev.1999， 99， 2235-2268 及其参考 资料中作了描述， 所述文献的内容在此被全文引入作为参考。
     该金属螯合剂还可以包括含有不以四配位基排列供给金属的配体原子的络合物。 这些金属螯合剂包括锝和铼二肟的硼酸加合物， 例如在美国专利 5,183,653、 5,387,409 和 5,118,797 中所述的那些， 所述文献的内容在此被全文引入作为参考。
     优选的螯合剂的实例包括但不限于二亚乙基三胺五乙酸 (DTPA)、 1， 4， 7， 10- 四氮 杂环十四烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸 (DOTA)、 1- 取代的 1， 4， 7- 三羧甲基 1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二烷三乙酸 (DO3A)、 乙二胺四乙酸 (EDTA)、 4- 羰基甲基 -10- 膦酰基甲基 -1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1， 7- 二乙酸 (Cm4pm10d2a) ； 和 1， 4， 8， 11- 四氮杂环十四烷 -1， 4， 8， 11- 四 乙酸 (TETA)。其它螯合配体为亚乙基双 -(2- 羟基 - 苯基甘氨酸 )(EHPG) 及其衍生物， 包括 5-Cl-EHPG、 5-Br-EHPG、 5-Me-EHPG、 5-t-Bu-EHPG 和 5-sec-Bu-EHPG ； 苯并二亚乙基三胺五乙酸 ( 苯并 -DTPA) 及其衍生物， 包括二苯并 -DTPA、 苯基 -DTPA、 二苯基 -DTPA、 苄基 -DTPA 和二苄基 -DTPA ； 双 -2( 羟基苄基 )- 亚乙基 - 二胺二乙酸 (HBED) 及其衍生物 ； 包含至少 3 个碳原子， 更优选至少 6 个碳原子和至少 2 个杂原子 (O 和 / 或 N) 的大环化合物类， 所述大 环化合物可以由 1 个环， 或者在杂环元素处结合在一起的 2 或 3 个环组成， 例如苯并 -DOTA、 二苯并 -DOTA 和苯并 -NOTA， 其中 NOTA 为 1， 4， 7- 三氮杂环壬烷 N， N ′， N ″ - 三乙酸， 苯 并 -TETA、 苯并 -DOTMA， 其中 DOTMA 为 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十四烷 -1， 4， 7， 10- 四 ( 甲基四乙 酸 )， 和苯并 -TETMA， 其中 TETMA 为 1， 4， 8， 11- 四氮杂环十四烷 -1， 4， 8， 11-( 甲基四乙酸 ) ； 1， 3- 丙二胺四乙酸 (PDTA) 和三亚乙基四胺六乙酸 (TTHA) 的衍生物 ； 1， 5， 10-N， N′， N″ 三 (2， 3- 二羟基苯甲酰基 )- 三儿茶酸酯 (catecholate)(LICAM) 和 1， 3， 5-N， N′， N″ - 三 (2， 3- 二羟基苯甲酰基 ) 氨基甲基苯 (MECAM) 的衍生物。其它优选的螯合剂包括 Aazta 及 其包括 CyAazta 的衍生物。本发明考虑的代表性螯合剂和螯合基的实例公开在以下文献 中： WO98/18496、 WO 86/06605、 WO 91/03200、 WO 95/28179、 WO 96/23526、 WO 97/36619、 PCT/US98/01473、 PCT/US98/20182 和 U.S.4,899,755、 U.S.5,474,756、 U.S.5,846,519 和 U.S.6,143,274， 所述各文献在此被全文引入作为参考。
     特别优选的金属螯合剂包括以下所述的式 1、 2、 3 和 8 的金属螯合剂 ( 用于 111In 90 153 68 和放射性镧系， 例如 177Lu、 Y、 Sm、 Ga 和 166Ho) 和式 4、 5 和 6 的金属螯合剂 ( 用于放射性 99m 186 188 Tc、 Re 和 Re)。这些和其它金属螯合基在美国专利 6,093,382 和 5,608,110 中作了描 述， 所述文献在此被全文引入作为参考。此外， 式 3 的螯合基例如在美国专利 6,143,274 中 作了描述 ； 式 5 的螯合基例如在美国专利 5,627,286 和 6,093,382 中作了描述， 而式 6 的螯 合基例如在美国专利 5,662,885、 5,780,006 和 5,976,495 中作了描述， 所有这些文献被引 入作为参考。式 8 的螯合基描述于共未决的 2004 年 1 月 15 日提交的 U.S.S.N10/484,111 和 2005 年 6 月 23 日提交的 U.S.S.N 11/165,793 中， 两个文献均被引入作为参考。特定的 式 6 的金属螯合剂包括 N， N- 二甲基 Gly-Ser-Cys、 N， N- 二甲基 Gly-Thr-Cys、 N， N- 二乙基 Gly-Ser-Cys、 N， N- 二苄基 Gly-Ser-Cys ； 及其其它变体。例如， 实际上不与金属放射性核 素络合的间隔基， 例如额外的单一氨基酸 Gly， 可以连接到这些金属螯合剂 ( 例如 N， N- 二 甲基 Gly-Ser-Cys-Gly、 N， N- 二甲基 Gly-Thr-Cys-Gly、 N， N- 二乙基 Gly-Ser-Cys-Gly、 N， N- 二苄基 Gly-Ser-Cys-Gly)。其它有用的金属螯合剂， 例如所有在美国专利 6,334,996 中 公开的金属螯合剂 ( 也在此被引入作为参考 )( 例如二甲基 gly-L- 叔丁基 gly-L-Cys-Gly、 二甲基 gly-D- 叔丁基 gly-L-Cys-Gly、 二甲基 gly-L- 叔丁基 gly-L-Cys 等 )。
     而且， 硫保护基如 Acm( 乙酰氨基甲基 )、 三苯甲基或其它已知的烷基、 芳基、 酰基、 烷酰基、 芳酰基、 巯基酰基和有机硫醇基可以连接到这些金属螯合剂的半胱氨酸氨基酸上。
     此外， 其它有用的金属螯合剂包括 ：
     在以上式 1 和 2 中， R 为烷基， 优选甲基。在以上式 5a 和 5b 中， X 为 CH2 或 O ； Y为 C1-C10 支链或非支链烷基、 芳基、 芳氧基、 芳基氨基、 芳基氨基酰基、 芳基烷基 - 其中连接到
     芳基上的烷基为 C1-C10 支链或非支链烷基、 C1-C10 支链或非支链羟基或多羟基烷基或多烷氧 基烷基或多羟基多烷氧基烷基 ； J 是任选的， 但如果存在的则是 C( ＝ O)-、 OC( ＝ O)-、 SO2-、 NC( ＝ O)-、 NC( ＝ S)-、 N(Y)、 NC( ＝ NCH3)-、 NC( ＝ NH)-、 N ＝ N-、 均聚酰胺或杂聚胺， 其源 自合成或天然存在的氨基酸 ； 所有情况下， n 为 1-100。这些结构的其它变体例如在美国专 利 6,093,382 中作了描述。在式 6 中， 基团 S-NHCOCH3 可以被 SH 或 S-Z 替换， 其中 Z 为任 何已知的硫保护基， 如上述的硫保护基。式 7 例示了用作金属螯合剂的叔丁基化合物的一 个实施方案。各前述专利、 申请和参考资料的内容在此被全文引入作为参考。
     Aazta 家族的金属螯合剂通常具有下列通式 ： (8) ：
     其中 ：
     R1 是氢、 任选用一个或多个羧基基团取代的 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷 基烷基、 芳基、 芳基烷基或两个 R1 基团共同形成直链或环状 C2-C10 亚烷基基团或邻 - 二取代 的亚芳基 ；
     R2 是氢、 羧基或任选经取代的选自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基的基团、 具有酸性结构部分的基团和具有氨基结构部分的基团， 其中的每一 个可以进一步任选用官能团取代， 所述官能团能够与适合的分子缀合， 所述分子能够与生 理系统相互作用 ；
     R3、 R4 和 R5 可以是相同的或不同的， 是氢、 羧基或任选取代的选自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基的基团、 具有酸性结构部分的基团和具有 氨基结构部分的基团， 其中的每一个可能进一步任选用官能团取代， 所述官能团能够与适 合的分子缀合， 所述分子能够与生理系统相互作用 ；
     FG 可以是相同的或不同的， 是羧基、 -PO3H2 或 -RP(O)OH 基团， 其中 R 是氢或任选取 代的选自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基的基团、 具有酸性结 构部分的基团和具有氨基结构部分的基团， 其中的每一个可能进一步任选用官能团取代， 所述官能团能够与适合的分子缀合， 所述分子能够与生理系统相互作用。
     本领域的技术人员已知， 官能团能够与靶分子或其它分子缀合， 所述靶分子或其 它分子能够与生理系统相互作用。 这类基团包括， 例如， 羧酸、 胺、 醛、 烷基卤、 烷基马来酰亚 胺、 巯基基团、 羟基基团等。
     这类 Aazta 金属螯合剂或其衍生物的具体实施例包括， 但是不限于 CyAazta。 Aazta 衍生物也包括 ：
     在一个优选的实施方案中， 金属螯合剂包括环状或非环状聚氨基羧酸， 例如 DOTA(1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸 )， DTPA( 二亚乙基三胺五乙酸 )， DTPA- 双甲基酰胺， DTPA- 双吗啉酰胺， Cm4pm10d2a(1， 4- 羰基甲基 -10- 膦酰基甲基 -1， 4，
     7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 7- 二乙酸 )， DO3A N-[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮 杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基、 HP-DO3A、 DO3A- 一酰胺及其衍生物。在另一个优选的实施方 案中， 金属螯合剂包括 Aazta 或其衍生物。 51 67 68
     用于闪烁照相术或放射治疗优选的金属放射性核素包括 99mTc、 Cr、 Ga、 Ga、 47 51 167 141 111 168 175 140 90 88 153 166 165 166 62 64 67 Sc、 Cr、 Tm、 Ce、 In、 Yb、 Yb、 La、 Y、 Y、 Sm、 Ho、 Dy、 Dy、 Cu、 Cu、 Cu、 97 103 186 188 203 211 212 213 214 105 109 117 149 161 177 198 Ru、 Ru、 Re、 Re、 Pb、 Bi、 Bi、 Bi、 Bi、 Rh、 Pd、 mSn、 Pm、 Tb、 Lu、 Au 199 和 Au 和它们的氧化物或氮化物。金属的选择将基于所需的治疗或诊断应用而确定。例 如， 为诊断目的 ( 例如为了诊断和监测原发性肿瘤和转移瘤的治疗进展 )， 优选的放射性核 64 67 68 99m 111 99m 111 68 素包括 Cu、 Ga、 Ga、 Tc 和 In， 特别优选 Tc、 In 和 Ga。为治疗目的 ( 例如为了提 供对与前列腺、 乳腺、 肺等的癌症有关的原发性肿瘤和转移瘤的放射治疗 )， 优选的放射性 64 90 105 111 117 149 153 161 166 166 175 177 186/188 核素包括 Cu、 Y、 Rh、 In、 mSn、 Pm、 Sm、 Tb、 Dy、 Ho、 Yb、 Lu、 Re 和 199Au， 特别优选 177Lu 和 90Y。 99m
     Tc 是特别有用的， 并因为它的低成本、 可获得性、 成像性能和高特异性活性而优 99m 选用于 SPECT 和平面成像的诊断性放射性核素。 Tc 的核和放射性性能使这种同位素成为 理想的闪烁照相显像剂。这种同位素的单光子能量为 140keV， 而放射性半衰期为大约 6 小 99 99m 99m 时， 并容易从 Mo- Tc 发生器获得。例如， Tc 标记的肽可以用于诊断和监测原发性肿瘤 和转移瘤的治疗进展。 68
     同样地， Ga 是特别有用的， 因为它是正电子发射断层摄影术 (PET) 的理想的同位 68 68 素。它是从 锗 / 镓发生器制备， 因此能够不经过回旋加速器使用正电子 - 发射同位素。 68 68 若干类型的 Ge/ Ga 发生器对于那些本领域的技术人员是已知的。 这些发生器的区别在于 68 用于维持 Ge( 长命母体同位素 ) 在发生器上的吸附剂 (adsorbant) 性质， 用于将 68Ga 从柱 上洗脱下来的洗脱液 ( 参见例如 Fania 等人， Contrast Media Mol.Imaging2008， 367-77 ； Zhernosekov 等人， J.Nucl.Med， 2007， 48， 1741-1748)。
     大体积的酸， 例如 HCl， 经常用于洗脱这类发生器， 对于那些本领域的技术人员已 知的是， 该洗脱液的大体积和酸性对于随后的标记反应是不理想的。因此， 在某些实例中， 发生器的洗脱液如下预纯化 ： 使用例如， 阴离子或阳离子交换树脂， 所述阴离子或阳离子交 68 68 换树脂通过移除 G 穿透用于预纯化洗脱液， 和 / 或浓集 Ga， 可以随后使用小体积的酸或 68 酸和例如丙酮的有机溶剂的混合物从树脂上移除 Ga。 可代替地， 含有最高浓度的同位素的 68 仅发生器洗脱液的小级分， 可以用于已知的分馏的过程。 Ga 具有 68min 的物理半衰期， 其 与很多低分子量的放射性药剂的清除药物代谢动力学是相容的， 所述放射性药剂例如肽、 68 抗体片段、 寡核苷酸、 适配体和小分子。大约 89％的 Ga 通过正电子发射衰减， ～ 11％通过 电子捕获衰减。每次衰变的平均正电子能量是 740keV， 所述能量用于 PET 成像。
     通常在一个热室中使用可以编程为远距离地制备和 ( 如果需要 ) 纯化化合物的 自动合成器制备 68Ga 标记的化合物 ； 这保护化学家使其避免过度辐射暴露。由于同位素 的短半衰期， 用于加速反应速率的方法， 包括使用微波加热， 可以是有优势的 (Velikyan， WO2004/089517)。 90
     用 177Lu、 Y 或其它治疗性放射性核素标记的含有 GRP 的肽可以用于提供用于与前 列腺、 乳腺、 肺等的癌症有关的原发性肿瘤和转移瘤的放射治疗。
     1B. 光学标记在一个例举性实施方案中， 本发明的化合物可以与光学标记物缀合， 例如光学染 料， 包括有机发色团或荧光团， 其具有广泛的离域环系统并且在 400-1500nm 的范围内具有 最大吸收和发射。本发明的化合物可以选择性地用生物发光分子衍生。光学标记物的最 大吸收的优选范围为 600-1000nm 以最小化来自血红蛋白的信号的干扰。优选光吸收标 记具有大摩尔吸光系数， 例如＞ 105cm-1M-1， 而荧光光学染料具有高量子产额。光学染料的 实例包括但不限于在 WO 98/18497、 WO98/18496、 WO98/18495、 WO98/18498、 WO98/53857、 WO96/17628、 WO97/18841、 WO 96/23524、 WO 98/47538 及其中引述的参考资料中描述的那 些。例如， 光学标记物可以直接共价连接到本发明的化合物， 例如包含本发明的靶向 GRP 受体的肽和连接基的化合物。几种在电磁光谱的可见和近红外区吸收并发射光的染料由 于它们的生物相容性、 高摩尔吸光系数和 / 或高荧光量子产额而目前被用于许多生物医学 应用。作为造影剂的染料结合的光形态的高度敏感性与核医学的相似， 并允许在没有不 期望的电离辐射作用的情况下使器官和组织显像。在近红外 (NIR) 区具有强烈吸收和发 射的花青染料是特别有用的， 因为在此区域生物组织是光学透明的。例如， 在 NIR 区吸收 和发射的吲哚氰蓝绿已用于监测心输出量、 肝功能和肝血流， 且它的官能化衍生物已用于 缀合生物分子以用于诊断目的 (R.B.Mujumdar， L.A.Ernst， S.R.Mujumdar 等人， Cyanine dye labeling reagents ： Sulfoindocyanine Succinimidyl esters.Bioconjugate Chemistry， 1993， 4(2)， 105-111 ； Linda G.Lee 和 Sam L.Woo. ″ N-Heteroaromatic ion and iminium ion substituted cyanine dyes for use as fluorescent labels ″， U.S.Pat.No.5,453， 505 ； Eric Hohenschuh 等 人 ″ Light imaging contrast agents ″， WO98/48846 ； Jonathan Turner 等人″ Optical diagnostic agents for the diagnosis of neurodegenerative diseases by means of near infra-red radiation″， WO98/22146 ； Kai Licha 等 人 ″ In-vivo diagnostic process by near infrared radiation ″， WO96/17628 ； Robert A.Snow 等 人， 化 合 物， WO 98/48838。 在 以 下 文 献 中 描 述 了 多 种 成像技术和试剂 ： 美 国 专 利 6,663,847、 6,656,451、 6,641,798、 6,485,704、 6,423,547、 6,395,257 、 6,280,703 、 6,277,841 、 6,264,920 、 6,264,919 、 6,228,344 、 6,217,848 、 6,190,641、 6,183,726、 6,180,087、 6,180,086、 6,180,085、 6,013,243 和 公 开 的 美 国 专 利 申 请 2003185756、 20031656432、 2003158127、 2003152577、 2003143159、 2003105300、 2003105299、 2003072763、 2003036538、 2003031627、 2003017164、 2002169107、 2002164287 和 2002156117。上述所有文献的内容在此被全文引入作为参考。
     1C. 包含放射性标记卤素的结构部分
     本技术领域已知， 包含放射性标记卤素 ( 例如， 放射性碘、 氟等 ) 的结构部分， 也已 知将它们连接至本发明的 N-O-P-G 组分上的方法。在优选的实施方案中， 使用了类似于公 开于 Zhang 等人， J.Nuclear Medicine 47 ： 492-501(2006) 中的那些结构部分的结构部分。
     2A. 包含至少一个非 α- 氨基酸的连接基
     在本发明的一个实施方案中， 连接基 N-O-P 包含至少一个非 α- 氨基酸。因此， 在 连接基 N-O-P 的这个实施方案中，
     N 为 0( 其中 0 意指它不存在 )、 α 或非 α- 氨基酸或其它连接基 ；
     O 为 α 或非 α- 氨基酸 ； 和
     P 为 0、 α 或非 α- 氨基酸或其它连接基，其中 N、 O 或 P 中至少一个为非 α- 氨基酸。
     因此， 在一个实例中， N ＝ Gly， O ＝非 α- 氨基酸， 而 P ＝ 0。
     α- 氨基酸在本领域中是已知的， 并包括天然存在和合成的氨基酸。
     非 α- 氨基酸在本领域中也是已知的， 并包括天然存在和合成的氨基酸。优选的 非 α- 氨基酸包括 ：
     8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 ；
     N-4- 氨基乙基 -N-1- 乙酸 ； 和
     具有式 NH2-(CH2CH2O)n-CH2CO2H 或 NH2-(CH2CH2O)n-CH2CH2CO2H 的聚乙二醇衍生物， 其中 n ＝ 2-100。
     包含具有至少一个非 α- 氨基酸的连接基的具有式 M-N-O-P-G 的化合物的实例列 于表 1。这些化合物可以用本文， 特别是实施例中公开的方法， 以及本领域技术人员已知的 类似方法制备。
     表1
     ＊ BBN(7-14) 对应于 QWAVGHLV， 其是 [SEQ ID NO ： 1] 1 HPLC 方法指 HPLC 梯度的 10 分钟时间内发生的梯度变化。 2 HPLC RT 指 HPLC 中化合物的保留时间。 3 MS 指质谱， 其中分子量由质量 / 单位电荷 (m/e) 计算。 4 IC50 指抑制碘化铃蟾肽与细胞上 GRP 受体的 50％结合的化合物浓度。2B. 包含至少一个取代的胆汁酸的连接基
     在本发明的另一实施方案中， 连接基 N-O-P 包含至少一个取代的胆汁酸。因此， 在 连接基 N-O-P 的这个实施方案中，
     N 为 0( 其中 0 意指它不存在 )、 α- 氨基酸、 取代的胆汁酸或其它连接基 ；
     O 为 α- 氨基酸或取代的胆汁酸 ； 和
     P 为 0、 α- 氨基酸， 取代的胆汁酸或其它连接基，
     其中 N、 O 或 P 中至少一个为取代的酸。
     胆汁酸见于胆汁 ( 肝的分泌物 ) 中， 它是具有羟基和终止于羧基的 5 个碳原子侧 链的甾类化合物。在取代的胆汁酸中， 胆汁酸的至少一个原子 ( 如氢原子 ) 被另一原子、 分 子或化学基团代替。例如， 取代的胆汁酸包括具有 3- 氨基、 24- 羧基官能团、 任选在 7 和 12 位被氢、 羟基或酮官能团取代的那些。
     本发明中其它有用的取代的胆汁酸包括取代的胆酸及其衍生物。 特定的取代的胆 酸衍生物包括 ：
     (3β， 5β)-3- 氨基胆烷 -24- 酸 ；
     (3β， 5β， 12α)-3- 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 ；
     (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 ；
     Lys-(3， 6， 9)- 三氧杂十一烷 -1， 11- 二羰基 -3， 7- 二脱氧 -3- 氨基胆酸 ) ；
     (3β， 5β， 7α)-3- 氨基 -7- 羟基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸 ； 和
     (3β， 5β， 7α)-3- 氨基 -7- 羟基胆烷 -24- 酸。
     包含具有至少一个取代的胆汁酸的连接基的具有式 M-N-O-P-G 的化合物的实例 列于表 2。这些化合物可以使用本文公开的方法， 特别是实施例公开的方法， 以及本领域技 术人员已知的类似方法来制备。
     表2
     ＊ BBN(7-14) 对应于 QWAVGHLM， 其为 SEQ ID NO ： 1 1 HPLC 方法指 HPLC 梯度的 10 分钟时间。 2 HPLC RT 指 HPLC 中化合物的保留时间。 3 MS 指质谱， 其中分子量由质量 / 单位电荷 (m/e) 计算。42102076214 A CN 102076221
     4说明书39/220 页IC50 指抑制碘化铃蟾肽 (125I-[Tyr4]-BBN) 与细胞上 GRP 受体的 50％结合的化合物浓度。 2C. 包含至少一个具有环状基团的非 α- 氨基酸的连接基
     在本发明的又一实施方案中， 连接基 N-O-P 包含至少一个具有环状基团的非 α- 氨基酸。因此， 在连接基 N-O-P 的这个实施方案中，
     N 为 0( 其中 0 意指它不存在 )、 α- 氨基酸、 具有环状基团的非 α- 氨基酸或其它 连接基 ；
     O 为 α- 氨基酸或具有环状基团的非 α- 氨基酸 ； 和
     P 为 0、 α- 氨基酸、 具有环状基团的非 α- 氨基酸或其它连接基，
     其中 N、 O 或 P 中至少一个为具有环状基团的非 α- 氨基酸。
     具有环状基团的非 α- 氨基酸包括取代的苯基、 联苯、 环己基或其它含胺和羧基 的环状脂族或杂环部分。
     这些实例包括 ：
     4- 氨基苯甲酸 ( 此后在说明书中称作 “Abz4” )
     3- 氨基苯甲酸
     4- 氨基甲基苯甲酸 8- 氨基辛酸 反式 -4- 氨基甲基环己烷甲酸 4-(2- 氨基乙氧基 ) 苯甲酸 六氢异烟酸 2- 氨基甲基苯甲酸 4- 氨基 -3- 硝基苯甲酸 4-(3- 羧甲基 -2- 酮基 -1- 苯并咪唑基 - 哌啶 6-( 哌嗪 -1- 基 )-4-(3H)- 喹唑啉酮 -3- 乙酸 (2S， 5S)-5- 氨基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六氢 - 吖庚因并 [3， 21-hi] 吲哚 -4- 酮 -2- 甲酸 (4S， 7R)-4- 氨基 -6- 氮杂 -5- 氧代 -9- 硫杂二环 [4.3.0] 壬烷 -7- 甲酸 3- 羧甲基 -1- 苯基 -1， 3， 8- 三氮杂螺 [4.5] 癸烷 -4- 酮 N1- 哌嗪乙酸 N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 (3S)-3- 氨基 -1- 羧甲基己内酰胺 (2S， 6S， 9)-6- 氨基 -2- 羧甲基 -3， 8- 二氮杂二环 -[4， 3， 0]- 壬烷 -1， 4- 二酮 3- 氨基 -3- 脱氧胆酸 4- 羟基苯甲酸 4- 氨基苯基乙酸 3- 羟基 -4- 氨基苯甲酸 3- 甲基 -4- 氨基苯甲酸 3- 氯 -4- 氨基苯甲酸 3- 甲氧基 -4- 氨基苯甲酸 6- 氨基萘甲酸N， N′ - 双 (2- 氨基乙基 )- 琥珀酰胺酸
     包含具有至少一个含环状基团的非 α- 氨基酸的连接基的具有式 M-N-O-P-G 的化 合物的实例列于表 3。这些化合物可以用本文公开的方法， 特别是实施例公开的方法， 以及 本领域技术人员已知的类似方法制备。
     表3
     ＊ BBN(7-14) ＊为序列 QWAVGHLM(SEQ ID NO ： 1)
     ＊＊ NT 定义为 “未测试”
     ＊＊＊ BOA 定义为 (1R)-1-( 双 {2-[ 双 ( 羧甲基 ) 氨基 ] 乙基 } 氨基 ) 丙烷 -1， 3- 二甲酸。 1
     HPLC 方法指 HPLC 梯度的 10 分钟时间内发生的梯度变化。 2
     HPLC RT 指 HPLC 中化合物的保留时间。 3
     MS 指质谱， 其中分子量由质量 / 单位电荷 (m/e) 计算。 4
     IC50 指抑制碘化铃蟾肽与细胞上 GRP 受体的 50％结合的化合物浓度。
     一小组含有优选连接基和多种靶向 GRP 受体的肽的化合物如表 4 所述。这些化合 物可以用本文公开的方法， 特别是实施例公开的方法， 以及本领域技术人员已知的类似方 法制备。
     表4
     ＊ BBN(7-14) 是序列 QWAVGHLM(SEQ ID NO ： 1)。
     2D. 其它连接基
     可以在连接基 N-O-P 内使用的其它连接基包括用于将靶向 GRP 受体的肽偶联至金 属螯合剂或光学标记上同时不会不利地影响靶向 GRP 受体的肽的靶向功能或金属螯合剂 的金属络合功能或光学标记的检测能力的化学基团。适宜的其它连接基包括单独的肽 ( 即 连接在一起的氨基酸 )、 非肽基团 ( 例如烃链 ) 或氨基酸序列和非肽间隔基的组合。
     在一个实施方案中， 在连接基 N-O-P 内使用的其它连接基包括 L- 谷氨酰胺和烃链 或它们的组合。
     在另一个实施方案中， 在连接基 N-O-P 内使用的其它连接基包括由一系列氨基酸 组成的纯肽连接基团 ( 例如二甘氨酸、 三甘氨酸、 gly-gly-glu、 gly-ser-gly 等 )， 其中聚合 链中靶向 GRP 受体的肽的 N- 末端残基与金属螯合剂或光学标记之间的原子总数为≤ 12 个 原子。
     在另一个实施方案中， 在连接基 N-O-P 内使用的其它连接基还可以包括烃链 [ 即 R1-(CH2)n-R2]， 其中 n 为 0-10， 优选 n ＝ 3-9， R1 为可以用作共价连接配体主链或预先形成的 金属螯合剂或金属络合主链或光学标记的位点的基团 ( 例如 H2N-、 HS-、 -COOH) ； 而 R2 为用
     于共价偶联至靶向 GRP 受体的肽的 N- 末端 NH2- 基团的基团 ( 例如 R2 为活化的 COOH 基团 )。 多种用于将配体 ( 即螯合剂 ) 或优选的金属螯合物偶联至生物分子上的化学方法已在文献 中作了充分描述 [Wilbur， 1992 ； Parker， 1990 ； Hermanson， 1996 ； Frizberg 等人， 1995]。这 些方法中的一种或多种可以用于将未络合的配体 ( 螯合剂 ) 或放射金属螯合物或光学标记 连接到连接基或者将连接基连接到靶向 GRP 受体的肽上。这些方法包括形成酸酐、 醛、 芳 基异硫氰酸酯、 活化的酯或 N- 羟基琥珀酰亚胺 [Wilbur， 1992 ； Parker， 1990 ； Hermanson， 1996 ； Frizberg 等人， 1995]。
     在一个优选的实施方案中， 在连接基 N-O-P 内使用的其它连接基可以由下述的具 有亲电体或亲核体的连接基前体形成 ：LP1 ： 在连接基至少 2 个位置上具有相同的亲电体 E1 或相同的亲核体 Nul 的连接 基前体 ；
     LP2 ： 具有亲电体 E1 和在连接基的另一位置的不同亲电体 E2 的连接基前体 ；
     LP3 ： 具有亲核体 Nul 和在连接基的另一位置的不同亲核体 Nu2 的连接基前体 ； 或 者
     LP4 ： 一个末端以亲电体 E1 官能化和另一末端以亲核体 Nul 官能化的连接基前体。
     优选的亲核体 Nul/Nu2 包括 -OH、 -NH、 -NR、 -SH、 -HN-NH2、 -RN-NH2 和 -RN-NHR′， 其中 R′和 R 独立地选自上述关于 R 的定义， 除了 R′不为 H。
     优 选 的 亲 电 体 E1/E2 包 括 -COOH、 -CH ＝ O( 醛 )、 -CR ＝ OR ′ ( 酮 )、 -RN-C ＝ S、 -RN-C ＝ O、 -S-S-2- 吡啶基、 -SO2-Y、 -CH2C( ＝ O)Y 和
     其中 Y 可以选自以下基团 ：3. 靶向 GRP 受体的肽
     靶向 GRP 受体的肽 ( 即式 M-N-O-P-G 中的 G) 为任何肽、 其等同物、 衍生物或类似 物， 它对 GRP 受体家族具有结合亲和力。
     靶向 GRP 受体的肽可以是激动剂或拮抗剂的形式。已知靶向 GRP 受体的肽激动剂 在以高度亲和力结合之后 “激活” 细胞， 并可以被细胞内化。相反， 已知靶向 GRP 受体的肽 拮抗剂仅与细胞上的 GRP 受体结合而不被细胞内化， 且不 “激活” 细胞。在一个优选的实施 方案中， 靶向 GRP 受体的肽为激动剂。
     在本发明的一个更优选的实施方案中， GRP 激动剂为铃蟾肽 (BBN) 类似物和 / 或其 衍生物。BBN 衍生物或其类似物优选包含 BBN 结合区的相同一级结构 ( 即 BBN(7-14)(SEQ ID NO ： 1)) 或类似的一级结构， 具有以比单独的 BBN 更好或与其类似的结合亲和力与 GRP 受 体发生特异性结合的特定氨基酸置换 ( 即 Kd ＜ 25nM)。适宜的化合物包括肽、 肽模拟物及 其类似物和衍生物。BBN-14 位 L- 蛋氨酸 (Met) 的存在一般将赋予激动剂特性， 而 BBN-14 位该残基的缺乏一般将赋予拮抗剂特性 [Hoffken， 1994]。 某些有用的铃蟾肽类似物公开在 美国专利公开文本 2003/0224998 中， 所述文献在此被全文引入。
     现有技术已充分记载， 在 BBN(8-14) 结合区存在一些和选择数目的特异性氨基酸 11 11 置换 ( 例如 D-Ala 置换 L-Gly 或 D-Trp8 置换 L-Trp8)， 所述置换可以在不减小结合亲和 力的情况下完成 [Leban 等人， 1994 ； Qin 等人， 1994 ； Jensen 等人， 1993]。 此外， 某些氨基酸 8 链或其它基团与 BBN-8 位 ( 即 Trp 残基 ) 的 N- 末端胺基的连接可以大幅减小 BBN 类似物 与 GRP 受体的结合亲和力 [Davis 等人， 1992 ； Hoffken， 1994 ； Moody 等人， 1996 ； Coy 等人， 1988 ； Cai 等人， 1994]。在少数情况下， 可以附加额外的氨基酸或化学部分而不减小结合亲 和力。
     BBN 受 体 靶 向 肽 的 类 似 物 包 括 以 比 BBN 更 大 或 相 同 的 亲 和 力 靶 向 GRP 受 体 的 分 子 以 及 GRP 或 BBN 的 突 变 蛋 白 质、 逆 肽 (retro-peptide) 和 逆 - 反 向 - 肽 (retro-inverso-peptide)。 本领域技术人员将认识到这些类似物还可以包含修饰， 所述修 饰包括置换和 / 或缺失和 / 或添加一个或多个氨基酸， 条件是这些修修饰没有不利地改变 本文所述的肽的生物活性。 这些置换可以通过用它们的同义氨基酸置换一个或多个氨基酸 来完成。 一组内的同义氨基酸定义为具有充足的物理化学性能以允许组内成员之间进行置 换而保持分子的生物功能的氨基酸。
     也可以将氨基酸的缺失或插入引入所定义的序列， 条件是它们不改变该序列的生 物功能。优选这些插入或缺失应该限于 1、 2、 3、 4 或 5 个氨基酸， 且不应除去或者物理破坏 或替换对功能构象来说重要的氨基酸。本文所述的靶向 GRP 受体的肽的突变蛋白质具有 与本发明说明书公开的序列同源的序列， 其中在一个或多个氨基酸位置存在氨基酸置换、 缺失或插入。突变蛋白质的生物活性至少为本文所述肽的 40 ％， 优选至少 50 ％， 更优选 60-70％， 最优选 80-90％。但是， 它们还可以具有大于特别例举的肽的生物活性， 并因此不 必一定要与所例举的肽的生物功能完全相同。靶向 GRP 受体的肽的类似物还包括将改变引 入肽主链的酰胺键， 包括硫代酰胺、 亚甲基胺和 E- 烯烃的肽模拟物或假肽。而且基于 GRP、 BBN 的结构的肽或氨基酸被 N- 取代的肼羰基化合物替换的其肽类似物 ( 还已知为氮杂氨基 酸 ) 也包括在本文所用的术语类似物中。
     取决于所选择的螯合剂， 所述靶向 GRP 受体的肽可以通过多种方法来制备。通常所述肽可以最方便地通过肽合成技术中已常规建立和已知的技术来制备， 所述技术例如固 相肽合成 (SPPS) 方法。固相肽合成 (SPPS) 包括往与不溶性载体或基质 ( 如聚苯乙烯 ) 连 接的生长的肽链上分步加入氨基酸残基。肽的 C 末端残基首先固定于可商购得到的载体 上， 其氨基用 N- 保护试剂 ( 如叔丁氧羰基 (Boc) 或芴基甲氧基羰基 (Fmoc)) 保护。用适宜 的脱保护剂除去氨基保护基， 例如对于 Boc 用 TFA， 对于 Fmoc 用哌啶， 加入下一个氨基酸残 基 (N- 保护形式 ) 和偶联剂如 N， N′ - 二环己基碳二亚胺 (DCC) 或 N， N′ - 二异丙基碳二 亚胺 (DIC) 或 2-(1H- 苯并三唑 -1- 基 )-1， 1， 3， 3- 四甲基脲 六氟磷酸盐 (HBTU)。在肽 键形成后， 从载体上洗去试剂。在加入最后的残基之后， 用适宜的试剂 ( 如三氟乙酸 (TFA) 或氟化氢 (HF)) 从载体上裂解肽。
     然后可以通过使靶向 GRP 受体的肽的 Trp8 残基的游离氨基与适宜的连接基官能 团反应而偶联连接基以形成缀合物。以上讨论的螯合剂、 连接基和靶向部分的完整构建体 还可以在树脂上装配， 然后通过适宜的试剂 ( 如三氟乙酸或 HF) 裂解。
     铃蟾肽 (7-14) 经过体外和体内蛋白酶剪切而缩短了肽的半衰期。多肽主链的酰 胺键可被置换并保留活性， 同时抵抗蛋白酶剪切， 这在文献中是熟知的。例如， 为了减少或 消除不需要的蛋白酶解作用， 或使血清稳定性减小导致生物活性降低或消失的其它降解途 径， 或为了限制或增加构象柔性， 常常使用模拟现存构象或以所需方式改变构象的官能团 置换肽主链内的酰胺键。这种修饰可增加结合亲和性或改善药动学行为。应了解肽合成领 域的技术人员可对连接两个氨基酸的任何酰胺键 ( 例如， 靶向部分、 连接基、 螯合剂等中的 酰胺键 ) 进行下列酰胺键改变， 预期所得肽可具有相同或更高的活性 ： 插入 α-N- 甲基酰胺 或主链硫代酰胺， 除去羰基以产生关联仲胺， 将一个氨基酸替换为氮杂 - 氨基酸以产生缩 氨基脲衍生物， 使用 E- 烯烃和取代 E- 烯烃作为酰胺键代用品。还可通过插入不稳定酰胺 键的氨基酸之一的 D- 氨基酸， 或通过 α- 甲基氨基酸衍生物来防止水解。还可用杂环 ( 如 唑、 吡咯烷酮、 咪唑以及南五味子酮和氟烯烃 ) 替代主链酰胺键。
     在表 4a 中列出了一些包括这种酰胺键修饰的具体的化合物。表 4a 中所用各种酰 胺键修饰的缩写词在下面说明 ：
     表 4A
     在上表中， QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1， 且 QWAVGHFL-NH2(L300) 是 SEQ ID NO ：22。 4. 标记和施用放射性药物化合物
     可以通过配位化学技术中公知的多种方法在放射性药物缀合物中引入金属。如 果金属为 99mTc( 一种优选的用于诊断成像的放射性核素 )， 则可以使用以下一般方法形成 锝络合物。如下形成肽 - 螯合剂缀合物溶液 ： 首先将缀合物溶于水、 稀酸或醇 ( 如乙醇 ) 的水溶液。然后任选将溶液脱气以除去溶解的氧。如果在肽中存在 -SH 基团， 则可以任选 使用巯基保护基 ( 如 Acm( 乙酰氨基甲基 )、 三苯甲基 ) 或其它巯基保护基保护巯基使其 免于氧化。用适宜的试剂 ( 例如氢氧化钠 ) 除去巯基保护基， 然后用有机酸 ( 如乙酸 (pH 6.0-6.5)) 中和。 作为可替代的选择， 可以在锝螯合期间原位除去巯基保护基。 在标记步骤 中， 将得自钼发生器的高锝酸钠与足量还原剂 ( 如氯化亚锡 ) 加至缀合物的溶液以还原锝， 并使其在室温下静置或加热。 可以例如用 C-18SepPak 柱 [Millipore Corporation， Waters Chromatography Division， 34Maple Street， Milord， Massachusetts 01757] 进行色谱处 理或使用本领域技术人员已知的方法进行 HPLC 而任选将标记的缀合物与污染物 99mTcO4- 和 胶体 99mTcO2 分离。
     在一个可替代选择的方法中， 可以通过转螯合 (transchelation) 反应来完成标 记。 在此方法中， 锝源是锝溶液， 它在与所选择的螯合剂反应之前被还原或与不稳定的配体
     络合， 从而有利于与所选择的螯合剂进行配体交换。用于转螯合的适宜配体的实例包括酒 石酸盐、 柠檬酸盐、 葡萄糖酸盐和庚葡糖酸盐 (heptagluconate)。 可以认识到所述的缀合物 可以用上述的技术标记， 或者作为可替代的选择， 螯合剂本身可以被标记， 然后与肽偶联形 成缀合物 ： 一种称为 “预标记螯合物” 方法的工艺。Re 和 Tc 均在元素周期表的 VIIB 列， 且 它们是化学同族元素。因此在极大程度上， 这两种金属与在体外和体内表现高稳定性的配 体主链的络合化学是相同的 [Eckelman， 1995]， 且可以将类似的螯合剂和方法用于进行 Re 标记。 许多用于与肽和蛋白形成稳定的放射金属络合物的 99mTc 或 186/188Re 络合物螯合 +5 氧 化态的这些金属 [Lister-James 等人， 1997]。这种氧化态可以将 99mTc- 或 186/188Re 选择地 置于已与生物分子缀合的配体主链中， 这种主链是由多种不同的 99mTc(V) 和 / 或 186/188Re(V) 弱螯合物构建的 ( 例如 99mTc- 葡庚糖酸盐、 柠檬酸盐、 葡萄糖酸盐等 )[Eckelman， 1995 ； Lister-James 等人， 1997 ； Pollak 等人， 1996]。这些文献的内容在此均通过引用被全文并 入本文。
     正电子 - 发射放射同位素 68Ga 是用于 PET( 正电子发射断层摄影术 ) 成像的优选放 射金属。68Ga 的重要特征是其通过 68Ge/68Ga 放射性核素发生器系统的回旋加速器 - 独立有 效性。 相对长寿命母体 68Ge( 半衰期 [t1/2] ＝ 270.95d) 产生短寿命 68Ga(t1/2 ＝ 67.71min)， 其 68 68 随后衰变成稳定的 Zn。 Ga 是出色的正电子发射体， 具有 89％正电子分支 (branching)， 伴 68 68 有低的光子发射 (1， 077keV， 3.22％ )。 Ge/ Ga 放射性核素发生器已被开发和研究了几乎 50 年。最近的综述， 参见 等人， ( Knapp FF.Radiohuclide generators. F， eds.Handbook of Nuclear Chemistry. Dordrecht， The Netherlands ： Kluwer Academic Publishers ； 2003 ； 4： 81-118.) 68 68
     现在， 最常见商业上可获得的 Ge/ Ga 放射性核素发生器是基于 TiO2 固体相， 68 但是可以使用其它固体相。使用例如， 0.1N HCl 溶液从发生器洗脱 “离子的” Ga3+， 尽管 68 68 也可以使用其它洗脱剂。在 5mL 的洗脱液中 Ga 收率＞ 60 ％ ； 长寿命母体 Ge 的突破 -3 通常不超过 5·10 ％。洗脱液可以直接用于标记， 或在标记之前， 可以预纯化洗脱液， 以 68 浓缩它和 / 或移除 Ge 和其它痕量金属。例如， Hofmann 等人 (Hofmann M， Maecke HR， AR， et al.Biokinetics and imaging with the somatostatin receptor PET radioligand 68Ga-DOTATOC ： preliminary data.Eur J Nucl Med.2001 ； 28 ： 1751-1757) 和 Meyer 等人 (Meyer G-J， HR， Schuhmacher J， Knapp WH， Hofmann M.68Ga-Labelled DOTA-derivatised peptide ligands.Eur J Nucl Med.2004 ； 31 ： 1097-1104) 已描述了浓 68 缩方法， 其中所述初始发生器洗脱液用强酸 ( 例如 9.5N HCl) 处理。在这些情况下， Ga 可 68 以吸附在强阴离子 - 交换器上作为 Ga(III) 的氯阴离子络合物。在采用 5.5N HCl 的洗涤 步骤后， 树脂用氮流冲洗， 然后用小体积 H2O 洗脱。该策略从 68Ga 分离 68Ge。
     Konstantin(K.P.Zhernosekov， D.V.Filosofov， R.P.Baum， P.Aschoff， H.Bihl， A.A.Razbash， M.Jahn， M.Jennewein and F.68In ： Vértes A， Nagy S， Klencsár Z，Processing of Generator-ProducedGa for Medical Application， J.Nucl.Med.Vol.48， 1741-1748) 已描述了可代替方法， 其 中使用包含有机阳离子 - 交换剂树脂的小柱实施初始发生器洗脱液的再浓缩和纯化， 其中 68 使用盐酸 / 丙酮洗脱， 以移除 Ga。纯化级分可以用于在纯水溶液中或在缓冲剂中标记包 含螯合剂的肽， 例如奥曲肽衍生物。
     另一个方法是分馏初始发生器洗脱液。仅仅收集包含最高浓度 68Ga 的洗脱液部分， 这帮助克服若干问题， 例如洗脱液体积， 酸性 pH 和 68Ge 和化学杂质的出现 (Breeman WAP， de Jong M， de Blois E， Bernard BF， Konijnenberg M， Krenning EP.Radiolabelling 68 DOTA-peptides with Ga.Eur J Nucl Med.2004 ； 32 ： 478-485)。可代替地， 可以从发生器 68 洗脱液将 Ga 萃取入例如， 有机溶剂 ( 例如甲基乙基酮 )， 例如如 Bokhari 等人所描述的 68 (Bokhari TH， Mushtaq A， Khan IU， Concentration of Ga via solvent extraction， Appl Radiat Isot.2009 ； 67(1) ： 100-102)。 溶剂的蒸发浓缩放射同位素， 然后将其以缓冲液稀释 以用于放射标记。在某些实例中， 洗脱液不被预纯化， 反而， 在放射标记之后， 使用技术 ( 例 68 如固体相提取或 HPLC) 移除 Ge 突破。
     不管如何得到或纯化放射同位素溶液， 通常在水性或水性 / 有机混合物中以适合 的 pH 值实施放射标记， 以将放射金属掺入螯合剂。通常使用大环的螯合剂 ( 例如 NOTA， DOTA 和 DO3A 衍生物 ) 结合 68Ga， 尽管由于开链多齿配体 ( 例如 N， N′ - 双 [2- 羟基 -5-( 羧 基乙基 ) 苄基 ] 乙二胺 -N， N′ - 二乙酸、 双胺、 双硫醇配体 BAT-TECH( 双氨基乙硫醇 - 四 乙基 - 环己基 ) 和亚乙基二半胱氨酸 (EC)、 N3S) 的快速率的标记 ( 这对于具有短寿命同位 68 素 ( 例如 Ga) 是重要的 )， 也可以使用它们。可以在～ 2 至～ 7 的 pH 值， 最通常在 3-5 的 pH 值， 标记这些螯合剂。如果 pH 太低， 放射金属不能很好掺入。如果 pH 太高， 发生 Ga3+ 与 导致形成已知作为放射胶体的不溶解的含有 Ga- 氢氧化物 ( 氧代 ) 水和 OH- 的竞争性反应， 的化合物。用于掺入放射金属的适当 pH 通常使用生理可接受的缓冲剂保持， 例如醋酸盐、 柠檬酸盐、 碳酸氢盐、 HEPES 等。如果在强酸中提供洗脱液， 可以使用高缓冲浓度。 68
     加入充足的配体， 以提供高收率的期望的 Ga 络合物。通过以下确定所需的配 体的量 ： 放射浓度， pH， 缓冲组合， 螯合剂的性质， 从最后一次洗脱发生器起算的时间和在 标记溶液中存在的竞争性金属的量。竞争性金属可以包括 Zn2+， 其得自 68Ga3+ 的衰变， 和 Fe(III)， Al(III) 等， 其存在于用于洗脱发生器的溶剂中或从发生器自身被洗脱下来。典 型地， 必须使用＞ 2 ∶ 1 络合配体 /Ga 的比率。为了将放射金属掺入配体， 在室温下保持反 应混合物， 或在约 37℃至～ 100℃的温度 ( 通过加热或使用微波 ) 将其加热， 这取决于反应 物的性质。
     认为最终产物的特异性活性是重要的。如果被研究的系统具有低的受体浓度， 且 放射性标记产物不能被纯化以移除过量配体， 重要的是最小化在反应中使用的配体的量， 因为这可以与放射性标记产物竞争， 因此减少在靶的有效信号。 此外， 某些配体具有生理学 效果， 这使得优选移除过量配体。如果需要， 通过使用技术 ( 例如固体相提取， 离子 - 交换 和 / 或逆相高压液相色谱法 ) 纯化放射性标记产物以移除过量未标记的螯合剂和 / 或用其 它金属标记的螯合剂， 可以移除杂质， 且可以提高特异性活性。
     如果需要， 可以在注射之前稳定化合物以预防对化合物的放射性损伤。放射稳定 剂是那些本领域技术人员已知的， 且可以包括， 例如， 对 - 氨基苯甲酸、 抗坏血酸、 龙胆酸 等， 以及那些公开在 US 2007/0269375 和 WO 05/009393 中的放射稳定剂， 通过引用将其全 部并入本文， 包括含硒衍生物， 例如硒代甲硫氨酸， 半胱氨酸衍生物或二硫代氨基甲酸盐。 它们也可以含有增溶剂和抑菌剂， 例如， 苄醇。也可以加入螯合剂 ( 例如 EDTA 或 DTPA)， 以 结合在反应之后残留的任何未反应的 “游离” 放射金属。
     也可以使用类似于那些上文所述的方法的标记方法， 制备 67 镓 - 标记的化合物。 通常在稀酸溶液中以氯化物或柠檬酸盐的形式， 提供 67Ga 放射同位素。在标记溶液中必须使用充足的配体， 以抵消 Zn(II) 和其它竞争性痕量金属在标记溶液中的存在。
     5.Ga-AMBA
     Ga-AMBA( 或 67Ga-AMBA 和 / 或 68Ga-AMBA) 意指 AMBA 的 67Ga 或 68Ga 标记的类似物， 在本文中也意指 Ga-L70( 或 67G-L70 和 68Ga-L70)。它是本发明优选的显像剂， 且可以如本 文描述的用于监测与 GRP-R 串流的药物的治疗反应。
     结合 Lu3+( 例如 DO3A， 其包括在 Lu-AMBA 中 ) 的螯合剂也结合 Ga3+。68Ga 是特别优 选的同位素， 因为 68Ga 是适于 PET 成像的发生器 - 产生的同位素， 其具有的 t1/2 ＝ 68 分钟。 67 68 Ga 和 Ga-AMBA 都靶向 GRP-R 阳性癌。这类类似物的示例性结构如下所示 ：
     [DO3A 螯合剂 ][ 连接基 ][ 靶向基团 ]
     分子具有 3 部分， 螯合剂、 控制受体亚型特异性的连接基基团和从铃蟾肽截断的 八肽靶向基团 (BBN 7-14)， GRP-R 的天然配体。Lu-AMBA 对 GRP-R 具有 Kd ～ 2-3nM。Ga3+ 和 Lu3+ 都是 3+ 金属离子， 其类似地结合于多价氨基羧酸根配体， 如同用于 Lu-AMBA(Lu-L70) 的 R-DO3A 大环。 67
     如在表 5 中所示， 已发现在携带 GRP-R 阳性 PC-3 人前列腺肿瘤的小鼠模型中， Ga 177 68 和 Lu-AMBA 是生物学等价的。预期采用 Ga 将得到类似结果。
     如在表 5 中所示， 将 177Lu-AMBA 的生物分布与 67Ga-AMBA( 作为 68Ga-AMBA 的替代 177 品 ) 相比。 对 PC-3 肿瘤靶的分布没有显著不同。 以这些数据和体外数据为基础， Lu-AMBA 是预见 Ga-AMBA 在体外和体内的行为的合理替代品， 并且是本发明优选的显像剂。Ga-AMBA 也是用于监测药物的治疗反应的优选显像剂， 所述药物靶向与 GRP-R 串流的受体。
     6. 诊断和治疗应用
     如果用诊断和 / 或治疗上有用的金属或光学标记进行标记， 则本发明的化合物可 以用于通过放射诊断、 放射治疗和光学成像技术中已建立的方法治疗和 / 或检测任何涉及 GRP 受体 ( 或 NMB 受体 ) 超表达的病理。[ 例如参见 Bushbaum， 1995 ； Fischman 等人， 1993 ； Schubiger 等人， 1996 ； Lowbertz 等人， 1994 ； Krenning 等人， 1994 ； 光学染料的实例包括但 不限于以下文献公开的光学染料 ： WO 98/18497、 WO 98/18496、 WO 98/18495、 WO 98/18498、 WO 98/53857、 WO 96/17628、 WO97/18841、 WO 96/23524、 WO 98/47538 及其引述的参考资料， 其内容在此均通过引用被全文并入本文。
     GRP-R 表达在许多人肿瘤中高度上调。例如参见 WO99/62563。因此， 本发明的化 合物可以广泛地用于治疗和诊断癌症， 包括前列腺癌 ( 原发性和转移性 )、 乳腺癌 ( 原发性
     和转移性 )、 结肠癌、 胃癌、 胰腺癌、 非小细胞肺癌、 小细胞肺癌、 胃泌素瘤、 黑素瘤、 成胶质细 胞瘤、 成神经细胞瘤、 子宫平滑肌肉瘤、 前列腺上皮内瘤 [PIN] 和卵巢癌。此外， 本发明的化 合物可以用于区分其中 GRP 受体上调和没有上调的病症 ( 例如分别为慢性胰腺炎和胰腺导 管癌 )。
     在实施例中更为详细说明的本发明的化合物在体内比不具有本文公开的新连接 基的化合物表现出更大的特异性和更高的肿瘤摄取， 对表达 GRP 受体的肿瘤表现出改进的 靶向能力， 并因此用于对这些组织成像或递送放射治疗。
     这些化合物的诊断应用可以是作为利用闪烁照相、 光学或成像进行的肿瘤细胞存 在的一线诊断筛选， 或者作为在放射免疫指导的外科手术 (RIGS) 领域利用手持放射检测 仪器靶向肿瘤组织的活性剂， 作为一种在施用配对的放射治疗化合物之前获得放射量测定 数据的手段， 作为评价 GRP 受体活性 ( 作为评价 GRP 受体靶向疗法的治疗对时间的函数 ) 的手段， 作为评价 GRP 受体活性 ( 其作为非 GRP 受体靶向治疗对时间的函数 ) 并且因此直 接或间接评价靶向受体对治疗的响应。
     这些化合物的治疗应用可以定义为用作癌症治疗中的一线治疗的药剂， 作为采用 化疗药物或其他药物的联合治疗， 和 / 或作为配伍的诊断 / 治疗剂。治疗包括至少部分缓 解或减轻指定病症的症状。 例如， 治疗可以导致肿瘤或其染病区域尺寸减小， 预防肿瘤或其 染病区域尺寸增加， 减少肿瘤中异常血流或通过其他方式正常化肿瘤中血流， 延迟肿瘤发 展的时间， 增加患者存活等。配对的概念指可以根据已选择用于与适宜的螯合物结合的放 射金属而定既可充当诊断剂又可充当治疗剂的单一的未金属化化合物。 如果该螯合剂不能 适应需要的金属， 则可以进行适宜的取代以适应不同的金属， 同时保持药理学， 使得诊断化 合物的体内表现可以用于预测放射治疗化合物的表现。如果与联合疗法联合使用， 则可以 使用任何适宜的化学治疗剂或药物， 例如包括抗肿瘤药如铂化合物 ( 例如螺铂、 顺铂和卡 波铂 )、 氨甲蝶呤、 阿霉素、 丝裂霉素、 柄型菌素、 博来霉素、 胞嘧啶、 阿糖胞苷、 阿糖腺苷、 巯 基聚赖氨酸、 长春新碱、 白消安、 苯丁酸氮芥、 美法仑 ( 例如 PAM、 a、 L-PAM 或苯丙氨酸氮芥 )、 巯基嘌呤、 米托坦、 盐酸丙卡巴肼、 更生菌素 ( 放线菌素 D)、 盐酸柔红霉素、 盐酸多柔比星、 紫杉酚、 丝裂霉素、 普利霉素 ( 光辉霉素 )、 氨基格鲁米特、 雌莫司汀磷酸钠、 氟他米特、 乙酸 亮丙瑞林、 乙酸甲地孕酮、 柠檬酸它莫西芬、 睾内酯、 曲洛司坦、 安吖啶 (m-AMSA)、 天冬酰胺 酶 (L- 天冬酰胺酶 )、 Erwina 天冬酰胺酶、 依托泊苷 -(VP-16)、 干扰素 α-2a、 干扰素 α-2b、 替尼泊苷 (VM-26)、 硫酸长春碱 (VLB) 和阿拉伯糖基。在某些实施方案中， 治疗剂可以是单 克隆抗体， 例如能够与黑素瘤抗原结合的单克隆抗体。
     可以通过在可药用的载体和 / 或溶液， 例如盐溶液 ( 如等渗盐水 ) 中进行例如静 111 68 脉内、 皮下或腹膜内注射而将用放射性核素金属， 例如 177Lu， In， Ga 或 99mTc 标记的缀合 物施用于哺乳动物， 包括人患者或受试者。本发明提供的放射性标记的闪烁照相显像剂具 有适宜的放射性量。在形成 99mTc 放射性络合物过程中， 一般优选形成包含放射性浓度为大 约 0.01 毫居里 (mCi)-100mCi/mL 的放射性络合物溶液。一般地， 待施用的单位剂量的放射 性为大约 0.01mCi 至大约 100mCi， 优选 1mCi 至 30mCi。单位剂量的待注射的溶液为大约 0.01mL- 大约 10mL。适于施用的标记的缀合物的数量取决于选择的缀合物的分布性质， 其 含义是快速清除的缀合物可能需要以比清除较慢的缀合物更高的剂量施用。 可以通过标准 闪烁照相技术在施用后的适宜时间示踪体内分布和定位 ； 所述时间取决于在靶部位的蓄积速率相对于在非靶组织的清除率， 一般为 30 分钟至 180 分钟。例如， 在给患者注射诊断性 放射性核素标记的本发明的化合物之后， 可以将针对在显像剂中引入的核素的 γ- 射线能 量进行校准的 γ- 照相机用于对药剂摄取区域进行成像， 并对该部位存在的放射性量进行 定量。体内部位成像可以在数分钟内发生。但是， 如果需要且如果放射性核素的物理半衰 期允许的话， 成像可以在放射性标记的肽注入患者之后数小时或甚至更长时间发生。在大 部分的情况下， 足量的施用剂量将在大约 0.1 小时内在待成像的区域蓄积以允许成像。
     可以将本发明的化合物单独或作为包含其它组分 ( 如赋形剂、 稀释剂、 自由基清 除剂、 稳定剂和载体， 所有上述的组分在本领域中是已知的 ) 的组合物的一部分施用于患 者。可以将该化合物经静脉内或腹膜内施用于患者。
     本发明具有许多优点。根据本发明某些实施方案制备的化合物形成稳定、 清楚限 99m 186/188 67 68 111 177 定的 Tc 或 Re 标记的化合物。采用其他实施方案， 形成用 Ga、 Ga、 In 或 Lu 标 记的化合物。 类似的本发明的化合物也可以通过使用对各种放射性金属的适宜螯合剂主链 90 166 105 199 149 来制备， 以形成稳定、 清楚限定的 153Sm、 Y、 Ho、 Rh、 Au、 Pm 或其它放射性金属标记的 产物。放射性标记的靶向 GRP 受体的肽与表达 GRP 受体的肿瘤细胞选择性结合， 并且如果 使用激动剂的话， 被内化并在肿瘤细胞内长期保留。未到达 ( 即不结合 ) 癌细胞的放射性 物质优选有效地排泄进入尿液， 放射金属在肾脏中保留极少。
     a. 增加靶向 GRP-R 的方法
     此外， 本发明包括与正常的 ( 例如非靶 ) 表达 GRP 受体组织相比增加标记的本发 明化合物靶向表达 GRP 受体靶组织的方法。该方法包扩在标记的本发明化合物的给药之前 或在给药期间， 给予适当质量的靶向 GRP 受体的肽或缀合物。类似地， 本发明包括标记的本 发明化合物的改善的给药方法， 其中优化肿瘤靶向， 包括在标记的本发明化合物给药之前 或在给药期间， 给予适当的质量剂量的靶向 GRP 受体的肽或缀合物。已经发现这类预先或 共同给药饱和非靶 GRP 受体， 减少它们与肿瘤组织上 GRP 受体竞争的能力。
     先前已显示， 可以有益的是， 预先或共同给予采用增加的质量的活性成分， 以占有 在正常的 ( 例如， 非靶 ) 组织上的循环结合位置或结合位置， 其将以其他方式与靶组织结合 位置竞争活性成分。 这类预给药或共同给药的目的是增加对靶组织的靶向和在靶组织中的 摄取。例如， 已在给予放射性抗 CD20 抗体之前给予未标记的抗 CD20 抗体， 以占有在循环细 胞上的结合位置， 以便改善疾病位置的可视化。 在另一个实施例中， 已给予增加质量的冷促 生长素抑制素， 以便饱和正常的组织的结合位置和因此改善疾病的可视化。
     迄今还没有鉴定循环靶向 GRP 受体的肽结合蛋白。但是， 存在一些在机体中表达 可预知的水平的 GRP 受体的正常的组织， 其可以与表达 GRP 受体的靶组织竞争。预期增加 质量给药将饱和这类组织中的结合位置。 但是， 已出人意料地发现， 当给予质量剂量的本发 明化合物时， 表达 GRP 受体的肿瘤组织的行为不同于表达 GRP 受体的正常的组织。特别地， 尽管表达 GRP 受体的正常组织显示质量剂量导致的预期饱和和因此标记的本发明化合物 的摄取减少， 表达 GRP 的肿瘤组织在质量剂量增加时出人意料地未饱和， 保留结合标记的 本发明化合物的能力。正常组织和肿瘤组织反应差异可以反映为脱离肿瘤组织的控制。因 此该有益效果最可能存在于如下那些情况中， 其中通常通过正常组织生理学密切控制的所 述调节肽或化合物的结合位置， 当存在于肿瘤组织时脱离这类控制， 如在例如表达 GRP 受 体肿瘤组织的情况下。因此， 为了优化肿瘤靶向， 可以在给予标记的本发明化合物之前或在给予期间， 给 予适当的质量剂量的本发明化合物。应注意到， 尽管优选给予质量剂量的未标记的本发明 化合物， 但是可以使用与 GRP 受体结合和相互作用的任何活性肽， 无论是否缀合至连接基 和 / 或金属螯合剂或可测定的标记， 且无论是否标记。优选地， 使用质量剂量的 GRP 受体激 动剂， 更优选它是缀合至连接基和 / 或金属螯合剂或可测定的标记， 例如那些本文公开的。 最优选给予质量剂量的本发明化合物。尽管某些实施方案优选使用未标记的化合物， 质量 剂量可以包括标记的化合物。 实际上， 对于共同给药应用， 优选给予包括质量剂量和诊断的 或治疗剂量的标记的化合物的单剂量。在该情况下， 给予标记的、 但是低特异性活性剂量， 其递送适当的质量剂量的未标记的化合物以及诊断的或治疗适用剂量的标记的化合物。
     适当的质量剂量将取决于患者和应用的特异性， 但是这类剂量的选择在本领域技 2 术范围之内。适用的质量剂量在约 1 至约 20μg/m 范围中， 优选的剂量在约 2 至约 10μg/ 2 m 的范围中。当在标记的本发明化合物之前给予质量剂量 ( 例如预给药 ) 时， 优选在诊断 的或治疗剂量之前不超过约 60 分钟给予质量剂量。
     b. 光学成像、 声致发光、 光声成像和光治疗
     根据本发明， 可以将许多光学参数用于在给患者注射光学标记的本发明化合物之 后用体内光学成像来确定靶体的位置。在成像制备中待检测的光学参数可以包括穿透辐 射、 吸收、 荧光或磷光发射、 光反射、 吸收幅度或最大值的改变和弹性散射辐射。例如， 生物 组织对波长范围为 650-1000nm 的近红外 (NIR) 光相对透光。 NIR 照射可以穿透组织达数厘 米， 允许使用本发明化合物对含靶体的组织进行体内成像。可见和近红外 (NIR) 光在临床 实践中的使用迅速增长。在电磁波谱的可见、 NIR 或长波长 (UV-A， ＞ 350nm) 区吸收或发射 的化合物可能用于光学断层照相成像、 内窥镜可视化和光治疗。
     生物医学光学的一个主要优点是它的治疗潜能。已证明光治疗是一种用于治 疗多种表面损伤 ( 外伤和内伤 ) 的安全和有效的方法。染料对于在光学成像和光治 疗中增强信号检测和 / 或使组织具有感光性是重要的。先前的研究已表明， 某些染料 可 以 定 位 在 肿 瘤， 并 用 作 检 测 和 治 疗 小 癌 的 强 有 力 探 针 (D.A.Bellnier 等 人， Murine pharmacokinetics and antitumor efficacy of the photodynamic sensitizer 2-[1-hexyloxyethyl]-2-devinyl pyropheophorbide-a ， J.Photochem.Photobiol. ， 1993， 20， pp.55-61 ； G.A.Wagnieres 等 人， In vivo fluorescence spectroscopy and imaging for oncological applications， Photochem.Photobiol.， 1998， 68， pp.603-632 ； J.S.Reynolds 等 人， Imaging of spontaneous canine mammary tumors using fluorescent contrast agents， Photochem.Photobiol.， 1999， 70， pp.87-94)。 所有这些所 列文献的内容在此均通过引用被全文并入本文。 但是， 这些染料不优先定位在恶性组织中。
     在一个例举性实施方案中， 本发明化合物可以与光学标记物缀合， 所述光学标记 物例如光学染料， 包括有机发色团或荧光团， 具有广泛的离域环系统且吸收或发射最大值 范围为 400-1500nm。本发明化合物可选择性地用生物发光分子衍生。光学标记物的优 选的最大吸收范围为 600-1000nm， 以使对来自血红蛋白的信号的干扰最小。优选光吸收 标记具有大摩尔吸光系数， 例如＞ 105cm-1M-1， 而荧光性光学染料具有高量子产率。光学 染料的实例包括但不限于在 US 6,641,798， WO98/18497、 WO 98/18496、 WO 98/18495、 WO 98/18498、 WO 98/53857、 WO 96/17628、 WO 97/18841、 WO 96/23524、 WO 98/47538 及其引述的参考资料所述的光学染料， 这些文献的内容在此均通过引用被全文并入本文。例如， 光学标记物可以直接共价连接到本发明化合物， 例如包含靶向 GRP 受体的肽和本发明的 连接基的化合物。许多在电磁光谱的可见和近红外区吸收和发射光的染料由于它们的生 物相容性、 高摩尔吸光系数和 / 或高荧光量子产率目前正被用于多种生物医学应用。与 作为造影剂的染料结合的光形态的高度敏感性与核医学的类似， 并允许在无不期望的电 离辐射作用的情况下使器官和组织可见。在近红外 (NIR) 区具有强烈吸收和发射的花 青染料是特别有用的， 因为生物组织在该区透光 (B.C.Wilson， Optical properties of tissues.Encyclopedia of Human Biology， 1991， 5， 587-597)。例如， 在 NIR 区吸收和发 射的吲哚花青绿已用于监测心输出量、 肝功能和肝血流 (Y-L.He， H.Tanigami， H.Ueyama， T.Mashimo， andI.Yoshiya， Measurement of blood volume using indocyanine green measured with pulse-spectrometry ： Its reproducibility and reliability.Critical Care Medicine， 1998， 26(8)， 1446-1451 ； J.Caesar， S.Shaldon， L.Chiandussi， et al.， The use of Indocyanine green in the measurement of hepatic blood flow and as a test of hepatic function.Clin.Sci.1961， 21， 43-57)， 且它的官能化衍生物已用于缀 合生物分子以用于诊断目的 (R.B.Mujumdar， L.A.Ernst， S.R.Mujumdar 等人， Cyanine dye Labeling reagents ： Sulfoindocyanine Succinimidyl esters.Bioconjugate Chemistry， 1993， 4(2)， 105-111 ； Linda G.Lee and Sam L.Woo.″ N-Heteroaromatic ion and iminium ion substituted cyanine dyes for use as fluorescent labels″， U.S.Pat.No.5,453， 505 ； Eric Hohenschuh 等人″ Light imaging contrast agents″， WO98/48846 ； Jonathan Turner 等人″ Optical diagnostic agents for the diagnosis of neurodegenerative diseases by means of near infra-red radiation ″， WO98/22146 ； Kai Licha 等 人″ In-vivo diagnostic process by near infrared radiation″， WO96/17628 ； Robert A.Snow 等人， Compounds， WO 98/48838， US 6,641,798。所有这些所列文献的内容在此均通 过引用被全文并入本文。
     在注射光学标记化合物之后， 用适于在药剂中所用的光学标记的波长范围的一个 或多个光源 ( 例如激光 ) 扫描患者。所用的光可以是单色或多色的和连续或脉冲的。通 过调至一个或多个波长的光检测器检测透射、 散射或反射的光以确定受试者中含靶的组织 ( 例如含 GRP 的组织 ) 的位置。可以随时间监测光学参数的改变， 以检测靶部位 ( 例如具有 GRP 受体的部位的肿瘤或其它 ) 光学标记的试剂的蓄积。可以将标准图像加工和检测设备 与本发明的光学显像剂联合使用。
     上述的光学显像剂还可以用于采用光学标记的显像剂进行的声 - 光或声致发光 学成像 ( 参见 U.S.5,171,298、 WO 98/57666 及其参考资料 )。在声 - 光学成像中， 将超声照 射应用于受试者， 并影响透射、 发射或反射光的光学参数。在声致发光学成像中， 所用的超 声实际上产生被检测的光。使用这些技术的适宜的成像方法在 WO 98/57666 中作了描述。
     在以下文献中描述了各种成像技术和试剂 ： 美国专利 6,663,847、 6,656,451、 6,641,798 、 6,485,704 、 6,423,547 、 6,395,257 、 6,280,703 、 6,277,841 、 6,264,920 、 6,264,919 、 6,228,344 、 6,217,848 、 6,190,641 、 6,183,726 、 6,180,087 、 6,180,086 、 6,180,085、 6,013,243 和 公 开 的 美 国 专 利 申 请 2003185756、 20031656432、 2003158127、 2003152577、 2003143159、 2003105300、 2003105299、 2003072763、 2003036538、 2003031627、2003017164、 2002169107、 2002164287 和 2002156117， 所有这些文献在此均被引入作为参 考。
     c. 放射治疗
     放射性同位素治疗包括施用足量的放射性标记的化合物， 该量足以损伤或破坏靶 向的组织。在施用化合物 ( 例如通过静脉内、 皮下或腹膜内注射 ) 之后， 放射性标记的药物 优先定位在病患部位 ( 在此情况下为表达相关 GRP 受体的肿瘤组织或其它组织 )。一旦定 位， 该放射性标记的化合物就以在所施用的同位素的放射性衰减期间释放的能量损坏或破 坏病患组织。如本文讨论， 本发明还包括联合使用放射治疗和化学治疗 ( 或者与任何其它 适宜的治疗剂联用 )。
     成功的放射治疗的设计涉及若干关键因素 ：
     1. 选择适宜的靶向基团以递送放射性至病患部位 ；
     2. 选择释放足够能量以破坏病患部位的适宜的放射性核素， 并基本上不破坏相邻 的正常组织 ； 和
     3. 选择适宜的靶向基团与放射性核素的组合， 不会不利地影响这种缀合物在病患 部位定位的能力。 对于放射性金属而言， 这通常涉及这样的螯合基团 ： 这种基团与放射性核 素紧密地配位， 并结合将该螯合物偶联至靶向基团的连接基， 且这种基团影响化合物的总 生物分布以使靶组织的摄取最大化， 并使正常、 非靶器官的摄取最小化。
     放射治疗剂可以包含来自已知为镧系元素类 ( 原子序数 57-71 的元素 ) 的螯合的 3+ 金属离子和它们的类似物 ( 即 M3+ 金属如钇和铟 )。在此种类中典型的放射性金属包括 同位素 90- 钇、 111- 铟、 149- 钷、 153- 钐、 166- 镝、 166- 钬、 175- 镱和 177- 镥。所有这些金 属 ( 和镧系中的其它金属 ) 具有非常类似的化学性质， 它们保持 +3 氧化态， 并优选与含有 硬 ( 氧 / 氮 ) 供体原子的配体螯合， 典型的为已知螯合物 DTPA( 二亚乙基三胺五乙酸 ) 的 衍生物和多氮杂 - 多羧酸大环如 DOTA(1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -N， N′， N″， N″′ - 四 乙酸及其相近的类似物。这些完全去质子化形式的螯合配体的结构如以下所示。
     这 些 螯 合 配 体 通 过 多 个 氮 和 氧 原 子 与 放 射 金 属 结 合 而 将 其 包 封， 从而防止 + 游 离 ( 未 结 合 ) 的 放 射 金 属 释 放 进 入 体 内。 这 是 重 要 的， 因为 3 放射金属由其螯 合 物 的 体 内 解 离 可 以 导 致 在 肝、 骨 和 脾 中 放 射 金 属 的 摄 取 [Brechbiel MW， Gansow 90 OA，″ Backbone-substituted DTPALLigands for Y radioimmunotherapy″， Bioconj. Chem.1991 ； 2： 187-194 ； Li， WP， Ma DS， Higginbotham C， Hoffman T， Ketring AR， Cutler
     CS， Jurisson， SS，″ Development of an in vitro model for assessing the in vivo stabilityof lanthanide chelates. ″ Nucl.Med.Biol.2001 ； 28(2) ： 145-154 ； Kasokat T， Urich K， Arzneim.-Forsch，″ Quantification of dechelation of gadopentetate dimeglumine in rats″， 1992 ； 42(6) ： 869-76]。除非配体特异性地靶向于这些器官， 这些 非特异性摄取是非常不期望的， 因为它导致非靶组织的非特异性照射， 从而可能导致诸如 由于骨髓照射造成的造血抑制的问题。
     关于放射治疗应用， 可以使用本文公开的任何治疗性放射性核素的螯合剂。但 是， DOTA 螯 合 物 形 式 [Tweedle MF， Gaughan GT， HaganJT， ″ 1-Substituted-1， 4， 7-triscarboxymethyl-1， 4， 7， 10-tetraazacyclodode cane and analogs. ″ 美 国 专 利 4,885,363， Dec.5， 1989] 是特别优选的， 因为 DOTA 螯合物预期在体内比 DTPA 或其它线性 螯合物较少去螯合。化合物 L64 和 L70( 当用适宜的治疗性放射性核素标记时 ) 特别优选 用于放射治疗。
     通过连接基将 DOTA 型大环偶联至靶向基团的一般方法 ( 例如通过活化 DOTA 的羧 酸之一以形成活性酯， 然后使其与连接基上的氨基反应以形成稳定的酰胺键 ) 对本领域技 术人员来说是已知的 ( 例如参见 Tweedle 等人， 美国专利 4,885,363)。还可以对在多氮杂 环主链上修饰的 DOTA 型大环进行偶联。
     用于特定的放射治疗应用的适当核素的选择取决于多种因素， 包括 ：
     物理半衰期 - 它应该足够长以允许从放射金属和缀合物合成并纯化放射治疗构 建体， 并将该构建体递送至注射部位， 并在注射前无明显的放射性衰变。 优选放射性核素应 该具有大约 0.5-8 天的物理半衰期。
     放射性核素发射的能量 - 为了放疗应用， 作为粒子发射体 ( 例如 α- 发射体、 β- 发射体和 Auger 电子发射体 ) 的放射性核素是特别有用的， 因为它们发射在短距离内蓄 积其能量从而产生高度局部化破坏的高能粒子。 β- 发射放射性核素是特别优选的， 因为来 自这些同位素的 β- 粒子发射的能量在 5 至大约 150 个细胞直径内蓄积。由这些核素制备 的放射治疗剂能够杀死与它们的定位部位相对接近的病患细胞， 但不能跨越长距离行进而 破坏相邻正常组织如骨髓。
     比活性 ( 即放射性 / 放射性核素质量 )- 具有高比活性的放射性核素 ( 例如发生 器产生的 90-Y、 111-In、 177-Lu) 是特别优选的。放射性核素的比活性由它的生产方法、 用 于生产它的特定靶体和所讨论的同位素的特性来决定。
     许多镧系元素包括具有使它们适于用作放射治疗剂的核特性的放射性同位素， 因 为它们发射 β- 粒子或 Auger 电子。这些当中的一些列于表 6。
     Pm ： 钷， Sm ： 钐， Dy ： 镝， Ho ： 钬， Yb ： 镱， Lu ： 镥， Y： 钇， In ： 铟
     放射金属如 β- 发射镧系放射性同位素的制备方法对本领域技术人员是已 知 的， 并 已 在 其 它 地 方 公 开 [ 例 如 Cutler C S， Smith CJ， EhrhardtGJ. ； Tyler TT， Jurisson SS， Deutsch E.″ Current and potential therapeutic uses of lanthanide radioisotopes.″ Cancer Biother.Radiopharm.2000 ； 15(6) ： 531-545]。 许多这些同位素 90 149 177 可以高产率和较低成本地产生， 且许多 ( 例如 Y、 Pm、 Lu) 可以以接近无载体的比活性 产生 ( 即高百分比的原子是放射性的 )。由于非放射性原子可以与它们的放射性类似物竞 争与靶组织上的受体结合， 因此使用具有高比活性的放射性同位素是重要的， 以允许递送 尽可能高剂量的放射性至靶组织。
     含有 β- 发射同位素铼 (186-Re 和 188-Re) 的本发明的放射治疗衍生物也是特别优 选的。
     本发明通过适当选择靶向基团、 放射性核素、 金属螯合物和连接基， 提供满足所有 3 个上述标准的放射治疗剂。如在实施例中更详细解释的， 本发明化合物在体内显示比不 具有本文公开的新连接基的化合物更强的对肿瘤的特异性和更高的肿瘤摄取， 显示靶向表 达 GRP 受体的肿瘤并因此成像或递送放射治疗至这些组织的改善能力。实际上， 如实施例 所示， 使用本发明化合物的放射治疗是更有效的 ( 并且存活时间增加 )。
     此外， 如实施例所示， 本发明化合物特别适用于治疗前列腺癌， 包括前列腺癌的骨 或软组织转移瘤并且适用于激素敏感的和激素难治的前列腺癌。
     本发明化合物， 特别是放射性标记的 L70， 也适用于延迟前列腺癌的发展和减少前 列腺癌血管通透性的方法， 特别是激素敏感的前列腺癌。实际上， 如实施例所示， 本发明化 合物可以约 100％地延迟发展的时间。这是特别显著的， 因为某些药物已被证实少如 15％ 地减少发展的时间。本发明化合物也适用于利于激素敏感的前列腺癌的组合治疗。组合治 疗包括给予本发明化合物以及适用于治疗前列腺癌的其它物质， 例如， 化疗药。 本发明化合 物通过， 例如， 正常化到肿瘤的血流， 利于附加的治疗剂的递送， 从而方便这类组合治疗。
     d. 评价治疗性应用和对靶向与 GRP-R 串流的受体的药物 ( 例如 68Ga-AMBA ： GRP-R 作为岗哨 (Sentinel) 受体的 PET 成像 ) 响应的方法
     本发明也提供检测表达 GRPR 的广谱固体人肿瘤 ( 原发的和转移的 ) 与 GRP 受体
     的串流， 特别是在 RTK 或 “其它靶” 至 GRPR 方向的的串流的方法， 所述固体人肿瘤包括， 但 是不限于乳腺癌和前列腺癌。现在参考图 58， 描述了涉及 GRP-R 与在癌症治疗中使用的其 它受体的已知串流。这些实例的串流描述了当靶向 “中枢” GRP 受体时对 “外周” 受体的效 果。令人意想不到地， 我们现在发现串流可以相反方向进行， 也就是说， 当干涉改变 “外周” 受体活性时， 这改变 “中枢” GRP 受体的活性。通过本发明分子靶向的 GRP 受体与多种其它 癌症受体进行串流。串流意指在 “中枢” GRP 受体和一种或多种 “外周” 受体之间存在交流。 显示与 GRP 受体串流的 “外周” 受体将， 基于作为指向它的干涉的结果的活性变化， 导致 GRP 受体活性变化。当这连贯地和以充足程度存在时， 可以使用 GRP 受体以测定其它， 外周受体 的状态。这些受体各自由于各所述受体相关而与靶向药物相关， 因此在癌症治疗中非常重 要。不限于特定的原理， 这些受体也可以具有对 GRP-R 的影响， 并因此可以使用靶向 GRP-R 的本发明化合物以确定， 如果和当一种或多种其它受体在患者肿瘤中有活性时， 允许肿瘤 科医生根据成像确定靶向受体的药物在肿瘤中有效程度。
     特别地， 本发明允许评价用诸多类型的靶向与 GRP-R 串流的受体 ( 例如 RTK 受体 或雌激素受体 ) 的治疗剂 ( 例如 RTK 抑制剂、 雌激素抑制剂 ) 中任一种的治疗效果， 所述治 疗剂在正常的临床条件 ( 剂量和方案 ) 下给予， 可以具有对这类受体 ( 例如 RTK 受体或雌 激素受体 ) 的功能的效果， 如通过在 GRP 受体特异性信号的表达中变化所测定的， 所述信号 是所述受体进行串流所采用的。成像 GRP-R 受体提供靶向与 GRP-R 串流的其它受体的药物 ( 例如易瑞沙， 赫赛汀和他莫昔芬 ) 治疗 ( 预先 / 之后 ) 的响应信息， 特别是当响应速率低 时是有帮助的。例如， 在乳腺癌中， 赫赛汀具有 9％响应 (30％具有 Her2neu， 30％是治疗应 答的 )。类似地， 阿瓦斯丁在转移的结肠癌中具有 10％响应和爱必妥在转移的结肠癌中具 有 11-14％响应。
     本发明通过体内 GRP 受体特异性信号活性增加、 减少或无变化， 提供预期的对用 这类药物治疗的响应的功能性指示。
     本发明也提供， 通过 GRP 受体家族体外活性变化， 使用放射性标记或以其他方式 可测定的标记的 GRP 受体的激动剂或拮抗剂， 筛选靶向与 GRP-R 串流的外周受体的新药物 的方法。
     本发明也提供， 使用放射性标记的 GRP 受体激动剂或拮抗剂成像 GRP 受体家族体 内活性以监测药物治疗效果的方法。
     这种方法使用本文定义的结合 GRP-R 的本发明配体， 其中 M 是与通过闪烁照相 术或 PET 成像可测定的放射性核素络合的螯合剂， 或是包含放射性标记卤素 ( 例如 F-18， 123 124 131 I-， I- 或 I-) 的结构部分， 并且 M-N-O-P-Q 如本文所定义， 从而成像 GRP-R 以监测靶 向与 GRPR 串流的受体的药物的治疗进展。
     在一个优选的实施方案中， 方法使用结合 GRPR 的本发明配体， AMBA( 本文也称之 68 68 为 L70 或 AMBA)， 所述配体优选采用 Ga 标记 ( 本文也称之为 Ga-L70 或 68Ga-AMBA) 或者 123 124 131 F-18， I-， I-， I- 或 99mTc- 标记以成像 GRP 受体从而监测对靶向与 GRPR 串流的受体的 药物治疗的响应。在一个特别优选的实施方案中， 在这类方法中使用 68Ga-AMBA。
     在一个优选的实施方案中， GRP-R 的成像是纵向的 ： 例如在初始治疗之前 ( 以得到 基线值 )， 在治疗期间 ( 以预见和监测响应， 和测定何时肿瘤群体位移可以保证治疗变化 )， 和在治疗结束时或治疗后 ( 以辅助确定功效， 下一治疗步骤和预见或寻找复发 ) 进行成像。在开始治疗之前至多约 30 天， 优选至多 15 天和理想地至多 7 天， 进行前成像。在 治疗的第一疗程结束时进行开始治疗之后的成像， 优选在开始治疗的 15 天之内和理想地 在开始之后至多 7 天。在计划的一个或多个治疗疗程之后和在其后周期性或在怀疑复发 时， 进行在治疗结束时的成像。
     可以使用的成像剂量为约 3-12mCi(111-444MBq)， 优选～ 3-5mCi(110-185MBq) 的 68 67 放射性标记化合物 ( 例如 Ga-AMBA 或 Ga-AMBA)， 其采用至多约 50μg 的肽的质量剂量， 并采用快速浓注或通过缓慢灌注历经 30 分钟给予。
     在给药之后以适当的间隔， 实施放射性标记的本发明化合物的成像。例如对于 68 68 Ga， 在给药 G 标记的物质之后约 0.5-2 小时， 使用被称为正电子发射断层摄影术 (PET) 的 成像技术和那些本领域技术人员众所周知的装置， 实施成像。例如， R.P.Baum 在 2007 在哥 本哈根核医学欧洲联盟会议中所描述那些的。可代替地， 可以采用 SPECT 装置， 使用那些本 领域技术人员众所周知的技术， 实施非正电子发射放射性核素成像。对于更长寿命放射性 核素， 可以采用与它们的物理半衰期一致的更长时间实施成像。
     预期的响应取决于治疗药物靶和 GRP 受体之间特定的关系， 包括， 但是不限于， GRP 受体特异性信号单调增加， 减少或无变化， 如成像所测定的。
     例如， 可以如下导致活性减少 ： 有效靶向治疗药物， 通过串流和使肿瘤组织不能为 了支持 / 拯救接通 GRPR 而导致 GRP 受体活性减少 ； 或它可以表明治疗无效， 因此没有选择 性抑制肿瘤组织接通 GRPR。
     或者， 可以通过包括 GRP 受体的细胞或肿瘤起动存活原理而导致活性增加。这种 原理可以预示细胞最终死亡或避免破坏的企图 ( 为了持续的生长接通 GRP， 或通过例如由 GRPR 反式激活靶向途径而增强靶向途径 )。
     最后， GRPR 无变化可以暗示， 治疗性处理是有效的， GRPR 不是细胞可获得的拯救 的可代替的途径 ； 或所述治疗不是成功的， 和因此不需要反式激活 GRPR ； 或 GRP 介导拯救， 但是不需要增加 GRPR 的表达 .
     预期的响应取决于治疗药物或使用的组合， 并取决于靶向的癌症细胞， 并将通过 引用的实施例使其更清楚。当在肿瘤中观察到明显变化之前 ( 即在存在可观察到的肿瘤细 胞增殖减少和 / 或可观察到的肿瘤细胞丧失增加作为肿瘤生长速率减小或实际上肿瘤尺 寸减少之前 ) 监测这些 GRP 家族的受体功能变化是最适用的。
     下列表总结了单独采用本发明化合物 ( 优选 Ga-AMBA) 或将其与 18F-FDG 组合而成 像 GRP-R 的可能结果。
     表7： 治疗决定基础 ( 仅仅 Ga-AMBA)
     关键 ： 增加＝↑， 减少＝↓， 无变化＝ PR ＝部分响应或更好 SD ＝稳定的疾病 PD ＝进行性疾病 表8： 治疗决定基础， 与 18F-FDG 组合的 Ga-AMBA
     关键 ：
     增加＝↑， 减少＝↓， 无变化＝
     PR ＝部分响应或更好
     SD ＝稳定的疾病
     PD ＝进行性疾病
     F ＝ 18F-FDG
     A ＝ 68Ga-AMBA
     如在实施例中更详细解释的， 本文试验显示， 体外在细胞中培养物和体内在小 鼠中， 不靶向 GRP 受体的药物治疗以活的细胞为基础调节 177Lu-AMBA( 和通过推理可知 67/68 Ga-AMBA 也如此 ) 的 GRP-R 摄取。 这种试验显示， 在前列腺和乳腺癌细胞系中， 在靶向外 周串流受体的药物和 GRP 受体之间的串流。
     令人意想不到地， 实施例也确定了， 使用 177Lu-AMBA 测量 GRP-R 活性而测定的信 号不同于 FDG 的信号。例如， 通过类似量采用达沙替尼治疗 pfPC-3 前列腺癌细胞， 增加 177 18 Lu-AMBA 摄取至多 76％， 但是减少 NBDG， 其是 2 脱氧葡萄糖和 F- 氟脱氧葡萄糖的荧光类 似物。一般而言， 因为动力学范围增加， 与信号减少相比， 更期望信号增加。
     因此， 实施例显示， GRP-R 活性 ( 并因此 GRP-R 的成像 ) 证明药物靶向与 GRP-R 串 流的受体 ( 例如， 雌激素受体， Src 受体家族， 多种 RTK 受体等 ) 效果的能力。此外， 实施例 18 显示， 本发明化合物， 例如 Ga-AMBA， 比 F-FDG 更适于监测治疗进展。
     6. 给药和添加剂
     本发明化合物的适宜给药方案对于本领域技术人员来说是已知的。 该化合物可以 用许多方法施用， 所述方法包括但不限于单一或多次 IV 或 IP 注射。对于放射性药物， 施用 的放射性的量足以允许成像或在放射治疗的情况下导致破坏或除去含靶向的 GRP-R 的组 织， 但不至于造成非靶体 ( 正常组织 ) 发生实质性损伤。闪烁成像所需的量和给药在上文 作了讨论。放射治疗所需的量和给药对于不同的构建体也是不同的， 它取决于所用的同位 素的能量和半衰期、 体内试剂的摄取和清除程度以及肿瘤的质量。 一般地， 剂量范围可以从 大约 30-50mCi 的单一剂量至至多大约 3 居里的累积剂量。
     如本文解释的， 适当地选择质量剂量的给药可以减少在具有功能性 GRP 受体的正 常的组织中标记的本发明化合物的给予剂量的比率， 因此改善肿瘤信号的清晰度和 / 或增 加在肿瘤中治疗性放射性核素的剂量。
     对于光学成像化合物而言， 足以获得所需成像增强的剂量是本领域技术人员已知 的且可根据所用染料或其它化合物、 待成像的器官或组织、 所用成像设备等而广泛变化。
     本发明的组合物可以包括生理学上可接受的缓冲剂， 并可能需要照射稳定剂以防 止在注射前化合物发生辐射分解破坏。放射稳定剂对本领域技术人员来说是已知的， 并可
     以包括例如对氨基苯甲酸、 抗坏血酸、 龙胆酸等。
     包含制备本发明的诊断或治疗剂所需的所有组分的单瓶或多瓶试剂盒是本发明 的一个组成部分。在放射性药物的情况下， 这些试剂盒通常还包括除了放射性核素之外的 所有必需的成分。
     例如， 用于制备本发明的放射性药物的单瓶试剂盒优选包含式 M-N-O-P-G 的螯合 剂 / 连接基 / 靶向肽缀合物， 一种亚锡盐来源 ( 如果需要还原， 例如在使用锝的时候 ) 或其 它可药用的还原剂， 并用可药用的酸或碱适宜地缓冲以调节 pH 至大约 3 至大约 9 的值。所 用的还原剂的数量和类型将高度取决于待形成的交换络合物的性质。 适宜的条件对本领域 技术人员来说是已知的。优选试剂盒内容物为冻干形式。这种单瓶试剂盒可以任选包含不 稳定或交换配体， 例如葡糖庚酸盐、 葡萄糖酸盐、 甘露醇、 苹果酸盐、 柠檬酸或酒石酸， 并还 可以包含反应修饰剂如二亚乙基三胺 - 五乙酸 (DPTA)、 乙二胺四乙酸 (EDTA)， 或者 α、 β 或 γ- 环糊精， 其用于改善最终产物的放射化学纯度和稳定性。该试剂盒还可以包含稳定 剂、 膨胀剂如甘露醇， 它们设计用于辅助冻干工艺， 和本领域技术人员已知的其它添加剂。
     多瓶试剂盒优选包含相同的常规组分， 但使用多于一个的小瓶以重构放射性药 物。例如， 一个小瓶可以包含所有在加入高锝酸盐时形成不稳定的 Tc(V) 络合物所需的成 分 ( 例如亚锡源或其它还原剂 )。将高锝酸盐加到此小瓶， 并在等待适宜的时间之后将此 小瓶的内容物加到包含螯合剂和靶向肽以及适于将 pH 调节至其最佳值的缓冲剂的第二小 瓶。在大约 5 至 60 分钟的反应时间之后， 形成本发明的络合物。有利的是此多瓶试剂盒的 两个小瓶的内容物均被冻干。 如上所述， 反应修饰剂、 交换配体、 稳定剂、 膨胀剂等可以存在 于任一个或两个小瓶中。
     化合物的一般制备
     取决于所选择的螯合剂， 本发明化合物可以通过多种方法制备。化合物的肽部分 可以最为便利地由肽合成技术中已常规建立和已知的技术， 例如固相肽合成 (SPPS) 方法 来制备。因为要进行固相合成， 因此使用交替 FMOC 保护和脱保护是优选的制备短肽的方 法。重组 DNA 技术优选用于生产蛋白和它的长片段。
     固相肽合成 (SPPS) 包括往与不溶性载体或基质 ( 如聚苯乙烯 ) 连接的生长的肽 链上分步加入氨基酸残基。所述肽的 C 末端残基首先固定于可商购得到的载体上， 其氨基 用 N- 保护剂 ( 如叔丁氧羰基 (Boc) 或芴基甲氧基羰基 (Fmoc)) 保护。用适宜的脱保护剂 除去氨基保护基， 对于 Boc 为 TFA， 或对于 Fmoc 为哌啶， 并采用偶联剂 ( 如二异丙基碳二亚 胺 (DIC)) 加入下一个氨基酸残基 (N- 保护形式 )。在肽键形成后， 从载体上洗去试剂。在 加入最后的残基之后， 用适宜的试剂 ( 如三氟乙酸 (TFA) 或氟化氢 (HF)) 从载体上裂解肽。
     通过分段偶联的化合物的可替代选择的制备
     本发明化合物还可以通过本领域中称为分段偶联 (segment coupling) 或片段缩 合的方法来制备 (Barlos， K. 和 Gatos， D. ； 2002″ Convergent Peptide Synthesis″ in Fmoc Solid Phase Synthesis-APractical Approach ； Eds.Chan， W.C. 和 White， P.D. ； Oxford University Press， New York ； Chap.9， pp 215-228)。 在此方法中， 通过液相合成或 固相合成或这两种方法的组合分别制备通常为侧链保护形式的肽的片段。 片段的选择是关 键的， 且用可以提供易处理数目的片段的分割策略来进行选择， 所述片段的 C- 末端残基和 N- 末端残基设计用于提供肽合成中最干净利落的偶联。最好片段的 C- 末端残基不含手性α 碳 ( 甘氨酸或其它部分， 在偶联步骤中在待活化的羧基的碳∝处为非手性 )， 或者包含在 活化和偶联期间的外消旋化倾向是可能选择中最低的氨基酸。各片段的 N- 末端氨基酸的 选择基于将活化的酰基中间产物偶联至氨基的容易程度。一旦选择分割策略， 则根据所需 的中间产物的合成可达性和所得产物的处理和纯化 ( 如果需要的话 ) 的相对容易性来选择 各片段的偶联方法。 然后将片段偶联在一起， 所述片段都在溶液中， 或者一个在固体相而另 一个在溶液中， 从而制备完全或部分保护形式的最终结构。
     然后除去受保护的目标化合物的保护基， 纯化， 并分离得到最终期望的产物。 分段 偶联方法的优点是各个片段可以分别纯化， 允许除去副产物， 如由不完全偶联产生缺失序 列， 或者那些衍生自反应 ( 如偶联步骤中侧链酰胺脱水， 或在 Fmoc 基团脱保护期间将侧链 ( 如 Gln 的侧链 ) 内环化至 α- 氨基 ) 的副产物。这些副产物都会存在于常规的基于树脂 的 “直通” 肽链装配的最终产物中， 如果需要的话可以在分段偶联策略的许多阶段除去这些 物质。分段偶联策略的另一个重要的优点是可以应用不同的溶剂、 试剂和条件以将各片段 的合成最优化至高纯度和产率， 导致最终产物的纯度和产率得到提高。其它意识到的优点 是试剂消耗减少和成本降低。 实施例 提供以下实施例作为可以用于制备本发明多种化合物的不同方法的实例。 在各个 实施例中， 存在用单一黑体大写字母 ( 例如 A、 B、 C) 标识的化合物， 其与在附图中相同标记 的对应化合物相关。
     一般实验
     A. 所用其它缩写词的定义
     在整个说明书中使用以下常用缩写 ：
     1， 1- 二甲基乙氧基羰基 (Boc 或 Boc) ；
     9- 芴基甲氧基羰基 (Fmoc) ；
     烯丙氧基羰基 (Aloc) ；
     1- 羟基苯并三唑 (HOBt 或 HOBT) ；
     N， N′ - 二异丙基碳二亚胺 (DIC) ；
     N- 甲基吡咯烷酮 (NMP) ；
     乙酸酐 (Ac2O) ；
     (4， 4- 二甲基 -2， 6- 二氧代亚环己 -1- 基 )-3- 甲基丁基 (iv-Dde) ；
     三氟乙酸 (TFA) ；
     试剂 B(TFA ∶ H2O ∶苯酚∶三异丙基硅烷， 88 ∶ 5 ∶ 5 ∶ 2) ；
     二异丙基乙胺 (DIEA) ；
     O-(1H- 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， N′， N′ - 四甲基脲 O-(7- 氮杂苯并三唑 -1- 基 )-1， 1， 3， 3- 四甲基脲 N- 羟基琥珀酰亚胺 (NHS) ； 固相肽合成 (SPPS) ； 二甲亚砜 (DMSO) ； 二氯甲烷 (DCM) ；81六氟磷酸盐 (HBTU) ； 六氟磷酸盐 (HATU) ；102076214 A CN 102076221
     说明书78/220 页二甲基甲酰胺 (DMF) ；
     二甲基乙酰胺 (DMA) ；
     1， 4， 7， 10- 四氮杂环十四烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸 (DOTA) ；
     三异丙基硅烷 (TIPS) ；
     1， 4， 7， 10- 四氮杂环十四烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸 (DOTA)
     (1R)-1-[1， 4， 7， 10- 四氮杂 -4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 ) 环十二烷基 ] 乙烷 -1， 2- 二甲 酸 (CMDOTA) ；
     胎牛血清 (FBS) ；
     人血清白蛋白 (HSA) ；
     人前列腺癌细胞系 (PC3) ；
     氯甲酸异丁酯 (IBCF) ；
     三丁基胺 (TBA) ；
     放射化学纯度 (RCP) ； 和
     高效液相色谱 (HPLC)。
     B. 材料
     所用的 Fmoc- 保护的氨基酸购自 Nova-Biochem(San Diego， CA， USA)， Advanced Chem Tech(Louisville， KY.， USA)、 Chem-Impex International(Wood Dale Ill.， USA) 和 Multiple Peptide Systems(SanDiego， CA.， USA)。 合 成 中 所 需 的 其 它 化 学 物 质、 试 剂 和 吸 附 剂 购 自 Aldrich Chemical Co.(Milwaukee， WI， USA) 和 VWR Scientific Products(Bridgeport， NJ.， USA)。 用于肽合成的溶剂购自 Pharmco Co.(Brook field CT.， USA)。用于 HPLC 分析和纯化的柱购自 Waters Co.(Milford， MA.， USA)。以下给出非商购 的物质的实验细节。
     C. 肽合成的仪器
     使用 Advanced ChemTech 496ΩMOS 合成仪， Advanced ChemTech 357FBS 合成仪 和 / 或通过人工肽合成来制备肽。但是， 所用的反复脱保护和链延伸的方案对于所有方法 来说是相同的。
     D. 采用 Symphony 仪器 (Rainin 制造 ) 的自动合成
     用 Protein Technologies Inc. 提供的 Symphony soft ware(Version3) 进行合 成。使用置换率为 0.25mmol/g 的 Novagel TGR 树脂， 各孔包含 0.2g 树脂 (50μmol)。将氨 基酸溶于 NMP， 其浓度为 0.25M。制备 0.25M 在 DMF 中的 HBTU 和 N- 甲基吗啉的溶液， 并将 其用于偶联。所有的偶联进行 2.0 小时。裂解在机器外通过将树脂转移至另一反应容器并 使用如在人工合成中使用的试剂 B 完成。
