发明内容
本发明首次描述了用作食欲素受体拮抗剂的2-氮杂-二环[3.3.0]辛烷衍生物。
i)本发明的第一方面由具有(1S，3S，5S)-构型的立构中心的式(I)的化合物组成
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其中
A代表芳基或杂环基，其中该芳基或杂环基未被取代或被独立地单或双取代，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基、(C2-6)炔基、(C1-4)烷氧基、NR2R3、卤素以及未取代或独立地单或双取代的苯基，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、氟和氯；
B代表芳基-或杂环基-基团，其中该芳基或杂环基未被取代或被独立地单、双或三取代，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、三氟甲基、NR2R3、NHC(O)CH3和卤素；
R1代表芳基或杂环基，其中该芳基或杂环基未被取代或独立地被单、双或三取代，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、卤素、三氟甲基和NR2R3；或者R1代表2，3-二氢-苯并呋喃基-或2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英基-基团，该基团未被取代或独立地被(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基和卤素单或双取代；
R2代表氢或(C1-4)烷基；
R3代表氢或(C1-4)烷基。
本发明的另一部分是式(I)的化合物及其药学可接受的盐。
术语“卤素”指氟、氯或溴，优选为氟或氯。
单独或结合使用的术语“(C1-4)烷基”指具有1至4个碳原子的直链或支链烷基基团。(C1-4)烷基基团的范例为甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。优选甲基和乙基。最优选甲基。
单独或结合使用的术语“(C2-6)炔基”指具有2至6个碳原子的直链或支链化炔基基团。(C2-6)炔基基团的范例为乙炔基、1-丙炔基、1-丁炔基、3-甲基-1-丁炔基、1-戊炔基、3，3-二甲基-1-丁炔基、3-甲基-1-戊炔基、4-甲基-1-戊炔基或1-己炔基。
单独或结合使用的术语“(C3-6)环烷基”指具有3至6个碳原子的环烷基基团。(C3-6)环烷基基团的范例为环丙基，环丁基，环戊基或环己基。优选环丙基。
单独或结合使用的术语“(C1-4)烷氧基”指具式(C1-4)烷基-O-的基团，其中该术语“(C1-4)烷基具有前述含义，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。优选甲氧基和乙氧基。最优选甲氧基。
单独或结合使用的术语“芳基”指苯基或萘基基团。优选苯基基团。芳基基团可未被取代或被独立地单、双或三取代，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基、(C2-6)炔基、(C1-4)烷氧基、三氟甲基、NR2R3、NHC(O)CH3、卤素以及未取代或独立地单或双取代的苯基，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、氟和氯。
当“A”代表“芳基”时，该术语优选表示上述未被取代或被独立地单或双取代的基团，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基、(C2-6)炔基、(C1-4)烷氧基、NR2R3、卤素以及未被取代或被独立地单或双取代的苯基，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、氟和氯。“A”代表“芳基”的优选范例为未被取代或被独立地单或双取代的苯基(优选被单取代的苯基)，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基、(C1-4)烷氧基和NR2R3。一个范例是苯基。除了上述取代基，该取代基“A”还可被取代基“B”所取代。
在“B”代表“芳基”的情况下，该术语优选表示上述未被取代或被独立地单、双或三取代取代的基团，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、三氟甲基、NR2R3、NHC(O)CH3和卤素；“B”代表“芳基”的优选范例为未被取代或被独立地单、双或三取代的苯基(优选被单或双取代的苯基)，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、三氟甲基、NR2R3、NHC(O)CH3和卤素(优选：(C1-4)烷基、NHC(O)CH3、三氟甲基和卤素)。范例为苯基，3-甲基苯基、4-甲基苯基、3，5-二甲基苯基、2，4-二甲基苯基、3，4-二甲基苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、3-氯苯基、4-溴苯基、3，4-二氟苯基、3，4-二氯苯基、3-溴-4-氟苯基、3-乙酰氨基苯基和3-三氟甲基苯基。除了上述取代基，该取代基“B ”被连接至该取代基“A”。
在“A”和“B”都代表“芳基”的情况下，组合“A-B”优选表示“A”未被取代或独立地被单或双取代而“B”未被取代或被单、双或三取代的联苯基基团，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、三氟甲基、NR2R3、NHC(O)CH3和卤素。“A”和“B ”都代表“芳基”的优选范例为“A”未被取代或独立地被单或双取代而“B”未被取代或被单、双或三取代(优选单或双取代)的联苯基基团，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、三氟甲基和卤素。
在R1代表“芳基”的情况下，该术语优选表示上述未被取代或被独立地单、双或三取代的基团，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、卤素、三氟甲基和NR2R3(优选：(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、卤素和三氟甲基)。
单独或结合使用的术语“杂环基”指包含如1个、2个或3个选自氧，氮和硫的相同或不同杂原子的5-至10-元单环或双环芳香环。该种杂芳基基团的范例为呋喃基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并硫代苯基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯丙异噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、喹啉基、异喹啉基、萘啶基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、酞嗪基、吡唑酮[1，5-a]吡啶基、吡唑酮[1，5-a]嘧啶基、咪唑并[1，2-a]吡啶基以及咪唑并[2，1-b]噻唑基。上述杂环基基团也可未被取代或被独立地单、双或三取代，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基、(C2-6)炔基、(C1-4)烷氧基、卤素、三氟甲基、NR2R3、NHC(O)CH3以及未取代或独立地单或双取代的苯基，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、氟和氯。
当“A”代表“杂环基”时，该术语优选表示上述未被取代或被独立地单或双取代(优选未被取代或被单取代)的基团，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基、(C2-6)炔基、(C1-4)烷氧基、NR2R3、卤素以及未取代或独立地单或双取代的苯基，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、氟和氯。
在进一步优选的实施方式中，当“A”代表“杂环基”时该术语表示上述未被取代或被单取代的基团，其中该取代基选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基和NR2R3。“A”代表“杂环基”的优选范例为未被取代或被单取代的噻唑基、噁唑基、嘧啶基和吡嗪基(优选噻唑基)，其中该取代基选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基或NR2R3。除了上述取代基，该取代基“A”还可被取代基“B”所取代。