     E. 用于分析和纯化的仪器
     使用 Shimadzu-LC-10A 双泵梯度分析 LC 系统， 采用用于系统控制、 数据获取和运 行后处理的 Shimadzu-ClassVP 软件 4.1 版完成分析 HPLC。在 Hewlett-Packard Series 1100MSD 质谱仪上获得质谱， 其接口为 Hewlett-Packard Series 1100 双泵梯度 HPLC 系统， 配备 Agilent Technologies 1100series 自动取样器， 适于直接流式注射或注射至 Waters Associates XTerra MS C18 柱 (4.6mm×50mm， 5μ 颗 粒， 孔 ) 上。 此 仪 器 通 过 HP Kayak 工作站， 使用用于样品提交的′ MSDAnyone′软件和用于仪器控制和数据获取的 HPChemstation 软件来驱动。在大部分的情况下， 通过使用注射 5μL 浓度为 1mg/mL 的样品 溶液进行直接注射来引入样品， 并使用阳离子电喷雾进行分析以得到用于确证结构的 m/e 和 m/z( 带多个电荷 ) 离子。在 Varian Innova 波谱仪上于 500MHz 获得 1H-NMR 谱。在相 同的仪器上， 于 125.73MHz 获得 13C-NMR 谱。通常将残余的 1H 吸收， 或者在 13C-NMR 的情况 下所用溶剂的 13C 吸收用作内标 ； 在其它情况下采用四甲基硅烷 (δ ＝ 0.00ppm)。以 δ 单 位给出共振值。从 Quantitative Technologies Inc.Whitehouse NJ 获得微分析数据。用 Shimadzu-LC-8A 双泵梯度制备 HPLC 系统， 使用用于系统控制、 数据获取、 级分收集和运行 后处理的 Shimadzu-ClassVP 软件 4.3 版完成制备 HPLC。
     F. 用于肽合成的一般方法
     将 Rink 酰胺 -Novagel HL 树脂 (0.6mmol/g) 用作固体载体。
     G. 偶联操作
     在典型实验中， 将第一氨基酸装载至 0.1g 树脂 (0.06mmol)。将在 NMP 中的适宜 的 Fmoc- 氨基酸 (0.25M 溶液 ； 0.960mL) 加至树脂， 然后加入 N- 羟基苯并三唑 (0.5M， 在 NMP 中； 0.48mL)。并将反应区 (block)( 在自动肽合成的情况下 ) 或各反应容器 ( 在人工肽合 成的情况下 ) 振荡大约 2 分钟。向以上混合物中加入二异丙基碳二亚胺 (0.5M， 在 NMP 中 ； 0.48mL)， 并将反应混合物在室温下振荡 4 小时。然后通过应用正压力无水氮气来冲洗反应 区或单独的反应容器内的反应物。
     H. 洗涤操作
     给反应区的每孔装填 1.2mL NMP， 并将该区振荡 5 分钟。在氮正压下排出溶液。重 复此操作三次。在使用单独的容器进行人工合成的情况下使用相同的方法和适宜体积的 NMP。
     I. 除去 Fmoc 保护基团
     用 1.5mL 在 DMF 中的 20％哌啶 (v/v) 处理含有 Fmoc- 保护的氨基酸的树脂， 并将 该反应区或单独的人工合成容器振荡 15 分钟。从树脂中排出溶液。重复此过程一次， 并用 上述的洗涤方法洗树脂。
     J. 配体 (DOTA 和 CMDOTA) 的最终偶联
     将树脂结合的肽连接基构建体的 N- 末端氨基去封闭， 并洗涤树脂。制备 0.25M 在 NMP 中的目标配体和 HBTU 的溶液， 并用两倍当量的 DIEA 进行处理。 将所得的激活配体的溶 液加至树脂 (1.972mL ； 0.48mmol)， 并将反应混合物在室温下振荡 24-30 小时。排出溶液并 洗涤树脂。用 1.5mL 二氯甲烷 (3X) 完成树脂的最终洗涤。
     K. 最终肽的脱保护和纯化
     将试剂 B 的溶液 (2mL ； 88 ∶ 5 ∶ 5 ∶ 2-TFA ∶苯酚∶水∶ TIPS) 加至树脂， 并将反 应区或单独的容器于室温下振荡 4.5 小时。将所得的包含脱保护肽的溶液排出至小瓶中。 使用 1mL 试剂 B 再重复此过程 2 次。用 Genevac HT-12 series II 离心浓缩器减压浓缩合 并的滤液。然后将各小瓶中残余物与 2mL Et2O 一起研磨， 并弃去上清液。重复此方法两次 以得到肽， 为无色固体。将该粗制肽溶于水 / 乙腈， 并用 WatersXTerra MS C18 制备 HPLC 柱 (50mm×19mm， 5 微米粒径， 10 微米粒径 . 级分， 并通过冻干分离肽。83孔径 ) 或 Waters-YMC C18ODS 柱 (250mm×30mm i.d.，孔径 ) 纯化。收集含产物的级分， 并用 HPLC 分析。收集＞ 95％纯度的102076214 A CN 102076221
     说明书80/220 页制备型 HPLC 的条件 (Waters XTerra 柱 ) ： 洗脱速率 ： 50mL/ 分 检测 ： UV， λ ＝ 220nm 洗脱剂 A ： 0.1％ TFA 水溶液 ； 洗脱剂 B ： 乙腈 (0.1％ TFA)。 HPLC 分析的条件 ： 柱： Waters XTerra(Waters Co. ； 4.6×50mm ； MS C18 ； 5 微米粒子， 孔 )。洗脱速率 ： 3mL/ 分 ； 检测 ： UV， λ ＝ 220nm。
     洗脱剂 A ： 0.1％ TFA 水溶液 ； 洗脱剂 B ： 乙腈 (0.1％ TFA)。
     实施例 I- 图 1A-B
     合成 L62
     概述 ： 如图 1A-B 所示， 用以下步骤制备 L62 ：
     用 NaOH 水 解 (3β， 5β)-3- 氨 基 胆 烷 -24- 酸 甲 酯 A， 得 到 对 应 的 酸 B， 然后与 Fmoc-Cl 反 应 得 到 中 间 产 物 C。 使 用 八 肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2(BB N[7-14][SEQ ID NO ： 1]) 官能化的 Rink 酰胺树脂依次与 C、 Fmoc- 甘氨酸和 DOTA 三叔丁酯 反应。在用试剂 B 裂解和脱保护之后， 用制备 HPLC 纯化粗品得到 L62。总产率 ： 2.5％。以 下提供更多的细节 ： A. 用铃蟾肽 [7-14](SEQ ID NO ： 1) 官能化的 Rink 酰胺树脂， (A)
     在固相肽合成容器中， 将 Fmoc- 氨基酸 (24mmol)、 N- 羟基苯并三唑 (HOBt)(3.67g ； 24mmol) 和 N， N′ - 二异丙基碳二亚胺 (DIC)(3.75mL ； 24mmol) 依次加到在 DMF(45mL) 中 TM 的 Rink 酰胺 NovaGel 树脂 (10g ； 6.0mmol)A 的悬浮液。将混合物于室温下使用台式振荡 器振荡 3 小时， 然后排空溶液， 并用 DMF(5×45mL) 洗涤树脂。将树脂与在 DMF(45mL) 中的 25％哌啶一起振荡 4 分钟， 倒空溶液， 并加入新鲜的在 DMF(45mL) 中的 25％哌啶。 将该悬浮 液振荡 10 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMF(5×45mL) 洗涤树脂。
     将此方法依次用于以下氨基酸 ：
     N-α-Fmoc-L- 蛋 氨 酸、 N-α-Fmoc-L- 亮 氨 酸、 N-α-Fmoc-Nim- 三 苯 甲 基 -L- 组 氨 酸、 N-α-Fmoc- 甘 氨 酸、 N-α-Fmoc-L- 缬 氨 酸、 N-α-Fmoc-L- 丙 氨 酸、 in N-α-Fmoc-N -Boc-L- 色氨酸。
     在 最 后 的 偶 联 反 应 中， 将 N-α-Fmoc-N-γ- 三 苯 甲 基 -L- 谷 氨 酰 胺 (14.6g ； 24mmol)、 HOBt(3.67g ； 24mmol) 和 DIC(3.75mL ； 24mmol) 加到在 DMF(45mL) 中的树脂。将该 混合物于室温下振荡 3 小时， 倒空溶液， 并用 DMF(5×45mL)、 CH2Cl2(5×45mL) 洗涤树脂， 并
     进行真空干燥。
     B. 制备中间产物 B 和 C( 图 1A) ：
     1. 合成 (3β， 5β)-3- 氨基胆烷 -24- 酸 (B)
     45 ℃ 下 将 1M NaOH 溶 液 (16.6mL ； 16.6mmol) 滴 加 到 在 MeOH(65mL) 中 的 (3β， 5β)-3- 氨基胆烷 -24- 酸甲酯 (5.0g ； 12.8mmol) 的溶液。45℃下搅拌 3 小时后， 将混合物 浓缩至 25mL， 并加入 H2O(40mL) 和 1MHCl(22mL)。将沉淀的固体过滤， 用 H2O(2×50mL) 洗涤 并真空干燥得到 B， 为一种白色固体 (5.0g ； 13.3mmol)。产率 80％。
     2. 合成 (3β， 5β)-3-(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基胆烷 -24- 酸 (C)
     将在 1， 4- 二烷 (9mL) 中的 9- 芴基甲氧基羰基氯 (0.76g ； 2.93mmol) 的溶液滴加到在 0℃下搅拌的在 10％ Na2CO3 水溶液 (16mL) 和 1， 4- 二烷 (9mL) 中的 (3β， 5β)-3- 氨基胆烷 -24- 酸 B(1.0g ； 2.66mmol) 的悬浮液。室温下搅拌 6 小时后， 加入 H2O(90mL)， 用 Et2O(2×90mL) 洗涤水相， 然后加入 2M HCl(15mL)( 最终 pH ： 1.5)。 用 EtOAc(2×100mL) 萃取 水相， 用 Na2SO4 干燥有机相并蒸发。用快速色谱法纯化粗品得到 C， 为一种白色固体 (1.2g ； 2.0mmol)。产率 69％。
     C. 合成 L62(N-[(3β， 5β)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 胆烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色 氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 ) ( 图 1B) ：
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将该悬浮液振荡 20 分 钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 (3β， 5β)-3-(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨 基胆烷 -24- 酸 C(0.72g ； 1.2mmol)、 N- 羟基苯并三唑 (HOBT)(0.18g ； 1.2mmol)、 N， N′ - 二 异丙基碳二亚胺 (DIC)(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 24 小时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉 一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物再振荡 20 分钟。倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 N-α-Fmoc- 甘氨酸 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物于室温 下振荡 3 小时， 倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％ 吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 将混合物再振荡 20 分钟。倒空溶液， 用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂， 然后将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的加合物 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加 至 树 脂。 将 混合物在室温下振荡 24 小时， 倒空溶液， 用 DMA(5×7mL) 和 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并 真空干燥。将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压下 蒸发溶液得到一种油状粗品， 将其与 Et2O(20mL) 一起研磨得到沉淀。离心收集沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤， 然后用 HPLC 分析， 并用制备 HPLC 纯化。将含产物的级分冻干得到 -3 L62(6.6mg ； 3.8×10 mmol)， 为一种白色固体。产率 4.5％。
     实施例 II- 图 2A-F 合成 L70、 L73、 L74、 L115 和 L116
     概述 ： 通过以下方法获得产物 ： 将在 Rink 酰胺树脂上的八肽 Gln-Trp-Ala-Val-G ly-His-Leu-Met-NH2(BBN[7-14][SEQ ID NO ： 1])( 具有适宜的侧链保护 ) 与不同的连接基 偶联， 然后用 DOTA 三叔丁酯官能化。在用试剂 B 裂解和脱保护之后， 通过制备 HPLC 纯化最 终产物。总产率 3-9％。
     A. 合成 L70( 图 2A) ：
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 Fmoc-4- 氨基苯甲酸 (0.43g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物在室温下
     振荡 3 小时， 倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％ 吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉， 并将混合物振 荡 20 分钟。倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 Fmoc- 甘氨酸 (0.36g ； 1.2mmol)、 HATU(0.46g ； 1.2mmol) 和 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 在 DMA(7mL) 中搅拌 15 分钟， 然后将溶液 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 2 小时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将 树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中 的 50％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的加合物 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物于室温下振荡 24 小时。倒空溶液， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂并真空干燥。将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4 小时。 将树脂过滤， 并在减压下蒸发滤液得到一种油状粗品， 将其与 Et2O(5mL) 一起研磨。离心收 集沉淀。并用 Et2O(5×5mL) 洗涤， 然后用 HPLC 分析并用制备 HPLC 纯化。将包含产物的级 分冻干得到 L70， 为一种白色绒毛状固体 (6.8mg ； 0.005mmol)。产率 3％。
     B. 合成 L73、 L115 和 L116( 图 2B-2E) ：
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 Fmoc- 连接基 -OH(1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 3 小时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。倒 空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸 三 (1， 1- 二 甲 基 乙 基 ) 酯 与 NaCl 的 加 合 物 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在室温 下振荡 24 小时， 倒空溶液并用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂并真空干燥。将树脂 在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油 状粗品， 将其与 Et2O(5mL) 一起研磨。离心收集沉淀， 并用 Et2O(5×5mL) 洗涤， 然后用 HPLC 分析并用制备 HPLC 纯化。将包含产物的级分冻干。
     C. 合成 L74( 图 2F) ：
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉一 起振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液搅拌 20 分 钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 Fmoc- 六氢异烟酸 (0.42g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振 荡 3 小时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 Fmoc- 甘氨酸 (0.36g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 3 小时， 倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉一起振 荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙 酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的加合物 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在室温 下振荡 24 小时， 倒空溶液， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将树脂 在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油 状粗品， 将其与 Et2O(5mL) 一起研磨。离心收集沉淀并用 Et2O(5×5mL) 洗涤， 然后用 HPLC 分析， 并用 HPPLC 纯化。将包含产物的级分冻干得到 L74， 为一种白色绒毛状固体 (18.0mg ； 0.012mmol)。产率 8％。
     实施例 III- 图 3A-E
     合成 L67
     概述 ： 用 NaOH 水解 (3β， 5β)-3- 氨基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸甲酯 A 得到对应的 酸 B， 然后使其与 Fmoc- 甘氨酸反应得到中间产物 C。使用八肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His -Leu-Met-NH2(BBN[7-14][SEQ IDNO ： 1]) 官能化的 Rink 酰胺树脂依次与 C 和 DOTA 三叔丁 酯反应。在用试剂 B 裂解和脱保护之后， 用制备 HPLC 纯化粗品， 得到 L67。总产率 ： 5.2％。
     A. 合成 (3β， 5β)-3- 氨基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸， (B)( 图 3A)
     在 45 ℃下将 1M NaOH 溶液 (6.6mL ； 6.6mmol) 滴加到在 MeOH(15mL) 中的 (3β， 5β)-3- 氨基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸甲酯 A(2.1g ； 5.1mmol) 的溶液。45 ℃下搅拌 3 小时 后， 将混合物浓缩至 25mL， 然后加入 H2O(25mL) 和 1M HC1(8mL)。将沉淀的固体过滤， 用 H2O(2×30mL) 洗涤， 并真空干燥得到 B， 为一种白色固体 (1.7g ； 4.4mmol)。产率 88％。
     B. 合成 (3β， 5β)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -12- 氧代胆 烷 -24- 酸 (C)( 图 3A)
     将 三 丁 基 胺 (0.7mL ； 3.1mmol) 滴 加 到 在 0 ℃ 下 搅 拌 的 在 THF(25mL) 中 的 N-α-Fmoc- 甘氨酸 (0.9g ； 3.1mmol) 的溶液。随后加入氯甲酸异丁酯 (0.4mL ； 3.1mmol)， 并 在 10 分 钟 后 于 1 小 时 内 将 在 DMF(30mL) 中 的 三 丁 基 胺 (0.6mL ； 2.6mmol) 和 (3β， 5β)-3- 氨基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸 B(1.0g ； 2.6mmol) 的悬浮液滴加到冷却的溶液。使混 合物升温， 并在 6 小时后将溶液浓缩至 40mL， 然后加入 H2O(50mL) 和 1NHCl(10mL)( 最终 pH ： 1.5)。将沉淀的固体过滤， 用 H2O(2×50mL) 洗涤， 真空干燥， 并用快速色谱法纯化得到 C， 为 一种白色固体 (1.1g ； 1.7mmol)。产率 66％。
     C. 合成 L67(N-[(3β， 5β)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-12， 24- 二氧代胆烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺 酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋 氨酰胺 )( 图 3B 和 3E)。
     将树脂 D(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉一 起振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉。将悬浮液搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 (3β， 5β)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲 氧 基 ) 氨 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 ]-12- 氧 代 胆 烷 -24- 酸 C(0.80g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加 至 树 脂， 将 混 合 物 在 室 温 下 振 荡 24 小 时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉一起振 荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙 酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯的加合物与 NaCl(0.79g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在室温 下振荡 24 小时， 倒空溶液， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂并真空干燥。将树脂 在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种 油状粗品， 将其与 Et2O(20mL) 一起研磨。
     实施例 IV- 图 4A-H
     合成 L63 和 L64
     概述 ： 用 NaOH 水解 (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸甲酯 1b 得到中间产物 2b， 然后使其与 Fmoc- 甘氨酸反应得到 3b。使用八肽 Gln-Trp-Ala-Val-G ly-His-Leu-Met-NH2(BBN[7-14][SEQ IDNO ： 1]) 官能化的 Rink 酰胺树脂与 3b 反应， 然后与 DOTA 三叔丁酯反应。在用试剂 B 裂解和脱保护之后， 用制备 HPLC 纯化粗品得到 L64。从已 经获得的中间产物 2a 开始重复相同的过程得到 L63。总产率分别为 9 和 4％。
     A. 合成 (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸， (2b)( 图 4A)
     将 1M NaOH 溶液 (130mL ； 0.13mol) 滴加到在 45℃下加热的在 MeOH(300mL) 中的 (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸甲酯 1b(42.1g ； 0.10mol) 的溶液。 45℃下搅拌 3 小时后， 将混合物浓缩至 150mL， 并加入 H2O(350mL)。在用 CH2Cl2(2×100mL) 萃 取 之 后， 将 水 溶 液 浓 缩 到 200mL 并 加 入 1M HCl(150mL)。 将 沉 淀 的 固 体 过 滤， 用 H2O(2×100mL) 洗涤， 并真空干燥得到 2b， 为一种白色固体 (34.8g ； 0.08mol)。产率 80％。
     B. 合成 (3β， 5β， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -12- 羟 基胆烷 -24- 酸， (3a)( 图 4A)
     将 三 丁 基 胺 (4.8mL ； 20.2mmol) 滴 加 到 在 0 ℃ 下 搅 拌 的 在 THF(120mL) 中 的 N-α-Fmoc- 甘氨酸 (6.0g ； 20.2mmol) 的溶液。 随后加入氯甲酸异丁酯 (2.6mL ； 20.2mmol)， 并在 10 分钟后于 1 小时内将在 DMF(120mL) 中的三丁基胺 (3.9mL ； 16.8mmol) 和 (3β， 5β， 12α)-3- 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 2a(6.6g ； 16.8mmol) 的悬浮液滴加到冷却的溶液。 使 混合物升温， 并在 6 小时后将溶液浓缩至 150mL， 然后加入 H2O(250mL) 和 1N HCl(40mL)( 最 终 pH ： 1.5)。 将沉淀的固体过滤， 用 H2O(2×100mL) 洗涤， 真空干燥， 并用快速色谱法纯化得 到 3a， 为一种白色固体 (3.5g ； 5.2mmol)。产率 31％。
     C. 合成 (3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸， (3b)( 图 4A)
     将 三 丁 基 胺 (3.2mL ； 13.5mmol) 滴 加 到 在 0 ℃ 下 搅 拌 的 在 THF(80mL) 中 的 N-α-Fmoc- 甘氨酸 (4.0g ； 13.5mmol) 的溶液。 然后加入氯甲酸异丁酯 (1.7mL ； 13.5mmol)， 并在 10 分钟后于 1 小时内将在 DMF(80mL) 中的三丁基胺 (2.6mL ； 11.2mmol) 和 (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 3a(4.5g ； 11.2mmol) 的悬浮液滴加到冷 却的溶液。使混合物升温， 并在 6 小时后将溶液浓缩至 120mL， 然后加入 H2O(180mL) 和 1N HCl(30mL)( 最终 pH ： 1.5)。将沉淀的固体过滤， 用 H2O(2×100mL) 洗涤， 真空干燥， 并用快 速色谱法纯化得到 3a， 为一种白色固体 (1.9g ； 2.8mmol)。产率 25％。
     在一个可替代选择的方法中， (3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨 基 ] 乙酰基 ] 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸， (3b) 可以如下制备 ：将 N- 羟 基 琥 珀 酰 亚 胺 (1.70g， 14.77mmol) 和 DIC(1.87g， 14.77mmol) 依 次 加 到在二氯甲烷 (15mL) 中的 Fmoc-Gly-OH(4.0g， 13.45mmol) 的搅拌溶液 ； 将所得的混合 物于室温下搅拌 4 小时。通过过滤除去形成的 N， N ′ - 二异丙基脲， 并用乙醚 (20mL) 洗涤固体。除去挥发物， 并用乙醚 (3×20mL) 洗涤形成的固体 Fmoc-Gly- 琥珀酰亚氨 基酯。然后将 Fmoc-Gly- 琥珀酰亚氨基酯再溶于无水 DMF(15mL)， 并将 3- 氨基脱氧胆 酸 (5.21g， 12.78mmol) 加到该澄清的溶液。将反应混合物于室温下搅拌 4 小时， 加入水 (200mL) 并将沉淀的固体过滤， 用水洗涤， 干燥并用硅胶色谱法 (TLC( 二氧化硅 ) ： (Rf ： 0.50， 硅胶， CH2Cl2/CH3OH， 9 ∶ 1)( 洗脱剂 ： CH2Cl2/CH3OH(9 ∶ 1)) 纯化得到 (3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸， 为一 种无色固体。产率 ： 7.46g(85％ )。
     D. 合成 L63(N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮 杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-12- 羟基 -24- 氧代胆烷 -24- 基 ]-L- 谷 氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰 基 -L- 蛋氨酰胺 )( 图 4B)
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉一 起振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液搅拌 20 分 钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 (3β， 5β， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基 甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 3a(0.82g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物在室温下振荡 24 小时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振 荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙 酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的加合物 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在室温 下振荡 24 小时， 倒空溶液并用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将树 脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种 油状粗品， 用 Et2O(5mL) 处理后得到一种沉淀。离心收集沉淀并用 Et2O(5×5mL) 洗涤， 然 后用 HPLC 分析和纯化。将包含产物的级分冻干得到 L63， 为一种白色绒毛状固体 (12.8mg ； 0.0073mmol)。产率 9％。
     E. 合 成 L64(N-[(3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-7， 12- 二羟基 -24- 氧代胆 烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 )( 图 4C)
     将树脂 A(0.5g， 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液搅拌 20 分钟， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 (3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧 基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 3b(0.81g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加 至 树 脂， 将 混 合 物 在 室 温 下 振 荡 24 小 时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙 酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的加合物 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在室 温下振荡 24 小时， 倒空溶液， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥 . 将 树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一 种油状粗品， 将其与 Et2O(5mL) 一起研磨。离心收集沉淀， 并用 Et2O(5×5mL) 洗涤。然后 将其溶于 H2O(20mL)， 并加入 Na2CO3(0.10g ； 0.70mmol) ； 将所得的混合物在室温下搅拌 4 小 时。用 HPLC 纯化此溶液， 将包含产物的级分冻干得到 L64， 为一种白色绒毛状固体 (3.6mg ； 0.0021mmol)。产率 4％。
     实施例 V- 图 5A-E
     合成 L71 和 L72
     概述 ： 分两步得到产物。第一步是在上文讨论的 Rink 酰胺树脂上固相合成八肽 G ln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2(BBN[7-14][SEQ ID NO ： 1])( 具有适宜的侧链保护 基 )。第二步是与不同的连接基偶联， 然后用 DOTA 三叔丁酯官能化。在用试剂 B 裂解和脱 保护之后， 通过制备 HPLC 纯化最终产物。总产率 3-9％。
     A. 铃蟾肽 [7-14] 官能化和裂解方法 ( 图 5A 和 5D)
     将树脂 B(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂 . 将 Fmoc- 连接基 -OH(1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在室温下振荡 3 小时， 倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。倒 空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸 三 (1， 1- 二 甲 基 乙 基 ) 酯 与 NaCl 的 加 合 物 C(0.79g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物于室温 下振荡 24 小时。倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将 树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发滤液得到一 种油状粗品， 将其与乙醚 (5mL) 一起研磨。离心收集沉淀， 并用乙醚 (5×5mL) 洗涤， 然后用 分析 HPLC 分析， 并用制备 HPLC 纯化。将包含产物的级分冻干。
     B. 产物
     1.L71(4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨 酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 )
     得到产物， 为一种白色绒毛状固体 (7.3mg ； 0.005mmol)。产率 7.5％。
     2.L72( 反式 -4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 环己基羰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨 酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 )
     得到产物， 为一种白色绒毛状固体 (7.0mg ； 0.005mmol)。产率 4.8％。C. 反式 -4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 环己烷甲酸， (D)( 图 将在 1， 4- 二 烷 (40mL) 中的 N-(9- 芴基甲氧基羰基氧基 ) 琥珀酰亚胺 (4.4g ；5E)
     14.0mmol) 的溶液滴加到冷却至 0℃的在 10％ Na2CO3(30mL) 中的反式 -4-( 氨基甲基 ) 环 己烷甲酸 (2.0g ； 12.7mmol) 的溶液。然后使混合物温至室温， 并在室温下搅拌 1 小时后用 1N HCl(32mL) 处理直至最终 pH 为 2。用 n-BuOH(100mL) 萃取所得的溶液 ； 除去挥发物， 并 用快速色谱法纯化粗制残余物， 得到 D， 为一种白色固体 (1.6g ； 4.2mmol)。产率 33％。
     实施例 VI- 图 6A-F
     合成 L75 和 L76
     概述 ： 通过以下方法得到两种产物 ： 将在 Rink 酰胺树脂上的八肽 Gln-Trp-Ala-Va l-Gly-His-Leu-Met-NH2(BBN[7-14][SEQ ID NO ： 1])(A) 与两种连接基 E 和 H 偶联， 然后用 DOTA 三叔丁酯官能化。在用试剂 B 裂解和脱保护之后， 通过制备 HPLC 纯化最终产物。总产 率： 8.5％ (L75) 和 5.6％ (L76)。
     A.2-[(1， 3- 二氢 -1， 3- 二氧代 -2H- 异吲哚 -2- 基 ) 甲基 ] 苯甲酸， (C)( 图 6A)
     根 据 文献 报道的方 法 (Bornstein， J； Drummon， P.E. ； Bedell， S.F.Org Synth. Coll.Vol.IV 1963， 810-812) 合成产物。 B.2-( 氨基甲基 ) 苯甲酸， (D)( 图 6A)
     将 40％甲基胺溶液 (6.14mL ； 7.1mmol) 加到 2-[(1， 3- 二氢 -1， 3- 二氧代 -2H- 异 吲哚 -2- 基 ) 甲基 ] 苯甲酸 C(2g ； 7.1mmol)， 然后加入 EtOH(30mL)。室温下搅拌 5 分钟后 在 50℃下加热反应混合物。2.5 小时后， 将混合物冷却， 并在减压下蒸发溶剂。将粗产物悬 浮在 50mL 无水乙醇中， 并在室温下将悬浮液搅拌 1 小时。将固体过滤， 并用 EtOH 洗涤得到 2-( 氨基甲基 ) 苯甲酸 D(0.87g ； 5.8mmol)。产率 81％。
     C.2-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯甲酸， (E)( 图 6A)
     根 据 文 献 报 道 的 方 法 (Sun， J-H. ； Deneker， W.F.Synth.Commun.1998， 28， 4525-4530) 合成产物。
     D.4-( 氨基甲基 )-3- 硝基苯甲酸， (G)( 图 6B)
     将 4-( 溴甲基 )-3- 硝基苯甲酸 (3.2g ； 12.3mmol) 溶于在 EtOH(300mL) 中的 8％ NH3， 并将所得的溶液于室温下搅拌。22 小时后蒸发溶液， 并将残余物悬浮在 H2O(70mL) 中。 将悬浮液搅拌 15 分钟并过滤。将收集的固体悬浮在 H2O(40mL) 中， 并通过加入数滴 25％ NH4OH 水溶液 (pH 12) 来溶解， 然后通过加入 6N HC1 调节溶液的 pH 至 6。将沉淀的固体过
     滤， 依次用 MeOH(3×5mL) 和 Et2O(10mL) 洗涤， 并真空干燥 (1.3kPa ； P2O5) 得到 4-( 氨基甲 基 )-3- 硝基苯甲酸， 为一种灰褐色固体 (1.65g ； 8.4mmol)。产率 68％。
     E.4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 硝基苯甲酸， (H)( 图 6B)
     将 4-( 氨基甲基 )-3- 硝基苯甲酸 G(0.8g ； 4mmol) 溶于 10％ Na2CO3 水溶液 (25mL) 和 1， 4- 二 烷 (10mL)， 并将溶液冷却至 0 ℃。历经 20 分钟， 滴加在 1， 4- 二 烷 (10mL) 中的 9- 芴基甲基氯甲酸酯 (Fmoc-Cl)(1.06g ； 4mmol) 的溶液。在 0-5 ℃下 2 小时和 10 ℃ 下 1 小时后， 将反应混合物过滤， 并通过加入 1N HCl 将溶液酸化至 pH 5。将沉淀过滤， 用 H2O(2×2mL) 洗涤， 真空干燥 (1.3kPa ； P2O5) 得到 4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 硝基苯甲酸， 为一种白色固体 (1.6g ； 3.7mmol)。产率 92％。F.L75(N-[2-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙 酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰 基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 )( 图 6C)
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 将悬浮液搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 2-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ] 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯甲 E(0.45g ； 1.2mmol)、 N- 羟基苯并三唑 (HOBT)(0.18g ； 1.2mmol)、 N， N′ - 二异丙 基碳二亚胺 (DIC)(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 24 小 时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振 荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。倒 空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的加合物 (DOTA 三叔丁酯 )(0.79g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合 物在室温下振荡 24 小时， 倒空溶液， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂并真空干燥。 将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发滤液得 到一种油状粗品， 在用 Et2O(20mL) 处理后得到一种沉淀。通过离心收集所得的沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤得到 L75(190mg ； 0.13mmol)， 为一种白色固体。产率 44％。
     G.L76(N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 硝基苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -1- 缬 氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 )( 图 6D)
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 硝基苯甲酸 H(0.50g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 24 小时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤 树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的 在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树 脂。将 DOTA 三叔丁酯 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBT(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在室温下振荡 24 小时， 倒空溶 液， 并用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状粗品， 将其 与 Et2O(20mL) 一起研磨。离心收集沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤得到一种固体 (141mg)， 用 HPLC 对其进行分析。用制备 HPLC 纯化 37mg 部分粗品。将包含产物的级分冻干得到 L76(10.8mg ； 7.2×10-3mmol)， 为一种白色固体。产率 9％。
     实施例 VII- 图 7A-C
     合成 L124
     概述 ： 使 4- 氰基苯酚 A 与溴乙酸乙酯和 K2CO3 在丙酮中反应得到中间产物 B， 用 NaOH 水解得到对应的酸 C。用 H2 和 PtO2， 在 355kPa 下， 在 EtOH/CHCl3 中对 C 进行连续氢化 得到对应的氨基酸 D， 直接用 FmocOSu 保护得到 E。使用八肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2(BBN[7-14][SEQ ID NO ： 1]) 官能化的 Rink 酰胺树脂与 E 反应， 然后与 DOTA 三 叔丁酯反应。在用试剂 B 裂解和脱保护之后， 通过制备 HPLC 纯化粗品得到 L124。总产率 ： 1.3％
     A. 合成 (4- 氰基苯氧基 ) 乙酸乙酯， (B)( 图 7A)
     根 据 文 献 报 道 的 方 法 (Archimbault， P. ； LeClerc， G. ； Strosberg， A.D. ； Pietri-Rouxel， F.PCT Int.Appl.WO 980005， 1998) 合成产物。
     B. 合成 (4- 氰基苯氧基 ) 乙酸 (C)( 图 7A)
     将 1N NaOH 溶液 (7.6mL ； 7.6mmol) 滴加到在 MeOH(15mL) 中的 (4- 氰基苯氧基 ) 乙酸乙酯 B(1.55g ； 7.6mmol) 的溶液。 1 小时后用 1NHCl(7.6mL ； 7.6mmol) 酸化溶液并蒸发。 将残余物溶于水 (20mL)， 并用 CHC13(2×30mL) 萃取。蒸发有机相， 并用快速色谱法纯化粗 品得到 (4- 氰基苯氧基 ) 乙酸 C(0.97g ； 5.5mmol)， 为一种白色固体。产率 72％。
     C. 合成 [4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯氧基 ] 乙酸， (E)( 图 7A)
     将 PtO2(150mg) 加到在 EtOH(147mL) 和 CHCl3(3mL) 中的 (4- 氰基苯氧基 ) 乙酸 C(1.05g ； 5.9mmol) 的溶液。 将悬浮液在氢气氛 (355kPa ； 20℃ ) 下搅拌 30 小时。 用 衬垫过滤混合物， 并将溶液真空蒸发。 用快速色谱法纯化残余物得到酸 D(0.7g)， 0℃下将其 溶于 H2O(10mL)、 MeCN(2mL) 和 Et3N(0.6mL)， 然后滴加在 MeCN(22mL) 中的 N-(9- 芴基甲氧 基羰基氧基 ) 琥珀酰亚胺 (1.3g ； 3.9mmol) 的溶液。室温下搅拌 16 小时后， 将反应混合物 过滤， 并在真空下除去挥发物。用 1N HCl(10mL) 处理残余物， 将沉淀的固体过滤， 并用快速 色谱法纯化得到 [4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯氧基 ] 乙酸 E(0.56g ； 1.4mmol)， 为一种白色固体 . 总产率 24％。
     D. 合 成 L124(N-[[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， l0- 四 氮 杂 环 十 二 烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯氧基 ] 乙酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙 氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 )( 图 7B)
     将树脂 A(480mg ； 0.29mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一 起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液搅拌 20 分 钟， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 [4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ] 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ] 苯氧基 ] 乙酸 E(480mg ； 1.19mmol)、 N- 羟基苯并三唑 (HOBT)(182mg ； 1.19mmol)、 N， N ′ - 二异丙基碳二亚胺 (DIC)(185μL ； 1.19mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物在室 温下振荡 24 小时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(6mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(6mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物 振荡 20 分钟。 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的加合物 (750mg ； 1.19mmol)、 HOBT(182mg ； 1.19mmol)、 DIEA(404μL ； 2.36mmol)、 DIC(185μL ； 1.19mmol) 和 DMA(6mL) 加至树脂。将混 合物在室温下振荡 24 小时， 倒空溶液， 用 DMA(2×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干 燥。将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发滤液 得到一种油状粗品， 将其与 Et2O(5mL) 一起研磨。离心收集沉淀， 并用 Et2O(5×5mL) 洗涤得 到一种固体 (148mg)， 用 HPLC 分析。用制备 HPLC 纯化 65mg 部分粗品。将包含产物的级分 冻干得到 L124( 图 7C)， 为一种白色固体 (15mg ； 0.01mmol)。产率 7.9％。实施例 VIII- 图 8A-C
     合成 L125
     概述 ： 使 4-( 溴甲基 )-3- 甲氧基苯甲酸甲酯 A 与在 DMF 中的 NaN3 反应得到中间产 物叠氮化物 B， 然后用 PH3P 和 H2O 还原成胺 C。 用 NaOH 水解 C 得到酸 D， 将其直接用 FmocOSu 保护得到 E。 使用八肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2(BBN[7-14][SEQ ID NO ： 1]) (A) 官能化的 Rink 酰胺树脂与 E 反应， 然后与 DOTA 三叔丁酯反应。在用试剂 B 裂解和脱保 护之后， 通过制备 HPLC 纯化粗品得到 L125。总产率 ： 0.2％。
     A. 合成 4-( 叠氮基甲基 )-3- 甲氧基苯甲酸甲酯， (B)( 图 8A)
     将在 DMF(90mL) 中的 4-( 溴甲基 )-3- 甲氧基苯甲酸甲酯 (8g ； 31mmol) 和 NaN3(2g ； 31mmol) 的溶液于室温下搅拌过夜。在真空下除去挥发物， 并将粗产物溶于 EtOAc(50mL)。 用水 (2×50mL) 洗涤溶液并干燥。将挥发物蒸发得到 4-( 叠氮基甲基 )-3- 甲氧基苯甲酸 甲酯 (6.68g ； 30mmol)。产率 97％。
     B.4-( 氨基甲基 )-3- 甲氧基苯甲酸甲酯， (C)( 图 8A)
     将三苯膦 (6.06g ； 23mmol) 加到在 THF(50mL) 中的 (4- 叠氮基甲基 )-3- 甲氧基 苯甲酸甲酯 B(5g ； 22mmol) 的溶液 ： 观察到产生氢和形成白色固体。将混合物在氮气氛和 室温下搅拌。24 小时后再加入三苯膦 (0.6g ； 2.3mmol)。24 小时后叠氮化物被消耗， 并加 并在室温下搅拌过 入 H2O(10mL)。4 小时后白色固体消失。将混合物于 45℃下加热 3 小时， 夜。将溶液蒸发至干， 并用快速色谱法纯化粗品得到 4-( 氨基甲基 )-3- 甲氧基苯甲酸甲酯 C(1.2g ； 6.1mmol)。产率 28％。
     C.4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 甲氧基苯甲酸， (E)( 图 8A)
     将 1N NaOH 溶液 (6.15mL ； 6.14mmol) 滴加到在 40℃下加热的在 MeOH(25mL) 中的 4-( 氨基甲基 )-3- 甲氧基苯甲酸甲酯 C(1.2g ； 6.14mmol) 的溶液。 45℃下搅拌 8 小时后， 将 溶液于室温下搅拌过夜。 加入 1N NaOH 溶液 (0.6mL ； 0.6mmol)， 并将混合物在 40℃下加热 4 小时。浓缩溶液， 用 1N HCl(8mL ； 8mmol) 酸化， 用 EtOAc(2×10mL) 萃取， 然后将水层浓缩至 15mL。将此溶液 (pH4.5) 于 0℃下冷却， 并加入 Et3N(936μL ； 6.75mmol)(pH 11)。滴加在 MeCN(30mL) 中的 N-(9- 芴基甲氧基羰基氧基 ) 琥珀酰亚胺 (3.04g ； 9mmol) 的溶液 ( 最终 pH 9)， 沉淀出白色固体。室温下搅拌 1 小时后将固体过滤， 悬浮在 1N HCl(15mL) 中， 并将悬浮 液搅拌 30 分钟。将固体过滤得到 4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 甲 氧基苯甲酸 E， 为一种白色固体 (275mg ； 0.7mmol)。将滤液真空蒸发， 并将所得的白色残余 物悬浮在 1N HCl(20mL) 中， 并搅拌 30 分钟。将固体过滤， 并用快速色谱法纯化得到更多的 酸 E(198mg ； 0.5mmol)。总产率 20％。
     D.L125(N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ] 甲基 ]-3- 甲氧基苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬 氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 )( 图 8B)
     将 树 脂 A(410mg ； 0.24mmol) 在 固 相 肽 合 成 容 器 中 与 在 DMA(7mL) 中 的 50 ％ 吗 啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉。将悬浮液搅 拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 4-[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ] 羰 基 ] 氨 基 ] 甲 基 ]-3- 甲 氧 基 苯 甲 酸 E(398mg ； 0.98mmol)、 HOBt(151mg ； 0.98mmol)、 DIC(154μL ； 0.98mmol) 和 DMA(6mL) 加至树脂 ； 将混合物在室温下振荡 24 小时， 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将树脂与在 DMA(6mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(6mL) 中的 50 ％吗啉， 将混合物振荡 20 分钟。倒空溶液， 并 用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸三 (1， 1- 二 甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的加合物 (618mg ； 0.98mmol)、 HOBt(151mg ； 0.98mmol)、 DIC(154μL ； 0.98mmol)、 DIEA(333μL ； 1.96mmol) 和 DMA(6mL) 加至树脂。将混合物在室温下振荡 24 小 时， 倒空溶液， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂并真空干燥。将树脂在烧瓶中与 试剂 B(25mL) 一起振荡 4 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状粗品， 将其 与 Et2O(5mL) 一起研磨。用 Et2O(5×5mL) 洗涤通过离心收集所得的沉淀， 用 HPLC 分析， 并 用制备 HPLC 纯化。将包含产物的级分冻干得到 L125( 图 8C)， 为一种白色固体 (15.8mg ； 0.011mmol)。产率 4.4％。
     实施例 IX- 图 9A-9D
     合成 L146、 L233、 L234 和 L235
     概述 ： 分几步从担载在 Rink 酰胺树脂上的八肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-M et-NH2(BBN[7-14])(A) 开始获得产物。在最后用试剂 B 裂解和脱保护之后， 用制备 HPLC 纯 化粗品得到 L146、 L233、 L234 和 L235。总产率 ： 分别为 10％、 11％、 4.5％、 5.7％。
     A.3-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基苯甲酸， B( 图 9A)
     将 在 THF(20mL) 中 的 3- 氨 基 苯 甲 酸 (0.5g ； 3.8mmol) 和 N- 乙 基 二 异 丙 基 胺 (DIEA)(0.64mL ； 3.8mmol) 的溶液滴加到在 THF(10mL) 和 CH2Cl2(10mL) 中的 Fmoc- 甘氨酸 氯化物 (1.2g ； 4.0mmol)(3) 的溶液。室温下搅拌 24 小时后， 加入 1M HCl(50mL)( 最终 pH ： 1.5)。将沉淀过滤， 用 H2O(2×100mL) 洗涤， 真空干燥并用 CHCl3/CH3OH(1 ∶ 1) 结晶得到 B， 为一种白色固体 (0.7g ； 1.6mmol)。产率 43％。
     B.N-[3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨 酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L233( 图 9D)
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。
     将 悬 浮 液 再 搅 拌 20 分 钟， 然 后 倒 空 溶 液， 并 用 DMA(5×7mL) 洗 涤 树 脂。 将 3-[[[(9H- 芴 -9- 基 甲 氧 基 ) 羰 基 ] 氨 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 苯 甲 酸 B(0.50g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振 荡 6 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一 起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 将混合物再振荡 20 分 钟。倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 DOTA 三叔丁酯与 NaCl2 的加合物 (0.79g ； 1.2mmol)(5)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。 将混合物在室温下振荡 24 小时， 倒空， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将该树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过 滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状粗品， 用 Et2O(20mL) 进行处理后得到一种沉淀。 离心 收集沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤得到一种固体 (152mg)， 用 HPLC 分析。用制备 HPLC 纯 化一定量的粗品 (50mg)。 将包含产物的级分冻干得到 L233(17.0mg ； 11.3×10-3mmol)， 为一 种白色固体。产率 11％。C.N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯基乙酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬 氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L146( 图 9D)
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉一 起振荡 10 分钟， 过滤溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将该悬浮液再搅拌 20 分钟， 然后过滤溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 Fmoc-4- 氨基苯基乙酸 (0.45g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加 至 树 脂， 将混合 物在室温下振荡 6 小时， 过滤并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中 的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 将溶液过滤， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将 混合物再振荡 20 分钟。过滤溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 Fmoc- 甘氨酸 (0.36g ； 1.2mmol)、 HATU(0.46g ； 1.2mmol) 和 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 在 DMA(7mL) 中 搅 拌 15 分 钟， 然后将溶液加至树脂， 将混合物于室温下振荡 2 小时， 过滤并用 DMA(5×7mL) 洗涤树 脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 将溶液过滤， 加入新鲜的 在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物再振荡 20 分钟。过滤溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗 涤树脂。将 DOTA 三叔丁酯与 NaCl 的加合物 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol)、 DIEA(0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物于室温下 振荡 24 小时， 过滤， 并用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂并真空干燥。将树脂在烧 瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状 粗品， 用 Et2O(20mL) 处理后得到一种沉淀。离心收集沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤得到一 种固体 (203mg)， 对其用 HPLC 分析。通过制备 HPLC 纯化一定量的粗品 (50mg)。将包含产 物的级分冻干得到 L146(11.2mg ； 7.4×10-3mmol)， 为一种白色固体。产率 10％。
     D.6-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基萘甲酸， C( 图 9B)
     将 在 THF(20mL) 中 的 6- 氨 基 萘 甲 酸 (500mg ； 2.41mmol) 和 DIEA(410μL 2.41mmol) 的溶液滴加到在 CH2Cl2/THF 1 ∶ 1(10mL) 中的 Fmoc- 甘氨酸氯化物 (760mg ； 2.41mmol) 的溶液， 并在室温下搅拌。24 小时后， 将溶剂真空蒸发。用 0.5N HC1(50mL) 溶 解残余物， 并搅拌 1 小时。将沉淀的白色固体过滤并干燥。将白色固体悬浮在甲醇 (30mL) 中， 并煮沸 5 分钟， 然后过滤得到产物 C(690mg ； 1.48mmol)。产率 62％。
     E.N-[6-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 萘甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨 酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L234
     将树脂 A(500mg ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉 一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液再搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 6-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰 基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基萘甲酸 C(560mg ； 1.2mmol)、 HOBt(184mg ； 1.2mmol)、 DIC(187μL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物在室温下振荡 6 小时， 倒空并用 DMA(5×7mL) 洗 涤树脂。 然后将树脂与在 DMA(6L) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 将混合物再振荡 20 分钟。倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 DOTA 三叔丁酯与 NaCl 的加合物 (757mg ； 1.2mmol)、 HOBt(184mg ； 1.2mmol)、 DIC(187uL ； 1.2mmol) 和 DIEA(537uL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在烧瓶中振荡， 倒空，用 DMA(2×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。 将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一 起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状粗品， 将其用 Et2O(20mL) 处理之后得到一种沉淀。离心收集沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤得到一种固体 (144mg)， 对其用 HPLC 进行分析。通过制备 HPLC 纯化一定量的粗品 (54mg)。将包含产物的级分冻干 得到 L234(8mg ； 5.1×10-3mmol)， 为一种白色固体。产率 4.5％。
     F.4-[[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 甲基氨基 ] 苯甲酸， D( 图 9C)
     将 在 THF(20mL) 中 的 4-N- 甲 基 氨 基 萘 甲 酸 (500mg ； 3.3mmol) 和 DIEA(562uL 3.3mmol) 的 溶 液 加 到 在 CH2Cl2/THF 1 ∶ 1(10mL) 中 的 Fmoc- 甘 氨 酸 氯 化 物 (1.04g ； 3.3mmol) 的溶液， 并在室温下搅拌。24 小时后， 在真空下蒸发溶剂。用 0.5N HC1(30mL) 溶 解残余物， 并在 0℃下搅拌 3 小时。将沉淀的白色固体过滤并干燥。用快速色谱法纯化粗品 得到化合物 D(350mg ； 0.81mmol)。产率 25％。
     G.N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 甲基氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬 氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L235( 图 9D)
     将树脂 A(500mg ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉 一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液再搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 4-[[[[9H- 芴 -9- 基甲氧基 ] 羰 基 ] 氨基 ] 乙酰基 ]-N- 甲基 ] 氨基 - 苯甲酸 D(510mg ； 1.2mmol)、 HOBt(184mg ； 1.2mmol)、 DIC(187μL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物在室温下振荡 6 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空 溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物再振荡 20 分钟。倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 DOTA 三叔丁酯与 NaCl 的加合物 (757mg ； 1.2mmol)、 HOBt(184mg ； 1.2mmol)、 DIC(187μL ； 1.2mmol) 和 DIEA(537μL， 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂 . 将混 合物在烧瓶中振荡， 倒空， 用 DMA(2×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥 . 将树脂 在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种 油状粗品， 对其用 Et2O(20mL) 处理后得到一种沉淀。
     通过离心收集沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤得到一种固体 (126mg)， 用 HPLC 对其 进行分析。 用制备 HPLC 纯化一定量的粗品 (53mg)。 将包含产物的级分冻干得到 L235(11mg ； -3 7.2×10 mmol)， 为一种白色固体。产率 5.7％。
     实施例 X- 图 10A-B
     合成 L237
     概述 ： 在 pH 3 下用氯甲酸苄酯选择性保护 1- 甲酰基 -1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二 烷 (A) 以得到 B， 用溴乙酸叔丁酯将其烷基化， 并用羟胺盐酸盐将其去甲酰基化得到 D。与 P(OtBu)3 和低聚甲醛反应得到 E， 通过氢化去保护和用溴乙酸苄酯进行烷基化以得到 G， 最 终将其氢化成 H。使用八肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2(BBN[7-14]) 官能化的 Rink 酰胺树脂 (A) 依次与 Fmoc-4- 氨基苯甲酸、 Fmoc- 甘氨酸和 H 反应。在用试剂 B 裂解 和脱保护之后， 用制备 HPLC 纯化粗品得到 L237。总产率 0.21％。
     A.7- 甲酰基 -1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 甲酸苯基甲酯二盐酸盐， B( 图 10A)将 1- 甲酰基 -1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 A(14g ； 69.9mmol) 溶于 H2O(100mL)， 并 烷 (220mL)。在 3.5 小时内缓慢滴加 烷 (15mL) 中的氯甲酸苄酯 (13.8g ； 77mmol) 的溶液， 通过用 pH 恒稳仪器连续加入 12N HCl(11mL) 直至 pH 3， 然后加入 1， 4- 二 在 1， 4- 二加入 2NNaOH(68.4mL) 来恒定保持反应混合物于 pH 3。在加入结束后， 将反应物搅拌 1 小 i 时， 然后用正己烷 (4×100mL) 和 Pr2O(4×100mL) 洗涤。通过加入 10N NaOH(6.1mL) 使水 相为 pH 13， 并用 CHCl3(4×100mL) 萃取。用盐水 (100mL) 洗涤有机相， 干燥 (Na2SO4)， 过滤 并蒸发。将油状残余物溶于丙酮 (200mL)， 并加入 6N HCl(26mL)。将沉淀的固体过滤， 用丙 酮 (2×50mL) 洗涤， 并真空干燥得到化合物 B(23.6g ； 58mmol)， 为一种白色结晶固体。产率 83％。
     B.4-( 苯基甲氧基 ) 羰基 -1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 7- 二乙酸双 (1， 1- 二甲 基乙基 ) 酯 D( 图 10A)
     将在 H2O(450mL) 和 1N NaOH(74mL ； 74mmol) 中的 B(14.4g ； 35.3mmol) 的溶液搅 拌 20 分钟， 然后用 CHCl3(4×200mL) 萃取。蒸发有机层得到一种油状残余物 (12.3g)， 将其 溶于 CH3CN(180mL) 和 N- 乙基二异丙基胺 (DIEA)(15mL ； 88.25mmol)。在 2.5 小时内将在 CH3CN(15mL) 中的溴乙酸叔丁酯 (16.8g ； 86.1mmol) 的溶液滴加到前述的溶液。室温下 20 小时后， 蒸发溶剂， 将油状残余物溶于 CHCl3(150mL)， 并用 H2O(5×100mL) 洗涤。 将有机层干 燥 (Na2SO4)， 过滤并蒸发至干得到 C， 为一种黄色油状物。 将粗品 C(22g) 溶于 EtOH(250mL)， 加入 NH2OH·HC1(2.93g ； 42.2mmol)， 并将溶液加热回流。48 小时后蒸发溶液， 并将残余物 溶于 CH2Cl2(250mL)， 用 H2O(3×250mL) 洗涤， 然后用盐水 (3×250mL) 洗涤。将有机层干燥 (Na2SO4)， 过滤并蒸发。用快速色谱法纯化油状残余物 (18.85g)。收集含产物的级分， 并蒸 发得到一种玻璃状白色固体 (17.62g)， 将其溶于 H2O(600mL) 和 1N NaOH(90mL ； 90mmol)， 并 用 CHCl3(3×250ml) 萃取。将有机层干燥 (Na2SO4)， 并蒸发至干得到 D(16.6g ； 31mmol)， 为 一种油状物。产率 88％。
     C.4-( 苯基甲氧基 ) 羰基 -10-[[ 双 (1， 1- 二甲基乙氧基 ) 氧膦基 ] 甲基 ]-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 7- 二乙酸双 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯， E( 图 10A)
     将化合物 D(13.87g ； 26mmol)、 P(OtBu)3(7.6g ； 28.6mmol)(10) 和低聚甲醛 (0.9g ； 30mmol) 的混合物在 60℃下加热。16 小时后， 再加入 P(OtBu)3(1g ； 3.76mmol) 和低聚甲醛 (0.1g ； 3.33mmol)。将反应物于 60℃下再加热 20 小时， 然后在 80℃和真空下加热 8 小时以 除去挥发性杂质。 用快速色谱法纯化粗品得到 E(9.33g ； 8mmol)， 为一种油状物。 产率 31％。
     D.7-[[ 双 (1， 1- 二甲基乙氧基 ) 氧膦基 ] 甲基 ]-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 10- 三乙酸 1- 苯基甲基 4， 10- 双 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯， G( 图 10A)
     向 在 CH3OH(160mL) 中 的 E(6.5g ； 5.53mmol) 的 溶 液 中 加 入 5 ％ Pd/C(1g ； 0.52mmol)， 并将该混合物在氢气氛和室温下搅拌。4 小时后 ( 消耗 H2165mL ； 6.7mmol) 用 滤器 (FT 0.45μm) 过滤混合物， 并减压蒸发溶液。用快速色谱法纯化粗品 (5.9g) 得到 F(4.2g)， 为一种油状物。在 1 小时内将溶于 CH3CN(8mL) 的溴乙酸苄酯 (1.9g ； 8.3mmol) 滴加到在 CH3CN(40mL) 和 DIEA(1.5mL ； 8.72mmol) 中的 F(4.2g) 的溶液。室温下 36 小时后， 蒸发溶剂， 并将残余物 (5.76g) 溶于 CHCl3(100mL)， 用 H2O(2×100mL) 洗涤， 然后 用盐水 (2×70mL) 洗涤。 干燥有机层 (Na2SO4)， 过滤并蒸发。 用快速色谱法纯化粗品 (5.5g) 两次， 收集级分并蒸发至干得到 G(1.12g ； 1.48mmol)， 为一种油状物。产率 27％。E.7-[[ 双 (1， 1- 二甲基乙氧基 ) 氧膦基 ] 甲基 ]-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 10- 三乙酸 4， 10- 双 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯， H( 图 10A)
     将 5％ Pd/C(0.2g ； 0.087mmol) 加到在 CH3OH(27mL) 中的 G(1.12g ； 1.48mmol) 的溶液， 并将混合物于氢气氛和室温下搅拌。 2 小时后 ( 消耗 H235mL ； 1.43mmol)， 用 滤器 (FT 0.45μm) 过滤混合物， 并将溶液蒸发至干， 得到 H(0.94g ； 1.41mmol)， 为一种灰黄 色油状物。产率 97％。
     F.N-[4-[[[[[4， 10- 双 ( 羧甲基 )-7-( 二羟基氧膦基 ) 甲基 -1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨 酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L237( 图 10B)
     将树脂 A(330mg ； 0.20mmol)(17) 在固相肽合成容器中与在 DMA(5mL) 中的 50％吗 啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 并加入新鲜的在 DMA(5mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液再搅 拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×5mL) 洗涤树脂。将 Fmoc-4- 氨基苯甲酸 (290mg， 0.80mmol)、 HOBt(120mg ； 0.80mmol)、 DIC(130μL ； 0.80mmol) 和 DMA(5mL) 加至树脂， 将混合 物在室温下振荡 3 小时， 倒空， 并用 DMA(5×5mL) 洗涤树脂。 将树脂与在 DMA(5mL) 中的 50％ 吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(5mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物再振 荡 20 分钟。倒空溶液， 并用 DMA(5×5mL) 洗涤树脂。将 Fmoc- 甘氨酸 (240mg ； 0.8mmol)、 HATU(310mg ； 0.8mmol) 和 DIEA(260μL ； 1.6mmol) 在 DMA(5mL) 中搅拌 15 分钟， 然后将溶 液加至树脂， 将混合物于室温下振荡 2 小时， 倒空， 并用 DMA(5×5mL) 洗涤树脂。然后将树 脂与在 DMA(5mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(5mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物再振荡 20 分钟。 倒空溶液， 并用 DMA(5×5mL) 洗涤树脂。 将 H(532mg ； 0.80mmol)、 HOBt(120mg ； 0.80mmol)、 DIC(130μL ； 0.80mmol) 和 DIEA(260μL ； 1.6mmol) 和 DMA(5mL) 加至树脂。将混合物在烧瓶中于室温下振荡 40 小时， 倒空， 用 DMA(5×5mL)、 CH2Cl2(5×5mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4 小 时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状粗品， 用 Et2O(20mL) 对其处理后得到 一种沉淀。离心收集沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤得到一种固体 (90mg)， 用 HPLC 对其进 行分析。用制备 HPLC 纯化一定量的粗品 (50mg)。将包含产物的级分冻干得到 L237(6mg ； 3.9×10-3mmol)， 为一种白色固体。产率 3.5％。
     实施例 XI- 图 11A-B 合成 L238 和 L239
     概述 ： 从担载在 Rink 酰胺树脂上的八肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH 用制备 HPLC 纯化 2(BBN[7-14])(A) 开始分几步获得产物。在用试剂 B 裂解和脱保护之后， 粗品得到 L238 和 L239。总产率 ： 分别为 14 和 9％。
     A.N， N- 二甲基甘氨酰基 -L- 丝氨酰基 -[S-[( 乙酰基氨基 ) 甲基 ]]-L- 半胱氨酰 基 - 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰 基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L238( 图 11A)
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液再搅拌 20 分 钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 Fmoc-4- 氨基苯甲酸 (0.43g ； 1.2mmol)、
     HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物在室温下振 荡 3 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一 起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉和将混合物再振荡 20 分 钟。 倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 Fmoc- 甘氨酸 (0.36g ； 1.2mmol)、 HATU(0.46g ； 1.2mmol) 和 N- 乙基二异丙基胺 (0.40mL ； 2.4mmol) 在 DMA(7mL) 中搅拌 15 分钟， 然后将溶 液加至树脂， 将混合物于室温下振荡 2 小时， 然后将溶液加至树脂， 将混合物于室温下振荡 2 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振 荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 将混合物再振荡 20 分钟。倒 空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 N-α-Fmoc-S- 乙酰氨基甲基 -L- 半胱氨酸 (0.50g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物 在室温下振荡 3 小时， 倒空并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉和将混合物再 振荡 20 分钟。倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 N-α-Fmoc-O- 叔丁基 -L- 丝氨酸 (0.46g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 3 小时， 倒空和用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混 合物再振荡 20 分钟。
     倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 N， N- 二甲基甘氨酸 (0.12g ； 1.2mmol)、 HATU(0.46g ； 1.2mmol) 和 N- 乙 基 二 异 丙 基 胺 (0.40mL ； 2.4mmol) 在 DMA(7mL) 中 搅 拌 15 分钟， 然后将溶液加至树脂。将混合物于室温下振荡 2 小时， 倒空， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小 时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状粗品， 用 Et2O(20mL) 处理之后得到一 种沉淀。离心收集沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤得到一种固体 (169mg)， 用 HPLC 对其进行 分析。用制备 HPLC 纯化一定量的粗品 (60mg)。将包含产物的级分冻干得到 L238(22.0mg ； 0.015mmol)， 为一种白色固体。产率 14％。
     B.N， N- 二甲基甘氨酰基 -L- 丝氨酰基 -[S-[( 乙酰基氨基 ) 甲基 ]]-L- 半胱氨酰 基 - 甘氨酰基 -(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基 -24- 氧代胆烷 -24- 基 -L- 谷 氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰 基 -L- 蛋氨酰胺， L239( 图 11B)
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。 将悬浮液再搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 (3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基甲 氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 B(0.82g ； 1.2mmol)(7)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 24 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分 钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 将混合物再振荡 20 分钟。 倒空溶液并 用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 N-α-Fmoc-S- 乙酰氨基甲基 -L- 半胱氨酸 (0.50g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振 荡 3 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物再振荡 20 分 钟。倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 N-α-Fmoc-O- 叔丁基 -L- 丝氨酸 (0.46g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物 于室温下振荡 3 小时， 倒空并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗 啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物再振荡 20 分钟。 倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 N， N- 二甲基甘氨酸 (0.12g ； 1.2mmol)、 HATU(0.46g ； 1.2mmol) 和 N- 乙基二异丙基胺 (0.40mL ； 2.4mmol) 在 DMA(7mL) 中搅拌 15 分 钟， 然后将溶液加至树脂。
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液再搅拌 20 分 钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 (3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[(9H- 芴 -9- 基 甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 B(0.82g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 24 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉， 并将混合物再振荡 20 分钟。倒空 溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 N-α-Fmoc-S- 乙酰氨基甲基 -L- 半胱氨酸 (0.50g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物 于室温下振荡 3 小时， 倒空并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉和将混合物 再振荡 20 分钟。倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 N-α-Fmoc-O- 叔丁基 -L- 丝氨 酸 (0.46g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加 至 树脂， 将混合物于室温下振荡 3 小时， 倒空并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗 啉和将混合物再振荡 20 分钟。倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 N， N- 二甲基甘氨 酸 (0.12g ； 1.2mmol)、 HATU(0.46g ； 1.2mmol) 和 N- 乙基二异丙基胺 (0.40mL ； 2.4mmol) 在 DMA(7mL) 中搅拌 15 分钟， 然后将溶液加至树脂。
     实施例 XII- 图 12A-F
     合成 L240、 L241、 L242
     概述 ： 从在 Rink 酰胺树脂上的八肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2(BB N[7-14])(A) 开始分几步获得产物。在用试剂 B 裂解并脱保护之后， 用制备 HPLC 纯化粗品 得到 L240、 L241 和 L242。总产率 ： 分别为 7.4、 3.2、 1.3％。
     A.4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -3- 甲氧基苯甲酸 A( 图 12A)
     将 在 THF(20mL) 中 的 4- 氨 基 -3- 甲 氧 基 苯 甲 酸 (1.0g ； 5.9mmol) 和 N- 乙 基 二异丙基胺 (1.02mL 5.9mmol) 的溶液滴加到在 CH2Cl2/THF 1 ∶ 1(20mL) 中的 Fmoc- 甘 氨酰氯 (1.88g ； 5.9mmol) 的溶液， 并在室温和 N2 下搅拌。3 小时后， 真空蒸发溶剂。用 0.5N HCl(50mL) 溶解残余物， 在 0℃下搅拌 1 小时， 然后过滤并干燥。将白色固体悬浮在 MeOH(30mL) 中， 并搅拌 1 小时， 然后过滤， 并悬浮在 CHCl3/ 己烷 1 ∶ 4(75mL) 的溶液中。将 悬浮液过滤得到化合物 A， 为一种白色固体 (1.02g ； 2.28mmol)。产率 39％。B.N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 甘氨酰基 ] 氨基 ]-3- 甲氧基苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬 氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L240
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。 将悬浮液再搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -3- 甲氧基苯甲酸 A(0.50g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 5 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗 涤树脂。 然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的 在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉和将混合物再振荡 20 分钟。倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树 脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的 加合物 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)， N- 乙基二异丙 基胺 (0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在室温下振荡 24 小时， 倒空， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一 起振荡 4.5 小时。 将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到油残余物， 用 Et2O(20mL) 对其进行 处理之后得到一种沉淀。离心收集沉淀， 并用 Et2O(5×20mL) 洗涤得到一种固体 (152mg)， 用 HPLC 对其进行分析。用制备 HPLC 纯化一定量的粗品 (52mg)。将包含产物的级分冻干得 到 L240(12.0mg ； 7.8×10-3mmol)， 为一种白色固体。产率 7.4％。
     C.4- 氨基 -3- 氯苯甲酸 C( 图 12B)
     45 ℃下将 1N NaOH(11mL ； 11mmol) 加到在 MeOH(20mL) 中的 4- 氨基 -3- 氯苯甲 酸甲酯 (2g ； 10.8mmol) 的溶液。将反应混合物于 45 ℃下搅拌 5 小时， 并在室温下搅拌过 夜。再次加入 1N NaOH(5mL ； 5mmol)， 并将反应物于 45℃下搅拌 2 小时。浓缩溶剂后加入 1NHCl(16mL)。过滤固体沉淀， 并干燥得到 4- 氨基 -3- 氯苯甲酸， C， 为一种白色固体 (1， 75g ； 10.2mmol)。产率 94.6％。
     D.4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -3- 氯苯甲酸， D( 图 12B)
     将在 THF(50mL) 中的 4- 氨基 -3- 氯苯甲酸 (1.5g ； 8.75mmol) 和 N- 乙基二异丙 基胺 (1.46mL 8.75mmol) 的溶液滴加到在 CH2Cl2/THF 1 ∶ 1(30mL) 中的 Fmoc- 甘氨酰氯 (2.76g ； 8.75mmol) 的溶液， 并在室温和 N2 气氛下搅拌。3 小时后， 真空蒸发溶剂。用 0.5N HC1(50mL) 溶解残余物， 过滤并干燥。
     将 白 色 固 体 悬 浮 在 MeOH(30mL) 中， 并 搅 拌 1 小 时， 然 后 过 滤， 并干燥得到 4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -3- 氯苯甲酸 (2.95g ； 6.5mmol)。 产率 75％。
     E.N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 甘氨酰基 ] 氨基 ]3- 氯苯甲酰基 ]L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰 基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L241( 图 12E)
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液再搅拌 20 分 钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -3- 氯苯甲酸， D(0.54g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 5 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗 涤树脂。
     然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的 在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉和将混合物再振荡 20 分钟。倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤 树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的加合物 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL.1.2mmol)， N- 乙基二异 丙基胺 (0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物于室温下振荡 40 小时， 倒空， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状粗品， 在用 Et2O(20mL) 处理后得到一种沉淀。离心收集沉淀， 并用 Et2O(5×20mL) 洗涤得到一种固体 (151mg)， 用 HPLC 对其进行分析。用制备 HPLC 纯化一定量的粗品 (56mg)。将包含产物的级分冻干得到 L241(5.6mg ； 3.6×10-3mmol)， 为一种白色固体。产率 3.2％。
     F.4-[[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -3- 甲基苯甲酸， E( 图 12C)
     将在 THF(30mL) 中的 4- 氨基 -3- 甲基苯甲酸 (0.81g ； 5.35mmol) 和 N- 乙基二异 丙基胺 (0.9mL 5.35mmol) 的溶液滴加到在 CH2Cl2/THF 1 ∶ 1(20mL) 中的 Fmoc- 甘氨酰氯 (1.69g ； 5.35mmol) 的溶液， 并在室温和 N2 气氛下搅拌。3 小时后在真空下蒸发溶剂。用 HCl 0.5N(50mL) 溶解残余物， 并在 0℃下搅拌 3 小时， 然后过滤并干燥。将白色固体悬浮在 MeOH(50mL) 中， 并搅拌 1 小时， 然后过滤并干燥得到化合物 E(1.69g ； 3.9mmol)。 产率 73％。
     G.N-[4-[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 甘氨酰基 ] 氨基 ]3- 甲基苯甲酰基 ]L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨 酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L242( 图 12F)
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉一 起振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液再搅拌 20 分钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 4-[[(9H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -3- 甲基苯甲酸 E(0.52g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 5 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗 涤树脂。 然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液， 加入新鲜的 在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉和将混合物再振荡 20 分钟。倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树 脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的 加合物 (0.76g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol)、 N- 乙基二异丙基 胺 (0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。
     将混合物于室温下振荡 40 小时， 倒空， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压 下蒸发溶液得到一种油状粗品， 用 Et2O(20mL) 对其进行处理之后得到一种沉淀。离心收集 沉淀， 并用 Et2O(5×20mL) 洗涤得到一种固体 (134mg)， 用 HPLC 对其进行分析。 用制备 HPLC 纯化一定量的粗品 (103mg)。将包含产物的级分冻干得到 L242(4.5mg ； 2.9×10-3mmol)， 为 一种白色固体。产率 1.3％。实施例 XIII- 图 13A-C
     合成 L244
     概述 ： 从担载在 Rink 酰胺树脂上的八肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2 (BBN[7-14])(A) 开始分几步得到产物。在对连接基 -BBN[7-14] 用试剂 B 裂解和脱保护之 后在液相完成与 DOTA 三叔丁酯的最后偶联步骤。用制备 HPLC 纯化粗品得到 L244。总产 率： 0.4％。
     A.N， N′ -( 亚氨基二 -2， 1- 乙烷二基 ) 双 [2， 2， 2- 三氟乙酰胺 ]， A( 图 13A)
     0 ℃下在 1 小时内将三氟乙酸乙基酯 (50g ； 0.35mol) 滴入在 THF(180mL) 中的二 亚乙基三胺 (18g ； 0.175mol) 的溶液。室温下 20 小时后， 将混合物蒸发至一种油状残余物 (54g)。用 Et2O(50mL) 结晶该油状物， 过滤， 用冷 Et2O(2×30mL) 洗涤， 并干燥得到 A， 为一 种白色固体 (46g ； 0.156mol)。产率 ： 89％。
     B.4-[N， N′ - 双 [2-( 三氟乙酰基 ) 氨基乙基 ] 氨基 ]-4- 氧代丁酸， B( 图 13A)
     室温下将琥珀酸酐 (0.34g ； 3.4mmol) 加入在 THF(5mL) 中的 A(1g ； 3.4mmol) 的溶 液。28 小时后将粗品浓缩得到残余物 (1.59g)， 用 EtOAc(2×10mL) 和 1N HCl(2×15mL) 洗 涤。用 Na2SO4 干燥有机层， 过滤并蒸发得到一种油状残余物 (1.3g)， 用快速色谱法 (5) 将 其纯化得到 B， 为一种油状物 (0.85g ； 2.15mmol)。产率 63％。
     C.4-[N， N′ - 双 [2-[(9-H- 芴 -9- 基甲氧基 ) 羰基 ] 氨基乙基 ] 氨基 ]-4- 氧代 丁酸， D( 图 13A)
     室温下将琥珀酸酐 (2g ； 20mmol) 加入在 THF(25mL) 中的 A(5g ； 16.94mmol) 的溶 液。28 小时后将粗品浓缩得到残余物 (7g)， 在乙酸乙酯 (100mL) 和 1N HCl(2×50mL) 中 洗涤。用 Na2SO4 干燥有机层， 过滤并蒸发得到粗品 B， 为一种油状残余物 (6.53g)。将 2N NaOH(25mL) 加到在 EtOH(35mL) 中的粗品 B(5g) 的悬浮液， 并在室温下 1 小时后得到一种完 全溶解。20 小时后将溶剂蒸发得到 C， 为一种油状物 (8.48g)。0℃下 1 小时内将在 1， 4- 二 烷 (30mL) 中的 9- 芴基甲基氯甲酸酯 (6.54g， 25.3mmol) 的溶液滴入在 10％ Na2CO3 水溶 液 (30mL) 中的 C 的溶液。室温下 20 小时后得到一种胶状悬浮液， 过滤得到一种白色固体 (3.5g) 和一种黄色溶液。 蒸发溶液， 用 H2O(150mL) 稀释剩余的水溶液， 并用 EtOAc(70mL) 萃 取。 将新鲜的 EtOAc(200mL) 加到水相， 得到一种悬浮液， 将其冷却至 0℃， 并用浓 HCl 酸化至 pH 2。用 H2O(5×200mL) 洗涤有机层至中性 pH， 然后干燥得到一种玻璃状固体 (6.16g)。将 该化合物悬浮在沸腾的正己烷 (60mL) 中持续 1 小时， 过滤得到 D， 为一种白色固体 (5.53g， 8.54mmol)。总产率 50％。
     D.N-[4-[[4-[ 双 [2-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十 二 烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙基 ] 氨基 -1， 4- 二氧代丁基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺 酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋 氨酰胺， L244( 图 13B)
     将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟， 倒空溶液并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液再搅拌 20 分 钟， 然后倒空溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 4-[N， N′ - 双 [2-[(9-H- 芴 -9- 基甲 氧基 ) 羰基 ] 氨基乙基 ] 氨基 ]-4- 氧代丁酸 (777.3mg ； 1.2mmol)、 HOBt(184mg ； 1.2mmol)、 DIC(187μL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂， 将混合物于室温下振荡 40 小时， 倒空和用DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒 空溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉， 并将混合物振荡 20 分钟。倒空溶液， 用 DMA(2×7mL) 洗涤树脂， 并用 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 然后将其在烧瓶中与试剂 B(25mL) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状粗品， 用 Et2O(20mL) 对其进行处理后得到一种沉淀。离心收集沉淀， 并用 Et2O(5×20mL) 洗涤， 得到 F， 为一种 白 色 固 体 (140mg)。 将 DOTA 三 叔 丁 酯 (112mg ； 0.178mmol)、 HATU(70mg ； 0.178mmol) 和 DIEA(60μL ； 0.356mmol) 加 到 在 DMA(3mL) 和 CH2Cl2(2mL) 中 的 F(50mg ； 0.0445mmol) 的 溶液， 并在室温下搅拌 24 小时。将粗品蒸发至减小的体积 (1mL)， 并与试剂 B(25mL) 一 起振荡 4.5 小时。蒸发溶剂后， 用 Et2O(20mL) 处理残余物得到一种沉淀。离心收集沉 淀， 并用 Et2O(5×20mL) 洗涤得到一种淡棕色固体 (132mg)， 用 HPLC 对其进行分析。用制 备 HPLC 纯化一定量的粗品 (100mg)。将包含产物的级分冻干得到 L244( 图 13C)(3.5mg ； 1.84×10-3mmol)， 为一种白色固体。产率 0.8％。
     实施例 XIV- 实施例 XLII 的一般实验
     L201-L228
     A. 人工偶联
     用各 6.0 当量的 HOBt 和 DIC 处理 6.0 当量的适宜保护的氨基酸， 并在反应容器之 外活化。然后将在 NMP 中的活化的羧酸转移至含胺的树脂， 使反应进行 4-6 小时， 然后排干 树脂并洗涤。
     B.Fmoc-Gly-OH 与 4- 氨基苯甲酸和氨基联苯羧酰胺的特殊偶联 ：
     用 在 NMP(10mL NMP 用 于 1 克 氨 基 酸， 按 重 量 计 ) 中 的 HATU(10.0 当 量 ) 和 DIEA(20.0 当量 ) 处理 Fmoc-Gly-OH(10.0 当量 )， 并将溶液于 RT 下搅拌 10-15 分钟， 然后 转移至含有载胺树脂的容器。使对于每克树脂的溶液体积为 15.0ml。在 RT 下继续偶联 20 小时， 并从树脂上排出所有的反应物。再重复此过程一次， 然后用 NMP 洗涤， 随后继续下一 步骤。
     C. 制备 DO3A 一酰胺 ：
     将 8.0 当量 DOTA 一酸溶于 NMP， 并用 8.0 当量的 HBTU 和 16.0 当量的 DIEA 处理。 将此溶液于 RT 下搅拌 15 分钟， 然后转至担载在树脂上的胺， 并在 RT 下继续偶联 24 小时。 然后排干树脂， 洗涤， 随后将肽裂解并纯化。
     D. 从树脂上裂解粗制肽并纯化 ：
     将树脂悬浮在试剂 B(15.0ml/g) 中并在 RT 下振荡 4 小时。然后排干树脂， 再次用 2×5mL 试剂 B 洗涤， 并与前面的滤液合并。然后在 RT 下将滤液减压浓缩成糊 / 液体， 并与 25.0mL 无水乙醚 ( 对于每克所用的树脂 ) 一起研磨。然后将悬浮液离心， 并倾析醚层。再 重复此过程两次， 用制备 HPLC 纯化乙醚洗涤后的无色沉淀。
     实施例 XIV- 图 21
     合成 L201
     使 用 0.5g Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-M- 树 脂 (0.4mmol/g， 0.5g， 0.2mmol)( 树脂 A)。如在一般方法所述加入其余的氨基酸单元以制备 (1R)-1-( 双 {2-[ 双 ( 羧甲基 ) 氨基 ] 乙基 } 氨基 ) 丙烷 -3- 甲酸 -1- 羧基 - 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷 氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L201)， 产率 ： 17.0mg(5.4％ )。
     实施例 XV- 图 22A 和 22B
     合成 L202
     A.4-Fmoc- 肼基苯甲酸 ( 图 22A) ：
     用 碳 酸 铯 (21.5g， 66.0mmol) 处 理 在 水 (100ml) 中 的 4- 肼 基 苯 甲 酸 (5.0g， 32.9mmol) 的悬浮液。在 1 小时内将在 THF(25mL) 中的 Fmoc-Cl(9.1g， 35.0mmol) 滴加到以 上溶液， 同时搅拌。加入后将溶液再搅拌 4 小时， 将反应混合物浓缩至大约 75mL， 并用乙醚 (2×100mL) 萃取。弃去醚层， 并用 2N HCl 酸化水层。将分离的固体过滤， 用水 (5×100mL) 洗涤， 然后用乙腈重结晶得到产物 ( 化合物 B)， 为一种无色固体。产率 ： 11.0g(89％ )。1H NMR(DMSO-d6) ： d 4.5(m， 1H， Ar-CH2-CH)， 4.45(m， 2H， Ar-CH2)6.6(bs， 1H， Ar-H)， 7.4-7.9(m， 9， Ar-H 和 Ar-CH2)， 8.3(s， 2H， Ar-H)， 9.6(s， 2H， Ar-H)。M.S.-m/z373.2[M-H]
     使 用 0.5g Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-M- 树 脂 (0.4mmol/g， 0.5g， 0.2mmol)( 树脂 A)。如一般方法所述加入氨基酸单元， 包括化合物 B， 以制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-4- 肼基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬 氨 酰 基 - 甘 氨 酰 基 -L- 组 氨 酰 基 -L- 亮 氨 酰 基 -L- 蛋 氨 酰 胺 (L202)( 图 22B)， 产率 ： 25.0mg(8.3％ )
     实施例 XVI- 图 23A 和图 23B
     合成 L203
     A. 制备 4-Boc- 氨基苄基苯甲酸酯化合物 B( 图 23A) ：
     用粉末碳酸铯 (1.3g， 4.0mmol) 处理在无水乙腈 (10.0mL) 中的 4-boc- 氨基苯甲 酸 (0.95g， 4.0mmol) 的悬浮液， 并在氮气氛下剧烈搅拌。加入苄基溴 (0.75g， 4.4mmol)， 并 在氮气氛下将反应混合物回流 20 小时。然后将反应混合物倾入冰冷的水 (200mL)， 过滤分 离的固体， 并用水 (5×50mL) 洗涤。然后用甲醇水溶液重结晶粗物质以得到产物， 为一种无 1 色固体 ( 化合物 B)。产率 ： 0.8g(61％ )。 H NMR(CDCl3) ： δ1.5(s， 9H， 三个甲基 )， 5.4(s， 2H， Ar-CH2)， 7.4(m， 7H， Ar-H) 和 8.0(m， 2H， Ar-H)。M.S.-m/z 326.1[M+H]。
     B.4- 氨基苄基苯甲酸酯化合物 C( 图 23A) ：
     将 4-Boc- 氨 基 苄 基 苯 甲 酸 酯 (0.8g， 2.5mmol) 溶 于 含 TFA(25 ％ 体 积 ) 的 DCM(20mL)， 并在 RT 搅拌 2 小时。将反应混合物倾入 100.0g 碎冰， 并用饱和碳酸氢钠溶 液中和， 直至 pH 到达大约 8.5。分离有机层， 用 DCM(3×20mL) 萃取水层， 并合并所有的有 机层。然后用 1×50mL 饱和碳酸氢钠、 水 (2×50mL) 洗涤 DCM 层， 并干燥 ( 硫酸钠 )。除 去溶剂得到一种无色固体 ( 化合物 C)， 将此固体用于下一步而不进行进一步纯化。产率 ： 1 0.51g(91 ％ )。 HNMR(CDCl3) ： δ5.3(s， 2H， Ar-CH2)， 6.6(d， 2H， Ar-H， j ＝ 1.0Hz)， 7.4(m， 5H， Ar-H， J ＝ 1.0Hz) 和 7.9(d， 2H， Ar-H， J ＝ 1.0Hz)。
     C.4-(2- 氯乙酰基 ) 氨基苄基苯甲酸酯化合物 D( 图 23A) ：
     将胺 (0.51g， 2.2mmol) 溶于无水二甲基乙酰胺 (5.0mL)， 并在冰中冷却。 通过注射 器滴加氯乙酰氯 (0.28g， 2.5mmol)， 使溶液变为 RT， 并搅拌 2 小时。再加入 2.5mmol 氯乙酰 氯， 并再继续搅拌 2 小时。 然后将反应混合物倾入冰冷的水 (100mL)。 将沉淀的固体过滤， 用 水洗涤， 然后用己烷 / 乙醚重结晶得到一种无色固体 ( 化合物 D)。产率 ： 0.38g(56％ )。1HNMR(CDCl3) ： δ4.25(s， 2H， CH2-C1)， 5.4(s， 2H， Ar-H)， 7.4(m， 5H， Ar-H)， 7.6(d， 2H， Ar-H)， 8.2(d， 2H， Ar-H) 和 8.4(s， 1H， -CONH)。
     2-{1， 4， 7， 10- 四氮杂 -7， 10- 双 {[( 叔丁基 ) 氧基羰基 ] 甲基 }-4-[(N-{4-[ 苄氧 基羰基 ] 苯基 } 氨基甲酰基 ] 环十二基 } 乙酸叔丁酯， 化合物 E 图 23A ：
     将 DO3A- 三叔丁酯 .HCl(5.24g， 9.5mmol) 悬浮在 30.0mL 无水乙腈中， 加入无水碳 酸钾 (2.76g， 20mmol)， 并搅拌 30 分钟。 然后历经 10 分钟， 将在无水乙腈 (20.0mL) 中的氯乙 酰胺 D(2.8g， 9.2mmol) 滴加到上混合物。 然后将反应混合物搅拌过夜。 将溶液过滤， 然后减 压浓缩至糊。 将该糊溶于大约 200.0mL 水， 并用 5×50mL 乙酸乙酯萃取。 用水 (2×100mL) 洗 涤合并的有机层， 并干燥 ( 硫酸钠 )。将溶液过滤并减压蒸发至糊， 并用快速硅胶 (600.0g) 对糊进行色谱处理。用在 DCM 中的 5％甲醇洗脱产物。收集在 TLC 上统一的所有级分， 并蒸 发得到一种无色胶。用异丙醚和 DCM 重结晶该胶以制备化合物 E。产率 ： 4.1g(55％ )。1H NMR(CDCl3) ： δ1.5(s， 27H， 甲基 )， 2.0-3.75(m， 24H， NCH2s)， 5.25(d， 2H， Ar-CH2)， 7.3(m， 5H， Ar-H)， 7.8(d， 2H， Ar-H) 和 7.95(d， 2H， Ar-H)。M.S.-m/z 804.3[M+H]。
     D. 还原以上的酸 E 以制备化合物 F， ( 图 23A) ：
     将以上的苄基酯 E(1.0g， 1.24mmol) 溶于甲醇 - 水混合物 (10.0mL， 95 ∶ 5)， 并加 入钯碳 (10％， 0.2g)。然后用 Parr 仪器在 50.0psi 下将溶液氢化 8 小时。从溶液中滤出催 化剂， 然后减压浓缩得到一种无色绒毛状固体 F。未对它进行进一步纯化， 而将其立即用于 下一步骤。MS ： m/z 714.3[M+Na]。
     E. 制备 L203( 图 23B)
     使用上述的标准偶联方法使以上的酸 F 偶联至来自以上的树脂 [H-Q(Trt)-W(Boc )-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树脂 ] 树脂 A 和以上的胺。 0.5g(0.2mmol) 树脂产生 31.5mg 最终纯化 的肽 (10.9％ )N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二 烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰 基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L203)( 图 23B)。
     实施例 XVII- 图 24
     合成 L204
     使 用 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树 脂 (0.5g， 0.2mmol)( 树 脂 A)。 使用标准偶联条件， 首先装载 Fmoc-Gly-OH， 然后装载来自以上方法 ( 图 23A) 的 F。产率 ： 24.5mg(8.16％ ) 的 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-4- 氨基苯甲酰基 - 甘氨酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L204) ( 图 24)。
     实施例 XVIII- 图 25
     合成 L205
     如 文 献 所 述 制 备 Fmoc-6- 氨 基 烟 酸 1( ″ Synthesis of diacylhydrazine compiounds for therapeutic use ″ .Hoelzemann， G. ； Goodman， S.(Merck Patent G.m.b.H..， Germany)。 Ger.Offen.2000， 16pp.CODEN ： GWXXBX DE 19831710 Al 20000120)， 并 与 预 装 载 的 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树 脂 (0.5g， 0.2mmol) 树 脂 A 偶联， 然后与如上述的其它氨基偶联以制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-4- 氨基苯甲酰基 - 甘氨酰 基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰 基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L205) 产率 ： 1.28mg(0.4％ )。
     实施例 XIX- 图 26A 和 26B
     合成 L206
     A.4’ -Fmoc- 氨基 -3’ - 甲基联苯 -4- 甲酸 B ：
     将氨基酸 (0.41g， 1.8mmol) 溶于在 10.0mL 水中的碳酸铯 (0.98g， 3.0mmol) 的溶 液。参见″ Rational Design of Diflunisal Analogues with Reduced Affinity for Human Serum Albumin″ Mao， H. 等人， J.Am.Chem.Soc.， 2001， 123(43)， 10429-10435。将此 溶液在冰浴中冷却， 滴加在 THF(10.0mL) 中的 Fmoc-Cl(0.52g， 2.0mmol) 的溶液， 并剧烈搅 拌。加入后， 将反应混合物于 RT 下搅拌 20 小时。然后用 2N HCl 酸化溶液。将沉淀的固体 过滤， 用水 (3×20mL) 洗涤并风干。然后用乙腈重结晶粗固体以得到一种无色绒毛状固体 B( 图 26A)。产率 ： 0.66g(75％ )。1H NMR(DMSO-d6) ： δ2.2(s， Ar-Me)， 4.25(t， 1H， Ar-CH， j ＝ 5Hz)， 4.5(d， 2H， O-CH2， j ＝ 5.0Hz)， 7.1(bs， 1H， CONH)， 7.4-8.0(m， 8H， Ar-H) 和 9.75(bs， 1H， -COOH)。M.S. ： m/z 472.0[M-H]。
     使 用 标 准 偶 联 条 件 将 以 上 的 酸 B 与 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-LM- 树 脂 (0.2g， 0.08mmol) 树 脂 A 偶 联。 如 上 述 加 入 附 加 的 基 团 以 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-[4’ - 氨基 -2’ - 甲基联苯 -4- 羧基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙 氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L206)。产率 ： 30.5mg(24％ )
     实施例 XX- 图 27A-B
     合成 L207
     使 用 上 述 的 方 法 由 对 应 的 胺 制 备 3’ -Fmoc- 氨 基 - 联 苯 -3- 甲 酸。 参 见″ Synthesis of 3’ -methyl-4-′ nitrobiphenylcarboxylic acids by the reaction of 3-methyl-4-nitrobenzenenediazonium acetate with methyl benzoate″， Boyland， E. 和 Gorrod， J.， J.Chem.Soc.， Abstracts(1962)， 2209-11。0.7G 胺产生 0.81g Fmoc- 衍 1 生物 (58％ )( 化合物 B， 图 27A)。 H NMR(DMSO-d6) ： δ4.3(t， 1H， Ar-CH)， 4.5(d， 2H， O-CH2)， 7.25-8.25(m， 16H， Ar-H) 和 9.9(s， 1H， -COOH)。M.S.-m/z 434[M-H]
     将 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树脂 (0.2g， 0.08mmol) 树脂 A 与以 上的酸 B 和上述其它基团偶联 ( 图 27B)。制备 29.0mgN-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-3’ -氨 基 - 联苯 -3- 羧基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰 基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L207)(23％ )。
     实施例 XXI- 图 28
     合成 L208
     将 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树 脂 (0.2g， 0.08mmol)A 解 封，并 使用 HATU 作为偶联剂与对苯二甲酸偶联。用 DIC 和 NHS 活化所得的担载在树脂上的酸， 然后与乙二胺偶联。最后将 DOTA- 一酸与担载在树脂上的胺偶联。制备 N-[(3β， 5β，12α)-3-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-[1， 2- 二氨基乙基 - 对苯二甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙 氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 (L208)， 产率为 17.5mg(14％ )
     实施例 XXII- 图 29A-B
     合成 L209
     A.Boc-Glu(G-OBn)-G-OBn ：
     将 Boc- 谷氨酸 (5.0g， 20.2mol) 溶于 THF(50.0mL)， 并在冰浴中冷却至 0 ℃。加 入 HATU(15.61g， 41.0mmol)， 然后加入 DIEA(6.5g， 50.0mmol)。将反应混合物于 0 ℃下搅 拌 30 分钟。加入在 THF(25.0mL) 中的甘氨酸的苄基酯 [8.45g， 50mmol， 通过用碳酸钠中和 苄基甘氨酸盐酸盐， 用 DCM 萃取并除去溶剂来产生 ]。将反应混合物变至 RT， 并在 RT 下搅 拌 20 小时。在减压下除去所有的挥发物。用饱和碳酸钠溶液 (100mL) 处理残余物， 并用乙 酸乙酯 (3×100mL) 萃取。合并有机层， 用 1N HCl(2×100mL) 和水 (2×100mL) 洗涤， 并干 燥 ( 硫酸钠 )。将溶液过滤， 并在减压下除去溶剂以得到一种糊， 用快速硅胶 (500.0g) 对 该糊进行色谱处理。用在 DCM 中的 2％甲醇洗脱得到产物， 为一种无色的糊 ( 化合物 B， 图 1 29A)。 产率 ： 8.5g(74.5％ )。 H NMR(CDCl3) ： δ1.4(s， 9H， -CH3s)， 2.0-2.5(m， 4H， -CH-CH2 和 CO-CH)， 4.2(m， 5H， N-CH2-CO)， 5.15(s， 4H， Ar-CH2)， 5.45(bs， 1H， Boc-NH)， 7.3(m， 10H， Ar-H) 和 7.6(2bs， 2H， CONH)。M.S.-m/z 564.1[M+H]。分析 HPLC 保留时间 -8.29 分 ( ＞ 97％纯， 20-65％ B， 经过 15 分钟 )。
     B.H-Glu(G-OBn)-G-OBn ：
     将以上的完全受保护的谷氨酸衍生物 (1.7g， 3.2mmol)B 溶于 DCM/TFA(4 ∶ 1， 20mL)， 并搅拌直至在 TLC 上原料消失 (2 小时 )。将反应混合物倾入冰冷的饱和碳酸氢钠 溶液 (200mL)， 分离有机层， 用 2×50mL DCM 萃取水层， 并与有机层合并。用饱和碳酸氢钠 (2×100mL)、 水 (2×100mL) 洗涤 DCM 层， 并干燥 ( 硫酸钠 )。将溶液过滤， 减压蒸发， 并在真 空下干燥残余物以得到一种玻璃状物质 ( 化合物 C， 图 29A)， 将其用于下一步骤而不进行进 一步的纯化。产率 ： 0.72g(95％ )。M.S.-m/z 442.2[M+H]。
     C.(DOTA- 三叔丁基 )-Glu-(G-OBn)-G-OBn ：
     将在无水 DCM(10.0mL) 中的以上的胺 C(1.33g， 3mmol) 加到活化的 DOTA- 三叔丁 酯 [2.27g， 3.6mmol， 用 HBTU 1.36g， 3.6mmol 和 DIEA 1.04g， 8mmol 处理， 并在 RT 下在 25mL 无水 DCM 中搅拌 30 分钟 ] 的溶液并在 RT 下搅拌 20 小时 ]。用 200mL DCM 稀释反应混合 物， 用饱和碳酸钠 (2×150mL) 洗涤， 并干燥 ( 硫酸钠 )。将溶液过滤， 并在减压下除去溶剂 以得到一种褐色糊。用快速硅胶 (500.0g) 对粗产物作色谱处理。用在 DCM 中的 2％甲醇 洗脱得到产物， 为一种无色胶 ( 化合物 D， 图 29A)。产率 ： 1.7g(56.8％ )。1H NMR(CDCl3) ： δ1.3 和 1.4(2s， 9H， 三个甲基， 各自来自游离碱和 DOTA 的钠加合物 )， 2.0-3.5(m， 20H， N-CH2s 和 -CH-CH2 和 CO-CH2)， 3.75-4.5(m， 13H， N-CH2-CO)， 5.2(m， 4H， Ar-CH2) 和 7.25(m， 10H， Ar-H)。M.S.m/z-1018.3[M+Na] 和 996.5[M+H] 和 546.3[M+Na+H]/2。HPLC- 保留时间 ： 11.24 分 ( ＞ 90％， 20-80％ B， 经过 30 分钟 )。
     D.(DOTA- 三叔丁基 )-Glu-(G-OH)-G-OH ：
     将以上的双苄基酯 (0.2g， 0.2mmol)D 溶于甲醇 - 水 (20mL， 9 ∶ 1)， 并在 50psi 下在 10 ％ Pd/C 催化剂 (0.4g， 50 ％ wt. 水 ) 存在下氢化。在 HPLC 和 TLC 上原料消失后 (4 小时 )， 滤出溶液中的催化剂， 在减压下除去溶剂， 并在高度真空下干燥残余物大约 20 小 时 ( ＜ 0.1mm) 以得到产物， 为一种无色泡沫 ( 化合物 E， 图 29A)。产率 ： 0.12g(73.5％ )。 1 HNMR(DMSO-d6) ： δ1.3 和 1.4(2s， 9H， 对 应 于 游 离 碱 和 DOTA 的 钠 加 合 物 的 甲 基 )， 1.8-4.7(m， 33H， NCH2s， COCH2 和 CH-CH2 和 NH-CH-CO)， 8.1， 8.2 和 8.4(3bs， NHCO)。M.S. ： m/z-816.3[M+H] 和 838.3[M+Na].HPLC 保留时间 ： 3.52 分 (20-80 ％ B， 经过 30 分， ＞ 95 ％ 纯度 )。
     E.H-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酰基 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酰基 -Gln-Trp-Ala-Va l-Gly-His-Leu-Met-NH2 ：
     将 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树脂 (0.5g， 0.2mmol)A 解封， 并依次 与 8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸偶联两次以在制备 HPLC 纯化之后得到以上脱保护的肽 ( 化合 物 F， 图 29B)。产率 ： 91.0mg(37％ )。
     HPLC 保 留 时 间 ： 8.98 分 ( ＞ 95 ％ 纯 度， 10-40 ％ B， 经 过 10 分 钟 )。M.S. ： m/ z-1230.6[M+H]， 615.9[M+2H]/2。
     F. 液相偶联以上的双酸 E 和胺 F( 图 29B)
     将双酸 (13.5mg， 0.0166mmol)E 溶于 100μL 无水乙腈， 用 NHS(4.0mg， 0.035mmol) 和 DIC(5.05mg， 0.04mmol) 处理， 并在 RT 下搅拌 24 小时。向以上活化的酸中加入游离胺 F(51.0mg， 0.41mmol)[ 通过以下方法产生 ： 用饱和碳酸氢钠处理 TFA 盐并冻干溶液得到绒 毛状固体的胺 ]， 然后加入 100μL NMP， 并在 RT 下继续搅拌 40 小时。用无水乙醚 (10mL) 稀释溶液， 离心收集沉淀， 并再次用 2×10mL 无水乙醚洗涤。然后用制备 HPLC 纯化粗固体 以得到产物， 为一种无色绒毛状固体 L209， 如在图 29B 所示， 产率为 7.5mg(14.7％ )。
     实施例 XXIII- 图 30A-B
     合成 L210
     A.H-8- 氨基辛酰基 -8- 氨基辛酰基 -Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2 ：
     此化合物也完全以与化合物 F( 图 29B) 的情况相同的方式制备， 但使用 1- 氨基辛 酸， 并用制备 HPLC 纯化胺 ( 化合物 B， 图 30A)。 产率 ： 95.0mg(38.9％ )。 HPLC 保留时间 ： 7.49 分 ( ＞ 95％纯度 ； 10-40％ B， 经过 10.0 分钟 )。M.S. ： m/z-1222.7[M+H]， 611.8[M+2H]/2。
     如 在 L209 的 情 况 下 那 样 在 100μL 乙 腈 中 将 (DOTA- 三 叔 丁 基 )-Glu-(G-OH)-G-OH(0.0163g， 0.02mmol) 转化成它的双 NHS 酯， 用在 100μL NMP 中的游 离碱 - 化合物 B(60.0mg， 0.05mmol) 处理， 并继续反应 40 小时， 然后进行处理， 并如上述纯 化以制备 L210( 图 30B)， 产率为 11.0mg(18％ )。
     实施例 XXIV- 图 31
     合成 L211
     使 用 标 准 方 案 由 0.2g Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树 脂 (0.08mmol) 制备。 制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 - 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰 基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋 氨酰胺 L211， 产率为 4.7mg(3.7％ )( 图 31)。
     实施例 XXV- 图 32合成 L212
     使 用 标 准 方 案 由 Rink 酰 胺 Novagel 树 脂 (0.47mmol/g， 0.2g， 0.094mmol) 通 过 在树脂上构建序列来制备。制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰 基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋 氨酰胺 L212， 产率为 25.0mg(17.7％ )( 图 32)。
     实施例 XXVI- 图 33
     合成 L213
     由 Fmoc-Met-2- 氯三苯甲基氯树脂 (NovaBioChem， 0.78mmol/g， 0.26g， 0.2mmol) 制备， 而序列的其余部分使用标准方法构建。制备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲 酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰 基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酸 L213， 产率为 49.05mg(16.4％ )( 图 33)。
     实施例 XXVII- 图 34
     合成 L214
     使 用 标 准 条 件 用 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树 脂 (0.2g， 0.08mmol)A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -D- 苯丙氨酰基 -L- 谷氨酰胺 酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋 氨酰胺 L214。得到 8.5mg 产物 (6.4％ )( 图 34)。
     实施例 XXVIII- 图 35
     合成 L215
     用 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树 脂 (0.2g， 0.08mmol)A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 精氨酰基 -L- 亮氨酰基 - 甘 氨酰基 -L- 天冬酰胺酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘 氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L215。得到 9.2mg(5.5％ )( 图 35)。
     实施例 XXIX- 图 36
     合成 L216
     用 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树 脂 (0.2g， 0.08mmol)A 制 备 N[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 - 精氨酰基 -L- 酪氨酰基 - 甘 氨酰基 -L- 天冬酰胺酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘 氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L216。得到 25.0mg(14.7％ )( 图 36)。
     实施例 XXX- 图 37
     合成 L217
     用 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树 脂 A(0.2g， 0.08mmol) 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 赖氨酰基 -L- 酪氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰 基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L217。得到 58.0mg(34.7％ )( 图 37)。
     实施例 XXXI- 图 38
     合成 L218
     使 用 Fmoc-Q(Trt)-W(Boc)-A-V-G-H(Trt)-L-M- 树 脂 A(0.2g， 0.08mmol)。 将 Fmoc-Lys(ivDde) 用于引入赖氨酸。在完成线性序列之后， 用在 DMF 中的 10％肼除去赖氨 酸的保护基 (2×10mL ； 每次 10 分钟， 然后洗涤 )。然后用 “一般” 部分所述的方法引入其余 的氨基酸以完成所需的肽序列。图 38 中获得 L218 的产率为 40.0mg(23.2％ )。
     实施例 XXXII- 图 39
     合成 L219
     使用 4- 氨磺酰丁酰基 AM Novagel 树脂 (1.1mmol/g ； 0.5g ； 0.55mmol)。-20℃下 将第一氨基酸装载到此树脂上， 持续 20 小时。用普通偶联方法完成其余的序列。洗涤后， 用 20.0 当量的碘乙腈和 10.0 当量的 DIEA 将树脂烷基化 20 小时。然后排干树脂的液体， 洗涤， 随后用 2.0 当量的在 5.0mL THF 中的戊胺裂解 20 小时。随后用 2×5.0mL 的 THF 洗 涤树脂， 并合并所有的滤液。然后在减压下蒸发 THF， 用 10.0mL 的试剂 B 将残余物解封， 并 如前述纯化肽 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二 烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -D- 苯丙氨酰基 -L- 谷氨酰胺酰 基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 - 氨基 戊基， L219。得到 28.0mg(2.8％ )( 图 39)
     实施例 XXXIII- 图 40
     合成 L220
     用 NovaSyn TGR(0.25mmol/g ； 0.15g， 0.05mmol) 树 脂 A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘 氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 -D- 丙 氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L220。得到 31.5mg(41.4％ )( 图 40)。
     实施例 XXXIV- 图 41
     合成 L221
     用 NovaSyn TGR(0.25mmol/g ； 0.15g， 0.05mmol) 树 脂 A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十 二 烷 -1- 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -D- 苯丙氨酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙 氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 亮氨酰胺， L221。得到 28.0mg(34.3％ )( 图 41)。
     实施例 XXXV- 图 42
     合成 L222
     用 NovaSyn TGR(0.25mmol/g ； 0.15g， 0.05mmol) 树 脂 A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮 杂 环 十 二 烷 -1- 基 ] 乙 酰 基 ] 氨 基 ]- 甘氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -D- 酪氨酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨 酰基 -L- 缬氨酰基 -β 丙氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 正亮氨酰胺， L222。得 到 34.0mg(40.0％ )( 图 42)。实施例 XXXVI- 图 43
     合成 L223
     用 NovaSyn TGR(0.25mmol/g ； 0.15g， 0.05mmol) 树 脂 A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘 氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰 基 -L- 缬氨酰基 -β 丙氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 正亮氨酰胺， L223。得到 31.2mg(37.1％ )( 图 43)。
     实施例 XXXVII- 图 44
     合成 L224
     用 NovaSyn TGR(0.25mmol/g ； 0.15g， 0.05mmol) 树 脂 A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘 氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 - 甘氨酰基 -L- 组 氨酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 亮氨酰胺， L224。得到 30.0mg(42.2％ )( 图 44)。
     实施例 XXXVIII- 图 45
     合成 L225
     用 NovaSyn TGR(0.25mmol/g ； 0.15g， 0.05mmol) 树 脂 A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘 氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰 基 -L- 丝氨酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L225。得到 15.0mg(20.4％ )( 图 45)。
     实施例 XXXIX- 图 46
     合成 L226
     用 NovaSyn TGR(0.25mmol/g ； 0.15g， 0.05mmol) 树 脂 A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘 氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 组氨酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰 基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L226。得到 40.0mg(52.9％ )( 图 46)。
     实施例 XL- 图 47
     合成 L227
     用 NovaSyn TGR(0.25mmol/g ； 0.15g， 0.05mmol) 树 脂 A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘 氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 苏氨酰基 - 甘氨酰 基 -L- 组氨酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 蛋氨酰胺 L227。得到 28.0mg(36.7％ )( 图 47)。
     实施例 XLI- 图 48
     合成 L228
     用 NovaSyn TGR(0.25mmol/g ； 0.15g， 0.05mmol) 树 脂 A 制 备 N-[(3β， 5β， 12α)-3-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]- 甘 氨酰基 -4- 氨基苯甲酰基 -L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘 氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 苯丙氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L228。得到 26.0mg(33.8％ )( 图 48)。
     实施例 XLII- 合成其它 GRP 化合物
     A. 用于制备 4， 4’ - 氨基甲基联苯羧酸 (B2) 和 3， 3’ - 氨基甲基联苯羧酸 (B3) 的一般方法 ：
     1. 甲基 - 羟基甲基联苯羧酸酯 ：
     将商购得到的 (Aldrich Chemical Co.)4- 羟基甲基苯基硼酸或 3- 羟基甲基苯基 硼酸 (1.0g， 6.58mmol) 和异丙醇 (10mL) 及 2M 碳酸钠 (16mL) 一起搅拌直至溶液变均一。 通过使氮通过溶液而使溶液脱气， 然后用固体甲基 -3- 溴苯甲酸酯或甲基 -4- 溴苯甲酸酯 (1.35g， 6.3mmol) 处理， 随后用 Pd(O) 催化剂 {[(C6H5)3P]4Pd ； 0.023g， 0.003mmol} 处理。将 反应混合物在氮气氛下保持回流， 直至通过 TLC 分析确定原料溴苯甲酸酯用完 (2-3 小时 )。 然后用 250mL 水稀释反应混合物， 并用乙酸乙酯 (3×50mL) 萃取。合并有机层， 用饱和碳酸 氢钠溶液 (2×50mL) 洗涤， 并干燥 (Na2SO4)。在减压下除去溶剂， 并用快速硅胶 (100g) 色 谱处理残余物。用在己烷中的 40％乙酸乙酯洗脱得到产物， 为一种固体或油状物。
     产率 ：
     B2-0.45g(31％ ) ； m.p.-170-171℃。
     B3-0.69g(62％ ) ； 油状物。 1
     H NMR(CDCl3)δB2-3.94(s， 3H， -COOCH3)， 4.73(s， 2H， -CH2-Ph)， 7.475(d， 2H， J＝ 5Hz)， 7.6(d， 2H， J ＝ 10Hz)， 7.65(d， 2H， J ＝ 5Hz) 和 8.09(d， 2H， J ＝ 10Hz)。
     M.S.-m/e-243.0[M+H]
     B3-3.94(s， 3H， -COOCH3)， 4.76(s， 2H， -CH2-Ph)， 7.50(m， 4H)， 7.62(s， 1H)， 7.77(s， 1H)， 8.00(s， 1H) 和 8.27(s， 1H)。
     M.S.-m/e-243.2[M+H]
     2. 叠氮基甲基联苯羧酸酯 ：
     在冰中冷却在无水二氯甲烷 (10mL) 中的以上联苯醇 (2.0mmol)， 用二苯基磷酰基 叠氮化物 (2.2mol) 和 DBU(2.0mmol) 处理， 并在氮气氛下搅拌 24 小时。用水稀释反应混 合物， 并用乙酸乙酯 (2×25mL) 萃取。合并有机层， 相继用 0.5M 柠檬酸溶液 (2×25mL)、 水 (2×25mL) 洗涤， 并干燥 (Na2SO4)。将溶液过滤， 并在减压下蒸发得到粗产物。用己烷 / 乙 醚结晶 4， 4’ - 异构体， 并将 3， 3’ - 异构体与异丙醚一起研磨以除去所有的杂质 ； 进行 TLC 分析确定产物是均一的， 不需要作进一步纯化。
     产率 ：
     甲基 -4- 叠氮基甲基 -4- 联苯羧酸酯 -0.245g(46％ ) ； m.p.-106-108℃。
     甲基 -4- 叠氮基甲基 -4- 联苯羧酸酯 -0.36g(59％， 油状物 ) 1
     H NMR(CDCl3)δ-4， 4’ - 异 构 体 -3.95(s， 3H， -COOCH3)， 4.41(s， 2H， -CH2N3)， 7.42(d， 2H， J ＝ 5Hz)， 7.66(m， 4H) 和 8.11(d， 2H， J ＝ 5Hz)
     3， 3’ - 异 构 体 -3.94(s， 3H， -COOCH3)， 4.41(s， 2H， -CH2N3)， 7.26-7.6(m， 5H)， 7.76(d， 1H， J ＝ 10Hz)， 8.02(d， 1H， J ＝ 5Hz) 和 8.27(s， 1H)。
     3. 水解联苯羧酸的甲酯 ：
     用 20mL 2M 氢氧化锂溶液处理大约 4mmol 甲酯， 并搅拌至溶液均一 (20-24 小时 )。 用 2×50mL 乙醚萃取水层， 并弃去有机层。然后用 0.5M 柠檬酸酸化水层， 将沉淀的固体过 滤并干燥。不需要进行其它纯化， 并将酸用于下一步骤。
     产率 ：
     4， 4’ - 异构体 -0.87 甲酯产生 0.754g 酸 (86.6％ ) ； m.p.-205-210℃3， 3’ - 异构体 -0.48g 甲酯提供 0.34g 酸 (63.6％ ) ； m.p.-102-105℃。 1
     H NMR(DMSO-d6)δ ： 4， 4’ - 异 构 体 -4.52(s， 2H， -CH2N3)， 7.50(d， 2H， J ＝ 5Hz)， 7.9(m， 4H) 和 8.03(d， 2H， J ＝ 10Hz)
     3， 3’ - 异 构 体 -4.54(s， 2H， -CH2N3)， 7.4(d， 1H， J ＝ 10Hz)， 7.5-7.7(m， 4H)， 7.92(ABq， 2H) 和 8.19(s， 1H)。
     4. 将叠氮化物还原成胺 ：
     此还原在固相完成， 并且不分离胺。用标准肽偶联方案将叠氮基羧酸装载在树脂 上。洗涤后， 将含叠氮化物的树脂与 20 当量的三苯膦在 THF/ 水 (95 ∶ 5) 中一起振荡 24 小时。在氮正压下排干溶液， 然后用标准洗涤方法洗涤。将所得的胺用于下一步偶联。
     5.(3β， 5β， 7α， 12α)-3-[{(9H- 芴 -9- 基 甲 氧 基 ) 氨 基 ] 乙 酰 基 } 氨 基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 ：
     将三丁基胺 (3.2mL ； 13.5mmol) 滴加到在 0℃下搅拌的在 THF(80mL) 中的 Fmoc- 甘 氨酸 (4.0g， 13.5mmol) 的溶液。 然后加入氯甲酸异丁酯 (1.7mL ； 13.5mmol)， 并在 10 分钟后 在 1 小时内将在 DMF(80mL) 中的三丁基胺 (2.6mL ； 11.2mmol) 和 (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨 基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 (4.5g ； 11.2mmol) 的悬浮液滴加到冷却的溶液。使混合物升 温至室温， 并在 6 小时后将溶液浓缩至 120mL， 然后加入水 (180mL) 和 1N HCl(30mL)( 最终 pH 1.5)。将沉淀的固体过滤， 用水 (2×100mL) 洗涤， 真空干燥， 并用快速色谱法纯化。用 氯仿 / 甲醇 (8 ∶ 2) 洗脱得到产物， 为一种无色固体。
     产率 ： 1.9g(25％ )。TLC ： Rf 0.30(CHCl3/MeOH/NH4OH-6 ∶ 3 ∶ 1)。
     化合物的体外和体内测试
     实施例 XLIII ： 在 PC3 细胞系中对 GRP 受体的体外结合试验
     图 14A-B
     为鉴定潜在的先导化合物， 使用一种鉴定对 GRP-R 具有高亲和力的化合物的体 外试验。由于已知来自人前列腺癌的 PC3 细胞系表现出在细胞表面高表达 GRP-R， 因此 125 开发出 96 孔平板格式的放射性配体结合试验， 并使其有效用于测定 I-BBN 与 GRP-R 阳 性 PC3 细胞的结合和本发明化合物抑制这种结合的能力。用此试验测定 RP527 配体、 DO3A- 一 酰 胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2( 对 照 ) 和 抑 制 125I-BBN 与 GRP-R 结 合 的 本 发 明 化 合 物 的 IC50。(RP527 ＝ N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-5- 氨 基 戊 酸 -BBN(7-14) [SEQ.ID.NO ： 1]， 它 具 有 MS ＝ 1442.6 和 IC50-0.84)。Van de Wiele C， Dumont F 等 人， Technetium-99m RP527， a GRP analogue for visualation of GRPreceptor-expressing malignancies ： a feasibility study.Eur.J.Nucl.Med.， (2000)27 ； 1694-1699 ； DO3A- 一 酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2 也称作 DO3A- 一酰胺 -8- 氨基 - 辛酸 -BBN(7-14)， 其是 SEQ ID NO ： 1， 它具有 MS ＝ 1467.0。DO3A 一酰胺 - 氨基辛基 -BBN[7-14]。
     使放射性配体结合平板试验有效用于 BBN 和 BBN 类似物 ( 包括可商购得到的 BBN 和 L1)， 且还使用 99mTc RP527 作为放射性配体。
     A. 材料和方法 ：
     1. 细胞培养 ：
     从美国典型培养物保藏中心 (American Type Culture Collection) 获得 PC3( 人 前列腺癌细胞系 )， 并在组织培养瓶 (Corning) 中在 RPMI1640(ATCC) 内培养。 此生长培养基补充有 10％热灭活 FBS(Hyclone， SH30070.03)、 10mM HEPES(GibcoBRL， 15630-080) 和抗生 素 / 抗真菌剂 (GibcoBRL， 15240-062) 以得到最终浓度的青霉素 - 链霉素 (100 单位 /mL) 和 两性霉素 B(0.25μg/mL)。将所有的培养物保持在含 5％ CO2/95％空气的增湿气氛和 37℃ 下， 按指示用 0.05％胰蛋白酶 /EDTA(GibcoBRL 25300-054) 进行常规传代。在 96 孔白色 / 透明底微滴量板 (Falcon Optilux-1) 或 96 孔黑色 / 透明胶原 I cellware 板 (Beckton Dickinson Biocoat) 中以 2.0×104/ 孔的浓度接种培养用于实验的细胞。在接种后第 1 或 2 天将平板用于结合研究。
     2. 结合缓冲液 ：
     补充 20mM HEPES、 0.1％ BSA(w/v)、 0.5mM PMSF(AEBSF)、 杆菌肽 (50mg/500ml)， pH 125 7.4 的 RPMI 1640(ATCC)。从 Perkin-Elmer 获得 I-BBN( 不含载体， 2200Ci/mmole)。 125
     B. 与 I-BBN 对 PC3 细胞中的 GRP-R 的竞争试验 ：
     用 96 孔平板试验测定本发明各种化合物抑制 125I-BBN 与人 GRP-R 结合的 IC50。采 用以下的一般方法 ：
     将所有受试化合物溶于结合缓冲液， 并在结合缓冲液中完成适宜的稀释。在 96- 孔白色 / 透明底微滴平板 (Falcon Optilux-I) 或 96 孔黑色 / 透明胶原 I cellware 平 板 (Beckton Dickinson Biocoat) 中以 2.0×104/ 孔的浓度接种用于试验的 PC3 细胞 ( 人 前列腺癌细胞系 )。在接种后第 1 或 2 天将平板用于结合研究。在试验前检查平板的汇合 ( ＞ 90％汇合 )。对于此试验， 将浓度范围为 1.25×10-9M-5×10-9M 的 RP527 或 DO3A- 一酰 胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2 配体 ( 对照 ) 或本发明化合物与 125I-BBN(25,000cpm/ 孔 ) 一起温 育。以 75μL/ 孔的测试体积进行这些研究。将一式三份的孔用于各数据点。在加入适宜 的溶液之后， 将平板在 4℃下培养 1 小时以防止配体 - 受体复合物内化。通过加入 200μL 冰冷的温育缓冲液来终止温育。将平板洗涤 5 次， 并吸干。用 LKBCompuGamma 计数器或微 板闪烁计数器检测放射性。
     RP527( 对照 ) 和 L70- 本发明化合物的竞争结合曲线可以见于图 14A-B。这些 数 据 表 明 RP527 对 照 的 IC50 为 2.5nM， 而 本 发 明 化 合 物 L70 的 IC50 为 5nM。DO3A- 一 酰 胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2 对照的 IC50 为 5nM。受试的本发明化合物的 IC50 值可以见于上述表 1-3， 表明它们与对照的值相当， 从而可以预期其对受体具有充足的亲和力， 以允许在体内 被带受体的细胞摄取。
     C. 内化和流出试验 ：
     在 96 孔平板上进行这些试验。在洗涤除去血清蛋白之后， 将 PC3 细胞与 125I-BBN、 177 Lu-DO3A- 一酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2 或放射性标记的本发明化合物一起在 37℃下温育 40 分钟。通过加入 200μL 冰冷的结合缓冲液来终止温育。用结合缓冲液将平板洗涤两次。 为除去表面结合的放射性配体， 将细胞与 0.2M 乙酸 ( 在盐水中 )， pH 2.8 一起温育 2 分钟。 将平板离心， 并收集酸洗涤培养基以测定未被内化的放射性的量。收集细胞以测定内化的 125 I-BBN 的数量， 并在 γ- 计数器中分析所有的样品。 通过将不同时间点获得的计数与在最 后时间点 (T40 分钟 ) 获得的计数进行比较而将内化试验数据标准化。
     对于流出研究， 在 37℃下对 PC3 细胞负载 125I-BBN 或放射性标记的本发明化合物 40 分钟后， 滤除未结合的物质， 并如上述测定内化％。然后在 37℃下将细胞重悬在结合缓 冲液中达 3 小时。在 0.5、 1、 2 或 3 小时， 如上所述测定相对于最初负荷水平保持内化的量，并将其用于计算流出百分比， 记录于表 9。
     表9 125
     I-BBN 以及 DO3A- 一酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2( 对照 ) 和本发明化合物的 Lu-177 络合物的内化和流出
     这些数据表明， 本发明化合物被 PC3 细胞内化和保留的程度与对照物类似。
     实施例 XLIV- 制备 Tc- 标记的 GRP 化合物
     制备在 0.1 ％ TFA 水溶液中浓度为 1mg/mL 的表 10 鉴定的本发明化合物的肽溶 液。通过将 SnCl2·2H2O(20mg/mL) 溶于 1N HCl 而制备氯化亚锡溶液。通过将等分试样的 SnCl2 溶液 (10μL) 加到葡萄糖酸钠溶液来制备包含 20μg SnCl2·2H2O/100μL 的葡萄糖
     酸亚锡溶液， 所述葡萄糖酸钠溶液通过将 13mg 的葡萄糖酸钠溶于水来制备。通过将 50mg HP-γ-CD 溶于 1mL 水来制备羟丙基 γ- 环糊精 [HP-γ-CD] 溶液。
     通 过 混 合 20μl 未 标 记 化 合 物 (20μg) 的 溶 液， 50μL HP-γ-CD 溶 液， 100μL 99m Sn- 葡萄糖酸盐溶液和 20-50μL Tc 高锝酸盐 (5-8mCi， Syncor) 来制备以下鉴定的 99mTc 标记的化合物。 最终的体积大约为 200μL， 而最终 pH 为 4.5-5。 将反应混合物在 100℃下加 热 15-20 分钟， 然后通过反相 HPLC 分析以测定放射化学纯度 (RCP)。通过 HPLC 分离期望产 物峰， 收集至含有 5mg/mL 抗坏血酸、 16mg/mL HP-γ-CD 和 50mM 磷酸盐缓冲液， pH 4.5 的稳 定缓冲液中， 并用加速真空浓缩以除去乙腈。用于分析和纯化的 HPLC 系统如下 ： C18Vydac 柱， 4.6×250mm， 水相 ： 在水中的 0.1％ TFA， 有机相 ： 在乙腈中的 0.085％ TFA。流速 ： 1mL/ 分。取决于各肽的性质， 使用 20％ -25％乙腈 /0.085％ TFA 的等度洗脱。
     标记结果总结在表 10 中。
     表 10
     n.d. ＝未检测
     1： 所有化合物与 N， N′ - 二甲基甘氨酰 -Ser-Cys-Gly 金属螯合剂缀合。使用 Acm 保护形式的配体。因此， 用于制备 L2 的 99mTc 络合物的配体为 N， N′ - 二甲基甘氨酰 -SerCys(Acm)-Gly-RJQWAVGHLM-NH2。在与 Tc 螯合期间除去 Acm 基团。
     2： 在序列中，″ J″指 8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸， 而″ a″指 D- 丙氨酸。
     3： 加热后和 HPLC 纯化前即刻进行最初 RCP 测定。
     4： 在 HPLC 分离和通过加速真空除去乙腈之后测定 RCP。
     实施例 XLV- 制备用于细胞结合和生物分布研究的 177Lu-L64 ：
     通过在 90℃下将 10μg L64 配体 (10μL 1mg/mL 水溶液 )、 100μL 乙酸铵缓冲液 177 (0.2M， pH 5.2) 和～ 1-2mCi 在 0.05N HCl 中的 LuCl3(MURR) 温育 15 分钟来合成此化合 物。通过加入 20μL1％ Na2EDTA·2H2O(Aldrich) 水溶液来清除游离 177Lu。所得的放射化 学纯度 (RCP) 为～ 95％。通过 HPLC， 使用 YMC Basic C8 柱 [4.6×150mm]， 30℃的柱温和 1mL/ 分的流速， 以及 30 分钟内 68％ A/32％ B-66％ A/34％ B 的梯度， 将放射性标记的产物 与未标记的配体和其它杂质分离， 其中 A 为柠檬酸盐缓冲液 (0.02M， pH 3.0)， 而 B 为 80％ CH3CN/20％ CH3OH。分离的化合物的 RCP 为～ 100％， 而 HPLC 保留时间为 23.4 分钟。
     通过将目标 HPLC 峰收集至 1000μL 柠檬酸盐缓冲液 (0.05M， pH5.3， 含 1％抗坏血 酸和 0.1％ HSA) 来制备用于生物分布和细胞结合研究的样品。通过离心浓缩 30 分钟来除 去收集的洗脱物中的有机洗脱剂。对于细胞结合研究， 在体外研究 30 分钟内用细胞结合培 养基稀释纯化的样品至浓度为 1.5μCi/mL。关于生物分布研究， 在体内研究 30 分钟内将 样品用柠檬酸盐缓冲液 (0.05M， pH5.3， 含 1％抗坏血酸钠和 0.1％ HSA) 稀释至最终浓度为 50μCi/mL。
     实施例 XLVI- 制备用于放射治疗研究的 177Lu-L64
     通过于 85 ℃下将 70μg L64 配体 (70L 1mg/mL 水溶液 )、 200μL 乙酸铵缓冲液 177 (0.2M， pH 5.2) 和～ 30-40mCi 在 0.05N HCl 中的 LuCl3(MURR) 温育 10 分钟来合成此化合 物。在冷却至室温后， 通过加入 20μL 2％ Na2EDTA·2H2O(Aldrich) 水溶液清除游离 177Lu。 所得的放射化学纯度 (RCP) 为～ 95％。通过 HPLC， 用 300VHP 阴离子交换柱 (7.5×50mm) (Vydac) 从未标记的配体和其它杂质中分离放射性标记的产物， 所述的柱依次用水、 50％乙 腈 / 水， 然后用 1g/L 乙酸铵水溶液以 1mL/ 分的流速洗脱。用 50％ CH3CN 从柱中洗脱目标 化合物， 并将其与～ 1mL 含 5 ％抗坏血酸、 0.2 ％ HSA 和 0.9 ％ (v ∶ v) 苄醇的柠檬酸盐缓 冲液 (0.05M， pH 5.3) 混合。通过旋转真空 40 分钟除去分离级分中的有机部分， 并在体内 研究 30 分钟内用含 5 ％抗坏血酸、 0.2 ％ HSA 和 0.9 ％ (v ∶ v) 苄基醇的柠檬酸盐缓冲液 (0.05M， pH 5.3) 将该浓缩的溶液 ( ～ 20-25mCi) 调节至浓度为 7.5mCi/mL。所得的化合物 的 RCP ＞ 95％。
     实施例 XLVII- 制备 111In-L64 ：
     通过在 85℃下在 0.05N HCl(80μL) 和 155μL 乙酸钠缓冲液 (0.5M， pH 4.5) 中将 10μg L64 配体 (5μL 在 0.01N HCl 中的 2mg/mL 溶液 )、 60μL 乙醇、 1.12mCi 111InCl3 温育 30 分钟来合成此化合物。通过加入 20μL 1％ Na2EDTA.2H2O(Aldrich) 水溶液来清除游离 111 In。所得的放射化学纯度 (RCP) 为 87％。通过 HPLC， 使用 Vydac C18 柱 [4.6×250mm]， 50℃的柱温和 1.5mL/ 分的流速， 以及 20 分钟内 75％ A/25％ B-65％ A/35％ B 的梯度， 从未标记的配体和其它杂质中分离放射性标记的产物， 其中 A 为 0.1％ TFA 水溶液， 而 B 为在乙 111 腈中的 0.085％ TFA。以此系统， In-L64 的保留时间为 15.7 分钟。分离的化合物 RCP 为 96.7％。
     实施例 XLVIII- 制备 177Lu-DO3A- 一酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2( 对照 )
     通 过 将 DO3A- 一 酰 胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2 配 体 ( 如 美 国 专 利 申 请 公 开 2002/0054855 和 WO 02/87637 所 述 制 备， 二 者 被 引 用 作 为 参 考 ) 溶 于 0.01N HCl 至 浓 度为 1mg/mL 来制备肽的储备液。以所示的顺序混合以下试剂来制备 177Lu-DO3A- 一酰 胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2 ：
     0.2M NH40Ac， pH 6.8 100μl
     肽储备液， 1mg/mL， 在 0.01N HCl 中 5μL 177
     LuCl3(MURR)， 在 0.05M HCl 中 1.2μl(1.4mCi)
     将反应混合物在 85℃下保温 10 分钟。在水浴中冷却至室温后， 加入 20μL 1％ EDTA 溶液和 20μL EtOH。通过 HPLC， 使用 C18 柱 (VYDAC Cat# ； 218TP54) 分析化合物， 用 20 分钟内 21-25％ B 的梯度以 1mL/min 的流速洗脱， 其中 A 为 0.1％ TFA/H2O， 而 B 为 0.1％ 177 TFA/CH3CN)。形成 97.1％产率 (RCP) 的 Lu-DO3A- 一酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2， 其在此系 统中的保留时间为～ 16.1 分钟。
     实施例 XLIX- 制备 177Lu-L63
     如关于 177Lu-DO3A- 一酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2， 其中 QQWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序列 (SEQ ID NO ： 1) 所述制备此化合物。 通过 HPLC， 使用 C18 柱 (VYDAC Cat#， 218TP54) 分 析化合物， 以 1mL/ 分的流速和 20 分钟内 30-34％ B 的梯度洗脱 ( 其中溶剂为 A.0.1％ TFA/ H2O， 而 B 为 0.1％ TFA/CH3CN)。形成的 177Lu-L63 的 RCP 为 97.8％， 在此系统中的保留时间 为～ 14.2 分钟。
     实施例 L- 制备用于细胞结合和生物分布研究的 177Lu-L70 ：
     根据上述的方法制备此化合物， 但换成 L70( 实施例 II 的配体 )。 用 YMC Basic C8 柱 (4.6×150mm) 进行纯化， 柱温为 30℃， 流速为 1mL/ 分， 而梯度为 40 分钟内 80％ A/20％ B 至 75 ％ A/25 ％ B， 其中 A 为柠檬酸盐缓冲液 (0.02M， pH 4.5)， 而 B 为 80 ％ CH3CN/20 ％ CH3OH。分离的化合物的 RCP 为～ 100％， 而 HPLC 保留时间为 25.4min。
     实施例 LI- 制备用于放射治疗研究的 177Lu-L70 ：
     如以上关于 L64 所述制备此化合物。
     实施例 LII- 制备用于细胞结合和生物分布研究的 111In-L70 ：
     通过在 85℃下将 10μg L70 配体 (10μL 在 0.01N HCl 中的 1mg/mL 溶液 )、 180μL 111 乙酸铵缓冲液 (0.2M， pH 5.3)、 在 0.05N HCl 中的 1.1mCi InCl3(61μL， Mallinckrodt) 和 50μL 盐水保温 30 分钟来合成此化合物。通过加入 20μL 1％ Na2EDTA· 2H2O(Aldrich) 水 111 溶液来清除游离的 In。所得的放射化学纯度 (RCP) 为 86％。通过 HPLC， 使用与 Vydac 强 阴离子交换柱 [7.5×50mm] 相连的 Waters XTerra C18 柱， 从未标记的配体和其它杂质中 分离放射性标记的产物， 柱温为 30℃， 流速为 1mL/ 分， 且梯度如下表列出， 其中 A 为 0.1mM 111 NaOH 水溶液， pH 10.0， B 为 1g/L 乙酸铵水溶液， pH 6.7， 而 C 为乙腈。 利用此系统， In-L70 的保留时间为 15 分钟， 而 L70 配体的保留时间为 27-28 分钟。 分离的化合物的 RCP 为 96％。
     119102076214 A CN 102076221说时间， 分钟 0-10 10-11 11-21 21-22 22-32 ％A 100％ 100-50％ 50％ 50-0％明书％B ％C116/220 页0-50％ 50％ 0-50％ 50％ 50％ 50％通过收集目标 HPLC 峰至 500μL 柠檬酸盐缓冲液 (0.05M， pH5.3， 含有 5％抗坏血 酸、 1mg/mL L- 蛋氨酸和 0.2％ HSA) 来制备用于生物分布和细胞结合研究的样品。通过旋 转真空 30 分钟来除去收集物中的有机部分。关于细胞结合研究， 在体外研究 30 分钟内使 用纯化、 浓缩的样品。 关于生物分布研究， 在体内研究 30 分钟内用柠檬酸盐缓冲液 (0.05M， pH 5.3， 包含 5％抗坏血酸钠和 0.2％ HSA) 将样品稀释至终浓度为 10μCi/mL。
     实施例 LIII- 体内药代动力学研究
     A. 示踪剂剂量生物分布 ：
     用 以 下 鉴 定 的 本 发 明 化 合 物 在 荷 有 异 种 移 植 的 PC3 肿 瘤 的 裸 小 鼠 ([Ncr]-Foxnl) 中进行低剂量药代动力学研究 ( 例如生物分布研究 )。在所有的研究 中， 以 200μCi/kg 给小鼠静脉内施用 100μL 177Lu- 标记的受试化合物， 且每组 (n ＝ 3-4) 的停留 (residence) 时间为 1 和 24 小时。在 LKB 1282CompuGamma 计数器中以适宜的标准 分析组织。
     表 11
     在 1 和 24 小时在负荷 PC3 肿瘤的裸小鼠中进行药代动力学比较
     (200μCi/kg ； 值为％ ID/g， 除非另有说明 )177Lu-177 标记的本发明化合物
     与对照比较
     在 L64 和 L70 注射之后血液、 肝脏和肾中的放射性的分布与对照化合物 DO3A- 一 酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2 的类似， 其中 QWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序列 (SEQ ID NO ： 1)， 而 L64 和 L70 在肿瘤中的摄取在 1 和 24 小时则高得多。L63 也表现高肿瘤摄取， 虽然早期血 液和肝脏值有所增加。小鼠胰腺 - 已知具有 GRP 受体的正常器官对 L64、 L70 和 L63 的摄取 大大高于对照化合物 DO3A- 一酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2， 其中 QWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序 列 (SEQ ID NO ： 1)。
     B.L70 在肿瘤和正常组织中的质量肽给药的效果
     下列生物分布研究在人 PC-3 裸小鼠模型 (Tac:Cr:(NCr)-Fox1nu) 中实施。
     小鼠接受一次 i.v. 尾静脉剂量 (0.1mL) 的适当的 177Lu-L70 的溶液， 其加入充足的 177 L70 配体以得到记录在下列表中的肽质量。给予的 Lu-L70 的放射性剂量是 10-750μCi。
     所有研究的受试者停留间隔结束时被处死， 并收集器官和组织。在 γ 计数器中测 试放射活性。数据表达为总给予放射活性 / 克组织的百分比 (％ ID/g)。
     小鼠％ ID/g， 给予剂量 (μg)
     1h
     器官 0.0025 0.08 0.22 0.43 0.64 0.85
     血 0.24 0.77 0.49 0.85 0.48 0.71
     肝 0.21 0.44 0.27 0.44 0.26 0.35
     肾 7.09 5.17 3.46 4.13 4.75 5.31
     肿瘤 6.35 3.13 4.36 3.13 3.97 5.78
     胰腺 49.59 51.15 25.11 11.60 7.19 5.27
     GI 6.38 4.08 1.41 1.39 0.94 0.83
     数据显示那些在小鼠中已知表达 GRP 受体的正常器官， 例如胰腺和胃肠道， 显示 预期的质量剂量效果 ( 即随着质量剂量增加放射活性的摄取减少 )， 但是， 当质量剂量增加 时， 肿瘤出人意料地未饱和。
     通过在给予放射性物质之前给予一定剂量的 L70 配体， 可以得到类似效果。在该 研究中， 生物分布研究在人 PC-3 裸小鼠模型 (Tac:Cr:(NCr)-Fox1nu) 中实施， 其中在静脉内 177 给药的 Lu L70 之前 5， 15 或 60 分钟， 用 1 次静脉内注射 L70 配体 (0.64μg) 或缓冲对照 预处理所述动物 ； 质量肽剂量 0.1μg/kg 小鼠。在 177Lu L70 给药之后 1 小时处死动物， 计 数组织以测定用 L70 预处理是否对生物分布具有任何效果。
     体内下调，％注射剂量 / 器官＊， 在 PC-3 小鼠中， 177
     在注射 Lu-L70 后 1 小时
     如之前所述， 在 177Lu-L70 给药之前 5 或 15 分钟用 L70 预处理的动物中发现， 胰腺 中放射活性的量显著减少， 尽管在所有 L70 预治疗组 (5， 15， 和 60 分钟 ) 中发现， 胃肠放射
     活性减少。肾效果是不稳定的， 仅仅在 5 分钟预给药组中显著不同于对照组 ； 但是， 尿的排 泄在 L70 给药后 60 分钟持续不同。结果表明， 在所有预给药条件下， 靶肿瘤是未受 L70 预 177 处理影响， 并显示 Lu-L70 的摄取。综上所述， 这些结果显示采用本发明化合物的预给药 或共同给药的有益效果。
     实施例 LIV- 受体亚型特异性
     目前， 已知 GRP 受体家族的四种哺乳动物成员 ： GRP- 偏好受体 (GRP-R)、 神经调节 177 肽 -B 偏好受体 (NMB-R)、 铃蟾肽受体亚型 3(BB3-R) 和铃蟾肽受体亚型 4(BB4-R)。 Lu-L70 177 的受体亚型特异性得到研究。结果表明， Lu-L70 与 GRP-R 和 NMB-R 特异性结合， 并且对 BB3-R 的亲和力小。
     通过体外受体放射自显影术， 使用 Reubi 等人，″ Bombesin Receptor Subtypes in Human Cancers Detection with the Universal Radio Ligand125I-[D-Tyr6， beta-Ala， 13 14 Phe ， Nle ]″， Clin.Cancer Res.8 ： 1139-1146(2002) 所述的方法和先前发现仅表达一种 GRP 受体亚型的组织样品， 以及包括正常胰腺和结肠及慢性胰腺炎的非 - 肿瘤组织确定 L70 177 的镥络合物 [ 这里称为 Lu-L70]( 如上述制备 ) 的亚型特异性 ( 在下面表 12a 中表示 )。 将人回肠类癌组织用作 NMB-R 的来源， 将人前列腺癌用作 GRP-R 的来源， 而将人支气管类癌 用作 BB3-R 亚型受体的来源。 为了进行比较， 还使用其它铃蟾肽放射性配体， 如 125I-Tyr4- 铃 125 蟾 肽， 或 已 知 为 通 用 配 体 的 化 合 物， I-[DTyr6， βAla11， Phe13， Nle14]-BBN(6-14)( 其 与 GRP-R 的所有三个亚型结合 )， 对相邻组织切片进行受体放射自显影。进一步讨论 见 Fleischmann 等 人 “Bombesin Receptor in Distinct Tissue Compartments of Human Pancreatic Disease， ” Lab.Invest.80 ： 1807-1817(2000) ； Markwalder 等 人， “Gastin-Releasing Peptide Receptor in the Human Prostate ： Relation to Neoplastic Transformation， ” Cancer Res.59 ： 1152-1159(1999) ； Gugger 等 人， “GRP Receptor in Non-Neoplastic and Neoplastic Human Bbreast” Am.J.Pathol.155 ： 2067-2076(1999)。
     表 12A
     使用不同放射性配体检测各种人类组织中的铃蟾肽受体亚型
     ＊ 125I-[DTyr6， βAla11， Phe13， Nle14]-BBN(6-14) 和 125I-Tyr4-BBN。
     从表 12a 可以看出， 也可使用 177Lu-L70 体外可视化使用已建立的放射性配体鉴定 的所有表达 GRP-R 的肿瘤， 如前列腺、 乳腺和肾细胞癌。如表 12a 所示， 由于敏感性更好， 可 177 125 4 使用 Lu-L70( 但不能使用 I-Tyr -BBN) 鉴定所选择的具有较低 GRP-R 水平的肿瘤。所 有用已建立的放射性配体鉴定的表达 NMB-R 的肿瘤也可用 177Lu-L70 可视化。相反， 不能 177 用 Lu-L70 检测 BB3 肿瘤。人们不应对在表 12a 所列各种类型肿瘤中受体表达的天然发 生率作出任何结论， 因为所试验例子被选择为在绝大多数情况下受体 - 阳性， 仅有少数选 177 择阴性对照。正常的人类胰腺不被 Lu-L70 标记， 而在相同条件下小鼠胰腺被强标记。虽 然正常胰腺是一种可非常迅速降解的组织， 不能完全排除蛋白包括受体的降解， 表明人类
     胰腺数据确实为阴性的因素包括相似条件下小鼠胰腺的阳性对照和在相应人类胰岛中发 现的强标记的 BB3， 其代表所研究的人类胰腺质量的阳性对照。此外， 在病理学改变 ( 慢性 胰腺炎 ) 的胰腺组织中检测到 GRP-R 表明 GRP-R 当存在时可在所选择的实验条件下在该组 177 织中被鉴定。事实上， Lu-L70 以比 125I-Tyr4-BBN 更高的敏感性鉴定慢性胰腺炎中的这些 GRP-R。 胰腺癌均不含可测出量的 GRP-R， 少数结肠癌显示用 177Lu-L70 测量的低密度的非均 匀分布的 GRP 受体 ( 表 12a)。还应进一步注意到结肠平滑肌表达 GRP-R 且用 177Lu-L70 及 已建立的铃蟾肽配体在体外检测到。
     表 12B 175
     Lu-L70 与在人类癌症中表达的 3 种铃蟾肽受体亚型的结合亲和性。数据以 nM IC50( 平均值 +SEM.n ＝圆括号中的实验数 ) 表示。
     化合物 通用配体175D.NMB-R 0.8+0.1(3) 0.9+0.1(4)E.GRP-R 0.7+0.1(3) 0.8+0.1(5)BB3 1.1+0.1(3) ＞ 1,000(3)Lu-L70如表 12b 所示， 冷标记的 175Lu-L70 对在人类组织中表达的人 GRP 和 NMB 受体具有 非常高的亲和性， 而对 BB3 受体仅有低亲和性。这些实验使用 125I-[DTyr6， βAla11， Phe13， Nle14]-BBN(6-14) 作为放射性示踪剂。 使用 177Lu- 标记的 L70 作为放射性示踪剂， 上述数据 177 由此被证实和扩展。所有表达 GRP-R 的人类癌症都被 Lu-L70 强标记。对所有 NMB-R- 阳 177 性肿瘤情况也相同。 相反， 没有可视化 BB3 肿瘤。 Lu-L70 的敏感性似乎好于 125I-Tyr4-BBN 或 125I- 标记的通用铃蟾肽类似物。因此， 可使用 177Lu-L70 很容易地鉴定少数表达低密 度 GRP-R 的肿瘤， 而使用 125I-Tyr4-BBN 时， 它们不能被鉴定。177Lu-L70 的结合特性还可在 非 - 肿瘤组织中加以证实。 尽管作为对照的小鼠胰腺显示出表达非常高密度的 GRP-R， 正常 人类胰腺腺泡全无 GRP-R。然而， 在慢性胰腺炎的状况下， 可在腺泡 ( 如 Fleischmann 等人 先前报道， “Bombesin Receptor in Distinct Tissue Compartments of Human Pancreatic Diseases， ” Lab.Invest.80 ： 1807-1817(2000)) 和组织中鉴定出 GRP-R， 且使用 177Lu-L70 较使用 125I-Tyr4-BBN 再次具有更好的敏感性。相反， 表达 BB3 的胰岛不被 177Lu-L70 检出，
     而它们被通用配体强标记， 如先前 Fleischmann 等人， “Bombesin Recptors in Distinct tissue Compartments of Human Pancreatic Disease， ” Lab.Invest.80 ： 1807-1817(2000) 所报道的。少数结肠癌具有 GRP-R， 通常密度非常低且不均匀分布， 正常结肠平滑肌表达高 密度 GRP-R。
     表 12a 和 12b 的结果表明预期 Lu 标记的 L70 衍生物可很好地结合主要表达 GRP-R 的人类前列腺癌。它们还表明预期 Lu 标记的 L70 衍生物不会很好地结合正常的人类胰腺 ( 其主要表达 BB3-R 受体 )， 或主要表达 BB3-R 受体亚型的癌。
     实施例 LV- 放射治疗研究
     A. 效力研究
     使用负荷 PC3 肿瘤的裸小鼠模型进行放射治疗研究。在短期效力研究中， 将 177Lu 标记的本发明化合物 L64、 L70、 L63 和治疗对照化合物 DO3A- 一酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2 与未治疗的对照组作比较。( 每个治疗组的 n ＝ 12， 长达 30 天， 而合并的未治疗的对照组的 n ＝ 36， 长达 31 天 )。 对于所有效力研究而言， 在无菌条件下给小鼠静脉内或皮下施用 100μL 177 30mCi/kg Lu- 标记的本发明化合物。在研究持续期间将受试者笼养在栅栏环境中。在整 个研究期间每周对每只受试动物进行 3 次体重和肿瘤大小 ( 用卡尺测量 ) 的测量。提前终 止的指标包括 ： 死亡 ； 总体重 (TBW) 下降等于或大于 20％ ； 肿瘤大小等于或大于 2cm3。短 期效力研究的结果在图 15A 中显示。这些结果表明用 L70、 L64 或 L63 治疗的动物与不给予 治疗的对照动物和给予相同剂量 DO3A- 一酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-NH2 对照的动物相比存活提 高。
     用 L64 和 L70， 使用与前述相同的剂量， 但每种化合物使用更多动物 (n ＝ 46) 并追 踪长达 120 天， 来进行长期效力研究。长期效力研究的结果表示在图 15B 中。相对于与前 面相同的对照 (n ＝ 36)， L64 和 L70 治疗均明显增加存活 (p ＜ 0.0001)， 且 L70 好于 L64， 虽然彼此没有统计学差异 (p ＜ 0.067)。
     实施例 LVI
     使用分段偶联对 L64 和 L70 的可替代选择的制备