其它“A”代表“杂环基”而其中一个取代基为“B”的范例为：
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在“B”代表“杂环基”的情况下，该术语优选表示上述未被取代或被独立地单、双或三取代(优选单或双取代)的基团，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、三氟甲基、NR2R3和卤素(优选：(C1-4)烷基、三氟甲基和卤素)。除了上述取代基，该取代基“B”被连接至该取代基“A”。
在R1代表“杂环基”的情况下，该术语优选表示上述未被取代或被独立地单、双或三取代(优选未被取代或被独立地单或双取代)的基团，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、卤素、三氟甲基和NR2R3。在进一步优选的实施方式中，当R1代表“杂环基”时，该术语表示上述未被取代或被独立地单、双或三取代的基团，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、三氟甲基和卤素。在进一步优选的实施方式中，当R1代表“杂环基”时，该术语表示上述未被取代或被独立地单或双取代的基团，其中该取代基为甲基。
R1代表“杂环基”的优选范例为：
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R1代表“杂环基”的其它优选范例为：
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术语“NR2R3”指，例如，NH2和N(CH3)2。
术语“药学可接受的盐”指无毒性、无机或有机酸和/或碱加成盐。参见″Salt selection for basic drugs″，Int.J.Pharm.(1986)，33，201-217。
ii)本发明的进一步实施方式包括了根据实施方式i)的式(I)的化合物，其中
A代表杂环基，其中该杂环基未被取代或被单取代，其中该取代基选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基或NR2R3。
iii)本发明进一步的实施方式包括了根据实施方式i)至ii)任意一个的式(I)的化合物，其中
B代表芳基，其中该芳基未被取代或被独立地单或双取代，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、三氟甲基、NHC(O)CH3和卤素。
iv)本发明进一步的实施方式包括了根据实施方式i)至iii)任意一个的式(I)的化合物，其中
R1代表芳基或杂环基，其中该芳基或杂环基未被取代或独立地被单或双取代，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基和卤素；或者R1代表2，3-二氢-苯并呋喃基-或2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英基-基团。
v)本发明进一步的实施方式包括了根据实施方式i)至iv)任意一个的式(I)的化合物，其中
A代表噁唑基、噻唑基或嘧啶基基团，这些基团未被取代或被单取代，其中该取代基选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基或NH2。
vi)本发明进一步的实施方式包括了根据实施方式i)至v)任意一个的式(I)的化合物，其中
B代表苯基，其中该苯基未被取代或被独立地单或双取代，其中该取代基独立地选自(C1-4)烷基、三氟甲基和卤素。
vii)本发明进一步的实施方式包括了根据实施方式i)至vi)任意一个的式(I)的化合物，其中
R1代表咪唑并[2，1-b]噻唑基或苯并异噁唑基基团，该基团未被取代或被单取代，其中该取代基选自(C1-4)烷基、三氟甲基和卤素；或者R1代表2，3-二氢-苯并呋喃基-基团。
viii)本发明进一步的实施方式包括了根据实施方式i)至vii)任意一个的式(I)的化合物，其中
A代表噻唑基基团，该基团未被取代或被单取代，其中该取代基选自(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基或NH2。
ix)本发明进一步的实施方式包括了根据实施方式i)至viii)任意一个的式(I)的化合物，其中
R2和R3均代表氢。
优选化合物的范例选自如下组合：
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-甲基-5-对-甲苯基-噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺；
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-氨基-5-对-甲苯基-噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺；
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氯-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(4-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[2-环丙基-5-(4-氟-苯基)-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[2-环丙基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
苯并[d]异噁唑-3-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-甲基-5-对-甲苯基-噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺；
苯并[d]异噁唑-3-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氯-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
苯并[d]异噁唑-3-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
苯并[d]异噁唑-3-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-环丙基-5-苯基-噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氯-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(4-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-甲基-5-间-甲苯基-噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(4-溴-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3，5-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-溴-4-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3，4-二氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(2，4-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3，4-二氯-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3，4-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-乙酰氨基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺；
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-甲基-5-苯基-噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺；和
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-环丙基-5-苯基-噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺。