    [1000] 可以使用由 A-D( 图 19) 概括表示的中间产物的集合体来制备化合物 L64 和 L70， 所述中间产物本身可以由固相和液相肽合成领域中已知的标准方法制备 (Synthetic Peptides-A User ′ s Guide 1992， Grant， G.， Ed.WH.Freeman Co.， NY， Chap 3 和 Chap 4pp 77-258 ； Chan， W.C. 和 White， P.D.Basic Procedures in Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis-A Practical Approach 2002， Chan， W.C. 和 White， P.D.Eds Oxford University Press， New York， Chap.3 pp 41-76 ； Barlos， K 和 Gatos， G.Convergent Peptide Synthesis in Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis-A Practical Approach 2002， Chan， W.C. 和 White， P.D.Eds Oxford University Press， New York， Chap.9pp 216-228.)， 所述文献在此被引用以供参考。

    [1001] 这些方法包括基于 Aloc、 Boc、 Fmoc 或苄氧基羰基的肽合成策略， 或者审慎选择的 那些固相或溶液方法的组合。 用于特定步骤的中间体根据分子中每个位置的适宜保护基的 选择来选择， 所述保护基可以选自图 1 所示的基团清单。本领域技术人员还理解， 还可以使 用可与肽合成方法相容、 包含可替代选择的保护基的中间体， 而以上所示的保护基的罗列 选项用作例示而不是包括性的， 且这些可替代的选择在本领域中是已知的。