该种式(I)的化合物可用于能够预防或治疗选自以下组合的疾病的药剂的制备，并适于预防或治疗选自以下组合的疾病：心境恶劣障碍，包括抑郁症和循环性精神病，情感性神经症，各类躁狂抑郁症，精神错乱，精神障碍，精神分裂症，紧张性精神分裂症，幻觉妄想，调整紊乱和各种病态人格群；分裂情感性疾患；焦虑障碍包括广泛性焦虑症，强迫症强迫症，创伤后应激障碍，恐慌发作，各类恐怖性焦虑和回避；分离焦虑；所有的精神活性物质使用，滥用，寻求和恢复；各类心理或生理成瘾，分离性障碍(包括多重人格综合症和心因性遗忘)；性和生殖功能障碍；心理障碍和成瘾；耐受麻醉药品或麻醉品戒断；增加的麻醉风险，麻醉剂响应；下丘脑-肾上腺功能紊乱；不安生物和昼夜节律；与包括神经性疼痛和不安腿综合症的神经系统疾病等疾病有关的睡眠障碍；睡眠型呼吸暂停；嗜睡症；慢性疲劳综合症；与精神病有关的失眠；各类特发性失眠和深眠状态；睡眠-觉醒节律障碍，包括时差；所有健康人群和精神和神经紊乱中的痴呆和认知功能障碍；老化引起心理功能障碍；各类失忆症；严重的智力迟钝；运动障碍和肌肉疾病；肌肉痉挛，震颤，运动失调；自发和药物引起的运动障碍；神经退行性疾病，包括Huntington，Creutzfeld-Jacob，Alzheimer症和Tourette综合症；肌萎缩侧索硬化症，Parkinson病；Cushing综合症；外伤性病变；脊髓损伤；头部外伤；围产期缺氧；听力损失；耳鸣；脱髓鞘疾病；脊髓和颅神经疾病；眼损害；视网膜病变；癫痫；癫痫发作；失神发作，复杂部分性和全身发作；Lennox-Gastaut综合症；偏头痛和头痛；疼痛障碍；麻醉和镇痛；增强或夸大对疼痛的敏感性，如过敏，灼痛，并痛；急性疼痛；烧伤疼痛；非典型面部疼痛；神经性疼痛；背部疼痛；复杂性区域疼痛综合症I和II；关节炎疼痛；运动损伤疼痛；牙齿疼痛；感染有关的疼痛如艾滋病毒；化疗后疼痛；卒中后疼痛；手术后疼痛；神经痛，骨关节炎；与例如肠易激综合症等内脏痛相关的症状；进食失调；糖尿病；毒性和代谢异常疾病，包括脑缺氧，治疗糖尿病周围神经病变和酗酒；食欲，口味，进食，或饮水障碍；躯体形式障碍，包括疑病症；呕吐/恶心，呕吐，胃的运动障碍；胃溃疡；Kallman综合症(嗅觉丧失症)；糖耐量受损；肠动力性运动障碍；下丘脑疾病；垂体疾病；高热症状，发热，惊厥，特发性增长不足；侏儒症；巨人症，肢端肥大症；嗜碱性粒细胞腺瘤；催乳素瘤；高泌乳素血症，脑肿瘤，腺瘤；良性前列腺增生症，前列腺癌，子宫内膜，乳腺癌，结肠癌；各类睾丸功能障碍，生育控制；生殖激素异常；潮热；下丘脑性腺机能减退，心功能或闭经；膀胱尿失禁；哮喘；过敏；各类皮炎，痤疮和囊肿，皮脂腺功能紊乱；心血管疾病，心脏病和肺病的疾病，急性和充血性心力衰竭；低血压；高血压；血脂障碍，高脂血症，胰岛素抵抗；尿潴留；骨质疏松症；心绞痛；心肌梗死；心律不齐，冠状动脉疾病，左心室肥大；缺血性或出血性中风；各类脑血管疾病，包括蛛网膜下腔出血，缺血性和出血性中风和血管性痴呆；慢性肾功能衰竭和其他肾脏疾病，痛风，肾脏肿瘤；尿失禁；以及其它与一般食欲素系统功能紊乱有关的疾病。
该种式(I)的化合物可用于制备预防或治疗选自如下组合的疾病的药剂，并适用于预防或治疗选自如下组合的疾病：各类睡眠障碍，压力有关的综合症，精神活性物质的使用、滥用、寻求和恢复，健康人群及精神和神经系统紊乱中的认知功能障碍，进食或饮水失调的疾病或紊乱。
进食失调可定义为包括代谢障碍；错调食欲控制；强迫性肥胖；催吐贪食症(emeto-bulimia)或神经性厌食症。病理改变食物摄入量可能起因于干扰的食欲(对食物的吸引或厌恶)；改变能量平衡(摄入与消耗)；对食物品质的扰乱的感知(高脂肪或碳水化合物，高适口性)；扰乱的食物可利用性(无限制的节食或缺失)或破坏水平衡。
饮水失调包括精神紊乱中的烦渴以及所有其他类型的液体摄入量过多。
睡眠障碍包括各类异态睡眠，失眠症，嗜睡症以及其它过度嗜睡障碍，睡眠相关的张力失常；不宁腿综合症；睡眠型呼吸暂停；时差综合症；倒班工作综合症，睡眠时相后移或提前综合症或者与精神紊乱相关的失眠症。失眠症定义为包括与老化有关的睡眠障碍；慢性失眠的间歇治疗；情景短暂失眠(新的环境，噪音)或因压力；悲伤；疼痛或疾病而短期失眠。失眠还包括压力有关的综合症，包括创伤后应激障碍以及其他类型和亚型的焦虑症，如广泛性焦虑症，强制性障碍，惊恐发作和各类恐惧焦虑和回避。精神活性物质使用、滥用、寻求和恢复被定义为各类心理或生理成瘾及其相关耐受性和依赖性部分。认知功能障碍包括正常，健康，青年，成年或老龄人群中短暂或长期发生的，同时还在精神，神经系统，心血管和免疫系统疾病中短暂或长期发生的各类注意力，学习和记忆功能的缺陷。
在本发明进一步优选的实施方式中，式(I)的化合物可用于制备预防或治疗选自如下组合的疾病的药剂，并适用于预防或治疗选自如下组合的疾病：睡眠障碍，包括各类异态睡眠，失眠症，嗜睡症以及其它过度嗜睡障碍，睡眠相关的张力失常；不宁腿综合症；睡眠型呼吸暂停；时差综合症；倒班工作综合症，睡眠时相后移或提前综合症或者与精神紊乱相关的失眠症。
在本发明的另一优选的实施方式中，式(I)的化合物可用于制备预防或治疗选自如下组合的疾病的药剂，并适用于预防或治疗选自如下组合的疾病：认知功能障碍，包括正常，健康，青年，成年或老龄人群中短暂或长期发生的，同时还在精神，神经系统，心血管和免疫系统疾病中短暂或长期发生的各类注意力，学习和记忆功能的缺陷。
在本发明的另一优选的实施方式中，式(I)的化合物可用于制备预防或治疗选自如下组合的疾病的药剂，并适用于预防或治疗选自如下组合的疾病：进食失调，包括代谢障碍；错调食欲控制；强迫性肥胖；催吐贪食症或神经性厌食症。
在本发明的另一优选的实施方式中，式(I)的化合物可用于制备预防或治疗选自如下组合的疾病的药剂，并适用于预防或治疗选自如下组合的疾病：精神活性物质的使用、滥用、寻求和恢复，包括各类心理或生理成瘾及其相关耐受性和依赖性部分。
该药物组合物可以本领域任意技术人员熟知的方式(例如参见Remington，The Science and Practice of Pharmacy，21st Edition(2005)，Part 5，“Pharmaceutical Manufacturing”[published byLippincott Williams & Wilkins])进行生产，其包括将所述的式(I)的化合物及其药学可接受的盐，可选地联合其它有治疗价值的物质，连同适用的、无毒的、惰性的、治疗相容性固体或液体载体材料以及根据需要选用的常用药物佐剂制成盖仑制剂(galenical)形式。
该式(I)的化合物及其药学可接受的盐可用作药剂，例如，作为可进行肠内或肠胃外施用的药物组合物的形式。
本发明另一方面是制备式(I)的化合物的方法。本发明的式(I)的化合物可根据下文的路线图所概述的反应的一般顺序进行制备，其中A、B和R1如式(I)的描述所定义。所得的化合物也可通过本身已知的方式被转化为其药学可接受的盐。
总体而言，所有的化学转化均可参照文献或下文描述的步骤以公知的标准方法进行。
式(I)的化合物的制备：
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路线图1：式(I)的化合物的合成，其中A、B和R1如上文定义。
式(I)的2-氮杂-二环[3.3.0]辛烷衍生物的合成的第一步是用Boc2O保护(1S，3S，5S)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-羧酸酯的氮原子以得到化合物(2)，其通过用DIBAL在低温下处理被还原为醇(3)。以氧化剂如Dess-Martin高碘烷将醇(3)氧化为对应的醛(4)。通过在还原剂如三乙酰氢硼化钠存在下用苄胺将(4)还原胺化，通过氢解去除中间体(5)的苄基基团以得到伯胺(6)。在偶联剂如TBTU存在下用羧酸R1COOH酰化(6)导致氨化物(7)的形成，后者在去除Boc-基团后通过酰胺偶联(例如，B-A-COOH，TBTU)转化为式(I)的化合物。
例如式B-A-COOH的噻唑-4-羧酸衍生物可参照路线图2合成。
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路线图2：噻唑-4-羧酸衍生物的合成，其中B如上文定义，而R为(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基或NR2R3，其中R2和R3彼此独立的代表氢或(C1-4)烷基