    [1002] 这在概述这种方法的图 20 中作了详细例示。当应用相同的合成策略时， 用中间产 物 C2 替换在合成 L64 中所示的 Cl 而得到 L70。

    [1003] 实施例 LVII- 图 49A 和 49B

    [1004] 合成 L69

    [1005] 概述 ： (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 A 与 Fmoc-Cl 反 应得到中间产物 B。使用八肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2(BBN[7-14)(SEQ ID NO ： 1)(A) 官能化的 Rink 酰胺树脂 (A) 依次与 B、 Fmoc-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸和 DOTA 三叔丁酯反应。在用试剂 B 裂解和脱保护之后， 用制备 HPLC 纯化粗品， 得到 L230。总产率 ： 4.2％。

    [1006] A.(3β， 5β， 7α， 12α)-3-(9H- 芴 -9- 基 甲 氧 基 ) 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸， B( 图 49)将在 1， 4- 二烷 (18mL) 中的 9- 芴基甲氧基羰基氯 (1.4g ； 5.4mmol) 的溶液滴 烷 (18mL) 中的 (3β， 5β，加到在 0℃下搅拌的在 10％ Na2CO3 水溶液 (30mL) 和 1， 4- 二7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 A(2.0g ； 4.9mmol)(3) 的悬浮液。室温下搅 用 Et2O(2×90mL) 洗涤水相， 然后加入 2M HCl(15mL)( 最终 pH ： 拌 6 小时后加入 H2O(100mL)， 1.5)。将沉淀的固体过滤， 用 H2O(3×100mL) 洗涤， 真空干燥， 然后用快速色谱法纯化得到 B， 为一种白色固体 (2.2g ； 3.5mmol)。产率 71％。

    [1008] B.N-[3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[[2-[2-[[[4， 7， 10- 三 ( 羧 甲 基 )-1， 4， 7， 10- 四 氮杂环十二烷 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙氧基 ] 乙氧基 ] 乙酰基 ] 氨基 ]-7， 12- 二羟 基 -24- 氧代胆烷 -24- 基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘 氨酰基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L69( 图 49B)

    [1009] 将树脂 A(0.5g ； 0.3mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起 振荡 10 分钟。过滤溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。将悬浮液再搅拌 20 分 钟， 然后过滤溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 (3β， 5β， 7a， 12α)-3-(9H- 芴 -9- 基 甲氧基 ) 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 B(0.75g ； 1.2mmol)、 N- 羟基苯并三唑 (HOBt) (0.18g ； 1.2mmol)、 N， N′ - 二异丙基碳二亚胺 (DIC)(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至 树脂， 将混合物于室温下振荡 24 小时， 倒空， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。然后将树脂与 在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 倒空溶液加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％ 吗啉， 并将混合物再振荡 20 分钟。倒空溶液并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 Fmoc-8- 氨 基 -3， 6- 二氧杂辛酸 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ； 1.2mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。 将混合物于室温下振荡 3 小时， 倒空并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 然后 将树脂与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一起振荡 10 分钟， 过滤溶液， 加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50 ％吗啉， 并将混合物再振荡 20 分钟。过滤溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。将 1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1， 4， 7， 10- 四乙酸三 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯与 NaCl 的加合 物 (0.79g ； 1.2mmol)、 HOBt(0.18g ； 1.2mmol)、 DIC(0.19mL ∶ 1.2mmol)、 N- 乙基二异丙基 胺 (0.40mL ； 2.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在室温下振荡 24 小时， 过滤并用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL)(2) 一起振荡 4.5 小时。将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状粗品， 用 Et2O(20mL) 对其进行处理后得到一种沉淀。离心收集沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤得到一种固体 (248mg)， 对其用 HPLC 分析。用制备 HPLC 纯化一定量的粗品 (50mg)。将包含产物的级分冻 干得到 L69(6.5mg ； 3.5×10-3mmol)( 图 49B)， 为一种白色固体。产率 5.8％。 实施例 LVIII- 图 50

    [1011] 合成 L144

    [1012] 概述： 使 用 八 肽 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2(BBN[7-14])(SEQ ID NO ： 1)(A) 官能化的 Rink 酰胺树脂 (A) 与 4-[2- 羟基 -3-[4， 7， 10- 三 [2-(1， 1- 二甲基乙 氧基 )-2- 氧代乙基 ]-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 丙氧基 ] 苯甲酸反应。在用试 剂 B(2) 裂解并脱保护之后， 用制备 HPLC 纯化粗品得到 L144。总产率 ： 12％。

    [1013] A.N-[4-[2- 羟基 -3-[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 丙氧基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰基 -L- 丙氨酰基 -L- 缬氨酰基 - 甘氨酰 基 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰基 -L- 蛋氨酰胺， L144( 图 50)

    [1010] 将树脂 A(0.4g ； 0.24mmol) 在固相肽合成容器中与在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉一 起振荡 10 分钟， 过滤溶液， 并加入新鲜的在 DMA(7mL) 中的 50％吗啉。 将悬浮液再搅拌 20 分 钟， 然后过滤溶液， 并用 DMA(5×7mL) 洗涤树脂。 将 4-[2- 羟基 -3-[4， 7， 10- 三 [2-(1， 1- 二 甲基乙氧基 )-2- 氧代乙基 ]-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二烷 -1- 基 ] 丙氧基 ] 苯甲酸 B(0.5g ； 0.7mmol)、 HOBt(0.11g ； 0.7mmol)、 DIC(0.11mL ； 0.7mmol))、 N- 乙基二异丙基胺 (0.24mL ； 1.4mmol) 和 DMA(7mL) 加至树脂。将混合物在室温下振荡 24 小时， 倒空， 用 DMA(5×7mL)、 CH2Cl2(5×7mL) 洗涤树脂， 并真空干燥。 将树脂在烧瓶中与试剂 B(25mL)(2) 一起振荡 4.5 小 时。 将树脂过滤， 并在减压下蒸发溶液得到一种油状粗品， 用 Et2O(20mL) 对其处理后得到一 种沉淀。离心收集沉淀， 并用 Et2O(3×20mL) 洗涤得到一种固体 (240mg)， 用 HPLC 对其进行 分析。用制备 HPLC 纯化一定量的粗品 (60mg)。将包含产物的级分冻干得到 L144(10.5mg ； 7.2×10-3mmol)， 为一种白色固体。产率 12％。

    [1015] 实施例 LIX

    [1016] 制备 L300 和 177Lu-L300

    [1017] 从 0.2g Rink 酰胺 Novagel 树脂 (0.63mmol/g， 0.126mmol)， 在制备型柱色谱之后， 得到 L300(0.033g， 17％ )。保留时间为 6.66 分钟。分子式为 C72H99N19O18。计算的分子量为 1518.71 ； 观察到 1519.6。 序列为 DO3A-Gly-Abz4-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Phe-Leu-NH2， 其中 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Phe-Leu-NH2。L300 的结构在图 51 中显示。

    [1018] 将 L300(13.9μg 溶于 13.9μL 0.2M pH 4.8 的醋酸钠缓冲液中 ) 与 150μL 0.2M pH 4.8 醋 酸 钠 缓 冲 液 和 4μL 177LuCl3(1.136mCi， Missouri Research Reactor) 混 合。 100℃下 10 分钟后， 放射化学纯度 (RCP) 为 95％。将产物在 Vydac C18 肽柱 (4.6×250mm， 5μm 孔径 ) 上纯化， 使用 0.1％ TFA 水溶液 (A) 和 0.085％ TFA 乙腈溶液 (B) 的含水 / 有机 梯度， 以 1mL/ 分钟的流速洗脱。使用下列梯度 ： 等度洗脱 22％ B 30 分钟， 5 分钟内至 60％ B， 保持在 60％ B 5 分钟。将以 18.8 分钟保留时间洗脱的该化合物收集到 1mL 0.8％人血 清白蛋白溶液中， 其是通过将 HSA 加入到生理盐水与注射用抗坏血酸的 9 ∶ 1 混合物中而 制备的。使用 Speed Vacuum(Savant) 除去乙腈。纯化后， 该化合物具有 100％的 RCP。

    [1019] 实施例 LX- 与 GRP 受体亚型相关的连接基特异性的表征

    [1020] 在本测定中， 使用两种细胞系 ： C6， 一种表达 NMB-R 的啮齿动物成胶质细胞瘤细胞 系， 和 PC3， 一种表达 GRP-R 的人前列腺癌细胞系。通过测量其竞争 125I-NMB 或 125I-BBN 与 在 C6 和 PC3 细胞中其相应受体结合的能力， 间接测定了多种未标记的化合物对各受体亚型 (NMB-R 和 GRP-R) 的亲和性。

    [1021] A. 材料和方法 ：

    [1022] 1. 细胞培养 ：

    [1023] C6 细胞从 ATCC(CCL-107) 获得并在补充了 2mM L- 谷氨酰胺、 1.5g/L 碳酸氢钠、 15％马血清和 2.5％ FBS 的 F12K 培养基 (ATCC) 中培养。 将用于测定的细胞以 9.6×104/ 孔 的浓度平板接种在 48 孔聚 - 赖氨酸涂覆的平板 (Beckton Dickinson Biocoat) 中。PC3 从 ATCC(CRL-1435) 获得并在补充了 2mM L- 谷氨酰胺、 1.5g/L 碳酸氢钠、 10mM HEPES 和 10％ FBS 的 RPMI 1640(ATCC) 中培养。两种培养物均维持在 37℃下， 含 5％ CO2/95％空气的湿 4 润大气中。将用于测定的 PC3 细胞以 2.0×10 个细胞 / 孔的浓度平板接种在 96- 孔白色 / 透明底平板 (Falcon Optilux-I) 中。在接种后第 2 天， 平板用于进行测定。2. 结合缓冲液， 和放射性 - 配体 ：

    [1025] RPMI 1640(ATCC) 含 25mM HEPES、 0.2％ BSA 级分 V、 1.0mMAEBSF(CAS#3087-99-7) 和 0.1％杆菌肽 (CAS#1405-87-4)， pH 7.4。 125 0

    [1026] 使用定制的 I-[Tyr ]NMB， ＞ 2.0Ci/μmole(Amersham Life Science)[125I-NMB] 和商业可得到的 125I-[Tyr4]BBN， ＞ 2.0Ci/μmole(Perkin Elmer Life Science)[125I-BBN] 作为放射性配体。

    [1027] B. 体外测定法 ：

    [1028] 使用 48- 孔平板测定系统 ( 用于 C6 研究 )， 用 125I-NMB 进行竞争实验。所有 PC3 研究均是按照实施例 XLIII 所述， 使用 125I-BBN 进行的。基于连接基亚型选择进行测定的 化合物。结果在表 13 中表示。

    [1029] 表 13

    [1030] 用于测定所选的化合物数和它们的连接基

    [1031] 使用 GraphPad Prism 单 - 位点竞争非 - 线形回归分析分析由该研究获得的结合 参数。将各种化合物对 C6 细胞中 NMB-R 的相对亲和性与使用商业得到的 [Tyr4]-BBN 和 [Tyr0]-NMB 获得的进行比较。为了区分 GRP-R 偏好化合物与 NMB-R 加 GRP-R 偏好化合物， 将从各化合物获得的 IC50 值与在 C6 细胞上从 [Tyr0]-BBN 和 125I-NMB 获得的进行比较。将 两类化合物之间的截断点取为 10X[Tyr4]-BBN 的 IC50。在所试验化合物中， 8 种化合物偏好 结合 GRP-R( 如表 14 所示 ) 而 32 种化合物以相似的亲和性结合 GRP-R 和 NMB-R， 有两种显 示偏好 NMB-R。

    [1033] 表 14

    [1034] 使用 125I-NMB 和 125I-BBN 进行竞争实验获得的 IC50 值

    [1032] ＊ QWAVGHLM-NH2 是序列 BBN(7-14)， 其是 (SEQ ID NO ： 1)。

    [1041] 在上表中， “na” 表示 “不适用的” ( 例如， 该化合物不含本发明的连接基且因此没 有指定 L#)。

    [1042] 基于上面所述， 观察到若干结果。单独的受体结合区 (BBN7-14 或 BBN8-14) 没有显示 出对 GRP-R 或 NMB-R 的任何偏好。向受体结合区加入单独的螯合剂不有助于肽对 GRP-R 或 NMB-R 的亲和 (DO3A- 一酰胺 -QWAVGHLM-NH2， 其中 QWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序列 (SEQ ID NO ： 1))。螯合剂通过连接基与肽偶合确实导致肽对受体的亲和。然而， 根据连接基类型的 不同， 该亲和性从双重 ( 偏好 NMB-R 和 GRP-R) 到 GRP-R( 偏好 GRP-R) 变化。 在上述段落中， QWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序列 (SEQ ID NO ： 1)。 175

    [1043] 所试验的 ω- 氨基链烷酸 ( Lu-DO3A- 一酰胺 -Aoc-QWAVGHLM-HN2 和 DO3A- 一酰 胺 -Aoc-QWAVGHL-Nle-NH2 中的 8- 氨基辛酸， DO3A- 一酰胺 -Apa3-QWAVGHLM-NH2 中的 3- 氨基 丙酸和 DO3A- 一酰胺 -Abu4-QWAVGHLM-NH2 中的 4- 氨基丁酸 ) 作为连接基， 赋予肽对 GRP-R 175 和 NMB-R 的双重亲和性。用′ Nle′替换 Lu-DOTA-Aoc-QWAVGHLM-NH2 中的′ Met′不改 变肽的这种双重亲和性。在上述段落中， QWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序列 (SEQID NO ： 1)。

    [1044] 含 胆 酸 的 连 接 基 (L64 中 的 3- 氨 基 胆 酸、 L63 中 的 3- 氨 基 -12- 羟 基 胆 烷 酸 和 L67 中 的 3- 氨 基 -12- 酮 胆 烷 酸 ) 赋 予 肽 对 GRP-R 和 NMB-R 的 双 重 亲 和 性。 含 环 烷 基 和 芳 族 取 代 的 丙 氨 酸 的 连 接 基 (DO3A- 一 酰 胺 -Cha-Cha-QWAVGHLM-NH2 中 的 3- 环 己 基 丙 氨 酸、 DO3A- 一 酰 胺 -Cha-Nal1-QWAVGHLM-NH2 中 的 1- 萘 基 丙 氨 酸、 DO3A- 一 酰 胺 -Nal1-Bpa4-QWAVGHLM-NH2 中 的 4- 苯 甲 酰 基 苯 丙 氨 酸 和 DO3A- 一 酰 胺 -Nal1-Bip-QWAVGHLM-NH2 中 的 联 苯 基 丙 氨 酸 ) 使 肽 对 GRP-R 具 有 选 择 亲 和 性。 仅 含 4-(2- 氨 乙 基 哌 嗪 )-1 的 连 接 基 也 使 肽 具 有 GRP-R 选 择 性 (L89)。 在 上 述 段 落 中， QWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序列 (SEQ ID NO ： 1)。

    [1045] 向 NMB 序列中引入 G-4- 氨基苯甲酸连接基可使化合物除了其固有的 NMB-R 亲和 性外， 还对 GRP-R 具有亲和性 (L227 vsGNLWATGHFM-NH2(SEQ ID NO ： 24)。围绕连接基移动

    [1040] Gly 的位置将 L70 的亲和性从其双重亲和性改变为对 NMB-R 的选择亲和性 (L204)。L70 中 4- 氨基苯甲酸中的 3- 甲氧基取代 ( 如 L240) 将双重亲和性改变为对 GRP-R 的选择亲和性。

    [1046] 根据前面的数据可明显看出连接基对受体亚型的特异性具有显著影响。 可鉴定三 组化合物 ：

    [1047] 对 GRP-R 有活性的那些

    [1048] 这些化合物提供体外和体内对该受体特异性的信息， 其可用于诊断目的。当用治 疗性放射性核素放射性标记这些化合物时， 可对仅含该受体的组织进行治疗， 而不影响含 NMB-R 的那些组织。

    [1049] 对 NMB-R 有活性的那些

    [1050] 这些化合物提供体外和体内对该受体特异性的信息， 其可用于诊断目的。当用治 疗性放射性核素放射性标记时， 可对仅含该受体的组织进行治疗， 而不影响含 GRP-R 的那 些组织。

    [1051] 对 GRP-R 和 NMB-R 均有活性的那些

    [1052] 这些化合物提供有关体外和体内这两种受体亚型联合存在的信息， 其可用于诊断 目的。以特异性为代价， 靶向两种受体可增加检测的敏感性。当用治疗性放射性核素放射 性标记这些化合物时， 可对含两种受体的组织进行治疗， 其可增加递送到所需组织的剂量。 125

    [1053] 实施例 LXI- 经修饰的铃蟾肽 (BBN) 类似物与 I-BBN 对人前列腺癌 (PC3) 细胞 中 GRP-R 的竞争研究

    [1054] 为了测定替换 BBN7-14 类似物中特定氨基酸的效应， 制备靶向部分中被修饰的肽， 并测定与人前列腺癌 (PC3) 细胞中 GRP-R 的竞争性结合。所有这些肽具有与金属螯合部分 缀合的通用连接基 (DOTA-Gly-Abz4-)。结合数据 (IC50nM) 在下面表 15 中表示。

    [1055] A. 材料和方法 ：

    [1056] 1. 细胞培养 ：

    [1057] PC3 细胞系从 ATCC(CRL-1435) 获得并在补充了 2mM L- 谷氨酰胺、 1.5g/L 碳酸 氢钠、 10mM HEPES 和 10 ％ FBS 的 RPMI 1640(ATCC) 中培养。培养物维持在 37 ℃， 含 5％ 4 CO2/95％空气的湿润大气中。将用于测定的 PC3 细胞以 2.0×10 个细胞 / 孔的浓度平板接 种在 96- 孔白色 / 透明底平板 (Falcon Optilux-I) 中。在接种后第 2 天， 平板用于进行测 定。

    [1058] 2. 结合缓冲液 ：

    [1059] RPMI 1640(ATCC) 含 25mM HEPES、 0.2％ BSA 级分 V、 1.0mMAEBSF(CAS#3087-99-7) 和 0.1％杆菌肽 (CAS#1405-87-4)， pH 7.4。 125 4 125

    [1060] 3. I-Tyr - 铃蟾肽 [ I-BBN] 125

    [1061] I-BBN(Cat#NEX258) 从 PerkinElmer Life Sciences 获得。

    [1062] C. 体外测定法 ：

    [1063] 与 125I-BBN 对 PC3 细胞中 GRP-R 的竞争测定 ：

    [1064] 将所有试验的化合物均溶于结合缓冲液中， 并在结合缓冲液中进行适当稀释。以 4 2.0×10 / 孔的浓度将用于测定的 PC3 细胞接种在 96- 孔黑色 / 透明 I 型胶原 cellware 平 板 (Beckton Dickinson Biocoat) 中。在平板接种后第 2 天， 平板用于结合研究。在测定 前检查该平板的汇合 ( ＞ 90％汇合 )。进行竞争测定时， 将 1.25×10-9M-500×10-9M 浓度的N， N- 二甲基甘氨酰基 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Ava5-QWAVGHLM-NH2( 对照 )， 其中 QWAVGHLM-NH2 125 是 BBN(7-14) 序列 (SEQ ID NO ： 1) 或其它竞争剂与 I-BBN(25,000cpm/ 孔 ) 共同温育。 以 75μl/ 孔测定体积进行研究。各数据点使用一式三个孔。加入适宜溶液后， 在 4℃温育 平板 1 小时。通过加入 200μl 冰冷的温育缓冲液而终止温育。将平板洗 5 次并吸干。使 用 LKB CompuGamma 计数器或微量平板闪烁计数器检测放射性。将 125I-BBN 的结合放射性 相对于竞争剂的抑制浓度绘制曲线， 并根据结合曲线获得 125I-BBN 结合被抑制 50％的浓度 (IC50)。

    [1065] 表 15 ： 与 125I-BBN 对 PC3 细胞中 GRP-R 的竞争研究

    [1066] ＊ QWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序列 (SEQ ID NO ： 1)。

    [1070] 结果 / 结论 ： 靶向部分被修饰的各种肽的结合结果分析表明 ：

    [1071] 神经调节肽类似物 (GNLWATGHFM-NH2， yGNLWATGHFM-NH2， 其中 GNLWATGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 24) 不能竞争 GRP-R， 除非与 DO3A- 一酰胺 -G-Abz4 缀合 (L227)。然而， 它们是 有效的 NMB 竞争剂。这与 QWAVGHLM-NH2、 DO3A- 一酰胺 -QWAVGHLM-NH2( 其中 QWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序列 SEQID NO ： 1) 和 L70 中反映的对铃蟾肽序列氨基末端的衍生要求相类 似。组氨酸的替换 (L225) 降低了在 GRP-R 的竞争。

    [1072] L70 中两个连接基组分的反转产生 L204， 这将亚型特异性改变成偏好 NMB 亚型。 铃 13 蟾肽序列中 L F 置换维持了 GRP-R 活性 (L228)。

    [1073] 表 16

    [1069] ＊ QWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序列 (SEQ ID NO ： 1)。 13 14 13 14

    [1077] 在此可见， L228 中 F M 置换成 F L 产生对 GRP-R 具有高活性的化合物 (L300)。 除去蛋氨酸有益， 因为它有氧化的倾向。如果不同时进行 L13F 置换， 不会产生该益处 10 (L221)。如在 L224 中所见， 除去 V 导致结合完全丧失。

    [1078] 表 17

    [1076] 表 18 如表 18 所见， 在 BBN2-6 区允许多种置换 (L214-L217， L226)。＊ QWAVGHLM-NH2 是 BBN(7-14) 序列 (SEQ ID NO ： 1)。

    [1084] 表 19

    [1085] 正如所预期的， 表 19 的结果表明通用激动剂 (L222 和 L223) 以～ 50nM 水平相当 好地竞争。

    [1083] 实施例 LXII-L500 的合成

    [1088] 图 53

    [1089] 如在图 53 中所示制备化合物 L500。具体地说， 将二异丙基乙基胺 (150μL) 加入 至冷却的酸 A(0.19g， 0.3mmol) 和 HATU(0.12g， 0.32mmol) 在 DMF(1mL) 中的溶液， 并搅拌 5min。然后将纯化的肽 B(0.11g， 0.1mmol) 加入反应混合物， 并搅拌 18 小时。移除了 DMF， 将得到的油状物溶解于 DMF/CH3CN 的混合物中， 通过制备 HPLC 纯化。采集含有四 - 叔丁基 酯的纯的级分和冷冻干燥， 得到四 - 叔丁基酯， 为白色固体。收率 80mg(32％ )。将得到的 四 - 叔丁基酯溶解于试剂 B 之中， 并搅拌 8 小时。移除了 TFA， 使用 CH3CN/ 水 /0.1％ TFA， 通过 HPLC 纯化产生的糊状固体是。采集纯的级分， 冷冻干燥， 得到 L500， 为白色固体。收率 23mg(38％ )MS ： 1515.7(M-H)， 757.4(M-2H)/2。

    [1090] 实施例 LXIII-L501 的合成

    [1091] 图 54

    [1092] 如在图 54 中所示制备化合物 L501。将二异丙基乙基胺 (150μL) 加入至冷却的 A(0.278g， 0.4mmol) 和 HATU(0.152g， 0.4mmol) 在 DMF(1mL) 中的混合物， 并搅拌 5min。将 纯化的肽 B(0.12g.0.11mmol) 加入至反应混合物， 并搅拌 18 小时。 移除了 DMF， 将得到的油 状物溶解于 DMF/CH3CN 的混合物之中， 通过制备型 HPLC 纯化。采集含有四 - 叔丁基酯的纯 的级分， 冷冻干燥， 得到四叔丁基酯。收率 62mg(32％ )。将四叔丁基酯 (36.0mg， 0.02mmol) 溶解于试剂 B 之中， 并搅拌 8 小时。移除了 TFA， 使用 CH3CN/ 水 /0.1％ TFA， 通过 HPLC 纯化 产生的粘稠油状物。采集纯的级分， 冷冻干燥， 得到 L501， 为白色固体。收率 12mg(38％ )。 MS ： 1569.7(M-H)， 784.4(M-2H/2)， 803.3(M+K-2H)/2。

    [1093] 实 施 例 LXIV-L500 和 L501 的 放 射 标 记 (177Lu) 和 生 物 分 布 L500 和 L501 的 177 Lu- 络合物的放射标记和 HPLC 分析

    [1087] 放射标记方法 ：

    [1095] 典型地， 在 0.2M 醋酸钠缓冲液 (pH 4.8) 中制备 1mg/mL 的配体溶液。将等份的 该溶液 (2 至 5μL) 和 6 至 10mCi 的 177LuCl3( 在 0.05N HCl 中， 将特异性活性 2.8-4.09Ci/ μmol) 加入至 100 至 200μL 的 0.2M， pH 4.8NaOAc 缓冲液， 以实现 2 ∶ 1 的配体 ： Lu 摩尔 比率。在室温温育 5min 之后， 加入 10μL 的 10mM Na2EDTA·2H2O 以终止反应， 清除溶液中 177 任何残留游离 Lu。然后加入抑菌剂 0.9％氯化钠注射 USP/ASCOR 抗坏血酸注射 USP(0.2mL) 的 9 ∶ 1(v/v) 混合物， 以抑制产生的放射络合物的辐射分解。通过 HPLC 测定 放射化学纯度 (RCP)。 在室温温育 5min 之内观察到所有受试的配体与 Lu-177 的完全配位。

    [1096] 为了体内生物分布研究制备的放射标记的络合物 ：

    [1097] 为了生物分布研究， 如上文所述制备放射标记的化合物， 除了使用配体∶镥的 177 1 ∶ 1 摩尔比率， 以保证所有起始配体的完全螯合。将含有产生的 Lu 络合物的 HPLC 峰 采集在含有 0.1 ％ HAS 的 1mL 的 9 ∶ 1 抑菌盐水 /ASCOR 溶液中， 和使用快速真 空 (speed-vacuum) 装置移除有机溶剂。使用以 9 ∶ 1[v/v]) 比率混合的抑菌剂盐水 / ASCOR 抗坏血酸注射 USP， 将残留溶液进一步稀释至需要的放射浓度， 所有样品的 放射化学纯度是≥ 95％。

    [1098] HPLC 分析 ： 在 1.5mL/min 的流速下， 使用 37℃的柱温度， 实施所有 HPLC 研究。 177

    [1099] 1. Lu-L500

    [1100] HPLC 柱 ： Zorbax Bonus-RP， 5μm， 80孔径， 250mm×4.6mm(Agilent)。流动相 ： 使用下列梯度， 其中 A ＝水 ； B ＝含有 30mM(NH4)2SO4 的水 ； C ＝甲醇 ； D＝ 表 20 时间 0-2min 15min 30min 35-40min 45min 55min A(％ ) 70 36 30 0 70 70 B(％ ) 30 30 30 30 30 30 C(％ ) 0 16 20 35 0 0 D(％ ) 0 16 20 35 0 0乙腈

    [1102] 177 保留时间 ： Lu-L500 ＝ 25.5min。 177 2. Lu-L501HPLC 柱 ： Zorbax Bonus-RP， 5μm， 80孔， 250mm×4.6mm(Agilent)。流动相 ： 使用下列梯度， 其中 A ＝水 ； B ＝含有 30mM(NH4)2SO4 的水 ； C ＝甲醇 ； D＝乙腈。

    [1108] 时间 0-2min 15min 30min 35-40min 45min 55min

    [1109] A(％ ) 70 32 28 0 70 70B(％ ) 30 30 30 30 30 30C(％ ) 0 19 21 35 0 0D(％ ) 0 19 21 35 0 0177 保留时间 ： Lu-L501 ＝ 23.1min。

    [1110] 生物分布研究 ： 177 177

    [1111] 在人 PC-3 裸小鼠模型中评价 177Lu-L500， Lu-XX100， Lu-L501 和 177Lu-L70 的肿 瘤靶向容量， 生物分布和动力学。将 10-50μCi 的 HPLC 纯化化合物通过 i.v. 尾静脉注射 给予各小鼠， 每组 n ＝ 4。在注射后 1 小时， 1 和 7 天， 处死小鼠， 收集器官和组织， 在γ计 数器中测定放射活性。数据表达为与膀胱混合的尿， 以及血池 (blood pool) 占总给予放射 活性的百分比 (％ ID) ； 和所有其它受试的器官占总给予放射活性 / 克的百分比 (％ ID/g)。

    [1112] 表 22

    [1113] ＊ 72h 时间点， ND- 未测定

    [1115] 数据显示作为未衍生化的环己基氮杂 (aazta) 螯合剂的络合物 (XX100) 给予的 Lu-177( 其不包括靶向 GRP 受体的结构部分 ) 从机体快速地被清除， 在任何器官或组织中几 乎没有残留定位。当采用靶向 GRP 的肽衍生化 ( 如在 L500 和 L501 中 ) 络合物 ( 或其密切 相关的衍生物 ) 时， 显示放射活性定位在肿瘤中。数据类似于那些 177Lu-L70 的数据， 如本 文所示， 显示已将用于放射治疗目的的放射活性递送至 PC-3 肿瘤的功效。肿瘤定位和在机 体其它组织中缺少放射活性残留显示， 包括这些两种螯合剂的的本发明的化合物用于放射 成像和放射治疗的用途。

    [1114] 143102076214 A CN 102076221

    [1116] 177说明书140/220 页Lu-XX100 的结构是 ：实施例 LXV- 异常血管的通透性在 LNCaP 肿瘤中的减少

    [1119] 图 55-57

    [1120] 现在参考图 55， 在一个优选的实施方案中， LNCaP 细胞在 CrTAC:NCr:Foxn1nu/nu 小 鼠中成长为异种移植物， 显示不明显的侵入性体型， 同时来自肿瘤维管结构的血大量外渗 入皮肤， 导致非隆起的、 圆形的或不规则， 暗或更暗斑块 ( 瘀斑 )( 图 56)。瘀斑是清楚地可 这 见的， 提供肿瘤维管结构渗漏的度量。现已显示用 177Lu-L70 处理 LNCaP 肿瘤减少瘀斑， 表明它减少异常血管通透性， 如在图 55 和 57 中所示。由于其影响血管通透性， 预期用放射 性 L70 在与其它治疗剂组合治疗将改善其它治疗剂的递送。

    [1121] 如在图 55-57 中所示， 在一个优选的实施方案中， 使用具有 LNCaP( 雄性激素敏感 前列腺腺癌 ) 肿瘤的裸小鼠模型实施放射治疗研究。 将 177Lu 标记的本发明的化合物与未的 治疗对照组比较。 ( 各组 n ＝ 12， 持续 60 天 )， 在无菌条件下， 以 30mCi/kg 总剂量， 将 100μL 的 177Lu- 标记的本发明的化合物静脉内 (i.v.) 或皮下 (s.c.) 给予接受治疗的小鼠。在研 究期间将受试者饲养在屏障环境中。在研究期间每周 3 次对各受试者采集体重， 肿瘤尺寸 ( 通过测径器测量 )， 和临床观察。 早期终点标准包括 ： 死亡 ； 总体重 (TBW) 丧失等于或大于 3 177 20％； 肿瘤尺寸等于或大于 2cm 。采用 Lu-L70 的治疗相对于不接受治疗的参照动物不增 加存活， 但是用 177Lu-L70 治疗的小鼠的可观察到的瘀斑显著减少， P ＝ 0.0056。在研究期 间出现的瘀斑显示在图 55 中， 并描述于图 56 和 57 中。

    [1122] 进展时间是评价新药剂抗癌症活性的可代替手段。 其被定义为肿瘤直径显示 20％ 增加的时间点。进展平均值时间是当在一组中半数动物达到该点时的研究天数。在一个优 选的实施方案中， 现在已发现， 在采用 177Lu-L70 治疗的情况下， 在 LNCap 肿瘤中肿瘤发展平 均时间增加约 100％。进展平均值时间的数据显示在表 23 中。

    [1123] 表 23

    [1118] 组 对照177发展平均值时间 ( 研究天数 ) 14 28Lu-L70

    [1125] 发展时间＝至少 20％的增加＞ 2r， 其中 r ＝平均 (L ×W)/2。如在图 56 中所示， 不接受 177Lu-L701 的对照小鼠具有 LNCaP 异种移植物， 其显示具 177 有延伸入身体同侧后肢的瘀斑。 通过比较， 在图 57 中， 接受 Lu-L70 的试验小鼠具有 LNCaP 异种移植物， 其与对照小鼠相比显示瘀斑减少。

    [1127] 如本实施例所描述， 用 177Lu-L70 治疗在 LNCap 肿瘤中提供有益反应， 也就是说， 在 肿瘤中正常化血管， 且基本上增加发展时间。

    [1128] 实施例 LXVI- 体外证明拉帕替尼在 BT-474 人乳腺癌细胞中对 GRP 受体结合的效 果

    [1129] 从美国模式培养物保藏所 (American Type Culture Collection) 得到 BT-474 乳腺癌细胞 ( 人原发性侵入性导管癌 ； ER+， PR+， 扩增 HER2/neu+)。用于 BT-474 细胞的生 长介质是 Hybri-care Medium(CatNo ： 46X， ATCC)， 其补充有 10 ％热灭活的 FBS(Hyclone， SH30070.03)， 0.2％ NaHCO3， 和最终浓度为青霉素 - 链霉素 (1x， 100 单元 /mL) 和两性霉素 (0.25μg/mL) 的抗生素 / 抗真菌剂 “PSF-1x” (GibcoBRL， 15240-062)。在含有 5％ CO2/95％ 空气的湿润气氛中， 在 37℃， 将 BT-474 保持在 CellBindTM 组织培养烧瓶 (Corning) 上， 常 规使用 0.05 ％胰蛋白酶 /EDTA(GibcoBRL 25300-054) 传代。在 0 天， 以 5.6×104 细胞 / 2 cm 在 96 孔白色 / 清晰底微量滴定板 (Falcon Optilux-I)， 或 96 孔黑色 / 清晰 collaga Icellware 板 (Beckton Dickinson Biocoat) 中， 将用于结合试验的细胞铺板。

    [1130] 结合缓冲液 ：

    [1131] 补充有 20mM HEPES， 0.1％ BSA(w/v)， 0.5mM PMSF(AEBSF)， 杆菌肽 (50mg/500ml) 的 RPMI 1640， pH 7.4.

    [1132] 拉帕替尼溶液 ：

    [1133] 储备液 ： 在 100％ DMSO 中的 1mM 储备液

    [1134] 操作 ： 0.1-1.0μM， 在完全生长介质中

    [1135] 细胞处理， 并进行结合测试 ：

    [1136] 处理 ： 在 0 天将 BT-474 细胞铺板 ( 参见上述 ) ； 在铺板之后约 24-48 小时， 处理 1 和 2 天 (DT1， DT2)， 移除介质， 替换为新鲜生长介质 ( 对照 )， 或添加拉帕替尼 (0.1-1.0μM) 的生长介质。

    [1137] 细胞结合测试 ： 采用结合缓冲液洗涤两次以移除血清蛋白， 之后 3 天， 在 22℃， 用 177 Lu-AMBA( 系列稀释 5μCi/mL-0.625μCi/mL) 温育细胞 60min。通过添加 200μL 的冰冷 结合缓冲液停止温育。采用结合缓冲液再洗涤板 3 次， 将 140μL 的闪烁液体加入各孔， 密 封板， 在微 β 板读取器 (MicroβTrilux， Perkin-Elmer) 上分析。

    [1138] 采用拉帕替尼的处理导致在 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信号 177 增加， 如 Lu-AMBA( 也称为 177Lu-L70) 结合至多 140％的未处理的对照 (0.1-1.0μM) 的增 加所表明。 此外， 在最高浓度观察到细胞增殖减少至多 65％， 可能表明 GRP 受体特异性信号 扩增。上文所述显示 EGFR 和 / 或 HER2 和 GRP-R 的串流。可以认为所述增加是避免破坏的 可代替途径 ( 即为了 EGFR 的持续生长或 GRPR 导致的反式激活， 转换至 GRP)， 在治疗上可以 将其用作原始治疗药物耐药性的早期指征。 也可以认为信号增加是避免肿瘤细胞死亡的最 后企图 (“最后喘息” )， 最终导致肿瘤死亡。通过成像以测定这类变化的能力将具有极大 优势。

    [1139] 通过实施例 XCII 为此举例的结果记录在表 24( 如下 ) 中， 其显示， 不靶向 GRP 受体的药物治疗以活细胞为基础在体外调节细胞培养物中 GRP-R 摄取 177Lu-AMBA( 和通过推 理可知 67/68Ga-AMBA 也如此 ) ：

    [1140] 表 24

    [1141] 上表显示， 通过在左侧的药物靶向的受体和前列腺和乳腺癌细胞系中 GRP 受体的 体外串流， 如通过受体 - 配体结合测试所测定的。

    [1143] 实施例 LXVII- 拉帕替尼对 T47D 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明

    [1144] T-47D 乳腺癌细胞 ( 从胸膜渗出物分离的人转移的乳腺导管腺癌， ER+， PR+) 从美 国模式培养物保藏所得到。用于 T-47D 的生长介质是 RPMI 1640(10-041-CM， Mediatech， inc)， 补充有 10％热灭活的 FBS(Hyclone， SH30070.03)， 0.5％胰岛素 (10516-5ML， Sigma) 和 PSF-1x， 如在实施例 LXVI 中所述保持细胞。 结合缓冲液、 拉帕替尼溶液、 处理方法和细胞 结合测试与在实施例 LXVI 中的相同。

    [1145] 采用拉帕替尼的处理导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信号增 177 加， 如 Lu-AMBA 结合至多 50％的未处理的对照 (0.1-1.0μM) 增加所表明， 同时在最高浓 度细胞增殖至多减少 35％。上文所述显示 EGFR 和 / 或 HER2 和 GRP-R 的串流 ； 对其的分析 与实施例 LXVI 中所述相同。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1146] 实施例 LXVIII- 拉帕替尼对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1147] PC-3( 人前列腺腺癌， 骨转移瘤， AR-， ER) 从美国模式培养物保藏所得到。用于 PC-3 细胞的生长介质是 RPMI 1640(10-041-CM， Mediatech， inc)， 补充有 10 ％热灭活的

    [1142] FBS(Hyclone， SH30070.03) 和 PSF-1x( 如在实施例 LXVI 中所述 )。结合缓冲液、 拉帕替尼 溶液、 处理方法和细胞结合测试与在实施例 LXVI 中的相同。

    [1148] 结果 ： 采用拉帕替尼的处理导致在 PC-3 前列腺癌细胞中增殖或经细胞的 GRP 受体 特异性信号无变化， 如通过在 0.1-1.0μM 范围内等价的 177Lu-AMBA 结合未治疗的对照所表 明。

    [1149] 分析 ： 这显示 EGFR 和 / 或 HER2 和可能的 GRP-R 的串流。 这可以表明治疗实现成功 靶向， 且 GRPR 不是可代替的拯救途径 ； 治疗不是成功的， 因此不需要反式激活 GRPR ； 或 GRP 介导拯救， 但是不需要增加 GRPR 的表达。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1150] 实施例 LXIX- 达沙替尼对 BT-474 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1151] 如实施例 LXVI 中所述保持和处理 BT-474 细胞， 并进行结合测试。

    [1152] 达沙替尼溶液 ：

    [1153] 储备液 ： 1mM 在 100％ DMSO 中

    [1154] 操作 ： (0.1-1.0μM) 在完全生长介质中

    [1155] 结果 ： 采用达沙替尼的治疗导致 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 10-15％的未处理的对照 (0.1-1.0μM) 的减少所表明。

    [1156] 分析 ： 这表明 Src 家族激酶的成员和 GRPR 的串流。减少可以表明有效靶向， 但是 不能为了支持 / 拯救转换至 GRPR ； 或治疗不是有效， 因此不需要转换至 GRPR。结果记录在 实施例 LXVI 表 24 中。

    [1157] 实施例 LXX- 达沙替尼对 T47D 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明。

    [1158] 如实施例 LXVI 和 LXVII 中所述保持和处理 T-47D 细胞， 并进行结合测试， 且达沙 替尼溶液如在实施例 LXIX 中所述。

    [1159] 结果 ： 采用达沙替尼的治疗导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 号增加， 如在 (0.1-1.0μM) 下 177Lu-AMBA 结合至多 500％的未处理的对照的增加所表明。

    [1160] 分析 ： 这表明 Src 家族激酶的成员和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVI 中所 述相同。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1161] 实施例 LXX1- 达沙替尼对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明。

    [1162] 如实施例 LXVI 和 LXVIII 中所述保持和处理 PC-3 细胞， 并进行结合测试， 且达沙 替尼溶液如在实施例 LXIX 中所述。

    [1163] 结果 ： 采用达沙替尼的治疗导致 PC-3 前列腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 号增加， 如在 (0.1-1.0μM) 下 177Lu-AMBA 结合至多 250％的未处理的对照的增加所表明。

    [1164] 分析 ： 这表明 Src 家族激酶的成员和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVI 中所 述相同。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1165] 实施例 LXXII- 吉非替尼对 BT-474 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1166] 如实施例 LXVI 中所述保持和处理 BT-474 细胞， 并进行结合测试。

    [1167] 吉非替尼溶液 ： 储备液 ： 1mM 储备液， 在 0.5M H3PO4 中 操作 ： 0.1-10μM， 在完全生长介质中结果 ： 采用吉非替尼的治疗导致 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 号无变化， 如在 0.1-10μM 下通过等价的 177Lu-AMBA 结合未治疗的对照所表明。

    [1171] 分析 ： 这可以表明 Src 家族激酶的成员和 GRPR 的串流。这可以表明治疗实现成功 靶向， GRPR 不是可代替的拯救途径 ； 治疗不是成功的， 因此不需要反式激活 GRPR ； 或 GRP 介 导拯救， 但是不需要增加 GRPR 的表达。已经报道， GRP 如下与对吉非替尼的耐药性 (Liu X， 等人， ExpCell Res 2007， 313 ； 1361-72) 相关 ： 通过下游 c-src 介导的 Akt 的反式激活， 关 键的 EGFR- 激活的信号传递途径， 拯救接触吉非替尼的 NSCLC 细胞。但是这可以不需要增 加 GRPR 的表达。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1172] 实施例 LXXIII- 吉非替尼对 T47D 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1173] 如实施例 LXVI 和 LXVII 中所述保持和处理 T-47D 细胞， 并进行结合测试， 且吉非 替尼溶液如在实施例 LXXII 中所述。

    [1174] 结果 ： 采用吉非替尼的治疗导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号增加， 如 Lu-AMBA 结合至多 20％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-10μM) 的增加所表明。

    [1175] 分析 ： 这显示 EGFR 和 GRPR 的串流 ； 分析如在实施例 LXVI 中所述。结果记录在实 施例 LXVI 表 24 中。

    [1176] 实施例 LXXIV- 吉非替尼对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1177] 如实施例 LXVI 和 LXVIII 中所述保持和处理 PC-3 细胞， 并进行结合测试， 且吉非 替尼溶液如在实施例 LXXII 中所述。

    [1178] 结果 ： 采用吉非替尼的治疗导致 PC-3 前列腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 20-40％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-10μM) 的减少所表明。

    [1179] 分析 ： 这显示 EGFR 和 GRPR 的串流 ； 分析如在实施例 LXIX 中所述。结果记录在实 施例 LXVI 表 24 中。

    [1180] 实施例 LXXV- 伊马替尼对 BT-474 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1181] 如实施例 LXVI 中所述保持和处理 BT-474 细胞， 并进行结合测试。

    [1182] 伊马替尼溶液 ：

    [1183] 储备液 ： 在 100mM CH3COOH 中的 1mM 储备液

    [1184] 操作 ： 0.1-1.0μM， 在完全生长介质中

    [1185] 结果 ： 采用伊马替尼的治疗导致 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 号无变化， 如通过在 0.1-1.0μM 下等价的 177Lu-AMBA 结合未治疗的对照所表明。

    [1186] 分析 ： 这显示多个激酶抑制剂 (Bcr-Abl 酪氨酸激酶 ； 也抑制 PDGF 和干细胞因子 (SCF)， Kit 和 PDGFR) 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVIII 中所述相同。结果记录 在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1187] 实施例 LXXVI- 伊马替尼对 T47D 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1188] 如实施例 LXVI 和 LXVII 中所述保持和处理 T-47D 细胞， 并进行结合测试， 且伊马 替尼溶液如在实施例 LXXV 中所述。结果 ： 采用伊马替尼的治疗导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号增加， 如 Lu-AMBA 结合至多 15％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的增加所表明。

    [1190] 分析 ： 这显示多个激酶抑制剂 (Bcr-Abl 酪氨酸激酶 ； 也抑制 PDGF 和干细胞因子 (SCF)， Kit 和 PDGFR) 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVI 中所述相同。结果记录在 实施例 LXVI 表 24 中。

    [1191] 实施例 LXXVII- 伊马替尼在 PC-3 前列腺癌细胞中效果的体外证明。

    [1192] 如实施例 LXVI 和 LXVIII 中所述保持和处理 PC-3 细胞， 并进行结合测试， 且伊马 替尼溶液如在实施例 LXXV 中所述。

    [1193] 结果 ： 采用伊马替尼的治疗导致 PC-3 前列腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性 177 信号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 15-25％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的减少所表 明。

    [1194] 分析 ： 这显示多个激酶抑制剂 (Bcr-Abl 酪氨酸激酶 ； 也抑制 PDGF 和干细胞因子 (SCF)， Kit 和 PDGFR) 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXIX 中所述相同。结果记录在 实施例 LXVI 表 24 中。

    [1195] 实施例 LXXVIII- 厄洛替尼对 BT-474 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外 证明。

    [1196] 如实施例 LXVI 中所述保持和处理 BT-474 细胞， 并进行结合测试。

    [1197] 厄洛替尼溶液 ：

    [1198] 储备液 ： 在 95％乙醇中制备在 100mM CH3COOH 中的 1mM 储备液

    [1199] 操作 ： 0.1-1.0μM， 在完全生长介质中

    [1200] 结果 ： 采用厄洛替尼的治疗导致 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 号无变化， 如通过在 0.1-1.0μM 下等价的 177Lu-AMBA 结合未治疗的对照所表明。

    [1201] 分析 ： 这表明 EGFR 和 GRP-R 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVIII 中所述相同。 结 果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1202] 实施例 LXXIX- 厄洛替尼对 T47D 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1203] 如实施例 LXVI 和 LXVII 中所述保持和处理 T-47D 细胞， 并进行结合测试， 且厄洛 替尼溶液如在实施例 LXXVIII 中所述。

    [1204] 结果 ： 采用厄洛替尼的治疗导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号增加， 如 Lu-AMBA 结合至多 5-20％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的增加所表明。

    [1205] 分析 ： 这表明 EGFR 和 GRP-R 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVI 中所述相同。 结果 记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1206] 实施例 LXXX- 厄洛替尼对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明。

    [1207] 如在实施例 LXVI 和 LXVIII 中所述保持和处理 PC-3 细胞， 并进行结合测试， 且厄 洛替尼溶液如在实施例 LXXVIII 中所述。

    [1208] 结果 ： 采用厄洛替尼的治疗导致 PC-3 前列腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 5-20％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的减少所表明。

    [1209] 分析 ： 这表明 EGFR 和 GRP-R 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXIX 中所述相同。 结果 记录在实施例 LXVI 表 24 中。实施例 LXXXI- 索拉非尼对 BT-474 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明。 如实施例 LXVI 中所述保持和处理 BT-474 细胞， 并进行结合测试。

    [1212] 索拉非尼溶液 ：

    [1213] 储备液 ： 在 95％乙醇中制备在 100mM CH3COOH 中的 1mM 储备液

    [1214] 操作 ： 0.1-1.0μM， 在完全生长介质中

    [1215] 结果 ： 采用索拉非尼的治疗导致 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性 177 信号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 10-25％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的减少所表 明。

    [1216] 分析 ： 这显示多个激酶抑制剂 (PDGFRba/VEGFR 1， 2， 3/KIT， FLT3/EGF/Ras/Raf 激 酶 ) 和 GRPR 的串流 ； 分析如在实施例 LXIX 中所述。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1217] 实施例 LXXXII- 索拉非尼对 T47D 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1218] 如实施例 LXVI 和 LXVII 中所述保持和处理 T-47D 细胞， 并进行结合测试， 且索拉 非尼溶液如在实施例 LXXXI 中所述。

    [1219] 结果 ： 采用索拉非尼的治疗导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 号无变化， 如通过在 0.1-1.0μM 下等价的 177Lu-AMBA 结合未治疗的对照所表明。

    [1220] 分析 ： 这显示多个激酶抑制剂 (PDGFRba/VEGFR 1， 2， 3/KIT， FLT3/EGF/Ras/Raf 激 酶 ) 和 GRPR 的串流 ； 分析如在实施例 LXVI II 中。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1221] 实施例 LXXXIII- 索拉非尼对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1222] 如实施例 LXVI 和 LXVIII 中所述保持和处理 PC-3 细胞， 并进行结合测试， 且索拉 非尼溶液如在实施例 LXXXI 中所述。

    [1223] 结果 ： 采用索拉非尼的治疗导致 PC-3 前列腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性 177 信号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 10-20％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的减少所表 明。

    [1224] 分析 ： 这显示多个激酶抑制剂 (PDGFRba/VEGFR 1， 2， 3/KIT， FLT3/EGF/Ras/Raf 激 酶 ) 和 GRPR 的串流 ； 分析如在实施例 LXIX 中所述。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1225] 实施例 LXXXIV- 舒尼替尼对 BT-474 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外 证明。

    [1226] 如实施例 LXVI 中所述保持和处理 BT-474 细胞， 并进行结合测试。

    [1227] 舒尼替尼溶液 ：

    [1228] 储备液 ： 以 95％制备在 100mM CH3COOH 中的 1mM 储备液

    [1229] 操作 ： 0.1-1.0μM， 在完全生长介质中

    [1230] 结果 ： 采用舒尼替尼的治疗导致 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 8％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的减少所表明。

    [1211] 分析 ： 这显示多个激酶抑制剂 (EGFR、 HER2， ErbB3 ； PDGFα 和 β ； 干细胞因子受体 (KIT) ； FLT3 ； CSF-1R ； 拿神经因子受体 (RET) 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXIX 中 所述相同。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。实施例 LXXXV- 舒尼替尼对 T47D 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明。 如实施例 LXVI 和 LXVII 中所述保持和处理 T-47D 细胞， 并进行结合测试， 且舒尼 替尼溶液如在实施例 LXXXIV 中所述。

    [1234] 结果 ： 采用舒尼替尼的治疗导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号增加， 如 Lu-AMBA 结合至多 13％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的增加所表明。

    [1235] 分析 ： 这显示多个激酶抑制剂 (EGFR、 HER2， ErbB3 ； PDGFα 和 β ； 干细胞因子受体 (KIT) ； FLT3 ； CSF-1R ； 向神经因子受体 (RET) 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVI 中 所述相同。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1236] 实施例 LXXXVI- 舒尼替尼对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1237] 如实施例 LXVI 和 LXVIII 中所述保持和处理 PC-3 细胞， 并进行结合测试， 且舒尼 替尼溶液如在实施例 LXXXIV 中所述。

    [1238] 结果 ： 采用舒尼替尼的治疗导致 PC-3 前列腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号增加， 如 Lu-AMBA 结合至多 10％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的增加所表明。

    [1239] 分析 ： 这显示多个激酶抑制剂 (EGFR、 HER2， ErbB3 ； PDGFα 和 β ； 干细胞因子受体 (KIT) ； FLT3 ； CSF-1R ； 向神经因子受体 (RET) 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVI 中 所述相同。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1240] 实施例 LXXXVII- 阿那曲唑对 BT-474 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外 证明。

    [1241] 如实施例 LXVI 中所述保持和处理 BT-474 细胞， 并进行结合测试。

    [1242] 阿那曲唑溶液 ：

    [1243] 储备液 ： 在 100％乙醇中的 1mM 储备液

    [1244] 操作 ： 0.1-1.0μM， 在完全生长介质中

    [1245] 结果 ： 采用阿那曲唑的治疗导致 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 号无变化， 如通过在 0.1-1.0μM 下等价的 177Lu-AMBA 结合未治疗的对照所表明。

    [1246] 分析 ： 这显示雌激素受体和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVIII 中所述相 同。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1247] 实施例 LXXXVIII- 阿那曲唑对 T47D 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外 证明。

    [1248] 如实施例 LXVI 和 LXVII 中所述保持和处理 T-47D 细胞， 并进行结合测试， 且阿那 曲唑溶液如在实施例 LXXXVII 中所述。

    [1249] 结果 ： 采用阿那曲唑的治疗导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 10％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的减少所表明。

    [1250] 分析 ： 这显示雌激素受体和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXIX 中所述相同。 结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1251] 实施例 LXXXIX- 阿那曲唑对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1252] 如实施例 LXVI 和 LXVIII 中所述保持和处理 PC-3 细胞， 并进行结合测试， 且阿那

    [1233] 曲唑溶液如在实施例 LXXXVII 中所述。

    [1253] 结果 ： 采用阿那曲唑的治疗导致 PC-3 前列腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 10％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的减少所表明。

    [1254] 分析 ： 这显示雌激素受体和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXIX 中所述相同。 结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1255] 实施例 XC- 硼替佐米对 BT-474 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明。

    [1256] 如实施例 LXVI 中所述保持和处理 BT-474 细胞， 并进行结合测试。

    [1257] 硼替佐米溶液 ：

    [1258] 储备液 ： 在 100％ DMSO 中的 1mM 储备液

    [1259] 操作 ： 0.1-1.0μM， 在完全生长介质中

    [1260] 结果 ： 采用硼替佐米的治疗导致 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 50％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的减少所表明。

    [1261] 分析 ： 这显示泛素途径中下游信号传递和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXIX 中所述相同。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1262] 实施例 XCI- 硼替佐米对 T47D 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明。

    [1263] 如实施例 LXVI 和 LXVII 中所述保持和处理 T-47D 细胞， 并进行结合测试， 且硼替 佐米溶液如在实施例 XC 中所述。

    [1264] 结果 ： 采用硼替佐米的治疗导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 50％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的减少所表明。

    [1265] 分析 ： 这显示下泛素途径中游信号传递和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXIX 中所述相同。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1266] 实施例 XCII- 硼替佐米对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明。

    [1267] 如实施例 LXVI 和 LXVIII 中所述保持和处理 PC-3 细胞， 并进行结合测试， 且硼替 佐米溶液如在实施例 XC 中所述。

    [1268] 结果 ： 采用硼替佐米的治疗导致 PC-3 前列腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信 177 号减少， 如 Lu-AMBA 结合至多 60％的未治疗的对照 ( 范围 0.1-1.0μM) 的减少所表明。

    [1269] 分析 ： 这显示泛素途径中下游信号传递和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXIX 中所述相同。结果记录在实施例 LXVI 表 24 中。

    [1270] 实施例 XCIII-4-OH 他莫昔芬对 BT-474 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体 外证明。

    [1271] 如实施例 LXVI 中所述保持和处理 BT-474 细胞， 并进行结合测试。

    [1272] 4-OH 他莫昔芬溶液 ：

    [1273] 储备液 ： 1mM， 在 95％乙醇中

    [1274] 操作 ： 0.001-0.1μM， 在完全生长介质中

    [1275] 结果 ： 采用 4-OH 他莫昔芬的治疗导致 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特 异性信号减少， 如 177Lu-AMBA 结合至多 73％的未治疗的对照 ( 范围 0.001-0.1μM) 的减少 所表明。 分析 ： 这显示 ER 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXIX 中所述相同。结果记 录在下表 25 中 ：

    [1276] 表 25

    [1278] 实施例 XCIV-4-OH 他莫昔芬对 T47D 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明。 如实施例 LXVI 和 LXVII 中所述保持和处理 T-47D 细胞， 并进行结合测试， 且 4-OH 他莫昔芬溶液如在实施例 XCIII 中所述。

    [1282] 结果 ： 采用 4-OH 他莫昔芬的治疗导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异 性信号减少， 如 177Lu-AMBA 结合至多 35％的未治疗的对照 ( 范围 0.001-0.1μM) 的减少所 表明。

    [1283] 分析 ： 这显示 ER 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXIX 中所述相同。结果记 录在实施例 XCIII 中表 25。

    [1284] 实施例 XCV-4-OH 他莫昔芬对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证 明。

    [1285] 如实施例 LXVI 和 LXVIII 中所述保持和处理 PC-3 细胞， 并进行结合测试， 且 4-OH 他莫昔芬溶液如在实施例 XCIII 中所述。

    [1286] 结果 ： 采用他莫昔芬 (4-OH TMX) 的治疗导致在 PC-3 前列腺乳腺癌细胞中经细胞 的 GRP 受体特异性信号无变化， 如所通过在范围 0.001-0.1μM 中等价的 177Lu-AMBA 结合未 治疗的对照表明。

    [1287] 分析 ： 这显示 ER 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVIII 中所述相同。结果 记录在表 25 实施例 XCIII 中。

    [1288] 实施例 XCVI-4-OH 他莫昔芬加 β2- 雌二醇对 BT-474 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结 合的效果的体外证明。

    [1289] 如 实 施 例 LXVI 中 所 述 保 持 和 处 理 BT-474 细 胞， 并 进 行 结 合 测 试， 除了添加 β2- 雌二醇 ( 参见下文 )。

    [1290] 4-OH 他莫昔芬溶液 ：

    [1291] 储备液 ： 1mM， 在 95％乙醇中

    [1292] 操作 ： 0.001-0.1μM， 在完全生长介质中

    [1293] β2- 雌二醇溶液 ：

    [1294] 储备液 ： 1mM， 在 95％乙醇中

    [1295] 操作 ： 1nM， 在完全生长介质中

    [1296] 治疗 ： 在 0 天将 BT-474 细胞铺板， 在 1 和 2 天 (DT1， DT2) 治疗。移除介质， 替换为

    [1281] 新鲜生长介质 ( 对照 ) ； 或在 DT1 替换为生长介质， 接着在 DT2 替换为 1nMβ2- 雌二醇 ； 或在 DT1 替换为 4-OH 他莫昔芬， 接着在 DT2 替换为 1nMβ2- 雌二醇。

    [1297] 结果 ： 采用 β2- 雌二醇的治疗增加了在 BT-474 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体 特异性信号， 如 177Lu-AMBA 相对于对照值结合 47％的增加所表明。采用 4-OH 他莫昔芬接 着采用 β2- 雌二醇的治疗没有改变单独采用 4-OH 他莫昔芬治疗得到的值 ( 参见实施例 XCIII)。

    [1298] 分析 ： 这显示 ER 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVI 中所述相同。结果记 录在表 25 实施例 XCIII 中。

    [1299] 实施例 XCVII-4-OH 他莫昔芬加 β2- 雌二醇和仅用 β2- 雌二醇对 T47D 人乳腺癌 细胞中 GRP 受体结合的效果的体外证明。

    [1300] 如实施例 LXVI 和 LXVII 和 XCVI 中所述保持和处理 T47D 细胞， 并进行结合测试。

    [1301] 结果 ： 采用 β2- 雌二醇的治疗没有改变 T47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特 异性信号。采用他莫昔芬接着进行 β2- 雌二醇的治疗导致 T-47D 乳腺癌细胞中经细胞的 GRP-R 表达减少 27％， 小于仅用他莫昔芬 ( 实施例 XCIV)8％。

    [1302] 分析 ： 这显示 ER 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVIII 中所述相同。结果 记录在表 25 实施例 XCIII 中。

    [1303] 实施例 XCVIII-4-OH 他莫昔芬加 β2- 雌二醇对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结 合的效果的体外证明。

    [1304] 如实施例 LXVI 和 LXVIII 和 XCVI 中所述保持和处理 PC-3 细胞， 并进行结合测试。

    [1305] 结果 ： 采用 β2- 雌二醇或 4-OH 他莫昔芬接着进行 β2- 雌二醇的治疗导致 PC-3 前列腺乳腺癌细胞中经细胞的 GRP 受体特异性信号无变化， 如通过在范围 0.001-0.1μM 中 177 等价的 Lu-AMBA 结合未治疗的对照所表明。

    [1306] 分析 ： 这显示 ER 和 GRPR 的串流 ； 对其的分析与实施例 LXVIII 中所述相同。结果 记录在实施例 XCIII 表 25 中。

    [1307] 实施例 XCIX- 达沙替尼对 PC-3 前列腺癌细胞中 GRP 受体结合和葡萄糖摄取的效 果的体外证明 ( 使用单板测试方法 )

    [1308] 方法 ： 从美国典型培养物保藏所得到 PC-3( 人前列腺腺癌， 骨转移瘤， AR-， ER)。 用 于 PC-3 细胞的生长介质是 RPMI 1640(10-041-CM， Mediatech， inc)， 补充有 10％热灭活的 FBS(Hyclone， SH30070.03) 和 PSF-1x( 如在实施例 LXVI 中所述 )。 在 0 天将细胞铺板 (7.5k/ 孔 96 孔 PEScintiplate)。在铺板之后约 24 小时， 在 1 和 2 天 (DT1， DT2) 治疗， 移除介质， 替换为新鲜生长介质 ( 对照 )， 或替换为添加达沙替尼 (0-0.1μM) 的生长介质。在 3 天， 177 和之前所描述的进行 Lu-AMBA 结合测试。为了测定细胞数量和增殖， 将 100uL 的在 DPBS 中的 10％ CCK-F 溶液 (Molecular technologies) 加入至相同的板， 在 37℃温育 30min， 在 177 535nm 测量相对荧光 (RFU)。基于细胞数量和 Lu- 结合， 计算 Bmax( 结合的 f 摩尔 / 百万 细胞 )， 将结果与对照相比。

    [1309] 为了葡萄糖摄取研究， 使用荧光学标记的 2- 脱氧葡萄糖衍生物 (2-NBDG)。 在如上 文所述用达沙替尼治疗之后， 在 37℃， 用含 2-NBDG(200uM) 的结合缓冲液温育细胞 2 小时， 在 530nm 测量 RFU。如上文所述使用 CCK-F 测定细胞数量。基于细胞数量， 测定葡萄糖摄取 的 Bmax， 并将其与对照相比。如所预期的， 细胞增殖显著减少， 当使用 100nM 达沙替尼时， 抑制生长多达 33％。 177 令人意想不到地， Lu-AMBA 的摄取从不采用达沙替尼治疗 ( 对照 ) 时的 266f 摩尔 / 百万 细胞的平均 Bmax 增加至高如采用 100nM 达沙替尼时的 470f 摩尔 / 百万细胞 )， 增加了 76.7％。当采用 100nM 达沙替尼时， 葡萄糖摄取减少多达 67.8％。

    [1311] 达沙替尼治疗对前列腺癌 (PC3) 细胞 (N ＝ 4) 中增殖和 177Lu-AMBA 摄取的相对变 化的效果

    [1312] 结果显示 GRP 受体活性具有证明达沙替尼治疗靶向 Src 受体家族的效果能力。

    [1314] 实施例 C-4- 羟基他莫昔芬对 ZR-75-1 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合和葡萄糖摄 取的效果的体外证明

    [1315] 方法 ： 从美国模式培养物保藏所 (ATCC) 得到 ZR-75-1 乳腺癌细胞系 ( 具有雌激素 受体的人导管癌 )。 如下培养细胞 ： 在 37℃， 在 T-150CellBind 组织培养烧瓶 (Corning) 中， 保持在含有 5％ CO2/95％空气的湿润气氛中， 在完全生长介质， 来自 ATCC(Cat No ： 30-2001) 的补充有 10％热灭活的 FBS(hyclone， SH30070.03) 的 RPMI-1640 介质中。常规通过使用 来自 Mediatech， inc 的 0.25％胰蛋白酶 /EDTA(Cat No ： 25-053-cl) 传代细胞。在 0 天将 ZR-75-1 细胞铺板 (40k/ 孔 96 孔 PE Scintiplate)。 在铺板之后约 48 小时， 在 2 和 3 天 (DT2， DT3) 治疗， 移除介质， 替换为新鲜生长介质 ( 对照 )， 或添加 4- 羟基他莫昔芬 (0-0.1μM) 的 177 生长介质。 在 -4 天， 如之前所描述的进行 Lu-AMBA 结合测试。 为了测定细胞数量和增殖， 将 100uL 的在 DPBS 中的 10％ CCK-F 溶液 (Molecular technologies) 加入至相同的板， 在 177 37℃温育 30min， 在 535nm 测量相对荧光 (RFU)。 基于细胞数量和 Lu- 结合， 计算 Bmax( 结 合的 f 摩尔 / 百万细胞 )。

    [1316] 为了葡萄糖摄取研究， 使用荧光学标记的 2- 脱氧葡萄糖衍生物 (2-NBDG)。 在如上 文所述用 4- 羟基他莫昔芬治疗之后， 在 37℃用含 2-NBDG(200uM) 的结合缓冲液温育细胞 2 小时， 在 530nm 测量 RFU。

    [1317] 如上文所述测定采用 CCK-F 治疗的细胞数量。

    [1313] 结果显示采用 4-OH 他莫昔芬长期治疗 ZR-75-1 导致 ZR-75-1 细胞的增殖减少， 如 截止至 12 天观察到的 28％抑制。观察到 177Lu-AMBA 摄取显著减少， 同时伴随响应于治疗 的 2-NBDG 摄取的较小变化。结果显示 GRP 受体活性具有证明他莫昔芬治疗靶向雌激素受 体效果的能力。67Ga-AMBA 比 18F-FDG 更适于监测该治疗的进展。

    [1320] 实施例 ： CI-4- 羟基他莫昔芬对 ZR-75-1 人乳腺癌细胞中 GRP 受体结合的长期 (2-12 天 ) 的效果的体外证明

    [1321] 方法 ：

    [1322] 1.4-OH 他莫昔芬治疗在 -2 天对 GRP 摄取的效果 ：： 如上文所述培养 ZR-75-1 乳 177 腺癌细胞系。如上文所述进行采用 4-OH Tam 接着采用 Lu-AMBA 摄取的 2- 天研究。

    [1323] 2.4-OH 他莫昔芬在 5 天对 ZR-75-1 细胞中 GRP 或葡萄糖摄取的效果 ：

    [1324] 如 2 天研究中所述， 在同一天， 以 15K/ 孔将 ZR-75-1 细胞接种在两个 96 孔闪烁板。 从 2 天至 5 天， 每天采用 100nM 4-OH 他莫昔芬实施治疗。通过与 2 天 4-OH 他莫昔芬的效 果研究中所述相同的方法， 在 6 天测定 4-OH 他莫昔芬对 ZR-75-1 细胞中 GRP-R 或葡萄糖摄 取的效果。

    [1325] 3.4-OH 他莫昔芬在 11 天对 ZR-75-1 细胞中 GRP 或葡萄糖摄取的效果 ：

    [1326] 当所述研究开始时， 在同一天在 T-75TC 烧瓶中培养 ZR-75-1 细胞， 从 2 天至 5 天， 每天用或不用 100nM 4-OH 他莫昔芬处理细胞。在 6 天， 将细胞以 15K/ 孔接种至两个 96 孔 闪烁板， 每天采用 100nM 4-OH 他莫昔芬实施治疗， 直到 11 天。在 12 天通过与先前应用的 相同的方法， 测定 4-OH 他莫昔芬对 ZR-75-1 细胞中 GRP-R 或葡萄糖摄取的效果。

    [1319] 结果显示， 采用 4-OH 他莫昔芬长期治疗 ZR-75-1 导致截止 12 天观察到的 ZR-75-1 细胞的 28 ％抑制的增殖减少。观察到 177Lu-AMBA 摄取显著减少， 同时存在响应于治疗的 2-NBDG 摄取更小变化。 结果显示 GRP 受体活性具有证明他莫昔芬治疗靶向雌激素受体的效 果的能力。67Ga-AMBA 比 18F-FDG 更适于监测这类治疗的进展。

    [1328] 实施例 CII-Ga-AMBA(Ga-L70) 的制备和表征。

    [1330] (a)AMBA 配体的合成 ：

    [1331] 如 美 国 专 利 7,226,577(Cappelletti 等 人 ) 所 述， 使用固相肽合成化学合成 AMBA[(DO3A-CH2CO-G-(4- 氨基苯甲酰基 )-QWAVGHLM-NH2)， DO3A ＝ (1， 4， 7， 10- 四氮杂 -4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )- 环十二烷基 )- 乙酰基 ]。

    [1332] 配体的结构显示如下。

    [1333] (b) 非放射性 Ga-AMBA 标准的合成 ：

    [1335] 如下制备非放射性 Ga-AMBA 的样品 ： 在含 2μg 的镓的 0.2mL 的 0.2M NaOAc 缓冲液 (pH 4.8)( 镓 AAS 标准溶液 ) 中混合 AMBA 配体 (25μg) 和硒代蛋氨酸 (200μg)。这表示 1.8 ∶ 1 的 Ga ： 配体比率。使用过量的 Ga 以消耗所有 AMBA 配体， 使随后的纯化更简单。在 100℃将混合物加热 10min。在配位之后， 将 20μL 的 10mM EDTA 加入反应溶液以螯合任何 残留游离镓。将 Ga-AMBA 反应溶液注射入使用下文列举的条件的用于 LC/MS 分析的 HPLC。

    [1336] 柱： Zorbax Bonus-RP embedded amide C14(250mm×4.6mm， 尺寸 5μM)。 溶剂 ： A： H2O/0.1％甲酸 /0.01％ TFA(v/v) ； B： 乙腈 /0.1％甲酸 /0.01％ TFA(v/v)。梯度如下表 26 中所列举。流速 ： 0.6mL/min。柱温 ： 37℃。

    [1337] 用于 Ga-AMBA LC/MS 分析的 HPLC 梯度 ：

    [1338] 表 26

    [1334] 在用于 LC/MS 分析的 HPLC 条件下， Ga-AMBA 的保留时间是～ 24.8min。天然存在 的镓是两种非放射性同位素 ( 分别具有 60.11％和 39.89％的丰度的 Ga-69 和 Ga-71) 的混 合物。测量和预期的 Ga-AMBA 的同位素质量之间具有良好一致性。

    [1341] Ga-AMBA 的预期的、 测量同位素质量 ：

    [1340] 如下制备第二非放射性 Ga-AMBA 标准 ： 处理 10mg 溶解于 10mL 含 0.8mg 镓的 0.2M， pH 4.8NaOAc 缓冲液 ( 镓 AAS 标准溶液 ) 中的 “原样” AMBA。在该反应中， Ga ： 配体比率是～ 2 至 1。使用过量 Ga 以在螯合期间消耗所有 AMBA， 以方便随后纯化的 Ga-AMBA 络合物。在 100℃加热混合物 20min。在配位之后， 将 2mL 的 10mM EDTA 加入反应溶液以螯合任何残留 游离镓。

    [1344] 使用下文列举的 HPLC 条件， 通过制备型 HPLC 纯化 Ga-AMBA。

    [1345] 用于大规模 Ga-AMBA 纯化的制备型 HPLC 条件 ：

    [1343] 采集和冻干 Ga-AMBA 峰。 得到了 8.4mg Ga-AMBA 的样品， 元素分析的结果与 2037.6 的分子量 (3TFA.7H2O) 一致

    [1348] Ga-AMBA 3TFA.7H2O 的元素分析结果

    [1347] (c)67Ga-AMBA 的制备 ：

    [1351] 使 用 与 如 本 文 描 述 的 和 在 共 同 未 决 US 申 请 U.S.11/751,337 中 描 述 的 用 于 177 Lu-AMBA 的 方 法 相 似 的 方 法， 制 备 67Ga-AMBA。 将 AMBA(6μg 的 无 水 配 体， 4nmol) 和 硒 代 蛋 氨 酸 (0.05mg) 在 50μL 的 0.2M， pH 4.8NaOAc 缓 冲 液 中 的 溶 液 与 1.7mCi 的 67 GaCl3(Nordion) 混合。 在 100℃加热反应小瓶， 加热封闭 10min， 然后在室温水浴中冷却～ 2min。在冷却之后， 将 0.1mL 的 9 ∶ 1 的抑菌剂 0.9％氯化钠注射 USP 和 ASCOR 抗 坏血酸注射 USP 的混合物加入至小瓶， 接着加入 20μL 的 10mM EDTA 以螯合任何残留游离

    [1350] 放射性核素。未纯化反应混合物的 RCP 是 90.1％。HPLC 纯化等份的反应混合物以移除过 量配体， 使用下列 HPLC 系统。柱 ： Zorbax Bonus-RP embedded amide C14(250mm×4.6mm， 尺寸 5μM， Agilent)。柱温 ： 37℃， 流速 ： 1.5mL/ 分钟。梯度 ： 流动相 A ＝ H2O， B ＝含 0.1％ 三氟乙酸 (TFA)(v/v) 和 30mM(NH4)2SO4 的 H2O。(3.96g/L)， C ＝甲醇 (MeOH)， 和 D ＝乙腈 (ACN)。

    [1352] 用于 67Ga-AMBA 分析的流动相梯度

    [1353] 时间 (min) 0 5 37 40 45 46

    [1354] ％A 30 14 14 0 0 30％B 60 60 60 60 60 60％C 5 13 13 20 20 5％D 5 13 13 20 20 5采 集 期 望 的 级 分， 将 其 放 入 1mL 含 有 0.1 ％ HAS 的 的 抑 菌 剂 盐 水 /ASCOR L500(9 ∶ 1)。使用高速真空移除有机物， 使用含有 0.1 ％ HAS 的 9 ∶ 1 的抑菌剂盐水 / ASCOR L500 的混合物， 将最终产物稀释至 0.1mCi/mL。最终 RCP 是 99.8％。67Ga-AMBA 的平 均特异性活性在制备时是～ 20Ci/ 微摩尔。当考虑检测器偏差 (offsets) 时， Ga-AMBA 标 67 准 (26.2min) 的保留时间与 Ga-AMBA(26.4min) 的保留时间相同， 。 67

    [1355] (d) Ga-AMBA 与 PC-3 肿瘤细胞的体外结合。

    [1356] 从美国模式培养物保藏所得到人前列腺癌 (PC-3) 细胞 (ATCC， Lot #3250)， 将其 培养在组织培养烧瓶 (Corning) 中的含有 L- 谷氨酰胺和 25mMHEPES( 来自 Cellgro， cat# 10-041-CM) 的 RPMI-1640 中。 该生长介质补充有 10％热灭活的 FBS(Hyclone， SH30070.03)， 和两性霉素 (0.25μg/mL)。所有培养物保持在 37℃的含有 5％ CO2 湿润气氛中， 常规使用 0.25％胰蛋白酶 /EDTA(VWR， Cat#45000-664) 进行传代。以 20×103/ 孔的浓度， 在 96 孔白 色 / 清晰底组织培养板中 (Falcon Optilux-I) 将细胞铺板。当汇合时， 测定的细胞总数量 3 为约 25-30×10 细胞 / 孔。在铺板后 2 天将板用于结合研究。结合缓冲液是 RPMI-1640， 其补充有 0.2％ BSA(w/v)， 0.5mM PMSF(AEBSF)， 杆菌肽 (Sigma， lot#60K082 ； 50mg/500ml)， pH 7.2( 从 Cellgro 得到的 RPMI-1640， Cat# 10-041-Cm， Lot#10041059)。 67

    [1357] 采用 96 孔板测试以测定非放射性 Ga-AMBA 抑制 Ga-AMBA 与 GRP-R 的结合的 EC50。 将所有受试化合物溶解于结合缓冲液中， 在结合缓冲液中也进行适当的稀释。 为了该测试， -9 -9 以 1.0×10 M 至 50×10 M 的浓度， 将 AMBA 配体或非放射性金属络合物 Lu-AMBA 或 Ga-AMBA 67 与总体积为 75μL 的 Ga-AMBA(0.035μCi， 1.5μCi/mL) 共温育。 如下实施这些研究 ： 采用 75Ml/ 孔的测试体积， 每个数据点使用一式三份孔。在添加适当的溶液之后， 在 4℃温育板1 小时。在 4℃进行结合研究， 以预防配体 - 受体络合物的内化。通过添加 200μL 的冰冷 温育缓冲液， 结束温育。洗涤板 5 次并印记干燥。使用 LKB CompuGamma 计数器， 测定细胞 结合的放射活性。 通过 GraphPad Prizm 软件分析数据， 以得到抑制 50％结合需要的′有效 浓度′ (EC50 值 )。

    [1358] 使用板测试的 67Ga-AMBA 的饱和结合研究 ：

    [1359] 为了 67Ga-AMBA 的饱和结合， 使用下列一般方法 ： 如上文所述将 PC-3 细胞铺板， 当 67 汇合时， 然后将不同浓度 [0-50nM] 的添加了 Ga-AMBA 的 75μL 的载体 [ 储备液 ： 20μCi/ mL， 50nM] 以一式三份加入各孔， 在 4℃温育细胞 1 小时。在一个平行试验中， 采用多种浓度 67 的 Ga-AMBA 在大过量的冷 Ga-AMBA(1μM) 存在的情况下温育细胞， 以测定任何非特异性结 合 (NSB)。在洗去未结合的放射活性之后， 测定结合至细胞的总放射活性。使用 GraphPad Prism 软件分析数据， 以得到 Kd 和 Bmax 值。根据 Bmax 值计算受体数量。

    [1360] 内化和外向通量测试 ：

    [1361] 在 37 ℃，将 PC-3 细 胞 与 在 结 合 缓 冲 液 ( 总 测 试 体 积 75μL) 中 的 67 Ga-AMBA(100,000cpm， 75μL， 1μCi/mL) 温育 40min。通过添加 200μL 的冰冷结合缓冲液 停止温育， 通过采用结合缓冲液 (4℃ ) 洗涤 (4x) 移除未结合的放射活性。为了移除细胞 表面 - 结合的放射性配体， 在 0-5℃ ( 冰 - 浴 ) 用 0.2M 乙酸的盐水溶液 (pH 2.8) 温育细 胞 4min。从各孔单独地采集溶液 ( 酸洗涤介质 )。再次重复酸洗涤， 在 γ 计数器中计数混 合的溶液， 以测定表面结合的放射活性。然后在室温用通过 0.5N NaOH(100μL/ 孔 ) 处理 3min 裂解细胞。从各孔单独地采集溶液。再次重复用 0.5N NaOH 温育。计数混合的溶液， 以测定 PC-3 细胞内化的放射性物质的量。在 γ 计数器中分析所有样品。

    [1362] 为 了 外 向 通 量 研 究， 在 37 ℃ 将 PC-3 细 胞 与 67Ga-AMBA(75μL， 1μCi/mL) 温 育 40min 之后， 用冷结合缓冲液 (4℃ ) 洗去 (4x) 未结合的物质。将新鲜结合介质 (200μL) 加入至各孔， 温育细胞至多 3 小时。在 0、 1、 2 和 3h， 如上文所述测定在介质 ( 观察到的外向 通量 ) 中， 表面结合的 ( 酸洗涤 ) 和内化的 ( 裂解液 ) 放射活性。

    [1363] 因为在介质中观察到的外向通量可以含有从细胞表面释放的放射活性， 根据各时 间点细胞中保持内化的放射活性， 使用下列等式， 计算真实外向通量百分比 ：

    [1364] 显 示 AMBA 非 常 均 等 地 与 177Lu-AMBA 和 67Ga-AMBA 进 行 竞 争， EC50 分 别 是 2.95(+0.28) 和 2.89(+0.18)nM。类似地， 在 1.0-1.5nM[EC50] 下， AMBA 的 Lu- 和 Ga- 螯合 67 177 物与 Ga-AMBA 和 Lu-AMBA 进行竞争和交叉竞争。

    [1366] AMBA 配体和非放射性金属络合物与具有放射 - 标记的 AMBA 对 PC-3 细胞的竞争结 合的比较

    [1365] ＊结果是 3 个不同试验的平均值。#EC50 值不等于 kD， 因为最大浓度的 Ga-AMBA 不 足以实现饱和。

    [1369] 发现 Lu- 和 Ga-AMBA 甚至在比不含金属的 AMBA 低的浓度下， 都与 67Ga-AMBA 和 177 Lu-AMBA 进行竞争和交叉竞争。例如， 发现金属螯合物 (Lu-AMBA 和 Ga-AMBA) 的 EC50 值 是 在 1.0-1.5nM 的 范 围 中， 尽 管 不 含 金 属 的 AMBA 一 致 性 地 显 示 稍 微 更 高 的 EC50 值 (2.89-2.95nM)。

    [1370] 通过在 PC-3 中加入载体的 67Ga-AMBA 与 GRP-R 的饱和结合， 测定结合亲和力。通 过 Prizm 软件分析数据， 以得到亲和力 (kD) 和结合容量 (Bmax)。 根据 Bmax 值， 计算受体密度。

    [1368] 67 结果显示， 在 PC-3 细胞中， Ga-AMBA[kD 0.46±0.07nM] 对 GRP-R 的亲和力类似于 177 Lu-AMBA(kD 0.44±0.08nM)。类似地， 402f 摩尔 / 百万细胞的 Bmax 和受体数量 242,000/ 细胞类似于那些从 177Lu-AMBA 研究得到的 (Bmax 408f 摩尔 / 百万细胞， 和受体 245,000/ 细 胞 )。

    [1372] 通过 PC-3 细胞比较 67Ga-AMBA 和 177Lu-AMBA 的结合

    [1371] ＊结果是 3 个不同试验的平均值 ； # 高标准偏差源于三个值之一是异常值 ) 在将 Ga-AMBA 与 PC-3 细胞预温育后， 78.4％的总细胞结合的放射活性显示被内化， 和表面结合 的总计 20.9％。甚至在 3 小时之后， 几乎所有内化的活性保持内化。在 2h 测定的计算的外 向通量是 2.4％。表面结合的活性保持为总摄取的 15-20％。在多个时间点在介质中发现 的放射活性 ( 观察到的外向通量 ) 表现为几乎都来自细胞表面结合的活性。 发现 67Ga-AMBA 的内化和外向通量图是与 177Lu-AMBA 相同。

    [1375] 通过 PC-3 细胞比较内化和外向通量的放射 - 标记的 AMBA

    [1374] 67

    [1376] ( ＊结果是 3 个不同试验的平均值 )

    [1378] 实施例 CIII- 在具有 PC-3 肿瘤的免疫妥协的雄性小鼠中用镥 -177 或镓 -67 标记 的 AMBA 的生物分布数据

    [1379] 使用 HPLC 纯化物质的痕量水平的放射活性 (50μCi/mL)， 实施生物分布研究。称 重最接近 0.1g 的受试者 (n ＝ 4/ 镓 -67 组， n ＝ 9/ 镥 -177 组 )， 记录重量。将 0.1mL 剂量 67 177 的 Ga-AMBA(0.0002μg) 通过 i.v. 尾静脉， 或 Lu-AMBA(avg.0.0026μg) 给予各受试者。 在保留间隔结束时， 通过颈脱位法处死受试者。 在处死之后立即收集要评价的指定组织。 称 重等份的切除的器官， 组织， 和血 ( 至最接近的 mg)， 在 Perkin-Elmer， 14803” Wizard 自动 化 γ 计数器中评价残留的放射活性。将物质重量和相关的计数 / 分钟 (cpm) 转移至 Excel 电子表格以使用 GraphPadTM 进行其它统计学的分析。镥 -177 和镓 -67 在靶和非靶组织中

    [1377] 显示类似的全身生物分布和摄取， 除了使用 67Ga-AMBA 通过 Student′ s t- 检验时血中增 加的水平 (P ≤ 0.05)。特别是， 在 1 和 24 小时时间点的肿瘤摄取相当。

    [1380] 在 PC-3 异种移植物小鼠模型中 Lu-AMBA 和 Ga-AMBA 的分布。

    [1381] ＊ P ≤ 0.05 基于这些数据和体外数据， Lu-AMBA 是预见 Ga-AMBA 体外和体内行为的合理替代 实施例 CIV- 检测他莫昔芬对 GRP 受体结合 BT-474 人乳腺癌细胞在小鼠异种移植162品。

    [1384] 102076214 A CN 102076221说明书159/220 页物模型中的效果。

    [1385] 先前已经确立 177Lu-AMBA 作为用于 67Ga-AMBA 的经验证的替代品的用途 ( 实例 XCVI 和 XCVII)， 随后主要为了便利使用该替代品。

    [1386] 通过经由 s.c 移植的 60 天定时释放的小丸的 17β- 雌二醇给药， 使雌性裸小鼠 ([Ncr]-Foxn1) 接受激素补充 (0.72mg/60 天释放 ； 0.6mg/kg ； Innovative Research of America， Sarasota， FL)。在开始激素治疗之后 4 至 7 天， 将在 Matrigel(1 ∶ 1 与 PBS) 中的 1 千万 BT-474 细胞 s.c. 异种移植至小鼠肋腹。17β 雌二醇是肿瘤细胞生长在该模型 中需要的。

    [1387] 一 旦 通 过 s.c. 移 植 的 定 时 释 放 小 丸 (10mg/21 天 释 放 ； 25mg/kg ； Innovative 3 Research of America， Sarasota， FL) 使肿瘤达到平均尺寸 100-200mm ， 将他莫昔芬柠檬酸 盐每日给予具有 BT-474 肿瘤的小鼠。对照小鼠接受仅含赋形剂的定时释放小丸 ( 除了激 素支持 )。

    [1388] 在下列化学治疗给药开始后 14 天， 使用 177Lu-AMBA 作为 Ga-AMBA 的替代品， 实施低 剂量药物代谢动力学研究， 以测定相对于对照的 GRP-R 摄取。在所有研究中， 将 100μL 的 177 200μCi/kg 的 Lu-AMBA i.v. 给予小鼠， 采用 1 小时保留时间 / 每组 (n ＝ 3)。在采用适 当标准的 LKB 1282CompuGamma 计数器中分析组织。

    [1389] 结果 ： 采用他莫昔芬柠檬酸盐 (25mg/kg) 的治疗在补充 β2- 雌二醇 (0.6mg/kg) 的具有 BT-474 肿瘤的小鼠中显著减少肿瘤 GRP 受体特异性信号 (P ＜ 0.05)， 如相对于对照 177 肿瘤值的 Lu-AMBA 的结合减少 68％所表明。BT-474 肿瘤中摄取减少与采用相同细胞在 用 4-OH 他莫昔芬治疗的情况下的体外研究观察到的相当。

    [1390] 在具有 BT-474 肿瘤的裸小鼠 ( 采用 17β- 雌二醇进行激素补充 ) 中， 在 1 小时的 177 莫昔芬对 Lu-AMBA 分布的效果。

    [1391] 68 实施例 CV ： Ga-AMBA 的制备。

    [1393] a) 硒代蛋氨酸对 68Ga-AMBA RCP 的效果 ： 一式三份地进行 2 组的试验， 以测定硒 68 代 -L- 蛋氨酸 (Se-Met) 对 Ga-AMBA 的放射化学纯度 (RCP) 的效果。已经观察到， 硒代蛋 氨酸是这样的氨基酸， 其保护放射标记的化合物中敏感残基使其免受放射性损伤， 特别是， 在 AMBA 配体 (-QWAVGHLM-NH2) 的靶向基团中的蛋氨酸残基。

    [1394] 在第一组的试验中， 在 Se-Met 的存在下制备 68Ga-AMBA， 而在第二组中， 在没有 68 Se-Met 的情况下制备 Ga-AMBA。比较两组的结果。为了限制暴露于操作者， 使用自动化合 68 成仪 TRACERlab FX-FN 实施合成。 在两种情况下， 如下得到 Ga 放射同位素溶液 ： 使用注射 68 68 器泵， 以 1.5mL/min 的流速， 采用 5mL 的 0.1M HCl 洗脱， 洗脱 Ge/ Ga 产生器。采集峰级分 (1mL)， 将其用于研究。

    [1395] 在 Se-Met 存在的情况下合成 68Ga-AMBA ： 通过将 AMBA 配体 (122 至 123μg) 溶解 在 0.2M 醋酸钠 (NaOAc) 缓冲液 (pH 4.5， 含有 1mg/mLSe-Met(Aldrich)) 中， 制备制剂溶液。 68 最终 AMBA 浓度是 120μg/mL。向 1mL(6.4to 7.6mCi) 的 Ga 产生器洗脱液中加入 100μL 的 AMBA 制剂 ( 包含 12μg 的 AMBA) 和通过混合 120μL H2O 与含有 13.1mg NaOAc 的 80μL 用于注射 (Hospira) 的 USP 乙酸钠制备的 200μL NaOAc 溶液。在 95℃加热该溶液 7 分钟， 冷却至 30℃， 转移至小瓶以进行 HPLC 分析。 为了洗涤反应器和来自反应器的管以使其进入 并将其转移至产物小瓶。 产物小瓶， 将 10％ EtOH 的 H2O(3mL) 溶液引入反应器，

    [1396] 在 Zorbax Bonus-RP 柱 (4.6×250mm ； 5μm， Agilent) 上实施 HPLC 分析， 使用四元 梯度， 其中 A ： H2O ； B： 30mM(NH4)2SO4/0.1％ TFA(v ∶ v) ； C： 乙腈 (ACN) ； D： 甲醇 (MeOH)， 流速 ＝ 1.5mL/min， 柱温＝ 37℃。使用的梯度显示如下。

    [1397] 在不存在 e-Met 的情况下的 68Ga-AMBA 的合成 ： 如下制备制剂溶液 ： 将 AMBA 配体 (106 至 134μg) 溶解在 0.2M NaOAc 缓冲液 (pH 4.5) 中， 获得 120μg/mL 的最终浓度。向 68 1mL(6.6 至 7.5mCi) 的 Ga 产生器洗脱液中加入 100μL 的 AMBA 制剂 ( 包含 12μg 的 AMBA) 和通过混合 120μL H2O 与含有 13.1mg NaOAc 的 80μL 用于注射 (Hospira) 的 USP 乙酸钠 制备的 200μL NaOAc 溶液。在 95℃加热该溶液 7 分钟， 冷却至 30℃， 将其转移至小瓶以进 行 HPLC 分析。 为了洗涤反应器和来自反应器的管以使其进入产物小瓶， 将 10％ EtOH 的 H2O

    [1398] 溶液 (3mL) 引入反应器， 并将其转移至产物小瓶。

    [1399] 采用先前描述的柱和方法实施 HPLC 分析。试验的结果显示在下列表 27 和 28 和 放射色谱中。显示了在标记后 t ＝ 0， 1 小时， 和 2 小时得到的放射化学纯度 (RCP) 值。

    [1400] 表 27

    [1401] 硒代蛋氨酸对 68Ga-AMBA 的 RCP 的效果

    [1402] 表 28

    [1405] 不存在 ( 顶部图 ) 和存在 ( 底部图 ) 硒代蛋氨酸时的 68Ga-AMBA 反应的通常放射痕迹

    [1407] 根据上述表和放射色谱， 清楚的是， Se-Met 预防 68Ga-AMBA 中蛋氨酸残基的氧化。它也预防其它 68Ga- 标记的亲水杂质的形成。当使用 Se-Met 时得到了至多 96 ％ (93.7±3.2％ ) 的 RCP 值， 而不存在 Se-Met 时得到 83.3±2.1％ RCP。

    [1409] (b) 抗坏血酸和盐水对 68Ga-AMBA 稳定性的效果。以一式三份进行 2 组的试验， 以 68 测定用含有抗坏血酸和盐水的放射稳定剂溶液稀释 Sep-Pak 纯化 Ga-AMBA 的效果。通过 混合 9 份正常的盐水与 1 份 ASCOR L 制备稳定剂溶液。Ascor L500(McGuff) 是用于 注射的抗坏血酸 USP 溶液， 并包含 500mg/mL 钠抗坏血酸盐， 依地酸盐二钠 (0.025％ )， 注射 用水 (q.s.) 和用于 pH 调节 (pH 5.5 至 7.0) 的碳酸氢钠。

    [1410] 在第一组的试验中， 在纯化 Sep-Pak 之后， 将 68Ga-AMBA 与 4mL 的盐水混合， 而在第 二组中， 将它用 3mL 的 9Saline ： 1Ascor 和 1mL 的 H2O 稀释。比较两组的结果。

    [1411] 不采用 9Saline ： 1Ascor 合成 68Ga-AMBA。

    [1412] 为了限制暴露于操作者， 使用自动化合成仪 TRACERlab FX-FN 实施合成。通 过 将 AMBA 配 体 (120μg) 溶 解 在 0.2M 醋 酸 钠 (NaOAc) 缓 冲 液 (pH 4.5 含 有 1mg/mL Se-Met(Aldrich)) 中， 制备制剂溶液。最终 AMBA 浓度是 120μg/mL。向 1mL 的 68Ga 产生 器洗脱液中加入 100μL(12μg) 的 AMBA 制剂和通过混合 120μL H2O 与 80μL(13.1mg)USP NaOAc(Hospira) 制备的 200μL NaOAc 溶液。在 95℃加热该溶液 7 分钟， 冷却至 30℃， 将其 通过 转移至用 3mL 的 EtOH 和 8mL 的 H2O 调节的 WatersC18Light Sep-Pak。为了增加回收， 将 2ml 的 10％ EtOH 的 H2O 溶液引入反应器洗涤反应器和从反应器至产物小瓶的管， 将该溶 液转移至 Sep-Pak。用 4mL 的 H2O 洗涤 Sep-Pak， 将产物 (5.5 至 5.8mCi) 洗脱入含 500μL 的 EtOH 的产物小瓶。然后用 4mL 的盐水漂洗 Sep-Pak， 将其采集在产物小瓶中。使用先前 描述的柱和方法实施 HPLC 分析。

    [1413] 采用 9Saline ： 1Ascor 合成 68Ga-AMBA。

    [1414] 向 1mL 的 68Ga 产生器洗脱液中加入 100μL(12μg) 如上文所述制备的 AMBA 制剂 和通过混合 120μL H2O 与 80μL(13.1mg)USP NaOAc(Hospira) 制备的 200μL NaOAc 溶液。 在 95℃加热该溶液 7 分钟， 冷却至 30℃， 将其转移至 Waters C18 light Sep-Pak。为了增 加回收， 通过将 2mL 的 10％ EtOH 的 H2O 溶液引入反应器中， 洗涤反应器和从反应器至产物 小瓶的管， 将该溶液转移至 Sep-Pak。用 4mL 的 H2O 洗涤 Sep-Pak， 用 500uL 的 EtOH 将产物 (4.6 至 4.9mCi) 洗脱入产物小瓶， 其包含 3mL 的 9 ∶ 1 Saline 的混合物 ( 来自 Hospira 的 USP) ： Ascor(McGuff Pharmaceuticals)。然后用 1mL 的 H2O 漂洗 Sep-Pak， 将其采集在产物 小瓶中。

    [1415] 采用先前描述的柱和方法实施 HPLC 分析。试验的结果显示在下列表 29 和 30 ：

    [1416] 表 29

    [1417] 表 30

    [1419] 在 t ＝ 0 和 t ＝ 1 小时的 RCP 在统计学无差异 (P ≤ 0.05)。产物在 t ＝ 2 小时的 RCP 值在统计学上不同 (P ≤ 0.05)， 表明混合物 9 份 Saline ： 1 份 Ascor 作为放射保护剂发 挥作用。

    [1421] 采用 1mL 的产生器洗脱液和 100μL 的 AMBA 制剂合成的 68Ga-AMBA

    [1422] 为了限制暴露于操作者， 使用自动化合成仪 TRACERlab FX-FN 实施合成。 向 1mL 的 68 Ga 产生器洗脱液中加入如上文所述制备的 100μL(12μg) 的 AMBA 制剂和通过混合 120μL H2O 与 80μL(13.1mg)USPNaOAc(Hospira) 制备的 200μL 的 NaOAc 溶液。在 95 ℃加热该

    [1420] 溶液 7 分钟， 冷却至 30℃， 将其转移至 Waters C18 light Sep-Pak。为了增加回收， 将 2mL 的 10％ EtOH 的 H2O 溶液引入反应器， 洗涤反应器和从反应器至产物小瓶的管， 将该溶液转 移至 Sep-Pak。用 4mL 的 H2O 洗涤 Sep-Pak， 将产物 (4.6 至 4.9mCi) 洗脱入产物小瓶， 其含 有 3mL 的 9Saline( 来自 Hospira 的 USP) ： 1Ascor(McGuff Pharmaceuticals) 和 500uL 的 EtOH。然后用 1mL 的 H2O 漂洗 Sep-Pak， 将其采集入产物小瓶。

    [1423] 采用先前描述的柱和方法实施 HPLC 分析。试验的结果显示在表 31 中 ：

    [1424] 表 31

    [1425] 采用 3mL 的产生器洗脱液， 400μL 的 AMBA 制剂合成 68Ga-AMBA 和 HPLC 纯化

    [1427] 在该研究中， 使用更大量的 Ga 产生器洗脱液， 增加反应混合物中 AMBA 制剂的量。 HPLC 纯化产物以在反应之后移除游离配体。为了限制暴露于操作者， 使用自动化合成仪 TRACERlab FX-FN 实施合成。

    [1428] 向 3mL 的 68Ga 产生器洗脱液中加入如上文所述制备的 400μL(48μg) 的 AMBA 制 剂和含有 36mg NaOAc 的 220μL USP NaOAc(Hospira)。在 95℃加热该溶液 7 分钟， 冷却至 30℃， 加入 881μL 的 H2O 和 500μL 的 EtOH。 使用 MN Nucleosil 柱 (100-7C18， 20×250mm)， 通过 HPLC 纯化该溶液， 采用 29％ CH3CN/81％ H2O， 以 5mL/min 进行洗脱。 将所关注的含有产 物的级分采集入含有 10mL 的 H2O 的容器。将该溶液装载至用 3mL 的 EtOH 和 8ml 的 H2O 调 节的 Waters C18Sep-Pak。用 4mL 的 H2O 洗涤 Sep-Pak， 将产物 (4.7 至 5.4mCi， n ＝ 4) 洗

    [1426] 脱入含 500μL 的 EtOH 的产物小瓶。然后用 3mL 的 H2O 漂洗 Sep-Pak， 将其采集在产物小瓶 中。

    [1429] 使用先前描述的柱和方法实施 HPLC 分析。试验结果显示在表 32 中 ：

    [1430] 表 32

    [1431] 本发明的实施方案 提供下文以阐述本发明， 而不限制本发明的多种实施方案 ： 1. 如下通式的化合物 ：M-N-O-P-G

    [1436] 其中

    [1437] M 是光性学标记或金属螯合物， 任选地与放射性核素络合 ；

    [1438] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [1439] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 且

    [1440] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [1441] 且 G 是靶向 GRP 受体的肽，

    [1442] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是非 α 氨基酸。

    [1443] 2. 实施方案 1 的化合物， 其中 G 是具有激动剂活性的激动剂或肽。

    [1444] 3. 实施方案 1 的化合物， 其中所述非 α 氨基酸选自 ：

    [1445] 8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 ；

    [1446] N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪 - 乙酸 ； 和

    [1447] 具有式 NH2-(CH2CH2O)n-CH2CO2H 或 NH2-(CH2CH2O)n-CH2CH2CO2H， 其中 n ＝ 2 至 100 的聚乙二醇衍生物。

    [1448] 4. 实施方案 1 的化合物， 其中所述金属螯合剂选自 DTPA、 DOTA、 DO3A、 HP-DO3A、 EDTA、 TETA、 EHPG、 HBED、 NOTA、 DOTMA、 TETMA、 PDTA、 TTHA、 LICAM、 MECAM 和 CMDOTA。

    [1449] 5. 实施方案 1 的化合物， 其中所述金属螯合剂选自

    [1450] N， N- 二甲基 Gly-Ser-Cys ；

    [1451] N， N- 二甲基 Gly-Thr-Cys ；

    [1452] N， N- 二乙基 Gly-Ser-Cys ； 和

    [1453] N， N- 二苄基 Gly-Ser-Cys。

    [1454] 6. 实施方案 1 的化合物， 其中所述金属螯合剂选自

    [1455] N， N- 二甲基 Gly-Ser-Cys-Gly ；

    [1456] N， N- 二甲基 Gly-Thr-Cys-Gly ；N， N- 二乙基 Gly-Ser-Cys-Gly ； 和

    [1458] N， N- 二苄基 Gly-Ser-Cys-Gly.