通过二氯乙酸甲酯(9；已有市售)和醛在碱(如叔丁醇钾)存在下的反应可获得α-氧代-酯衍生物(10)，后者可在与硫酰胺[R＝(C1-4)烷基或(C3-6)环烷基]的反应中转化为2-烷基-或2-环烷基取代的噻唑衍生物(11)或在与硫脲(R＝NR2R3)的反应中转化为2-氨基-取代的噻唑衍生物(11)。用例如在甲醇等溶剂中的氢氧化钠的水性溶液将酯官能团皂化可形成所需的羧酸(12，R＝(C1-4)烷基、(C3-6)环烷基或NR2R3)。2-溴-噻唑衍生物(13)可通过例如在溴化铜(II)存在下用亚硝酸异戊酯与相应2-氨基-噻唑衍生物(11，R＝NH2)反应得到。酯衍生物(13)在采用环丙基-锡衍生物(已有市售)的钯催化反应中转化为化合物(14)，后者皂化得到相应的羧酸(15)。2-溴-噻唑衍生物(13)可如上所述额外地皂化为相应的羧酸(16)或者通过与甲醇钠反应后用氢氧化钠皂化转化为2-甲氧基取代的类似物(17)。此外，在2号位未取代的化合物(19)可通过在披钯碳存在下用氢氢化(13)后皂化中间体酯(18)得到。在(11)的合成中使用的(C3-6)环烷基-取代的硫酰胺已有市售，或者可通过相应氨甲酰与Lawesson试剂的反应获得(也可参见实验部分A.1.6)。醛B-CHO可从市场获得，或者通过来自文献的任意已知步骤合成得到，例如，用还原剂还原相应羧酸或其不同的衍生物，通过还原相应的腈或通过用氧化剂氧化苄醇及其杂环类似物(例如，J.March，Advanced Organic Chemistry，4th edition，John Wiley&Sons，p.447-449，919-920and 1167-1171)。
式R1-COOH的咪唑并[2，1-b]噻唑-羧酸衍生物如未有市售，则可以根据路线图3所示的不同路线之一合成。
路线A：
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路线B：
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路线C：
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路线D：
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路线E：
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路线F：
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路线图3：咪唑并[2，1-b]噻唑-羧酸衍生物的合成，其中R为甲基或乙基，Ra为氢或甲基，Rb为氢或甲基，X为氯或溴，Y为氯或三氟甲基。
根据路线A，咪唑并[2，1-b]噻唑-羧酸衍生物可由2-氯-3-氧代-丁酸甲酯(20；已有市售)起始通过与硫脲(已有市售)的反应在如乙醇等溶剂中在升高温度下的反应合成得到。所得的氨基-噻唑(21)通过烷化后用溴乙醛二乙基缩醛在浓盐酸等酸的存在下环化，被转化为咪唑并[2，1-b]噻唑衍生物(22)。通过在如THF和MeOH溶剂中以例如氢氧化钠皂化(22)可获得所需的酸(23)。
替代性的方法(路线B)起始于2-溴-3-氧代-丁酯(24；已有市售)与2-氨基-5-甲基-噻唑(已有市售)在如丙酮的溶剂中反应得到咪唑并[2，1-b]噻唑衍生物(25)，后者在如THF和MeOH溶剂中以例如氢氧化钠皂化转化为所需的酸(26)。
通过披钯碳存在下在酸性条件下(例如，含于EtOH的HCl)氢化2-羟基亚胺基-3-氧代-丁酯(27；已有市售)，随后与硫氰酸钾反应可得到咪唑衍生物(28)，其通过与相应α-卤化丙酮(已有市售)或丁酮衍生物(路线C；已有市售)反应得到两种可能异构体(29)和(30)的混合物。通过层析分离异构体(29)和(30)后用例如氢氧化钠在如THF和MeOH的溶剂中皂化得到所需的咪唑并[2，1-b]噻唑-羧酸衍生物(31)和(32)。
替代性地(路线D)，该咪唑衍生物(28)可通过用溴乙醛二乙基缩醛(已有市售)在乙醇钠等碱的存在下烷化转化为缩醛(33)。在酸性条件下(例如，盐酸水溶液)环化并通过例如三氯氧磷将中间体(34)脱水形成酯(35)，后者通过在如THF和MeOH等溶剂中用例如氢氧化钠皂化转化为所需的酸(36)。
在另一替代性步骤中(路线E)，相应的氨基-噻唑(37；已有市售)通过与N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(已有市售)在甲苯等溶剂中被加热，转化为甲脒衍生物(38)。用溴代乙酸乙酯(已有市售)烷化后，用DBU环化相应的溴化噻唑(39)得到酯(40)，后者在如THF和MeOH等溶剂中用例如氢氧化钠皂化转化为所需的酸(41)。
最后，路线F起始于用3-溴-1，1，1-三氟丙酮(已有市售)烷化2-氨基-噻唑(已有市售)得到三氟甲基-取代的咪唑并[2，1-b]噻唑衍生物(42)，后者通过在溶剂如DMF中与三氯氧磷反应甲酰基化为醛(43)。通过以氯酸钠氧化醛(43)可得到所需的咪唑并[2，1-b]噻唑-羧酸(44，Y＝CF3)。类似地，市售的氯化醛(43，Y＝Cl)被氧化为酸(44，Y＝Cl)。
实验部分
缩写(此处和上文所用)：
Ac 乙酰基，例如在OAc中为乙酸根
Boc 叔丁氧基羰基
BSA 牛血清白蛋白
Bu 正丁基
CHO 中国仓鼠卵巢
conc. 浓
d 天
DBU 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯
DCM 二氯甲烷
DIBAL 二异丁基氢化铝
DIPEA 二异丙基乙胺
DMAP 4-二甲氨基吡啶
DMF N，N-二甲基甲酰胺
eq 当量
ES 电喷雾
Et 乙基
EtOH 乙醇
EtOAc 乙酸乙酯
Ether 二乙醚
FCS 胎牛血清
FLIPR 荧光成像平板读取器
h 小时
HBSS Hank平衡盐溶液
HEPES 4-(2-羟乙基)-哌嗪-1-乙磺酸
HPLC 高效液相色谱
KOt-Bu 叔丁醇钾
LC 液相色谱
M 摩尔
Me 甲基
MeCN 乙腈
MeOH 甲醇
min 分钟
MS 质谱
Ph 苯基
prep. 制备
RT 室温
sat 饱和
tR 保留时间
TBTU O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
I-化学
以下实施例阐述了本发明的药理活性化合物的制备，但不限制本发明的范围。
所有的温度均以℃表示。
化合物通过如下方式鉴定：
1H-NMR：300MHz Varian Oxford或400MHz Bruker Avance；化学位移表示为相对所用溶剂的百万分之一；峰多重性：s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，m＝多重峰，b＝宽，偶联常数以Hz表示；
LC-MS：Agilent 1100系列，带有DAD和MS检测器(MS：Finnigan单四级)；柱(4.6x50mm，5μm)：Zorbax SB-AQ，ZorbaxExtend C18或Waters XBridge C18；条件：
碱性：洗脱液A：MeCN，洗脱液B：含于水的浓NH3(1.0mL/L)，5％-95％CH3CN；
酸性：洗脱液A：MeCN，洗脱液B：含于水中的TFA(0.4mL/L)，5％-95％CH3CN，tR以min表示；
采用MeCN/水梯度和甲酸或氨添加剂在硅胶上柱层析纯化或通过基于RP-C18柱的制备HPLC纯化化合物。
A.前体和中间体的制备：
A.1噻唑-4-羧酸衍生物的合成
A.1.13-氯-2-氧代-丙酸酯衍生物的合成
(一般步骤)
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将相应醛(338mmol，1.0eq)和二氯乙酸甲酯(338mmol，1.0eq)含于THF(100mL)的THF(100mL)溶液逐滴添加至KOtBu(335mmol，1.0eq)含于THF(420mL)的冷(-60℃)悬浮液中。4小时后将混合物升至室温，搅拌过夜并真空浓缩。添加DCM和冰冻水，分离层，并用DCM萃取水层两次。用冰冷水和盐水洗涤合并的有机层，以MgSO4干燥，并真空浓缩得到所需的α-氧代-酯，其不经进一步纯化便可使用。
3-氯-2-氧代-3-对-甲苯基-丙酸甲酯
通过4-甲基-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-3-(3-氟-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯
通过3-氟-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-3-(4-氟-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯
通过4-氟-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-3-(3-氯-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯
通过3-氯-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-2-氧代-3-间-甲苯基-丙酸甲酯
通过3-甲基-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-2-氧代-3-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸甲酯
通过3-三氟甲基-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-(4-溴-苯基)-3-氯-2-氧代-丙酸甲酯
通过4-溴基-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-3-(3，5-二甲基-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯
通过3，5-二甲基-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-(3-溴-4-氟-苯基)-3-氯-2-氧代-丙酸甲酯
通过3-溴-4-氟-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-3-(3，4-二氟-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯
通过3，4-二氟-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-3-(2，4-二甲基-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯
通过2.4-二甲基-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-3-(3，4-二氯-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯
通过3，4-二氯-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-3-(3，4-二甲基-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯
通过3，4-二甲基-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-2-氧代-3-苯基-丙酸甲酯
通过苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
3-氯-3-(3-硝基-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯
通过3-硝基-苯甲醛与二氯乙酸甲酯的反应制备。
A.1.2噻唑-4-羧酸甲酯衍生物的合成
(一般步骤)
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将硫代乙酰胺(132mmol，1.0eq)的MeCN(250mL)溶液添加至相应α-氧代-酯(132mmol，1.0eq)和分子筛![]()
在MeCN(60mL)中的混合物中。搅拌5小时后，将混合物在冰浴中冷却，过滤所得的沉淀。用冷MeCN洗涤残留物，干燥，溶于MeOH(280mL)，并在50℃下搅拌6小时。真空去除溶剂以得到成为白色固体的所需噻唑衍生物。
2-甲基-5-对-甲苯基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-2-氧代-3-对-甲苯基-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备。LC-MS：tR＝0.92min；[M+H]+＝248.2。
5-(3-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(3-氟-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.91min；[M+H]+＝252.1。
5-(4-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(4-氟-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。1H-NMR(CDCl3)：δ＝2.75(s，3H)；3.84(s，3H)；7.10(m，2H)；7.47(m，2H)。
5-(3-氯-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(3-氯-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.95min；[M+H]+＝268.0。
2-甲基-5-间-甲苯基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-2-氧代-3-间-甲苯基-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备。LC-MS：tR＝0.98min；[M+H]+＝248.5。
2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-2-氧代-3-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.98min；[M+H]+＝302.2。
5-(4-溴-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-(4-溴-苯基)-3-氯-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.95min；[M+H]+＝312.2。
5-(3，5-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(3，5-二甲基-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.97min；[M+H]+＝262.3。
5-(3-溴-4-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-(3-溴-4-氟-苯基)-3-氯-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.95min；[M+H]+＝330.2。
5-(3，4-二氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(3，4-二氟-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.92min；[M+H]+＝270.3。
5-(2，4-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(2.4-二甲基-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.96min；[M+H]+＝262.3。
5-(3，4-二氯-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(3，4-二氯-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.99min；[M+H]+＝302.2。
5-(3，4-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(3，4-二甲基-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.96min；[M+H]+＝262.3。
2-甲基-5-苯基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-2-氧代-3-苯基-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备。LC-MS：tR＝0.89min；[M+H]+＝234.0。
2-甲基-5-(3-硝基-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(3-硝基-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫代乙酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.94min；[M+H]+＝279.3。