    [1459] 7. 实施方案 1 的化合物， 选自 ：

    [1460] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Lys-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1461] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Arg-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1462] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1463] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Ser-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1464] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1465] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Glu-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1466] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Dala-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1467] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1468] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1469] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1470] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1471] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1472] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Glu-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1473] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Dala-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1474] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1475] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基 丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1476] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1477] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂 辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1479] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Asp-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1480] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1481] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Arg-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1482] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [1483] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基 丙酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1484] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Lys-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1485] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂 1； 辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ：

    [1486] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1487] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1488] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1489] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1490] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -2， 3- 二 氨基丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1491] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1492] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1493] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1494] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1495] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌 嗪 乙 酸 -2， 3- 二 氨 基 丙 酸 BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1497] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所

    [1496] 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1498] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-4- 羟基脯氨酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1499] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-4- 氨基脯氨酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1500] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Lys-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1501] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Arg-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1502] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Ser-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1503] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1504] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Asp-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1505] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1506] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Arg-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1507] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [1508] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基 丙酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1509] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Lys-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； 和

    [1510] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂 辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [1511] 8. 实施方案 1 的化合物， 选自 ：

    [1512] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-Lys-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1513] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-Arg-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1514] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-Asp-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1515] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-Ser-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1516] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1517] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-Glu-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1518] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-Dala-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1519] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Lys-BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1520] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Arg-BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1521] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Asp-BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1522] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Ser-BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1523] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1524] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Glu-BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1525] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Dala-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1526] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二 氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1527] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基丙 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1528] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1529] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1530] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1531] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Asp-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1532] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1533] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Arg-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1534] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二 氧杂辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1535] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基丙 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Lys-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1536] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1538] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1539] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1540] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1541] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1542] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -2， 3- 二氨基 丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1543] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1544] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1545] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1546] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1547] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-N-1- 哌 嗪 乙 酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1548] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -2， 3- 二氨基丙酸 BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1549] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1550] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-4- 羟 基 脯 氨 酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1551] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-4- 氨 基 脯 氨 酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1552] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-Lys-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1553] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-Arg-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1554] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-Ser-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1555] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1556] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛酸 -Asp-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1557] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1558] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Arg-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1559] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二 氧杂辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1560] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基丙 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1561] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Lys-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； 和

    [1562] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1.

    [1563] 9. 实施方案 1 的化合物， 选自 ：

    [1564] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 - 二氨基丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1565] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1566] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1567] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -4- 苯甲酰基苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1568] DO3A- 单酰胺 -5- 氨基戊酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1569] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -D- 苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； 和

    [1570] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [1571] 10. 实施方案 1、 2 或 3 任一项的化合物， 其中所述光学标记选自有机发色团、 有机 荧光团、 光吸收化合物、 光反射化合物、 光散射化合物以及生物发光分子。

    [1572] 11. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1573] 给予患者包括实施方案 1 的化合物的诊断的显像剂， 其中 M 是与诊断性放射性核 素络合的金属螯合剂， 且

    [1574] 将所述患者成像。

    [1575] 12. 包括下述步骤的方法成像 ：

    [1576] 给予患者诊断包括实施方案 8 的化合物的显像剂， 所述显像剂与诊断性放射性核 素络合， 且

    [1577] 将所述患者成像。 13. 包括下述步骤的成像方法 ：给予患者诊断包括实施方案 1 的化合物的显像剂， 其中 M 是光学标记， 且

    [1580] 将所述患者成像。

    [1581] 14. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1582] 给予患者诊断包括实施方案 10 的化合物的显像剂， 且

    [1583] 将所述患者成像。

    [1584] 15. 用于制备诊断的显像剂的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 将包括实施方案 1 的 化合物的物质加入至可注射的介质。

    [1585] 16. 治疗患者的方法， 所述方法包括如下步骤 ： 给予患者包括实施方案 7、 8或9的 化合物的放射治疗剂， 所述放射治疗剂与治疗放射性核素络合。

    [1586] 17. 包括如下步骤的治疗患者的方法 ： 给予患者包括实施方案 4 的化合物的放射 治疗剂， 所述放射治疗剂与治疗放射性核素络合。

    [1587] 18. 包括下述步骤的放射治疗剂的制备方法 ： 将包括实施方案 7、 8 或 9 的化合物 的物质加入至可注射的介质。

    [1588] 19. 包括下述步骤的放射治疗剂的制备方法 ： 将包括实施方案 4 的化合物的物质 加入至可注射的介质。

    [1589] 20. 如下通式的化合物 ：

    [1590] M-N-O-P-G

    [1591] 其中

    [1592] M 是光学标记或金属螯合物， 任选与放射性核素络合 ；

    [1593] N 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ；

    [1594] O 是 α 氨基酸或取代的胆酸 ； 且

    [1595] P 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ； 且

    [1596] G 是靶向 GRP 受体的肽， 且

    [1597] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是取代的胆酸。

    [1598] 21. 实施方案 20 的化合物， 其中 G 是具有激动剂活性的激动剂或肽。

    [1599] 22. 实施方案 20 的化合物， 其中所述取代的胆酸选自 ：

    [1600] 3β- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 ；

    [1601] (3β， 5β)-3- 氨基胆烷 -24- 酸 ；

    [1602] (3β， 5β， 12α)-3- 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 ；

    [1603] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 ；

    [1604] Lys-(3， 6， 9)- 三氧杂癸烷 -1， 11- 二羰基 -3， 7- 二脱氧 -3- 氨基胆汁酸 ) ；

    [1605] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7- 羟基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸 ； 和

    [1606] (3β， 5β， 7α)-3- 氨基 -7- 羟基胆烷 -24- 酸。

    [1607] 23. 实施方案 20 的化合物， 其中 M 选自 ： DTPA、 DOTA、 DO3A、 HPDO3A、 EDTA、 TETA 和 CMDOTA。

    [1608] 24. 实施方案 20 的化合物， 其中 M 选自 EHPG 和其衍生物。

    [1609] 25. 实 施 方 案 20 的 化 合 物， 其 中 M 选 自 5-Cl-EHPG、 5-Br-EHPG、 5-Me-EHPG、 5-t-Bu-EHPG 和 5-sec-Bu-EHPG。

    [1610] 26. 实施方案 20 的化合物， 其中 M 选自苯并二亚乙基三胺戊乙酸 ( 苯并 DTPA) 和其衍生物。

    [1611] 27. 实施方案 20 的化合物， 其中 M 选自二苯并 DTPA、 苯基 DTPA、 二苯基 DTPA、 苄基 DTPA 和二苄基 DTPA。

    [1612] 28. 实施方案 20 的化合物， 其中 M 选自 HBED 和其衍生物。

    [1613] 29. 实施方案 20 的化合物， 其中 M 是包含至少 3 个碳原子和至少 2 个杂原子 (O 和 / 或 N) 的大环化合物， 其大环化合物可以由以杂环元素连接的 1 个、 2 个或 3 个环组成。

    [1614] 30. 实施方案 20 的化合物， 其中 M 选自苯并 DOTA、 二苯并 DOTA、 苯并 NOTA、 苯并 TETA、 苯并 DOTMA 和苯并 TETMA。

    [1615] 31. 实施方案 20 的化合物， 其中 M 选自 1， 3- 丙稀二胺四乙酸 (PDTA) 和三亚乙基 四胺六乙酸 (TTHA) 的衍生物 ； 1， 5， 10-N， N′， N” 三 (2， 3- 二羟基苯甲酰基 ) 三儿茶酚酯 (LICAM) 和 1， 3， 5-N， N′， N” 三 (2， 3- 二羟基苯甲酰基 ) 氨基甲基苯 (MECAM) 的衍生物。

    [1616] 32. 实施方案 20 的化合物选自 ：

    [1617] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β)-3- 氨 基 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1618] DO3A- 单酰胺 -Gly-(3β， 5β， 12α)-3- 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1619] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1620] DO3A- 单酰胺 -Gly-Lys-(3， 6， 9)- 三氧杂癸烷 -1， 11- 二羰基 -3， 7- 二脱氧 -3- 氨 基胆汁酸 )-Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1621] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -3， 6， 9- 三氧杂癸烷 -1， 11- 二羰基

    [1622] Pglu-Q-Lys(DO3A- 单酰胺 -Gly)-Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1623] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3 β， 5 β， 7 α， 12 α )-3- 氨 基 -12- 氧 代 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1624] DO3A- 单酰胺 -1- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二 羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1625] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVaHLM-NH2 其中 QWAVaHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 14 ；

    [1626] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-QWAVGHLM-NH2 其中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1；

    [1627] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-WAVGHLL-NH2 其中 WAVGHLL-NH2 是 SEQ ID NO ： 26 ；

    [1628] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-QWAVGHL-NH- 戊基其中 QWAVGHL-NH- 戊基是 SEQ ID NO ： 6； DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -y-QWAV-Bala- 小 时 -F-Nle-NH2 其 中 QWAV-Bala- 小 时 -F-Nle-NH2 是 SEQ ID NO ： 9；

    [1629] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-QWAV-Bala- 小时 -F-Nle-NH2 其中 QWAV-Bala- 小时 -F-Nle-NH2 是 SEQID NO ： 9；

    [1631] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVGHFL-NH2 其中 QWAVGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 22

    [1632] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVGNMeH-L-M-NH2 其中 QWAVGNMeH-L-M-NH2 是 SEQ IDNO ： 15 ；

    [1633] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -LWAVGSF-M-NH2 其中 LWAVGSF-M-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；

    [1634] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -HWAVGHLM-NH2 其中 HWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 12 ；

    [1635] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -LWAGHFM-NH2 其中 LWAGHFM-NH2 ？是 SEQ ID NO ： 20 ；

    [1636] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVGHFM-NH2 其中 QWAVGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 13 ；

    [1637] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QRLGNQWAVGHLM-NH2 其中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 3；

    [1638] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2 其中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 4；

    [1639] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2 其中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 5；

    [1640] Pglu-Q-Lys(DO3A- 单 酰 胺 )-Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -LGNQWAVGHLM-NH2 其中 LGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 18.

    [1641] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QRLGNQWAVGHLM-NH2 其 中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 3；

    [1642] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2 其 中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 4；

    [1643] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2 其 中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 5； 和

    [1644] Pglu-Q-Lys(DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 )-LGNQWAVGHLM-NH2 其中 LGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 18.

    [1645] 33. 实施方案 20、 21 或 22 任一项的化合物， 其中所述光学标记选自有机发色团、 有 机荧光团、 光吸收化合物、 光反射化合物、 光散射化合物以及生物发光分子。

    [1646] 34. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1647] 给予患者包括实施方案 20 的化合物的诊断的显像剂， 其中 M 是与诊断性放射性核 素络合的金属螯合剂， 且

    [1648] 将所述患者成像。

    [1649] 35. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1650] 给予患者包括实施方案 32 的化合物的诊断的显像剂， 且将所述患者成像。

    [1652] 36. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1653] 给予患者包括实施方案 20 的化合物的诊断的显像剂， 其中 M 是光学标记， 且

    [1654] 将所述患者成像。

    [1655] 37. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1656] 给予患者包括实施方案 33 的化合物的诊断的显像剂， 且

    [1657] 将所述患者成像。

    [1658] 38. 用于制备诊断的显像剂的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 将包括实施方案 20 的化合物的物质加入至可注射的介质。

    [1659] 39. 治疗患者的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予患者包括实施方案 20 的化合 物的放射治疗剂， 所述放射治疗剂与治疗放射性核素络合。

    [1660] 40. 放射治疗剂的制备方法， 所述方法包括下述步骤 ： 将包括实施方案 20 的化合 物的物质加入至可注射的介质。

    [1661] 41. 化 合 物 DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1.

    [1662] 42. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1663] 给予患者包括 DO3A- 单酰胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14) 的诊断的显像剂， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1， 所述诊 断的显像剂与诊断性放射性核素络合， 且

    [1664] 将所述患者成像。

    [1665] 43. 用于制备诊断的显像剂的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 加入至可注射的介 质化合物包括 DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [1666] 44. 治疗患者的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予患者包括实施方案 41 的化合 物的放射治疗剂， 所述放射治疗剂与治疗放射性核素络合。

    [1667] 45. 放射治疗剂的制备方法， 所述方法包括下述步骤 ： 将包括实施方案 41 的化合 物的物质加入至可注射的介质。

    [1668] 46. 化合物 DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [1669] 47. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1670] 给予患者包括 DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14) 的诊断的显像剂， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1， 所述诊断的显像剂与诊断性放射性核素络合， 且

    [1671] 48. 用于制备诊断的显像剂的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 将包括 DO3A- 单酰 胺 -Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14) 的化合物加入至可注射的介质， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1。

    [1672] 49. 治疗患者的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予患者包括实施方案 46 的化合 物的放射治疗剂， 所述放射治疗剂与治疗放射性核素络合。

    [1673] 50. 放射治疗剂的制备方法， 所述方法包括下述步骤 ： 将包括实施方案 46 的化合 物的物质加入至可注射的介质。51. 如下通式的化合物 ： M-N-O-P-G 其中 M 是任选地与放射性核素络合的光学标记或金属螯合物 ； N 是 0、 具有环状基团的 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ； O 是具有环状基团的 α 或非 α 氨基酸 ； 且 P 是 0、 具有环状基团的 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团， 且 G 是靶向 GRP 受体的肽， 其中 N、 O 或 P 中至少一个是具有环状基团的非 α 氨基酸。 52. 实施方案 51 的化合物， 其中 G 是其具有激动剂活性的激动剂或肽。 53. 实施方案 51 的化合物， 其中所述具有环基团的非 α 氨基酸选自 ： 4- 氨基苯甲酸 ； 4- 氨基甲基苯甲酸 ； 反式 -4- 氨基甲基环己烷羧酸 ； 4-(2- 氨基乙氧基 ) 苯甲酸 ； 六氢异烟酸 ； 2- 氨基甲基苯甲酸 ； 4- 氨基 -3- 硝基苯甲酸 ； 4-(3- 羧甲基 -2- 氧代 -1- 苯并咪唑基 )- 哌啶 ； 6-( 哌嗪 -1- 基 )-4-(3H)- 喹唑啉酮 -3- 乙酸 ； (2S， 5S)-5- 氨基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六氢 - 氮杂卓并 [3， 21-hi] 吲哚 -4- 酮 -2- 羧酸； (4S， 7R)-4- 氨基 -6- 氮杂 -5- 氧代 -9- 硫代双环 [4.3.0] 壬烷 -7- 羧酸 ；

    [1696] 3- 羧甲基 -1- 苯基 -1， 3， 8- 三氮杂螺 [4.5] 癸烷 -4- 酮 ；

    [1697] N1- 哌嗪乙酸 ；

    [1698] N-4- 氨基乙基 -N-1- 乙酸 ；

    [1699] (3S)-3- 氨基 -1- 羧甲基己内酰胺 ； 和

    [1700] (2S， 6S， 9)-6- 氨基 -2- 羧甲基 -3， 8- 二氮杂双环 -[4， 3， 0]- 壬烷 -1， 4- 二酮。

    [1701] 54. 实施方案 51 的化合物， 其中 M 选自 ： DTPA、 DOTA、 DO3A、 HPDO3A、 EDTA 和 TETA。

    [1702] 55. 实施方案 51 的化合物， 其中 M 选自 EHPG 和其衍生物。

    [1703] 56. 实 施 方 案 51 的 化 合 物， 其 中 M 选 自 5-Cl-EHPG、 5-Br-EHPG、 5-Me-EHPG、 5-t-Bu-EHPG 和 5-sec Bu EHPG.

    [1704] 57. 实施方案 51 的化合物， 其中 M 选自苯并二亚乙基三胺戊乙酸 ( 苯并 DTPA) 和 其衍生物。

    [1705] 58. 实施方案 51 的化合物， 其中 M 选自二苯并 DTPA、 苯基 DTPA、 二苯基 DTPA、 苄基 DTPA 和二苄基 DTPA。

    [1695] 59. 实施方案 51 的化合物， 其中 M 选自 HBED 和其衍生物。

    [1707] 60. 实施方案 51 的化合物， 其中 M 是包含至少 3 个碳原子和至少 2 个杂原子 (O 和 / 或 N) 的大环化合物， 所述大环化合物可以由 1 个、 2 个或 3 个环通过杂环元素连接而组成。

    [1706] 61. 实施方案 51 的化合物， 其中 M 选自苯并 DOTA、 二苯并 DOTA、 苯并 NOTA、 苯并 TETA、 苯并 DOTMA 和苯并 TETMA。

    [1709] 62. 实施方案 51 的化合物， 其中 M 选自 1， 3 丙稀二胺四乙酸 (PDTA) 和三亚乙基四 胺六乙酸 (TTHA) 的衍生物 ； 1， 5， 10N， N′， N” 三 (2， 3 二羟基苯甲酰基 ) 三儿茶酚酯 (LICAM) 和 1， 3， 5N， N′， N” 三 (2， 3 二羟基苯甲酰基 ) 氨基甲基苯 (MECAM) 的衍生物。

    [1710] 63. 实施方案 51 的化合物， 选自

    [1711] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1712] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1713] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己基羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1714] DO3A- 单酰胺 -4-(2- 氨基乙氧基 ) 苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；

    [1715] DO3A- 单酰胺 -Gly- 六氢异烟酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1716] DO3A- 单酰胺 -2- 氨基甲基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1717] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基 -3- 硝基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1718] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -1- 萘基丙胺酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1719] DO3A- 单酰胺 -4-(3- 羧甲基 -2- 氧代 -1- 苯并咪唑基 - 哌啶 -BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1720] DO3A- 单酰胺 -6-( 哌嗪 -1- 基 )-4-(3H)- 喹唑酮 -3- 乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1721] DO3A- 单 酰 胺 -(2S， 5S)-5- 氨 基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六 氢 - 氮 杂 卓 [3， 21-hi] 吲 哚 -4- 酮 -2- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1722] DO3A- 单 酰 胺 -(4S， 7R)-4- 氨 基 -6- 氮 杂 -5- 氧 代 -9- 硫 代 双 环 [4.3.0] 壬 烷 -7- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1723] DO3A- 单酰胺 -N， N- 二甲基甘氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1724] DO3A- 单 酰 胺 -3- 羧 甲 基 -1- 苯 基 -1， 3， 8- 三 氮 杂 螺 [4.5] 癸 烷 -4- 酮 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1725] DO3A- 单酰胺 -N1- 哌嗪乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQID NO ： 1；

    [1726] DO3A- 单酰胺 -N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1727] DO3A- 单 酰 胺 -(3S)-3- 氨 基 -1- 羧 甲 基 己 内 酰 胺 -BBN(7-14)， 其中所述BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1728] DO3A- 单酰胺 -(2S， 6S， 9)-6- 氨基 -2- 羧甲基 -3， 8- 二氮杂双环 -[4， 3， 0]- 壬 烷 -1， 4- 二酮 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1729] DO3A- 单酰胺 -5- 氨基戊酸 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1730] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -D- 苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1731] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯甲酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中 所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1732] DO3A- 单酰胺 -4- 苯甲酰基 -(L)- 苯丙氨酸 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1733] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1734] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1735] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1736] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -1- 萘基丙胺酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1737] DO3A- 单 酰 胺 - 反 式 -4- 氨 基 甲 基 环 己 烷 -1- 羧 酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1738] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1739] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -2， 3- 二氨基丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1740] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1741] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -(2S， 5S)-5- 氨基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六氢 - 氮杂卓 [3， 21-hi] 吲哚 -4- 酮 -2- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；

    [1742] DO3A- 单 酰 胺 - 反 式 -4- 氨 基 甲 基 环 己 烷 -1- 羧 酸 - 反 式 -4- 氨 基 甲 基 环 己 烷 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1743] DO3A- 单 酰 胺 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 - 苯 丙 氨 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1744] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 - 苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中 所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； DO3A- 单酰胺 -8- 氨基辛酸 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1746] DO3A- 单酰胺 -4’ - 氨基甲基 - 二苯基 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14)

    [1745] 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1747] DO3A- 单酰胺 -3’ - 氨基甲基 - 二苯基 -3- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1748] CMDOTA-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1749] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯氧基乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1750] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯基乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1751] HPDO3A-4- 苯氧基 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1752] DO3A- 单酰胺 -3- 氨基甲基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1753] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯基乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1754] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基 -3- 甲氧基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1755] Boa-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [1756] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 肼基苯甲酰基 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1757] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1758] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基苯甲酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1759] DO3A- 单酰胺 -Gly-6- 氨基烟碱酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1760] DO3A- 单酰胺 -Gly-4’ - 氨基 -2’ - 甲基二苯基 -4- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1761] DO3A- 单酰胺 -Gly-3’ - 氨基二苯基 -3- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1762] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-1， 2- 二 氨 基 乙 基 - 对 苯 二 甲 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1763] DO3A- 单酰胺 -Gly-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1764] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -EWAVGHLM-NH2， 其中 EWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 2；

    [1765] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHLM-OH， 其中 QWAVGHLM-OH 是 SEQ ID NO ： 1；

    [1766] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -(D)-Phe-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QRLGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 3；

    [1768] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 4；

    [1769] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 5；

    [1770] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -(D)-Phe-QWAVGHL-NH-Pentyl，其 中 QWAVGHL-NH- 戊基是 SEQ ID NO ： 6；

    [1771] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWSVaHLM-NH2， 其中 QWSVaHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 7；

    [1772] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -(D)-Phe-QWAVGHLL-NH2， 其中 QWAVGHLL-NH2 是 SEQ ID NO ： 8；

    [1773] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -(D)-Tyr-QWAV-Bala-HF-Nle-NH2，其 中 QWAV-Bala-HF-Nle-NH2 是 SEQ ID NO ： 9；

    [1774] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -Phe-QWAV-Bala-HF-Nle-NH2， 其 中 9； QWAV-Bala-HF-Nle-NH2 是 SEQ ID NO ：

    [1775] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAGHFL-NH2， 其中 QWAGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 10 ；

    [1776] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -LWAVGSFM-NH2， 其中 LWAVGSFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；

    [1777] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -HWAVGHLM-NH2， 其中 HWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 12 ；

    [1778] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -LWAVGSFM-NH2， 其中 LWAVGSFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；

    [1779] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHFM-NH2， 其中 QWAVGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 13 ；

    [1780] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1781] DO3A- 单酰胺 -Gly-6- 氨基萘甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1782] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 甲基氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1783] Cm4pm10d2a-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1784] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1786] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 甲氧基 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14)

    [1785] 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1787] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 氯 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；

    [1788] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 甲基 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1

    [1789] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 羟基 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1790] (DO3A- 单酰胺 )2-N， N′ - 双 (2- 氨基乙基 )- 琥珀酰胺酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [1791] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHFL-NH2 其中 QWAVGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 22

    [1792] DO3A- 单 酰 胺 -4- 氨 基 甲 基 苯 甲 酸 -L-1- 萘 基 丙 胺 酸 -QWAVGHLM-NH2 其 中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1； 和

    [1793] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGNMeHLM-NH2 其中 QWAVGNMeHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 15.

    [1794] 64. 实施方案 51、 52 或 53 任一项的化合物， 其中所述光学标记选自有机发色团、 有 机荧光团、 光吸收化合物、 光反射化合物、 光散射化合物以及生物发光分子。

    [1795] 65. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1796] 给予患者包括实施方案 51 的化合物的诊断的显像剂， 其中 M 是与诊断性放射性核 素络合的金属螯合剂， 且

    [1797] 将所述患者成像。

    [1798] 762]66. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1799] 给予患者的诊断的显像剂包括化合物的实施方案 63， 和将所述患者成像。

    [1800] 67. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [1801] 给予患者包括实施方案 51 的化合物的诊断的显像剂， 其中 M 是光学标记， 且

    [1802] 将所述患者成像。

    [1803] 68. 用于制备诊断的显像剂的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 将包括实施方案 51 的化合物的物质加入至可注射的介质。

    [1804] 69. 治疗患者的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予患者包括实施方案 51 的化合 物的放射治疗剂， 所述放射治疗剂与治疗放射性核素络合。

    [1805] 70. 放射治疗剂的制备方法， 所述方法包括下述步骤 ： 将包括实施方案 51 的化合 物的物质加入至可注射的介质。

    [1806] 71. 合 成 DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14) 的方法， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1， 所述方法包括下 述步骤 ：

    [1807] (a) 在固相肽合成管中振荡溶液， 所述溶液包括树脂和至少 1 种肽生成成分，

    [1808] (b) 冲洗所述溶液且

    [1809] (c) 用 DMA 洗涤所述树脂，

    [1810] 其中所述至少 1 种肽生成成分包括 DMA 吗啉、 (3β， 5β， 7α， 12α)-3-[[(9H- 芴基 -9- 基甲氧基 ) 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸、 HOBt、 DIC、 HATU 或其 混合物， 且

    [1811] 其中重复 (a)、 (b) 和 (c) 的各步骤直到得到化合物 DO3A- 单酰胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [1812] 72. 合 成 DO3A- 单 酰 胺 -Gly-4- 氨 基 苯 甲 酸 -BBN(7-14) 的 方 法， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1， 所述方法包括下述步骤 ：

    [1813] (a) 在固相肽合成管中振荡溶液或阻断反应， 所述溶液包括树脂和至少 1 种肽生 成成分，

    [1814] (b) 冲洗所述溶液且

    [1815] (c) 洗涤所述树脂用 DMA，

    [1816] 其中所述至少 1 种肽生成成分包括 DMA、 吗啉、 Fmoc-4- 氨基苯甲酸、 HOBt、 DIC、 HBTU、 HATU 或其混合物， 且

    [1817] 其中重复 (a)、 (b) 和 (c) 各步骤直到得到化合物 DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯甲 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [1818] 73. 用于标记 DO3A- 单酰胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14) 的方法， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1， 所述方法包括下 述步骤 ：

    [1819] 孵化含有

    [1820] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)( 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1)、

    [1821] 铵醋酸酯、

    [1822] 选自 177LuCl3 或 111InCl3 放射性金属前体和

    [1823] HCl 的第一溶液， 且

    [1824] 将含有 Na2EDTA· 2H2O 和水的第二溶液加入至所述第一溶液， 以得到放射化学纯度 大于 95％。

    [1825] 74. 用于标记 DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14) 的方法， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1， 所述方法包括下述步骤 ：

    [1826] 孵化含有

    [1827] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)( 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1)、

    [1828] 铵醋酸酯、

    [1829] 选自 177LuCl3 或 111InCl3 放射性金属前体和

    [1830] HCl 的第一溶液， 且

    [1831] 将含有 Na2EDTA· 2H2O 和水的第二溶液加入至所述第一溶液， 以得到放射化学纯度 大于 95％。 75. 通过单独的氨基酸的偶联合成 DO3A- 单酰胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨 基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14) 的方法， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1， 在溶液中的偶联步骤之前或之后， 用任何需要的附加的试剂或步骤的方法保护氨基酸或

    [1832] 修饰的氨基酸。

    [1833] 76. 合 成 DO3A- 单 酰 胺 -Gly-4- 氨 基 苯 甲 酸 -BBN(7-14) 的 方 法， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1， 所述方法通过修饰的、 保护的、 未保护的或其它可变的肽片 段的偶联， 与在溶液中、 在固相上或经由溶液和固相合成组合的步骤和方法的偶联步骤之 前或之后任何需要的附加的试剂或步骤的方法组合。

    [1834] 77. 通过单独氨基酸的偶联合成 DO3A- 单酰胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨 基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14) 的方法， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1， 在溶液中的偶联步骤之前或之后， 用任何需要的附加的试剂或步骤的方法保护氨基酸或 修饰的氨基酸。

    [1835] 78. 如下通式的化合物 ：

    [1836] M-N-O-P-G

    [1837] 其中

    [1838] M 是任选与放射性核素络合的 DO3A ；

    [1839] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [1840] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 且

    [1841] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [1842] 且 G 是靶向 GRP 受体的肽，

    [1843] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是 8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 .

    [1844] 79. 实施方案 78 的化合物， 其中所述靶向 GRP 受体的肽选自 QWAVGHLM-OH(SEQ ID NO ： 1) 、QWAVGHLM-NH 2 (SEQ ID NO ： 1) 、QWAVGNMeHLM-NH 2 (SEQ ID NO ： 15) 、 QWAVGHFL-NH2(SEQID NO ： 22)、 QRLGNQWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 3)、 QRYGNQWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 4)、 QKYGNQWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 5)、 QWAVGHL-NH- 戊 基 (SEQ ID NO ： 6)、 QWSVaHLM-NH2(SEQ ID NO ： 7)、 QWAVGHLL-NH2(SEQ ID NO ： 8)、 QWAV-Bala-HF-Nle-NH2(SEQ ID NO ： 9)、 QWAGHFL-NH2(SEQ ID NO ： 10)、 LWAVGSFM-NH2(SEQ ID NO ： 11)、 HWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 12)、 LWATGSFM-NH2(SEQ IDNO ： 17)、 LWAVGSFM-NH2(SEQ ID NO ： 11)、 QWAVaHLM-NH2(SEQID NO ： 14) 和 QWAVGHFM-NH2(SEQ ID NO ： 13)。

    [1845] 80. 如下通式的化合物 ：

    [1846] M-N-O-P-G

    [1847] 其中

    [1848] M 是任选与放射性核素络合的 DO3A ；

    [1849] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [1850] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 且

    [1851] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [1852] 且 G 是靶向 GRP 受体的肽，

    [1853] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是 (3β， 5β， 12α)-3- 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸。

    [1854] 81. 实施方案 80 的化合物， 其中所述靶向 GRP 受体的肽选自 QWAVGHLM-OH(SEQ ID NO ： 1) 、QWAVGHLM-NH 2 (SEQ ID NO ： 1) 、QWAVGNMeHLM-NH 2 (SEQ ID NO ： 15) 、 QWAVGHFL-NH2(SEQID NO ： 22)、 QRLGNQWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 3)、 QRYGNQWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 4)、 QKYGNQWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 5)、 QWAVGHL-NH- 戊 基 (SEQ ID NO ： 6)、QWSVaHLM-NH2(SEQ ID NO ： 7)、 QWAVGHLL-NH2(SEQ ID NO ： 8)、 QWAV-Bala-HF-Nle-NH2(SEQ ID NO ： 9)、 QWAGHFL-NH2(SEQ ID NO ： 10)、 LWAVGSFM-NH2(SEQ ID NO ： 11)、 HWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 12)、 LWATGSFM-NH2(SEQ IDNO ： 17)、 LWAVGSFM-NH2(SEQ ID NO ： 11)、 QWAVaHLM-NH2(SEQID NO ： 14) 和 QWAVGHFM-NH2(SEQ ID NO ： 13)。

    [1855] 82. 如下通式的化合物 ：

    [1856] M-N-O-P-G

    [1857] 其中

    [1858] M 是任选与放射性核素络合的 DO3A ；

    [1859] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [1860] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 且

    [1861] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [1862] 且 G 是靶向 GRP 受体的肽，

    [1863] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是 4- 氨基苯甲酸。

    [1864] 83. 实施方案 82 的化合物， 其中所述靶向 GRP 受体的肽选自 QWAVGHLM-OH(SEQ ID NO ： 1) 、QWAVGHLM-NH 2 (SEQ ID NO ： 1) 、QWAVGNMeHLM-NH 2 (SEQ ID NO ： 15) 、 22)、 QRLGNQWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 3)、 QRYGNQWAVGHLM-NH2(SEQ QWAVGHFL-NH2(SEQID NO ： ID NO ： 4)、 QKYGNQWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 5)、 QWAVGHL-NH- 戊 基 (SEQ ID NO ： 6)、 QWSVaHLM-NH2(SEQ ID NO ： 7)、 QWAVGHLL-NH2(SEQ ID NO ： 8)、 QWAV-Bala-HF-Nle-NH2(SEQ ID NO ： 9)、 QWAGHFL-NH2(SEQ ID NO ： 10)、 LWAVGSFM-NH2(SEQ ID NO ： 11)、 HWAVGHLM-NH2(SEQ ID NO ： 12)、 LWATGSFM-NH2(SEQ IDNO ： 17)、 LWAVGSFM-NH2(SEQ ID NO ： 11)、 QWAVaHLM-NH2(SEQID NO ： 14)、 QWAVGHFM-NH2(SEQ ID NO ： 13)、 Nme-QWAVGHLM-NH2， 其 中 QWAVGHLM-NH2 是 (SEQ ID NO ： 1)、 Q-ψ[CSNH]WAVGHLM-NH2、 Q-ψ[CH2NH]-WAVGHLM-NH2、 Q-ψ[CH ＝ CH] WAVGHLM-NH 2 、α -MeQWAVGHLM-NH 2 、QNme-WAVGHLM-NH 2 、QW- ψ [CSNH]-AVGHLM-NH 2 、 QW- ψ [CH 2 NH]-AVGHLM-NH 2 、QW- ψ [CH ＝ CH]-AVGHLM-NH 2 、Q- α -Me-WAVGHLM-NH 2 、 QW-Nme-AVGHLM-NH 2 、QWA ＝ ψ [CSNH]-VGHLM-NH 2 、QWA- ψ [CH2NH]-VGHLM-NH 2 、 QW-Aib-VGHLM-NH 2、 QWAV-Sar-HLM-NH 2、 QWAVG- ψ [CSNH]-HLM-NH 2、 QWAVG- ψ [CH ＝ CH]-HLM-NH2、 QWAV-Dala-HLM-NH2、 QWAVG-Nme-His-LM-NH2、 QWAVG-H-ψ[CSNH]-L-M-NH2、 QWAVG-H- ψ [CH 2NH]-LM-NH 2、 QWAVGH- ψ [CH ＝ CH]-LM-NH 2、 QWAVG- ψ -Me-HLM-NH 2、 QWAVGH-Nme-LM-NH 2、 QWAVGH- α -MeLM-NH 2、 QWAVGHF-L-NH 2、 QWAVGHLM-NH 2， 其 中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQID NO ： 1、 QWAVGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 22。

    [1865] 84. 光线治疗的方法， 所述方法包括将实施方案 1、 20 或 51 任一项的化合物给予患 者， 其中 Mis 用于光线治疗的光学标记。

    [1866] 85. 选自如下的化合物 ：

    [1867] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVaHLM-NH2， 其中 QWAVaHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 14 ；

    [1868] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -fQWAVGHLM-NH2， 其中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1；

    [1869] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -fQWAVGHLL-NH2， 其中 QWAVGHLL-NH2 是 SEQ ID NO ： 8；DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -fQWAVGHL-NH- 戊基， 其中 QWAVGHL-NH- 戊基是 SEQ ID NO ： 6；

    [1871] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -yQWAV-Bala-HFNle-NH2， 其 中 QWAV-Bala-HFNle-NH2 是 SEQ ID NO ： 9；

    [1872] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -fQWAV-Bala-HFNle-NH2， 其 中 QWAV-Bala-HFNle-NH2 是 SEQ ID NO ： 9；

    [1873] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHFL-NH2， 其中 QWAVGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 22 ；

    [1874] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGNMeHisLM-NH2， 其中 QWAVGNMeHisLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 15 ；

    [1875] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -LWAVGSFM-NH2， 其中 LWAVGSFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；

    [1876] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -HWAVGHLM-NH2， 其中 HWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 12 ；

    [1877] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -LWATGHFM-NH2， 其中 LWATGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 16 ；

    [1878] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHFM-NH2， 其中 QWAVGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 13 ；

    [1879] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QRLGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 3；

    [1880] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 4；

    [1881] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 5；

    [1882] Pglu-Q-Lys(DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 )-LGNQWAVGHLM-NH2，其 中 LGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 18 ；

    [1883] DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -QWAVaHLM-NH2， 其中 QWAVaHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 14 ；

    [1884] DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -fQWAVGHLM-NH2， 其中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1；

    [1885] DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -fQWAVGHLL-NH2， 其中 QWAVGHLL-NH2 是 SEQ ID NO ： 8；

    [1886] DO3A- 单 酰 胺 -G-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -fQWAVGHL-NH- 戊 基，其 中 QWAVGHL-NH- 戊基是 SEQ ID NO ： 6；

    [1887] DO3A- 单 酰 胺 -G-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -yQWAV-Bala-HFNle-NH2，其 中 QWAV-Bala-HFNle-NH2 是 SEQ ID NO ： 9； DO3A- 单 酰 胺 -G-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -fQWAV-Bala-HFNle-NH2，其 中 QWAV-Bala-HFNle-NH2 是 SEQ ID NO ： 9；

    [1889] DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -QWAVGHFL-NH2， 其中 QWAVGHFL-NH2 ？是

    [1888] SEQ ID NO ： 22

    [1890] DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -QWAVGNMeHLMNH2， 其中 QWAVGNMeHLMNH2 是 SEQ ID NO ： 15 ；

    [1891] DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -LWAVGSFM-NH2， 其中 LWAVGSFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；

    [1892] DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -HWAVGHLM-NH2， 其中 HWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 12 ；

    [1893] DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -LWATGHFM-NH2， 其中 LWATGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 16 ；

    [1894] DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -QWAVGHFM-NH2， 其中 QWAVGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 13

    [1895] DO3A- 单 酰 胺 -G-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QRLGNQWAVGlyHLM-NH2，其 中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 3；

    [1896] DO3A- 单 酰 胺 -G-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2，其 中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 4；

    [1897] DO3A- 单 酰 胺 -G-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2，其 中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 5； 和

    [1898] Pglu-Q-Lys(DO3A- 单酰胺 -G-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 )-LGNQWAVGHLM-NH2， 其中 LGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 18。

    [1899] 86. 实施方案 16、 17、 39、 44、 49 或 69 任一项的方法还包括给予化疗或其它治疗剂。

    [1900] 87. 实 施 方 案 78 或 80 任 一 项 的 化 合 物， 其 中 所 述 靶 向 GRP 受 体 的 肽 选 自 Nme-QWAVGHLM-NH 2、 Q- ψ [CSNH]WAVGHLM-NH2、 Q- ψ [CH 2NH]-WAVGHLM-NH 2、 Q- ψ [CH ＝ CH]WAVGHLM-NH 2、 α -MeQWAVGHLM-NH 2、 QNme-WAVGHLM-NH 2、 QW- ψ [CSNH]-AVGHLM-NH 2、 QW- ψ [CH 2 NH]-AVGHLM-NH 2 、QW- ψ [CH ＝ CH]-AVGHLM-NH 2 、Q- α -Me-WAVGHLM-NH 2 、 QW-Nme-AVGHLM-NH 2 、QWA ＝ ψ [CSNH]-VGHLM-NH 2 、QWA- ψ [CH 2 NH]-VGHLM-NH 2 、 QW-Aib-VGHLM-NH 2、 QWAV-Sar-HLM-NH 2、 QWAVG- ψ [CSNH]-HLM-NH 2、 QWAVG- ψ [CH ＝ CH]-HLM-NH2、 QWAV-Dala-HLM-NH2、 QWAVG-Nme-His-LM-NH2、 QWAVG-H-ψ[CSNH]-L-M-NH2、 QWAVG-H- ψ [CH 2NH]-LM-NH 2、 QWAVGH- ψ [CH ＝ CH]-LM-NH 2、 QWAVG- α -Me-HLM-NH 2、 QWAVGH-Nme-LM-NH 2、 QWAVGH- α -MeLM-NH 2、 QWAVGHF-L-NH 2、 QWAVGHLM-NH 2， 其 中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1、 QWAVGHFL-NH2 是 SEQ IDNO ： 22。

    [1901] 88. 用于靶向于释放胃泌素的肽受体 (GRP-R) 和神经调节肽 -B 受体 (NMB-R) 的方 法， 所述方法包括给予如下通式的化合物 ：

    [1902] M-N-O-P-G

    [1903] 其中

    [1904] M 是任选与放射性核素络合的光学标记或金属螯合物 ；

    [1905] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [1906] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 且

    [1907] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [1908] 且 G 是靶向 GRP 受体的肽，其中 N、 O 或 P 中至少一个是非 α 氨基酸。 89. 实施方案 88 的方法， 其中 N、 O 或 P 中至少一个是具有环状基团的非 α 氨基酸。 90. 实施方案 89 的方法， 其中 N 是 Gly， O 是 4- 氨基苯甲酸且没有 P。

    [1912] 91. 靶向于 GRP-R 和 NMB-R 的方法， 所述方法包括给予如下通式的化合物 ：

    [1913] M-N-O-P-G

    [1914] 其中

    [1915] M 是任选与放射性核素络合的光学标记或金属螯合物 ；

    [1916] N 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ；

    [1917] O 是 α 氨基酸或取代的胆酸 ； 且

    [1918] P 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ； 且

    [1919] G 是靶向 GRP 受体的肽， 且

    [1920] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是取代的胆酸。

    [1921] 92. 实施方案 91 的方法， 其中 N 是 Gly， O 是 (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸， 且没有 P。

    [1922] 93. 实施方案 88、 89 或 91 任一项的方法， 其中所述靶向 GRP 受体的肽选自 ：

    [1923] Nme-QWAVGHLM-NH2、

    [1924] Q-ψ[CSNH]WAVGHLM-NH2、

    [1925] Q-ψ[CH2NH]-WAVGHLM-NH2、

    [1926] Q-ψ[CH ＝ CH]WAVGHLM-NH2、

    [1927] α-MeQWAVGHLM-NH2、

    [1928] QNme-WAVGHLM-NH2、

    [1929] QW-ψ[CSNH]-AVGHLM-NH2、

    [1930] QW-ψ[CH2NH]-AVGHLM-NH2、

    [1931] QW-ψ[CH ＝ CH]-AVGHLM-NH2、

    [1932] Q-α-Me-WAVGHLM-NH2、

    [1933] QW-Nme-AVGHLM-NH2、

    [1934] QWA ＝ ψ[CSNH]-VGHLM-NH2、

    [1935] QWA-ψ[CH2NH]-VGHLM-NH2、

    [1936] QW-Aib-VGHLM-NH2、

    [1937] QWAV-Sar-HLM-NH2、

    [1938] QWAVG-ψ[CSNH]-HLM-NH2、

    [1939] QWAVG-ψ[CH ＝ CH]-HLM-NH2、

    [1940] QWAV-Dala-HLM-NH2、

    [1941] QWAVG-Nme-His-LM-NH2、

    [1942] QWAVG-H-ψ[CSNH]-L-M-NH2、

    [1911] QWAVG-H-ψ[CH2NH]-LM-NH2、 QWAVGH-ψ[CH ＝ CH]-LM-NH2、 QWAVG-α-Me-HLM-NH2、QWAVGH-Nme-LM-NH2 和

    [1947] QWAVGH-α-MeLM-NH2，

    [1948] 其中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1 且 QWAVGHFL-NH2 是 SEQID NO ： 22。

    [1949] 94. 改善实施方案 1、 20、 51、 78、 80 或 82 任一项的化合物体内活性的的方法， 包括 下述步骤 ： 修饰靶向 GRP 受体的肽以使减少所述肽的蛋白水解裂解。

    [1950] 95. 实施方案 94 的方法， 其中所述修饰的 GRP-R 靶向肽是激动剂。

    [1951] 96. 减少实施方案 1、 20、 51、 78、 80 或 82 任一项的释放胃泌素的肽 (GRP) 类似物蛋 白水解裂解的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 修饰在 GRP-R 靶向结构部分中的肽键。

    [1952] 97. 实施方案 96 的方法， 其中所述修饰的 GRP-R 靶向肽是激动剂。

    [1953] 98. 减少具有释放胃泌素的肽受体 (GRP-R) 靶向结构部分的释放胃泌素的肽 (GRP) 类似物的蛋白水解裂解的方法， 所述释放胃泌素的肽受体 (GRP-R) 靶向结构部分是 激动剂， 所述方法包括下述步骤 ： 修饰在 GRP-R 靶向结构部分中的肽键。

    [1954] 99. 实施方案 94、 96 或 98 任一项的方法， 其中所述 GRP-R 靶向结构部分选自 ：

    [1955] Nme-QWAVGHLM-NH2、

    [1956] Q-ψ[CSNH]WAVGHLM-NH2、

    [1957] Q-ψ[CH2NH]-WAVGHLM-NH2、

    [1958] Q-ψ[CH ＝ CH]WAVGHLM-NH2、

    [1959] α-MeQWAVGHLM-NH2，

    [1960] QNme-WAVGHLM-NH2、

    [1961] QW-ψ[CSNH]-AVGHLM-NH2、

    [1962] QW-ψ[CH2NH]-AVGHLM-NH2、

    [1963] QW-ψ[CH ＝ CH]-AVGHLM-NH2、

    [1964] Q-α-Me-WAVGHLM-NH2、

    [1965] QW-Nme-AVGHLM-NH2、

    [1966] QWA ＝ ψ[CSNH]-VGHLM-NH2、

    [1967] QWA-ψ[CH2NH]-VGHLM-NH2、

    [1968] QW-Aib-VGHLM-NH2、

    [1969] QWAV-Sar-HLM-NH2、

    [1970] QWAVG-ψ[CSNH]-HLM-NH2、

    [1971] QWAVG-ψ[CH ＝ CH]-HLM-NH2、

    [1972] QWAV-Dala-HLM-NH2、

    [1973] QWAVG-Nme-His-LM-NH2、

    [1974] QWAVG-H-ψ[CSNH]-L-M-NH2、

    [1975] QWAVG-H-ψ[CH2NH]-LM-NH2、

    [1976] QWAVGH-ψ[CH ＝ CH]-LM-NH2、

    [1977] QWAVG-α-Me-HLM-NH2、

    [1978] QWAVGH-Nme-LM-NH2 和

    [1979] QWAVGH-α-MeLM-NH2，

    [1980] 其中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1 且 QWAVGHFL-NH2 是 SEQID NO ： 22。100. 根据实施方案 1、 20、 51、 78、 80 或 82 任一项的化合物， 其中 G 是已经修饰的靶 向 GRP 受体的肽以使蛋白水解裂解减少。

    [1982] 101. 在包括任选与放射性核素和 GRP-R 靶向肽络合的光学标记或金属螯合剂的 化合物上具有对 GRP-R 和 / 或 NMB-R 的特异性的方法， 所述方法包括在这类如下通式的化 合物的连接中 ：

    [1983] N-O-P

    [1984] 其中

    [1985] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [1986] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 和

    [1987] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [1988] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是非 α 氨基酸。

    [1989] 102. 在包括任选与放射性核素和 GRP-R 靶向肽络合的光学标记或金属螯合剂的 化合物上具有对 GRP-R 和 / 或 NMB-R 的特异性的方法， 所述方法包括在这类如下通式的化 合物的连接中 ：

    [1990] N-O-P

    [1991] 其中

    [1992] N 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ；

    [1993] O 是 α 氨基酸或取代的胆酸 ； 且

    [1994] P 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团，

    [1995] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是取代的胆酸。

    [1996] 103. 在包括任选与放射性核素和 GRP-R 靶向肽络合的光学标记或金属螯合剂的 化合物上具有对 GRP-R 和 / 或 NMB-R 的特异性的方法， 所述方法包括在这类如下通式的化 合物的连接中 ：

    [1997] N-O-P

    [1998] 其中

    [1999] N 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2000] O 是具有环状基团的 α 氨基酸或非 α 氨基酸 ； 且

    [2001] P 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [2002] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是具有环状基团的非 α 氨基酸。

    [2003] 104. 改善包括任选与放射性核素和 GRP-R 靶向肽络合的光学标记或金属螯合剂 的化合物的体内活性的方法， 所述方法包括在这类如下通式的化合物的连接中 ：

    [2004] N-O-P

    [2005] 其中

    [2006] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2007] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 和

    [2008] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团， 其中 N、 O 或 P 中至少一个是非 α 氨基酸。

    [2010] 105. 改善包括任选与放射性核素和 GRP-R 靶向肽络合的光学标记或金属螯合剂 的化合物的体内活性的方法， 所述方法包括在这类如下通式的化合物的连接中 ：

    [2009] N-O-P

    [2012] 其中

    [2013] N 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ；

    [2014] O 是 α 氨基酸或取代的胆酸 ； 和

    [2015] P 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团，

    [2016] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是取代的胆酸。

    [2017] 106. 改善包括任选与放射性核素和 GRP-R 靶向肽络合的光学标记或金属螯合剂 的化合物的体内活性的方法， 所述方法包括在这类如下通式的化合物的连接中 ：

    [2018] N-O-P

    [2019] 其中

    [2020] N 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2021] O 是具有环状基团的 α 氨基酸或非 α 氨基酸 ； 和

    [2022] P 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [2023] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是具有环状基团的非 α 氨基酸。

    [2024] 107. 具有下列结构的化合物 ：

    [2025] 108. 如下通式的化合物 ： M-N-O-P-G 其中 M 是式 8 的金属螯合剂 ：任选与放射性核素络合， 其中

    [2032] R1 是氢、 任选用一个或多个羧基基团取代 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷基 烷基、 芳基、 芳基烷基或两个 R1 基团共同形成直链或环状 C2-C10 亚烷基基团或邻 - 二取代的 亚芳基 ；

    [2033] R2 是氢、 羧基或选自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基、 具有酸性结构部分的基团和具有氨基结构部分的基团的任选取代的基团， 其中的每一个可 以进一步任选用与能够与生理系统相互作用的适合的分子缀合的官能团取代 ；

    [2034] R3、 R4 和 R5， 其可以是相同的或不同的， 是氢、 羧基或选自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷 基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基、 具有酸性结构部分的基团和具有氨基结构部分的基 团的任选取代的基团， 其中的每一个可以进一步任选用与能够与生理系统相互作用的适合 的分子缀合的官能团取代 ； 且

    [2035] FG， 其可以是相同的或不同的， 是羧基、 -PO3H2 或 -RP(O)OH 基团， 其中 R 是氢或选 自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基、 具有酸性结构部分的基团 和具有氨基结构部分的基团的任选取代的基团， 其中的每一个可以进一步任选用与能够与 生理系统相互作用的适合的分子缀合的官能团取代 ；

    [2036] N 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2037] O 是具有环状基团的 α 氨基酸或非 α 氨基酸 ；

    [2038] P 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团 ； 且

    [2039] G 是靶向 GRP 受体的肽，

    [2040] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是具有环状基团的非 α 氨基酸。

    [2041] 109. 如下通式的化合物 ：

    [2042] M-N-O-P-G

    [2043] 其中

    [2044] M 是式 8 的金属螯合剂 ：

    [2031] 任选与放射性核素络合， 其中

    [2047] R1 是氢、 任选用一个或多个羧基基团取代的 C1-C20 烷基， C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷 基烷基、 芳基、 芳基烷基或两个 R1 基团共同形成直链或环状 C2-C10 亚烷基基团或邻 - 二取代 的亚芳基 ；

    [2048] R2 是氢、 羧基或选自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基、 具有酸性结构部分的基团和具有氨基结构部分的基团的任选取代的基团， 其中的每一个可 以进一步任选用与能够与生理系统相互作用的适合的分子缀合的官能团取代 ；

    [2049] R3、 R4 和 R5， 其可以是相同的或不同的， 是氢、 羧基或选自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷 基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基、 具有酸性结构部分的基团和具有氨基结构部分的基 团的任选取代的基团， 其中的每一个可以进一步任选用与能够与生理系统相互作用的适合 的分子缀合的官能团取代 ； 且

    [2050] FG， 其可以是相同的或不同的， 是羧基、 -PO3H2 或 -RP(O)OH 基团， 其中 R 是氢或选 自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基、 具有酸性结构部分的基团 和具有氨基结构部分的基团的任选取代的基团， 其中的每一个可以进一步任选用与能够与 生理系统相互作用的适合的分子缀合的官能团取代 ；

    [2051] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2052] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 且

    [2053] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [2054] 和 G 是靶向 GRP 受体的肽，

    [2055] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是非 α 氨基酸。

    [2056] 110. 如下通式的化合物 ：

    [2057] M-N-O-P-G

    [2058] 其中

    [2059] M 是式 8 的金属螯合剂 ：

    [2060] 任选与放射性核素络合， 其中

    [2062] R1 是氢、 任选用一个或多个羧基基团取代的 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷 基烷基、 芳基、 芳基烷基或两个 R1 基团共同形成直链或环状 C2-C10 亚烷基基团或邻 - 二取代 的亚芳基 ；

    [2063] R2 是氢、 羧基或选自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基、 具有酸性结构部分的基团和具有氨基结构部分的基团的任选取代的基团， 其中的每一个可 以进一步任选用与能够与生理系统相互作用的适合的分子缀合的官能团取代 ；

    [2061] R3、 R4 和 R5， 其可以是相同的或不同的， 是氢、 羧基或选自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷 基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基、 具有酸性结构部分的基团和具有氨基结构部分的基 团的任选取代的基团， 其中的每一个可以进一步任选用与能够与生理系统相互作用的适合 的分子缀合的官能团取代 ； 且

    [2065] FG， 其可以是相同的或不同的， 是羧基、 -PO3H2 或 -RP(O)OH 基团， 其中 R 是氢或选 自 C1-C20 烷基、 C3-C10 环烷基、 C4-C20 环烷基烷基、 芳基、 芳基烷基、 具有酸性结构部分的基团 和具有氨基结构部分的基团的任选取代的基团， 其中的每一个可以进一步任选用与能够与 生理系统相互作用的适合的分子缀合的官能团取代 ；

    [2066] N 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ；

    [2067] O 是 α 氨基酸或取代的胆酸 ； 且

    [2068] P 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ； 且

    [2069] G 是靶向 GRP 受体的肽， 且

    [2070] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是取代的胆酸。

    [2071] 111. 如下通式的化合物 ：

    [2072] M-N-O-P-G

    [2073] 其中

    [2074] M 是任选与放射性核素络合的氮杂金属螯合剂或其衍生物 ；

    [2075] N 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2076] O 是具有环状基团的 α 氨基酸或非 α 氨基酸 ；

    [2077] P 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团 ； 且

    [2078] G 是靶向 GRP 受体的肽，

    [2079] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是具有环状基团的非 α 氨基酸。

    [2080] 112. 如下通式的化合物 ：

    [2081] M-N-O-P-G

    [2082] 其中

    [2083] M 是任选与放射性核素络合的氮杂螯合剂或其衍生物 ；

    [2084] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2085] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 和

    [2086] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [2087] 且 G 是靶向 GRP 受体的肽，

    [2088] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是非 α 氨基酸。

    [2089] 113. 如下通式的化合物 ：

    [2090] M-N-O-P-G

    [2091] 其中

    [2092] M 是任选与放射性核素络合的氮杂金属螯合剂或其衍生物 ；

    [2093] N 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ；

    [2094] O 是 α 氨基酸或取代的胆酸 ； 且 P 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ； 且 G 是靶向 GRP 受体的肽， 且其中 N、 O 或 P 中至少一个是取代的胆酸。 114. 实施方案 108 至 113 任一项的化合物， 其中 G 是具有激动剂活性的激动剂或肽。 115. 实施方案 108 或 111 的化合物， 其中所述具有环状基团的非 α 氨基酸选自 ：

    [2100] 4- 氨基苯甲酸 ；

    [2101] 4- 氨基甲基苯甲酸 ；

    [2102] 反式 -4- 氨基甲基环己烷羧酸 ；

    [2103] 4-(2- 氨基乙氧基 ) 苯甲酸 ；

    [2104] 六氢异烟酸 ；

    [2105] 2- 氨基甲基苯甲酸 ；

    [2106] 4- 氨基 -3- 硝基苯甲酸 ；

    [2107] 4-(3- 羧甲基 -2- 氧代 -1- 苯并咪唑基 )- 哌啶 ；

    [2108] 6-( 哌嗪 -1- 基 )-4-(3H)- 喹唑酮 -3- 乙酸 ；

    [2109] (2S， 5S)-5- 氨基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六氢 - 氮杂卓 [3， 21-hi] 吲哚 -4- 酮 -2- 羧酸 ；

    [2110] (4S， 7R)-4- 氨基 -6- 氮杂 -5- 氧代 -9- 硫代双环 [4.3.0] 壬烷 -7- 羧酸 ；

    [2111] 3- 羧甲基 -1- 苯基 -1， 3， 8- 三氮杂螺 [4.5] 癸烷 -4- 酮 ；

    [2112] N1- 哌嗪乙酸 ；

    [2113] N-4- 氨基乙基 -N-1- 乙酸 ；

    [2114] (3S)-3- 氨基 -1- 羧甲基己内酰胺 ； 和

    [2115] (2S， 6S， 9)-6- 氨基 -2- 羧甲基 -3， 8- 二氮杂双环 -[4， 3， 0]- 壬烷 -1， 4- 二酮 .