A.1.32-氨基-噻唑-4-羧酸甲酯的合成
(一般步骤)
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将相应α-氧代-酯(22.1mmol，1.0eq)含于丙酮(25mL)的溶液添加至硫脲(22.1mmol，1.0eq)含于丙酮(45mL)的悬浮液中。将该混合物加热至57℃(浴温)，搅拌24小时，然后浓缩至一半体积。过滤所得的悬浮液，并以丙酮洗涤残留物。干燥后得到成为固体的所需氨基-噻唑衍生物。
2-氨基-5-对-甲苯基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-2-氧代-3-对-甲苯基-丙酸甲酯与硫脲的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.77min；[M+H]+＝249.3。
2-氨基-5-(4-氟-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(4-氟-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫脲的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.75min；[M+H]+＝253.2。
2-氨基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-3-(3-三氟甲基-苯基)-2-氧代-丙酸甲酯与硫脲的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.86min；[M+H]+＝303.3。
A.1.42-溴-噻唑-4-羧酸甲酯衍生物的合成
(一般步骤)
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在惰性气氛中，将溴化铜(II)(69.6mmol，1.0eq)悬浮于乙腈(300mL)中，并冷却至5-10℃，然后在15分钟内添加3-甲基亚硝酸丁酯(104mmol，1.45eq)。在5-10℃下20分钟内向该反应混合物分批添加相应的2-氨基噻唑衍生物(70.0mmol，1eq，游离胺)。然后将反应混合物小心加热至65℃，并继续搅拌2小时。减压去除挥发物，并通过柱层析(硅胶；庚烷/EtOAc或DCM/甲醇作为适当混合物)纯化残留物，以得到相应产物。
2-溴-5-(4-氟-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯
通过2-氨基-5-(4-氟-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.97min；[M+H]+＝316.1。
2-溴-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯
通过2-氨基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯的反应制备得到。LC-MS：tR＝1.04min；[M+H]+＝366.2。
A.1.52-环丙基-噻唑-4-羧酸甲酯衍生物的合成(一般步骤I)
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在惰性气氛中，将对应2-溴-噻唑衍生物(9.0mmol，1.0eq)和三丁基-环丙基-氢化锡(9.9mmol，1.1eq)在1，2-二氯乙烷(90mL)中的溶液搅拌5分钟，并用双(三苯基膦)-氯化钯(II)(0.45mmol，0.05eq)处理。该混合物被加热至80℃，搅拌3天，并达到室温。添加DCM和水，分离层，并用DCM萃取水层一次。以MgSO4干燥合并的有机层，并在真空下浓缩。柱层析(硅胶；庚烷/EtOAc作为合适的混合物)纯化残留物以得到所需的产物。
2-环丙基-5-(4-氟-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯
通过2-溴-5-(4-氟-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯的环丙烷化制备得到。LC-MS：tR＝0.97min；[M+H]+＝278.3。
2-环丙基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯
通过2-溴-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯的环丙烷化制备得到。LC-MS：tR＝1.03min；[M+H]+＝328.2。
A.1.6 2-环丙基-噻唑-4-羧酸甲酯衍生物的合成(一般步骤II)
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环丙烷硫代羟酸酰胺的合成
将2，4-双-(4-甲氧基-苯基)-[1，3，2，4]二噻二磷烷-2，4-二硫化物(Lawesson试剂，115mmol)加入环丙烷氨甲酰(115mmol)和碳酸钠(115mmol)在THF(500mL)中的混合物中。将混合物加热回流2小时，真空去除溶剂，并用二乙醚(500mL)和水(500mL)稀释残留物。分离层，用二乙醚(250mL)萃取水层。用盐水(100mL)洗涤合并的有机层，以MgSO4干燥，并真空浓缩得到所需的硫代酰胺，其不经进一步纯化便可使用。LC-MS：tR＝0.39min；[M+H+CH3CN]+＝143.2。
2-环丙基-噻唑-4-羧酸甲酯衍生物的合成(一般步骤II)
将环丙烷硫代羟酸酰胺(44.5mmol，1.0eq)的MeCN(40mL)溶液添加至相应α-氧代-酯衍生物(44.5mmol，1.0eq)和NaHCO3(134mmol，3.0eq.)在MeCN(80mL)中的混合物中。搅拌16小时后，将混合物真空浓缩，并用EtOAc(200mL)和水(200mL)稀释残留物。分离层，用EtOAc(100mL)萃取水层。以盐水(100mL)洗涤合并的有机层，以MgSO4干燥并真空浓缩。将粗制产物溶解于MeOH(90mL)，并用浓H2SO4(0.25mL)处理。将混合物在60℃下加热16小时，并真空浓缩得到相应的噻唑衍生物。
2-环丙基-5-苯基-噻唑-4-羧酸甲酯
通过3-氯-2-氧代-3-苯基-丙酸甲酯与环丙烷硫代羟酸酰胺的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.99min；[M+H]+＝260.5。
A.1.7 5-(3-乙酰氨基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的合成
A.1.7.1 5-(3-氨基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的合成
将2-甲基-5-(3-硝基-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯(44.1mmol)和氯化铵(220mmol)在乙醇(100mL)和水(50mL)的混合物中的悬浮液用铁粉(53.0mmol)处理并加热至80℃。4小时后再加一份铁粉(53.0mmol)，将混合物在80℃下搅拌3小时，继续加铁粉(26.5mmol)，并将混合物在80℃下继续搅拌3.5小时。将混合物回到室温，用DCM稀释并通过Celite过滤。真空浓缩滤出液，用DCM和饱和NaHCO3水溶液稀释。分离层，用水洗涤有机层，用MgSO4干燥并真空浓缩以得到所需的苯胺衍生物。LC-MS：tR＝0.67min；[M+H]+＝249.4。
A.1.7.2 5-(3-乙酰氨基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的合成
将三乙胺(14.2mmol)和DMAP(4.00mmol)添加至5-(3-氨基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯(4.00mmol)的乙酸酐溶液(25mL)中。30分钟后添加EtOAc和水，分离层，并用EtOAc萃取水层一次。用饱和氯化铵水溶液洗涤合并的有机层两次，一次用饱和NaHCO3水溶液洗涤，一次用水洗涤，真空去除溶剂。用EtOAc稀释残留物，并用饱和NaHCO3水溶液萃取三次。用MgSO4干燥有机层，并真空浓缩以得到粗制固体，用二乙醚稀释。过滤所得的悬浮液，用二乙醚洗涤残留物以得到所需的乙酰胺。LC-MS：tR＝0.81min；[M+H]+＝291.3.
A.1.8噻唑-4-羧酸衍生物的合成
(一般步骤)
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用NaOH水溶液(1.0M，192mL)处理相应酯(96.2mmol)在THF(150mL)和MeOH(或异丙醇，50mL)混合物中的溶液。搅拌3小时，形成白色悬浮液，并真空去除有机挥发物。用水(100mL)稀释剩余的混合物，在冰浴中冷却，并通过添加HCl水溶液(1.0M)进行酸化(pH＝3-4)。如出现沉淀，过滤悬浮液，用冷水洗涤残留物，并真空干燥得到所需酸。在其它情况下，用EtOAc萃取该混合物两次，合并有机层，MgSO4干燥并真空浓缩得到相应的酸。
2-甲基-5-对-甲苯基-噻唑-4-羧酸
通过2-甲基-5-对-甲苯基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.83min；[M+H]+＝234.0。
5-(3-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(3-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.82min；[M+H]+＝238.1。
5-(4-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(4-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。1H-NMR(DMSO-d6)：δ＝2.67(s，3H)；7.27(m，2H)；7.53(m，2H)；12.89(br.s，1H)。
5-(3-氯-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(3-氯-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.84min；[M+H]+＝254.0。
2-甲基-5-间-甲苯基-噻唑-4-羧酸
通过2-甲基-5-间-甲苯基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.87min；[M+H]+＝234.4。
2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羧酸
通过2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.88min；[M+H]+＝288.0。
5-(4-溴-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(4-溴-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.85min；[M+H]+＝298.2。
5-(3，5-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(3，5-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.86min；[M+H]+＝248.3。
5-(3-溴-4-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(3-溴-4-氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.86min；[M+H]+＝316.2。
5-(3，4-二氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(3，4-二氟-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.82min；[M+H]+＝256.3。
5-(2，4-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(2，4-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.85min；[M+H]+＝248.3。
5-(3，4-二氯-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(3，4-二氯-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.88min；[M+H]+＝288.2。
5-(3，4-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(3，4-二甲基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.86min；[M+H]+＝248.3。
2-甲基-5-苯基-噻唑-4-羧酸
通过2-甲基-5-苯基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.77min；[M+H]+＝220.0。
5-(3-乙酰氨基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸
通过5-(3-乙酰氨基-苯基)-2-甲基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.73min；[M+H]+＝277.2。
2-氨基-5-对-甲苯基-噻唑-4-羧酸
通过2-氨基-5-对-甲苯基-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.64min；[M+H]+＝235.2。
2-环丙基-5-(4-氟-苯基)-噻唑-4-羧酸
通过2-环丙基-5-(4-氟-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.87min；[M+H]+＝264.2。
2-环丙基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羧酸
通过2-环丙基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羧酸甲酯的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.94min；[M+H]+＝314.2。
2-环丙基-5-苯基-噻唑-4-羧酸
通过2-环丙基-5-苯基-噻唑-4-羧酸的皂化制备得到。LC-MS：tR＝0.91min；[M+H]+＝246.4。
A.2 2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸的合成
将苯并呋喃-4-羧酸(30.8mmol，M.A.Eissenstat等人J.Med.Chem.1995，38，3094-3105)添加至Pd/C(10％，2.00g)在EtOH(25mL)中的悬浮液中。额外添加EtOH(75mL)，在氢气气氛(4bar)下室温搅拌16小时。通过celite过滤后去除溶剂，所得的产物可不经进一步纯化直接使用。1H-NMR(DMSO-d6)：δ＝3.45(t，J＝8.79Hz，2H)；4.55(t，J＝8.79Hz，2H)；6.99(d，J＝7.78Hz，1H)；7.21(t，J＝7.91Hz，1H)；7.39(d，J＝7.78Hz，1H)；12.9(bs，1H)。
A.3(1S，3S，5S)-3-氨基甲基-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的合成
A.3.1(1S，3S，5S)-(2-叔丁氧基-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-羧酸苄酯的合成
向苄基(1S，3S，5S)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-羧酸酯盐酸化物(17.3mmol，1.0eq)在DCM(50mL)中的悬浮液添加DIPEA(22.5mmol，1.3eq)、重碳酸二叔丁酯(17.3mmol，1.0eq)和额外的DCM(5mL)。将混合物搅拌1小时，并真空浓缩。添加EtOAc和水性柠檬酸(10％)，分离层，并用EtOAc萃取水层一次。以盐水洗涤合并的有机层，以MgSO4干燥并真空浓缩。柱层析(庚烷/EtOAc 3/1)纯化残留物以得到所需的产物。LC-MS：tR＝1.08min；[M+H]+＝346.3。
A.3.2(1S，3S，5S)-3-羟甲基-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的合成
在-78℃下将DIBAL的甲苯溶液(1.7M，22.5mmol)逐滴添加至(1S，3S，5S)-(2-叔丁氧基-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-羧酸苄酯(9.0mmol)的THF(50mL)溶液。40分钟后，使混合物回到室温，再搅拌45分钟，注入NaOH水溶液(1.0M，250mL)和冰的混合物中。添加EtOAc，分离层，用EtOAc萃取水层。用NaOH水溶液(1.0M)和盐水洗涤合并的有机层，用MgSO4干燥并真空浓缩得到所需的醇，其可通过快速层析(庚烷/EtOAc 3/1)纯化。LC-MS：tR＝0.91min；[M+H]+＝242.4。
A.3.3(1S，3S，5S)-3-甲酰基-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的合成
用(1S，3S，5S)-3-羟甲基-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯(1.85mmol，1.0eq)的DCM(4mL)溶液和数滴水处理Dess-Martin高碘烷(4.14mmol，2.2eq)的DCM(10ml)溶液。5小时后添加二乙醚和NaOH水溶液(1.0M)，并分层。用水性柠檬酸(10％)和盐水洗涤有机层，以MgSO4干燥，并真空浓缩得到所需的醛，其不经进一步纯化便可使用。
A.3.4(1S，3S，5S)-3-(苄基氨基-甲基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的合成
将苄胺(2.76mmol，2.3eq)加入(1S，3S，5S)-3-甲酰基-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯(1.2mmol，1.0eq)的氯仿(10mL)溶液中。将混合物搅拌5分钟，用三乙酰氢硼化钠(4.8mmol，4.0eq)和醋酸(0.05mL)处理，再搅拌14小时，并注入饱和NaHCO3溶液。添加DCM，分离层，用DCM萃取水层。以水(100mL)洗涤合并的有机层，真空浓缩。将残留物溶解于二乙醚，并用盐酸(0.1M)萃取三次。用二乙醚萃取合并的水层，通过添加NaOH溶液(1.0M)碱化(pH9-10)，并用二乙醚萃取三次。用MgSO4干燥合并的有机层，并真空浓缩得到所需的苄胺，其不经进一步纯化便可使用。LC-MS：tR＝0.89min；[M+H]+＝331.5。