    [2116] 116. 实施方案 109 或 112 的化合物， 其中所述非 α 氨基酸选自 ：

    [2117] 8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 ；

    [2118] N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪 - 乙酸 ； 和

    [2119] 具有式 NH2-(CH2CH2O)n-CH2CO2H

    [2120] 或 NH2-(CH2CH2O)n-CH2CH2CO2H 的聚乙二醇衍生物， 其中 n ＝ 2 至 100。

    [2121] 117. 实施方案 110 或 113 的化合物， 其中所述取代的胆酸选自 ：

    [2122] 3β- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 ；

    [2123] (3β， 5β)-3- 氨基胆烷 -24- 酸 ；

    [2124] (3β， 5β， 12α)-3- 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 ；

    [2125] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 ；

    [2126] Lys-(3， 6， 9)- 三氧杂癸烷 -1， 11- 二羰基 -3， 7- 二脱氧 -3- 氨基胆汁酸 ) ；

    [2127] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7- 羟基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸 ； 和

    [2128] (3β， 5β， 7α)-3- 氨基 -7- 羟基胆烷 -24- 酸 .

    [2129] 118. 包括下述步骤的成像方法 ：

    [2130] 给予患者包括实施方案 109 至 113 任一项的化合物的诊断的显像剂， 其中 M 是与 放射性或顺磁性金属络合的金属螯合剂， 且

    [2099] 将所述患者成像。

    [2132] 119. 用于制备诊断的显像剂的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 将包括实施方案 108 至 113 任一项的化合物的物质加入至可注射的介质。

    [2131] 120. 治疗患者的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予患者包括实施方案 108 至 113 任一项的化合物的与治疗放射性核素络合的放射治疗剂。

    [2134] 121. 放射治疗剂的制备方法， 所述方法包括下述步骤 ： 将包括实施方案 108 至 113 任一项的化合物的物质加入至可注射的介质。

    [2135] 122. 实施方案 108 的化合物， 其中 M 是 Aazta， N 是 Gly， O 是 4- 氨基苯甲酸， P是 0， 且 G 是 BBN(7-14)， 其中 BBN(7-14) 是 SEQ ID NO ： 1。

    [2136] 123. 实施方案 108 的化合物， 其中 M 是 CyAazta， N 是 Gly， O 是 4- 氨基苯甲酸， P 是 0， 且 G 是 BBN(7-14)， 其中 BBN(7-14) 是 SEQ ID NO ： 1。

    [2137] 124. 实 施 方 案 110 的 化 合 物， 其 中 M 是 Aazta， N 是 Gly， O 是 (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸， P 是 0， 且 G 是 BBN(7-14)， 其中 BBN(7-14) 是 SEQ ID NO ： 1。

    [2138] 125. 实施方案 110 的化合物， 其中 M 是 CyAazta， N 是 Gly， O 是 (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸， P 是 0， 且 G 是 BBN(7-14)， 其中 BBN(7-14) 是 SEQ ID NO ： 1。

    [2139] 126. 具有下列结构的化合物 ：

    [2140] 127. 具有下列结构的化合物 ：128. 用于在受试者中增加标记化合物对表达 GRP 受体的靶组织的靶向性的方法， 所述方法包括下述步骤 ：

    [2144] 给予受试者包括靶向 GRP 受体的肽的第一剂量以在非靶组织中占据 GRP 受体结合 位置，

    [2145] 给予所述受试者包括具有如下通式的标记的化合物的第二剂量 ：

    [2146] M-N-O-P-G

    [2143] 其中

    [2148] M 是与放射性核素络合的光学标记或金属螯合剂 ；

    [2149] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2150] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 且

    [2151] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [2152] 且 G 是靶向 GRP 受体的肽， 和

    [2153] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是非 α 氨基酸。

    [2154] 129. 实施方案 128 的方法， 其中所述给予所述第一剂量的步骤和给予所述第二剂 量的步骤同时存在。

    [2155] 130. 实施方案 128 的方法， 其中在第一剂量中所述靶向 GRP 受体的肽与连接基缀 合。

    [2156] 131. 实施方案 128 的方法， 其中在第一剂量中所述靶向 GRP 受体的肽与连接基缀 合， 所述连接基与一个或多个金属螯合剂连接。

    [2157] 132. 实施方案 131 的方法， 其中所述第一剂量的靶向 GRP 受体的肽、 连接基和金属 螯合剂与第二剂量的靶向 GRP 受体的肽、 N-O-P 连接基和金属螯合剂相同。

    [2158] 133. 实施方案 128 的方法， 其中所述非 α 氨基酸选自 ：

    [2159] 8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 ；

    [2160] N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪 - 乙酸 ； 和

    [2161] 具有式 NH2-(CH2CH2O)n-CH2CO2H 或 NH2-(CH2CH2O)n-CH2CH2CO2H 的聚乙二醇衍生物， 其中 n ＝ 2 至 100。

    [2162] 134. 实施方案 128 的方法， 其中所述金属螯合剂选自 DTPA、 DOTA、 DO3A、 HP-DO3A、 EDTA、 TETA、 EHPG、 HBED、 NOTA、 DOTMA、 TETMA、 PDTA、 TTHA、 LICAM、 MECAM， MDOTA、 N， N- 二甲 基 Gly-Ser-Cys、 Aazta 和其衍生物 .

    [2163] 135. 实施方案 128 的方法， 其中所述标记化合物所包含的化合物选自 ：

    [2164] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Lys-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2165] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Arg-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2166] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2167] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Ser-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2168] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2169] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Glu-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Dala-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2171] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛

    [2170] 酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2172] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2173] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2174] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2175] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2176] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Glu-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2177] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Dala-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2178] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2179] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基 丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2180] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2181] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂 辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2182] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2183] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Asp-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2184] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2185] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Arg-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2186] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [2187] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基 丙酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2188] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Lys-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2189] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂 辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2190] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2192] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2193] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [2194] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -2， 3- 二 氨基丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2195] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2196] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2197] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2198] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2199] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2200] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌 嗪 乙 酸 -2， 3- 二 氨 基 丙 酸 BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2201] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2202] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-4- 羟基脯氨酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2203] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-4- 氨基脯氨酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2204] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Lys-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2205] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Arg-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2206] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Ser-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2207] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2208] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Asp-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2210] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛

    [2209] 酸 -Arg-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2211] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [2212] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基 丙酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2213] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Lys-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； 和

    [2214] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂 辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [2215] 136. 实施方案 128 的方法， 其中所述标记化合物所包含的化合物选自 ：

    [2216] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 - 二氨基丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2217] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2218] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2219] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -4- 苯甲酰基苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2220] DO3A- 单酰胺 -5- 氨基戊酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2221] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -D- 苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2222] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2223] DO3A- 单 酰 胺 -E(G8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 QWAVGHLM-NH2)-8- 氨基辛酸 -8- 氨基辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； 和

    [2224] DO3A- 单 酰 胺 -E(G-Aoa-Aoa-QWAVGHLM-NH2)-8- 氨 基 辛 酸 -8- 氨 基 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [2225] 137. 用于在受试者中增加标记化合物对表达 GRP 受体的靶组织的靶向性的方法， 所述方法包括下述步骤 ：

    [2226] 给予受试者包括靶向 GRP 受体的肽的第一剂量以在非靶组织中占据 GRP 受体结合 位置，

    [2227] 给予所述受试者包括如下通式的标记化合物的第二剂量 ：

    [2228] M-N-O-P-G

    [2229] 其中

    [2230] M 是与放射性核素络合的光学标记或金属螯合剂 ；

    [2231] N 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ；

    [2232] O 是 α 氨基酸或取代的胆酸 ；P 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ；

    [2234] G 是靶向 GRP 受体的肽， 且

    [2235] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是取代的胆酸。

    [2236] 138. 实施方案 137 的方法， 其中所述给予所述第一剂量的步骤和给予所述第二剂 量的步骤同时存在。

    [2237] 139. 实施方案 137 的方法， 其中在第一剂量中的所述靶向 GRP 受体的肽与连接基 缀合。

    [2238] 140. 实施方案 137 的方法， 其中在第一剂量中的所述靶向 GRP 受体的肽与连结至 一个或多个金属螯合剂的连接基缀合。

    [2239] 141. 实施方案 140 的方法， 其中所述第一剂量的靶向 GRP 受体的肽、 连接基和金属 螯合剂与第二剂量的靶向 GRP 受体的肽、 N-O-P 连接基和金属螯合剂相同。

    [2240] 142. 实施方案 137 的方法， 其中所述取代的胆酸选自 ：

    [2241] 3β- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 ；

    [2242] (3β， 5β)-3- 氨基胆烷 -24- 酸 ；

    [2243] (3β， 5β， 12α)-3- 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 ；

    [2244] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 ；

    [2245] Lys-(3， 6， 9)- 三氧杂癸烷 -1， 11- 二羰基 -3， 7- 二脱氧 -3- 氨基胆汁酸 ) ；

    [2246] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7- 羟基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸 ； 和

    [2247] (3β， 5β， 7α)-3- 氨基 -7- 羟基胆烷 -24- 酸 .

    [2248] 143. 实施方案 137 的方法， 其中所述金属螯合剂选自 ： DTPA、 DOTA、 DO3A、 HPDO3A、 EDTA、 TETA、 CMDOTA、 N， N- 二甲基 Gly-Ser-Cys、 Aazta 和其衍生物。

    [2249] 144. 实施方案 137 的方法， 其中所述标记化合物所包含的化合物选自 ：

    [2250] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β)-3- 氨 基 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2251] DO3A- 单酰胺 -Gly-(3β， 5β， 12α)-3- 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2252] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2253] DO3A- 单酰胺 -Gly-Lys-(3， 6， 9)- 三氧十一烷 -1， 11- 二羰基 -3， 7- 二脱氧 -3- 氨 基胆汁酸 )-Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2254] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -3， 6， 9- 三氧十一烷 -1， 11- 二羰基 Pglu-Q-Lys(DO3A- 单酰胺 -Gly)-Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2255] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3 β， 5 β， 7 α， 12 α )-3- 氨 基 -12- 氧 代 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2256] DO3A- 单酰胺 -1- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二 羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVaHLM-NH2， 其中 QWAVaHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 14 ；

    [2257] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-QWAVGHLM-NH2， 其中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2259] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-WAVGHLL-NH2， 其中 WAVGHLL-NH2 是 SEQ ID NO ： 8；

    [2260] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-QWAVGHL-NH- 戊基， 其中 QWAVGHL-NH- 戊基是 SEQ ID NO ： 6；

    [2261] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -y-QWAV-Bala-H-F-Nle-NH2， 其中 QWAV-Bal-H-F-Nle-NH2 是 SEQ IDNO ： 9；

    [2262] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-QWAV-Bala-H-F-Nle-NH2， 其中 QWAV-Bala-H-F-Nle-NH2 是 SEQ IDNO ： 9；

    [2263] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVGHFL-NH2， 其中 QWAVGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 22 ；

    [2264] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVGNMeH-L-M-NH2， 其中 QWAVGNMeH-L-M-NH2 是 SEQ IDNO ： 15 ；

    [2265] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -LWAVGSF-M-NH2， 其中 LWAVGSF-M-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；

    [2266] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -HWAVGHLM-NH2， 其中 HWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 12 ；

    [2267] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -LWAGHFM-NH2， 其中 LWAGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 20 ；

    [2268] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVGHFM-NH2， 其中 QWAVGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 13 ；

    [2269] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QRLGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQID NO ： 3；

    [2270] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQID NO ： 4；

    [2271] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQID NO ： 5；

    [2272] -Lys(DO3A- 单 酰 胺 )-Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -LGNQWAVGHLM-NH2， 其中 LGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 18 ；

    [2273] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QRLGNQWAVGHLM-NH2，其 中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQID NO ： 3；

    [2274] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2，其 中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 4；

    [2275] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2，其 中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQID NO ： 5；

    [2276] Pglu-Q-Lys(DO3A- 单 酰 胺 DO3A- 单 酰 胺 -G-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 )-LGNQWAVGHLM-NH2， 其中 LGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 18 ；

    [2277] Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； 和

    [2278] ta-Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中 所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [2279] 145. 实施方案 137 的方法， 其中所述标记化合物包含 DO3A- 单酰胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1。

    [2280] 146. 用于在受试者中增加标记化合物对表达 GRP 受体的靶组织的靶向性的方法， 所述方法包括下述步骤 ：

    [2281] 给予受试者包括靶向 GRP 受体的肽的第一剂量以在非靶组织中占据 GRP 受体结合 位置，

    [2282] 给予所述受试者包括如下通式的标记化合物的第二剂量 ：

    [2283] M-N-O-P-G

    [2284] 其中

    [2285] M 是与放射性核素络合的光学标记或金属螯合剂 ；

    [2286] N 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2287] O 是具有环状基团的 α 氨基酸或非 α 氨基酸 ；

    [2288] P 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团 ； 和

    [2289] G 是靶向 GRP 受体的肽，

    [2290] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是具有环状基团的非 α 氨基酸。

    [2291] 147. 实施方案 146 的方法， 其中所述给予所述第一剂量的步骤和给予所述第二剂 量的步骤同时存在。

    [2292] 148. 实施方案 146 的方法， 其中在第一剂量中的所述靶向 GRP 受体的肽与连接基 缀合。

    [2293] 149. 实施方案 146 的方法， 其中在第一剂量中所述靶向 GRP 受体的肽与连结至一 个或多个金属螯合剂的连接基缀合。

    [2294] 150. 实施方案 149 的方法， 其中所述第一剂量的所述 GRP 受体肽、 连接基和金属螯 合剂与第二剂量的靶向 GRP 受体的肽， N-O-P 连接基和金属螯合剂相同。

    [2295] 151. 实施方案 146 的方法， 其中所述具有环状基团的非 α 氨基酸选自 ：

    [2296] 苯甲酸 ；

    [2297] 甲基苯甲酸 ；

    [2298] - 氨基甲基环己烷羧酸 ；

    [2299] 氨基乙氧基 ) 苯甲酸 ；

    [2300] 异烟酸 ；

    [2301] 甲基苯甲酸 ；

    [2302] -3- 硝基苯甲酸 ；

    [2303] 羧甲基 -2- 氧代 -1- 苯并咪唑基 )- 哌啶 ；

    [2304] 哌嗪 -1- 基 )-4-(3H)- 喹唑酮 -3- 乙酸 ； (2S， 5S)-5- 氨基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六氢 - 氮杂卓 [3， 21-hi] 吲哚 -4- 酮 -2- 羧酸 ； )-4- 氨基 -6- 氮杂 -5- 氧代 -9- 硫代双环 [4.3.0] 壬烷 -7- 羧酸 ；羧甲基 -1- 苯基 -1， 3， 8- 三氮杂螺 [4.5] 癸烷 -4- 酮 ；

    [2308] 哌嗪乙酸 ；

    [2309] 氨基乙基 -N-1- 乙酸 ；

    [2310] - 氨基 -1- 羧甲基己内酰胺 ； 和

    [2311] (2S， 6S， 9)-6- 氨基 -2- 羧甲基 -3， 8- 二氮杂双环 -[4， 3， 0]- 壬烷 -1， 4- 二酮 .

    [2312] 152. 实施方案 146 的方法， 其中所述金属螯合剂选自 ： DTPA、 DOTA、 DO3A、 HPDO3A、 EDTA、 TETA、 N， N- 二甲基 Gly-Ser-Cys、 Aazta 和其衍生物。

    [2313] 153. 实施方案 146 的方法， 其中所述标记化合物所包含的化合物选自

    [2314] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2315] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2316] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己基羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2317] DO3A- 单酰胺 -4-(2- 氨基乙氧基 ) 苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2318] DO3A- 单酰胺 -Gly- 六氢异烟酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2319] DO3A- 单酰胺 -2- 氨基甲基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2320] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基 -3- 硝基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2321] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -1- 萘基丙胺酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2322] DO3A- 单酰胺 -4-(3- 羧甲基 -2- 氧代 -1- 苯并咪唑基 - 哌啶 -BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2323] DO3A- 单酰胺 -6-( 哌嗪 -1- 基 )-4-(3H)- 喹唑酮 -3- 乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2324] DO3A- 单 酰 胺 -(2S， 5S)-5- 氨 基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六 氢 - 氮 杂 卓 [3， 21-hi] 吲 哚 -4- 酮 -2- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2325] DO3A- 单 酰 胺 -(4S， 7R)-4- 氨 基 -6- 氮 杂 -5- 氧 代 -9- 硫 代 双 环 [4.3.0] 壬 烷 -7- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2326] DO3A- 单酰胺 -N， N- 二甲基甘氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2327] DO3A- 单 酰 胺 -3- 羧 甲 基 -1- 苯 基 -1， 3， 8- 三 氮 杂 螺 [4.5] 癸 烷 -4- 酮 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2328] DO3A- 单酰胺 -N1- 哌嗪乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2329] DO3A- 单酰胺 -N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14)序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2330] DO3A- 单 酰 胺 -(3S)-3- 氨 基 -1- 羧 甲 基 己 内 酰 胺 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2331] DO3A- 单酰胺 -(2S， 6S， 9)-6- 氨基 -2- 羧甲基 -3， 8- 二氮杂双环 -[4， 3， 0]- 壬 烷 -1， 4- 二酮 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2332] DO3A- 单酰胺 -5- 氨基戊酸 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2333] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -D- 苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2334] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯甲酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中 所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2335] DO3A- 单酰胺 -4- 苯甲酰基 -(L)- 苯丙氨酸 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2336] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2337] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2338] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2339] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -1- 萘基丙胺酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2340] DO3A- 单 酰 胺 - 反 式 -4- 氨 基 甲 基 环 己 烷 -1- 羧 酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2341] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2342] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -2， 3- 二氨基丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2343] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2344] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -(2S， 5S)-5- 氨基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六氢 - 氮杂卓 [3， 21-hi] 吲哚 -4- 酮 -2- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2345] DO3A- 单 酰 胺 - 反 式 -4- 氨 基 甲 基 环 己 烷 -1- 羧 酸 - 反 式 -4- 氨 基 甲 基 环 己 烷 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2346] DO3A- 单 酰 胺 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 - 苯 丙 氨 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2347] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 - 苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中 所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2348] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基辛酸 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2349] DO3A- 单酰胺 -4’ - 氨基甲基 - 二苯基 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2350] DO3A- 单酰胺 -3’ - 氨基甲基 - 二苯基 -3- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2351] OTA-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQID NO ： 1；

    [2352] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯氧基乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2353] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯基乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2354] -4- 苯氧基 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2355] DO3A- 单酰胺 -3- 氨基甲基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2356] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯基乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2357] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基 -3- 甲氧基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2358] Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [2359] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 肼基苯甲酰基 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2360] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2361] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基苯甲酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2362] DO3A- 单酰胺 -Gly-6- 氨基烟碱酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2363] DO3A- 单酰胺 -Gly-4’ - 氨基 -2’ - 甲基二苯基 -4- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2364] DO3A- 单酰胺 -Gly-3’ - 氨基二苯基 -3- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2365] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-1， 2- 二 氨 基 乙 基 - 对 苯 二 甲 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2366] DO3A- 单酰胺 -Gly-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2367] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -EWAVGHLM-NH2， 其中 EWAVGHLM-NH2 ？是 SEQ ID NO ： 2；

    [2368] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHLM-OH 其中 QWAVGHLM-OH 是 SEQ ID NO ： DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -(D)-Phe-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列2081；

    [2369] 102076214 A CN 102076221说明书205/220 页是 SEQ ID NO ： 1；

    [2370] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QRLGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 3；

    [2371] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 ？ 是 SEQ ID NO ： 4；

    [2372] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 5；

    [2373] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -(D)-Phe-QWAVGHL-NH- 戊 基，其 中 QWAVGHL-NH- 戊基是 SEQ ID NO ： 6；

    [2374] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWSVaHLM-NH2， 其中 QWSVaHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 7；

    [2375] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -(D)-Phe-QWAVGHLL-NH2QWAVGHLL-NH2 是 SEQ ID NO ： 8；

    [2376] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -(D)-Tyr-QWAV-Bala-HF-Nle-NH2，其 中 QWAV-Bala-HF-Nle-NH2 是 SEQ ID NO ： 9；

    [2377] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -Phe-QWAV-Bala-HF-Nle-NH2， 其 中 QWAV-Bala-HF-Nle-NH2 是 SEQ ID NO ： 9；

    [2378] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAGHFL-NH2， 其中 QWAGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 10 ；

    [2379] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -LWAVGSFM-NH2， 其中 LWAVGSFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；

    [2380] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -HWAVGHLM-NH2， 其中 HWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 12 ；

    [2381] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -LWAVGSFM-NH2， 其中 LWAVGSFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；

    [2382] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHFM-NH2， 其中 QWAVGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 13 ；

    [2383] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2384] DO3A- 单酰胺 -Gly-6- 氨基萘甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2385] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 甲基氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2386] m10d2a-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2387] 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-4- 氨 基 苯 甲 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2388] 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -BBN(7-14)， 其中 所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 甲氧基 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2390] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 氯 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2391] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 甲基 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2392] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 羟基 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2393] ADO3A- 单酰胺 )2-N， N′ - 双 (2- 氨基乙基 )- 琥珀酰胺酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2394] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHFL-NH2， 其中 QWAVGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 22 ；

    [2395] DO3A- 单 酰 胺 -4- 氨 基 甲 基 苯 甲 酸 -L-1- 萘 基 丙 胺 酸 -QWAVGHLM-NH2， 其中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2396] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGNMeHisLM-NH2， 其中 QWAVGNMeHisLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 15 ；

    [2397] -Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1； 和

    [2398] zta-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQID NO ： 1。

    [2399] 154. 实施方案 146 的方法， 其中所述标记化合物含有 DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基 苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [2400] 155. 用于在受试者中增加标记化合物对表达 GRP 受体的靶组织的靶向性的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予受试者包括下述组合的剂量 ：

    [2401] 第一靶向 GRP 受体的肽以在非靶组织中占据 GRP 受体结合位置， 和

    [2402] 如下通式的标记化合物 ：

    [2403] M-N-O-P-G

    [2404] 其中

    [2405] M 是与放射性核素络合的光学标记或金属螯合剂 ；

    [2406] N 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2407] O 是 α 或非 α 氨基酸 ； 和

    [2408] P 是 0、 α 或非 α 氨基酸或其它连接基团，

    [2409] 且 G 是第二靶向 GRP 受体的肽， 且

    [2410] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是非 α 氨基酸。

    [2411] 156. 实施方案 155 的方法， 其中第一靶向 GRP 受体的肽与连接基缀合。

    [2412] 157. 实施方案 155 的方法， 其中第一靶向 GRP 受体的肽与连结至一个或多个金属 螯合剂的连接基缀合。

    [2413] 158. 实施方案 157 的方法， 其中所述第一 GRP 受体肽、 连接基和金属螯合剂与第二 靶向 GRP 受体的肽、 N-O-P 连接基和标记化合物的金属螯合剂相同。

    [2414] 159. 实施方案 158 的方法， 其中所述非 α 氨基酸选自 ： 8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 ；N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪 - 乙酸 ； 和

    [2417] 具有式 NH2-(CH2CH2O)n-CH2CO2H 或 NH2-(CH2CH2O)n-CH2CH2CO2H 的聚乙二醇衍生物， 其中 n ＝ 2 至 100。

    [2418] 160. 实施方案 155 的方法， 其中所述金属螯合剂选自 DTPA、 DOTA、 DO3A、 HP-DO3A、 EDTA、 TETA、 EHPG、 HBED、 NOTA、 DOTMA、 TETMA、 PDTA、 TTHA、 LICAM、 MECAM， CMDOTA、 N， N- 二甲 基 Gly-Ser-Cys、 Aazta 和其衍生物 .

    [2419] 161. 实施方案 155 的方法， 其中所述标记化合物所包含的化合物选自 ：

    [2420] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Lys-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2421] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Arg-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2422] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2423] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Ser-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2424] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2425] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Glu-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2426] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Dala-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2427] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2428] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2429] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2430] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2431] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2432] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Glu-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2433] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Dala-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2434] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2435] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基 丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2437] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂 辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2438] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2439] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Asp-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2440] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2441] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Arg-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2442] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [2443] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基 1； 丙酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ：

    [2444] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Lys-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2445] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂 辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2446] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2447] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2448] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2449] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [2450] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -2， 3- 二 氨基丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2451] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4- 氨 基 乙 基 -N-1- 哌 嗪 乙 酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2452] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Asp-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2453] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2455] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛

    [2454] 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2456] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌 嗪 乙 酸 -2， 3- 二 氨 基 丙 酸 BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2457] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1- 哌嗪乙酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2458] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-4- 羟基脯氨酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2459] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-4- 氨基脯氨酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2460] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Lys-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2461] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Arg-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2462] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Ser-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2463] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2464] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Asp-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2465] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Ser-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2466] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Arg-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2467] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [2468] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -2， 3- 二氨基 丙酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2469] N， N- 二 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -Lys-Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； 和

    [2470] N， N- 二甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-2， 3- 二氨基丙酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂 辛酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [2471] 162. 实施方案 155 的方法， 其中所述标记化合物所包含的化合物选自 ：

    [2472] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 - 二氨基丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2473] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2474] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2475] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -4- 苯甲酰基苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2476] DO3A- 单酰胺 -5- 氨基戊酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2477] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -D- 苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2478] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基辛酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2479] DO3A- 单 酰 胺 -E(G8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 QWAVGHLM-NH2)-8- 氨基辛酸 -8- 氨基辛酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； 和

    [2480] DO3A- 单 酰 胺 -E(G-Aoa-Aoa-QWAVGHLM-NH2)-8- 氨 基 辛 酸 -8- 氨 基 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [2481] 163. 用于在受试者中增加标记化合物对表达 GRP 受体的靶组织靶向性的方法， 所 述方法包括下述步骤 ： 给予受试者包括如下组合的的剂量 ：

    [2482] 第一靶向 GRP 受体的肽以在非靶组织中占据 GRP 受体结合位置， 和

    [2483] 如下通式的标记化合物 ：

    [2484] M-N-O-P-G

    [2485] 其中

    [2486] M 是与放射性核素络合的光学标记或金属螯合剂 ；

    [2487] N 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ；

    [2488] O 是 α 氨基酸或取代的胆酸 ；

    [2489] P 是 0、 α 氨基酸、 取代的胆酸或其它连接基团 ；

    [2490] G 是第二靶向 GRP 受体的肽， 且

    [2491] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是取代的胆酸。

    [2492] 164. 实施方案 163 的方法， 其中第一靶向 GRP 受体的肽与连接基缀合。

    [2493] 165. 实施方案 163 的方法， 其中第一靶向 GRP 受体的肽与连结至一个或多个金属 螯合剂的连接基缀合。

    [2494] 166. 实施方案 166 的方法， 其中所述第一 GRP 受体肽、 连接基和金属螯合剂与第二 靶向 GRP 受体的肽、 N-O-P 连接基和标记化合物的金属螯合剂相同。

    [2495] 167. 实施方案 163 的方法， 其中所述取代的胆酸选自 ：

    [2496] 3β- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 ；

    [2497] (3β， 5β)-3- 氨基胆烷 -24- 酸 ；

    [2498] (3β， 5β， 12α)-3- 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 ；

    [2499] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 ；

    [2500] Lys-(3， 6， 9)- 三氧十一烷 -1， 11- 二羰基 -3， 7- 二脱氧 -3- 氨基胆汁酸 ) ；

    [2501] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7- 羟基 -12- 氧代胆烷 -24- 酸 ； 和 (3β， 5β， 7α)-3- 氨基 -7- 羟基胆烷 -24- 酸 .

    [2503] 168. 实施方案 163 的方法， 其中所述金属螯合剂选自 ： DTPA、 DOTA、 DO3A、 HPDO3A、 EDTA、 TETA、 CMDOTA、 N， N- 二甲基 Gly-Ser-Cys， Aazta 和其衍生物。

    [2502] 169. 实施方案 163 的方法， 其中所述标记化合物所包含的化合物选自 ：

    [2505] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β)-3- 氨 基 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2506] DO3A- 单酰胺 -Gly-(3β， 5β， 12α)-3- 氨基 -12- 羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2507] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2508] DO3A- 单酰胺 -Gly-Lys-(3， 6， 9)- 三氧十一烷 -1， 11- 二羰基 -3， 7- 二脱氧 -3- 氨 基胆汁酸 )-Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2509] (3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -3， 6， 9- 三氧十一烷 -1， 11- 二羰基 Pglu-Q-Lys(DO3A- 单酰胺 -Gly)-Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列

    [2510] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3 β， 5 β， 7 α， 12 α )-3- 氨 基 -12- 氧 代 胆 烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2511] DO3A- 单酰胺 -1- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二 羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2512] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVaHLM-NH2， 其中 QWAVaHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 14 ；

    [2513] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-QWAVGHLM-NH2， 其中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2514] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-WAVGHLL-NH2， 其中 WAVGHLL-NH2 是 SEQ ID NO ： 26 ；

    [2515] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-QWAVGHL-NH- 戊基， 其中 QWAVGHL-NH- 戊基是 SEQ ID NO ： 6；

    [2516] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -y-QWAV-Bala-H-F-Nle-NH2， 其中 QWAV-Bala-H-F-Nle-NH2 是 SEQ IDNO ： 9；

    [2517] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -f-QWAV-Bala-H-F-Nle-NH2， 其中 QWAV-Bala-H-F-Nle-NH2 是 SEQ IDNO ： 9；

    [2518] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVGHFL-NH2， 其中 QWAVGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 22 ；

    [2519] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QWAVGNMeH-L-M-NH2， 其中 QWAVGNMeH-L-M-NH2， 其中 QWAVGNMeH-L-M-NH2 是 SEQ ID NO ： 15 ；

    [2520] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -LWAVGSF-M-NH2， 其中 LWAVGSF-M-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；

    [2521] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -HWAVGHLM-NH2， 其中 HWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 12 ；

    [2522] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -LWAGHFM-NH2， 其中 LWAGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 20 ；

    [2523] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆烷 -24- 酸 -QWAVGHFM-NH2， 其中 QWAVGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 13 ；

    [2524] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QRLGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQID NO ： 3；

    [2525] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQID NO ： 4；

    [2526] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQID NO ： 5；

    [2527] -Lys(DO3A- 单 酰 胺 )-Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨 基 -7， 12- 二 羟 基 胆 烷 -24- 酸 -LGNQWAVGHLM-NH2， 其中 LGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 18 ；

    [2528] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QRLGNQWAVGHLM-NH2，其 中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 3；

    [2529] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2，其 中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 4；

    [2530] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2，其 中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQID NO ： 5；

    [2531] Pglu-Q-Lys(DO3A- 单 酰 胺 DO3A- 单 酰 胺 -G-3- 氨 基 -3- 脱 氧 胆 汁 酸 )-LGNQWAVGHLM-NH2， 其中 LGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ IDNO ： 18 ；

    [2532] Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； 和

    [2533] ta-Gly-(3β， 5β， 7a， 12a)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中 所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1.

    [2534] 170. 实施方案 163 的方法， 其中所述标记化合物包含 DO3A- 单酰胺 -Gly-(3β， 5β， 7α， 12α)-3- 氨基 -7， 12- 二羟基胆烷 -24- 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1。

    [2535] 171. 用于在受试者中增加标记化合物对表达 GRP 受体的靶组织靶向性的方法， 所 述方法包括下述步骤 ： 给予受试者包括下述组合的剂量 ：

    [2536] 第一靶向 GRP 受体的肽以在非靶组织中占据 GRP 受体结合位置， 和

    [2537] 如下通式的标记化合物 ：

    [2538] M-N-O-P-G

    [2539] 其中

    [2540] M 是与放射性核素络合的光学标记或金属螯合剂 ；

    [2541] N 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团 ；

    [2542] O 是具有环状基团的 α 氨基酸或非 α 氨基酸 ；

    [2543] P 是 0、 具有环状基团的 α 氨基酸、 非 α 氨基酸或其它连接基团 ； 且

    [2544] G 是第二靶向 GRP 受体的肽，

    [2545] 其中 N、 O 或 P 中至少一个是具有环状基团的非 α 氨基酸。

    [2546] 172. 实施方案 171 的方法， 其中第一靶向 GRP 受体的肽与连接基缀合。

    [2547] 173. 实施方案 171 的方法， 其中第一靶向 GRP 受体的肽与连结至一个或多个金属 螯合剂的连接基缀合。174. 实施方案 173 的方法， 其中所述第一 GRP 受体肽、 连接基和金属螯合剂与靶向 GRP 受体的肽、 N-O-P 连接基和标记化合物的金属螯合剂相同。

    [2549] 175. 实施方案 171 的方法， 其中所述具有环状基团的非 α 氨基酸选自 ：

    [2550] 4- 氨基苯甲酸 ；

    [2551] 4- 氨基甲基苯甲酸 ；

    [2552] 反式 -4- 氨基甲基环己烷羧酸 ；

    [2553] 4-(2- 氨基乙氧基 ) 苯甲酸 ；

    [2554] 六氢异烟酸 ；

    [2555] 2- 氨基甲基苯甲酸 ；

    [2556] 4- 氨基 -3- 硝基苯甲酸 ；

    [2557] 4-(3- 羧甲基 -2- 氧代 -1- 苯并咪唑基 )- 哌啶 ；

    [2558] 6-( 哌嗪 -1- 基 )-4-(3H)- 喹唑酮 -3- 乙酸 ；

    [2559] (2S， 5S)-5- 氨基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六氢 - 氮杂卓 [3， 21-hi] 吲哚 -4- 酮 -2- 羧酸 ；

    [2560] (4S， 7R)-4- 氨基 -6- 氮杂 -5- 氧代 -9- 硫代双环 [4.3.0] 壬烷 -7- 羧酸 ；

    [2561] 3- 羧甲基 -1- 苯基 -1， 3， 8- 三氮杂螺 [4.5] 癸烷 -4- 酮 ；

    [2562] N1- 哌嗪乙酸 ；

    [2563] N-4- 氨基乙基 -N-1- 乙酸 ；

    [2564] (3S)-3- 氨基 -1- 羧甲基己内酰胺 ； 和

    [2565] (2S， 6S， 9)-6- 氨基 -2- 羧甲基 -3， 8- 二氮杂双环 -[4， 3， 0]- 壬烷 -1， 4- 二酮。

    [2566] 176. 实施方案 171 的方法， 其中所述金属螯合剂选自 ： DTPA、 DOTA、 DO3A、 HPDO3A、 EDTA、 TETA、 N， N- 二甲基 Gly-Ser-Cys、 Aazta 和其衍生物。

    [2567] 177. 实施方案 171 的方法， 其中所述标记化合物所包含的化合物选自

    [2568] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2569] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2570] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己基羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2571] DO3A- 单酰胺 -4-(2- 氨基乙氧基 ) 苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2572] DO3A- 单酰胺 -Gly- 六氢异烟酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2573] DO3A- 单酰胺 -2- 氨基甲基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2574] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基 -3- 硝基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1； DO3A- 单酰胺 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -1- 萘基丙胺酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2576] DO3A- 单酰胺 -4-(3- 羧甲基 -2- 氧代 -1- 苯并咪唑基 - 哌啶 -BBN(7-14)， 其中所

    [2575] 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2577] DO3A- 单酰胺 -6-( 哌嗪 -1- 基 )-4-(3H)- 喹唑酮 -3- 乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2578] DO3A- 单 酰 胺 -(2S， 5S)-5- 氨 基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六 氢 - 氮 杂 卓 [3， 21-hi] 吲 哚 -4- 酮 -2- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2579] DO3A- 单 酰 胺 -(4S， 7R)-4- 氨 基 -6- 氮 杂 -5- 氧 代 -9- 硫 代 双 环 [4.3.0] 壬 烷 -7- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2580] DO3A- 单酰胺 -N， N- 二甲基甘氨酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2581] DO3A- 单 酰 胺 -3- 羧 甲 基 -1- 苯 基 -1， 3， 8- 三 氮 杂 螺 [4.5] 癸 烷 -4- 酮 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2582] DO3A- 单酰胺 -N1- 哌嗪乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2583] DO3A- 单酰胺 -N-4- 氨基乙基 -N-1- 哌嗪乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2584] DO3A- 单 酰 胺 -(3S)-3- 氨 基 -1- 羧 甲 基 己 内 酰 胺 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2585] DO3A- 单酰胺 -(2S， 6S， 9)-6- 氨基 -2- 羧甲基 -3， 8- 二氮杂双环 -[4， 3， 0]- 壬 烷 -1， 4- 二酮 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2586] DO3A- 单酰胺 -5- 氨基戊酸 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2587] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -D- 苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2588] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯甲酸 -8- 氨基 -3， 6- 二氧杂辛酸 -BBN(7-14)， 其中 所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2589] DO3A- 单酰胺 -4- 苯甲酰基 -(L)- 苯丙氨酸 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2590] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -Arg-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2591] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -Lys-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2592] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2593] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -1- 萘基丙胺酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2594] DO3A- 单 酰 胺 - 反 式 -4- 氨 基 甲 基 环 己 烷 -1- 羧 酸 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2595] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -Ser-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -2， 3- 二氨基丙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2597] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 - 二苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2598] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -(2S， 5S)-5- 氨基 -1， 2， 4， 5， 6， 7- 六氢 - 氮杂卓 [3， 21-hi] 吲哚 -4- 酮 -2- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2599] DO3A- 单 酰 胺 - 反 式 -4- 氨 基 甲 基 环 己 烷 -1- 羧 酸 - 反 式 -4- 氨 基 甲 基 环 己 烷 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2600] DO3A- 单 酰 胺 -8- 氨 基 -3， 6- 二 氧 杂 辛 酸 - 苯 丙 氨 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2601] DO3A- 单酰胺 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 - 苯丙氨酸 -BBN(7-14)， 其中 所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2602] DO3A- 单酰胺 -8- 氨基辛酸 - 反式 -4- 氨基甲基环己烷 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其 中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2603] DO3A- 单酰胺 -4’ - 氨基甲基 - 二苯基 -1- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2604] DO3A- 单酰胺 -3’ - 氨基甲基 - 二苯基 -3- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2605] TA-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQID NO ： 1；

    [2606] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯氧基乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2607] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基苯基乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2608] 3A-4- 苯氧基 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2609] DO3A- 单酰胺 -3- 氨基甲基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2610] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基苯基乙酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2611] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基甲基 -3- 甲氧基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2612] ly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1；

    [2613] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 肼基苯甲酰基 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2614] DO3A- 单酰胺 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1； DO3A- 单酰胺 -4- 氨基苯甲酸 -Gly-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2616] DO3A- 单酰胺 -Gly-6- 氨基烟碱酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ

    [2615] ID NO ： 1；

    [2617] DO3A- 单酰胺 -Gly-4’ - 氨基 -2’ - 甲基二苯基 -4- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2618] DO3A- 单酰胺 -Gly-3’ - 氨基二苯基 -3- 羧酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2619] DO3A- 单 酰 胺 -Gly-1， 2- 二 氨 基 乙 基 - 对 苯 二 甲 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2620] DO3A- 单酰胺 -Gly-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2621] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -EWAVGHLM-NH2， 其中 EWAVGHLM-NH2， 是 SEQ ID NO ： 2；

    [2622] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHLM-OH， 其中 QWAVGHLM-OH 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2623] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -(D)-Phe-BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2624] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QRLGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRLGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 3；

    [2625] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QRYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QRYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 4；

    [2626] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QKYGNQWAVGHLM-NH2， 其中 QKYGNQWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 5；

    [2627] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -(D)-Phe-QWAVGHL-NH- 戊 基，其 中 QWAVGHL-NH- 戊基是 SEQ ID NO ： 6；

    [2628] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWSVaHLM-NH2， 其中 QWSVaHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 7；

    [2629] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -(D)-Phe-QWAVGHLL-NH2， 其中 QWAVGHLL-NH2 是 SEQ ID NO ： 8；

    [2630] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -(D)-Tyr-QWAV-Bala-HF-Nle-NH2，其 中 QWAV-Bala-HF-Nle-NH2 是 SEQ ID NO ： 9；

    [2631] DO3A- 单 酰 胺 -G-4- 氨 基 苯 甲 酸 -Phe-QWAV-Bala-HF-Nle-NH2， 其 中 QWAV-Bala-HF-Nle-NH2 是 SEQ ID NO ： 9；

    [2632] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAGHFL-NH2， 其中 QWAGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 10 ；

    [2633] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -LWAVGSFM-NH2， 其中 LWAVGSFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；

    [2634] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -HWAVGHLM-NH2， 其中 HWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 12 ；

    [2635] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -LWAVGSFM-NH2， 其中 LWAVGSFM-NH2 是 SEQ ID NO ： 11 ；DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHFM-NH2， 其中 QWAVGHFM-NH2 是 SEQ ID NO ：13 ； DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2638] DO3A- 单酰胺 -Gly-6- 氨基萘甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2639] DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 甲基氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2640] m10d2a-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2641] 甲 基 甘 氨 酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-4- 氨 基 苯 甲 酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2642] 甲基甘氨酸 -Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-3- 氨基 -3- 脱氧胆汁酸 -BBN(7-14)， 其中所 述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2643] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 甲氧基 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2644] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 氯 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2645] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 甲基 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2646] DO3A- 单酰胺 -Gly-3- 羟基 -4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序 列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2647] DO3A- 单酰胺 )2-N， N′ - 双 (2- 氨基乙基 )- 琥珀酰胺酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1；

    [2648] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGHFL-NH2， 其中 QWAVGHFL-NH2 是 SEQ ID NO ： 22 ；

    [2649] DO3A- 单 酰 胺 -4- 氨 基 甲 基 苯 甲 酸 -L-1- 萘 基 丙 胺 酸 -QWAVGHLM-NH2， 其中 QWAVGHLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 1；

    [2650] DO3A- 单酰胺 -G-4- 氨基苯甲酸 -QWAVGNMeHisLM-NH2， 其中 QWAVGNMeHisLM-NH2 是 SEQ ID NO ： 15 ；

    [2651] Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1； 和

    [2652] ta-Gly-4- 氨基苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ IDNO ： 1。

    [2653] 178. 实施方案 171 的方法， 其中所述标记化合物包含 DO3A- 单酰胺 -Gly-4- 氨基 苯甲酸 -BBN(7-14)， 其中所述 BBN(7-14) 序列是 SEQ ID NO ： 1。

    [2654] 179. 实施方案 128 的方法， 其中所述第一剂量的靶向 GRP 受体的肽是激动剂。

    [2655] 180. 实施方案 137 的方法， 其中所述第一剂量的靶向 GRP 受体的肽是激动剂。

    [2637] 181. 实施方案 146 的方法， 中所述第一剂量的靶向 GRP 受体的肽是激动剂。 182. 实施方案 155 的方法， 其中第一靶向 GRP 受体的肽是激动剂。 183. 实施方案 163 的方法， 其中第一靶向 GRP 受体的肽是激动剂。184. 实施方案 171 的方法， 其中第一靶向 GRP 受体的肽是激动剂。

    [2660] 185. 治疗转移前列腺癌骨或软组织的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予受试者 包括下述物质的剂量 ：

    [2661] 许多放射性标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二碳 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨 酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺。

    [2662] 186. 实施方案 185 的方法， 其中所述放射性标记是 177Lu。

    [2663] 187. 实施方案 185 的方法， 其中所述剂量是大约 3-30mCi/kg 的 177Lu- 标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 s( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二碳 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺。

    [2664] 188. 实施方案 185 的方法， 其中所述剂量是静脉内给予。

    [2665] 189. 实施方案 185 的方法， 其中所述肿瘤显示异常的维管结构的减少。

    [2666] 190. 实施方案 185 的方法， 其中发展时间增加至少大约 15％。

    [2667] 191. 治疗对激素敏感的前列腺癌的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予受试者包 括如下物质的剂量 ：

    [2668] 大量放射性标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二碳 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨 酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺。

    [2669] 192. 实施方案 191 的方法， 其中所述放射性标记是 177Lu。

    [2670] 193. 实施方案 191 的方法， 其中所述剂量是大约 3-30mCi/kg 的 177Lu- 标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二碳 -1 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺。

    [2671] 194. 实施方案 191 的方法， 其中所述剂量是静脉内给予。

    [2672] 195. 实施方案 191 的方法， 其中所述肿瘤显示异常的维管结构的减少。

    [2673] 196. 实施方案 191 的方法， 其中发展时间增加至少大约 15％。

    [2674] 197. 治疗激素难以治疗的前列腺癌的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予受试者 包括下述物质的剂量 ：

    [2675] 大量放射性标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二碳 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨 酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺。

    [2676] 198. 实施方案 197 的方法， 其中所述放射性标记是 177Lu。

    [2677] 199. 实施方案 197 的方法， 其中所述剂量是大约 3-30mCi/kg 的 177Lu- 标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二碳 -1 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺。

    [2678] 200. 实施方案 197 的方法， 其中所述剂量是静脉内给予。

    [2679] 201. 延迟激素敏感的前列腺癌的发展的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予受试者包括下述物质的剂量 ：

    [2680] 大量放射性标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环 十二碳 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨 酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺， 足以导致在肿 瘤中异常的维管结构的减少或发展时间的增加。

    [2681] 202. 实施方案 201 的方法， 其中所述放射性标记是 177Lu。

    [2682] 203. 实施方案 201 的方法， 其中所述剂量是大约 3-30mCi/kg 的 177Lu- 标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二碳 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺。

    [2683] 204. 实施方案 201 的方法， 其中所述剂量是静脉内给予。

    [2684] 205. 实施方案 201 的方法， 其中所述肿瘤显示异常的维管结构的减少。

    [2685] 206. 实施方案 201 的方法， 其中发展的时间至少增加大约 15％。

    [2686] 207. 实施方案 201 的方法， 其中发展的时间至少增加大约 50％。

    [2687] 208. 实施方案 201 的方法， 其中发展时间增加大约 100％。

    [2688] 209. 利于激素敏感的前列腺癌的组合治疗的方法， 所述方法包括下述步骤 ： 给予 受试者包括如下物质的剂量 ：

    [2689] 大量的放射性标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二碳 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨 酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺， 足以导致在肿 瘤中异常的维管结构的减少或发展时间的增加。

    [2690] 210. 实施方案 209 的方法， 其中所述放射性标记是 177Lu。

    [2691] 211. 实施方案 209 的方法， 其中所述剂量是大约 3-30mCi/kg 的 177Lu- 标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二碳 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺。

    [2692] 212. 实施方案 209 的方法， 其中所述剂量是静脉内给予。

    [2693] 213. 实施方案 209 的方法， 其中所述肿瘤显示异常的维管结构的减少。

    [2694] 214. 实施方案 209 的方法， 其中发展时间增加至少大约 15％。

    [2695] 215. 在激素敏感的前列腺癌的患者中减少异常血管通透性的方法， 所述方法包括 下述步骤 ： 给予受试者包括下述物质的剂量 ：

    [2696] 大量的放射性标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂 环十二碳 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨 酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺。

    [2697] 216. 实施方案 215 的方法， 其中所述放射性标记是 177Lu。

    [2698] 217. 实施方案 215 的方法， 其中所述剂量是大约 3-30mCi/kg 的 177Lu- 标记的 L70， N-[4-[[[[[4， 7， 10- 三 ( 羧甲基 )-1， 4， 7， 10- 四氮杂环十二碳 -1- 基 ] 乙酰基 ] 氨基 ] 乙酰 基 ] 氨基 ] 苯甲酰基 ]-L- 谷氨酰胺酰基 -L- 色氨酰 -L- 丙氨酰 -L- 缬氨酰 - 甘氨酰 -L- 组 氨酰基 -L- 亮氨酰 -L- 甲硫酰胺。218. 实施方案 215 的方法， 其中所述剂量是静脉内给予。

    [2700] 219. 通过观察在它们显示串流的 GRP 受体上的功能的这种效果变化， 检测当用一 种或多种的不同药物治疗时， 对多种受体之一的功能的效果的方法。

    [2701] 220. 使用 GRP 受体的放射标记的激动剂或拮抗剂， 特别是放射标记的 L70(AMBA)， 和最优选的用 Ga 放射标记的 L70， 在体外筛选 GRP 受体家族的活性的方法。

    [2702] 221. 使用 GRP 受体的放射标记的激动剂或拮抗剂， 特别是放射标记的 L70(AMBA)， 和最优选的用 Ga 放射标记的 L70， 在体内将 GRP 受体家族的活性成像的方法。

    [2703] 222. 改善患者管理的方法， 所述患者正经历靶向于与 GRP-R 串流的受体的药物治 疗， 所述方法包括在放射标记的 L70 给药至患者之后， 在初始治疗之前 ( 以得到基线值 )， 在 治疗期间 ( 以预见和监测反应， 和当肿瘤群的位移可能保证治疗剂的变化时进行测定 )， 和 在治疗结束或治疗之后 ( 以有助于效果的测定， 下一步的治疗和以预见或期待复发 )， 得到 一系列患者的成像， 和评价 GRP-R 活性的任何变化。