A.3.5(1S，3S，5S)-3-氨基甲基-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的合成
将(1S，3S，5S)-3-(苄基氨基-甲基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯(9.0mmol)的乙醇(10mL)溶液添加至Pd/C(1.9g，10％)在乙醇(40mL)中的悬浮液中，并在氢气气氛(1bar)下搅拌16小时。通过celite过滤后，用乙醇洗涤并去除溶剂，所得的胺不经进一步纯化便可使用。LC-MS：tR＝0.73min；[M+H]+＝241.4。
A.4(1S，3S，5S)-(2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基)-酰胺衍生物的合成
A.4.1(1S，3S，5S)-3-(芳酰基氨基-甲基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的合成(一般步骤)
![]()
将TBTU(5.0mmol，1.2eq)添加至相应羧酸(4.6mmol，1.1eq)的DMF(15mL)溶液。30分钟后添加DIPEA(12.5mmol，3.0eq)和(1S，3S，5S)-3-氨基甲基-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯(4.2mmol，1.0eq)的DMF(10mL)溶液，并搅拌混合物60分钟。添加水和EtOAc，分离层，用水洗涤有机层一次。用EtOAc萃取合并的水层一次，并用MgSO4干燥合并的有机层。真空去除溶剂，通过柱层析(DCM)纯化残留物得到相应的酰胺。
(1S，3S，5S)-3-{[(6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羰基)-氨基]-甲基}-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯
通过6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸(A.Andreani等人Eur.J.Med.Chem 1982，17，271-274)与(1S，3S，5S)-3-氨基甲基-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的反应制备得到。LC-MS：tR＝0.91min；[M+H]+＝405.2.
(1S，3S，5S)-3-{[(苯并[d]异噁唑-3-羰基)-氨基]-甲基}-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯
通过苯并[d]异噁唑-3-羧酸与(1S，3S，5S)-3-氨基甲基-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的反应制备得到。LC-MS：tR＝1.11min；[M+H]+＝386.6。
(1S，3S，5S)-3-{[(2，3-二氢-苯并呋喃-4-羰基)-氨基]-甲基}-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯
通过2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸与(1S，3S，5S)-3-氨基甲基-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的反应制备得到。LC-MS：tR＝1.00min；[M+H]+＝387.1。
A.4.2(1S，3S，5S)-(2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基)-酰胺衍生物的合成(一般步骤)
![]()
将HCl的二噁烷(4.0M，20mL)溶液添加至相应Boc-保护的2-氮杂二环[3.3.0]辛烷衍生物(3.6mmol)的二噁烷(20mL)溶液。LC-MS显示完全反应后(1-3h)，将混合物真空浓缩得到相应脱保护产物，其不经进一步纯化便可使用。
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸[(1S，3S，5S)-(2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基)甲基]-酰胺
通过(1S，3S，5S)-3-{[(6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羰基)-氨基]-甲基}-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的脱保护制备得到。LC-MS：tR＝0.56min；[M+H]+＝305.3。
苯并[d]异噁唑-3-羧酸[(1S，3S，5S)-(2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基)甲基]-酰胺
通过(1S，3S，5S)-3-{[(苯并[d]异噁唑-3-羰基)-氨基]-甲基}-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的脱保护制备得到。LC-MS：tR＝0.71min；[M+H]+＝286.3。
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸[(1S，3S，5S)-(2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基)甲基]-酰胺
通过(1S，3S，5S)-3-{[(2，3-二氢-苯并呋喃-4-羰基)-氨基]-甲基}-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-2-羧酸叔丁酯的脱保护制备得到。LC-MS：tR＝0.70min；[M+H]+＝287.4。
B.式(I)的化合物的制备：
B.1羧基酰胺衍生物的合成(一般步骤)
![]()
向相应羧酸(0.44mmol，1.1eq)在乙腈(1.0mL)中的混合物添加TBTU(0.48mmol，1.2eq)，30分钟后添加DIPEA(1.2mmol，3.0eq)。15分钟后，添加相应2-氮杂二环[3.3.0]辛烷衍生物(0.40mmol，1.0eq)的DCM(1.0mL)溶液。将混合物搅拌过夜并通过制备HPLC纯化HPLC得到相应的酰胺衍生物。
通过相应羧酸与6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸[(1S，3S，5S)-(2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基)甲基]-酰胺的反应合成羧基酰胺衍生物：
实例
名称
LC-MS：
1
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-甲基 -5-对-甲苯基-噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基 甲基]-酰胺
tR＝0.95min； [M+H]+＝520.1
2
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-氨基 -5-对-甲苯基-噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基 甲基]-酰胺
tR＝0.86min； [M+H]+＝521.2
3
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氯- 苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基 甲基}-酰胺
tR＝0.95min； [M+H]+＝540.1
4
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(4-氟- 苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基 甲基}-酰胺
tR＝0.93min； [M+H]+＝524.2
5
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氟- 苯基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基 甲基}-酰胺
tR＝0.93min； [M+H]+＝524.2
6
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[2-环丙 基-5-(4-氟-苯基)-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷 -3-基甲基}-酰胺
tR＝0.99min； [M+H]+＝550.4
7
6-甲基-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[2-环丙 基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0] 辛烷-3-基甲基}-酰胺
tR＝1.04min； [M+H]+＝600.2
通过相应羧酸与苯并[d]异噁唑-3-羧酸[(1S，3S，5S)-(2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基)甲基]-酰胺的反应合成羧基酰胺衍生物：
实例
名称
LC-MS：
8
苯并[d]异噁唑-3-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-甲基-5-对-甲苯 基-噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺
tR＝1.09min； [M+H]+＝501.2
9
苯并[d]异噁唑-3-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氯-苯基)-2-甲 基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺
tR＝1.10min； [M+H]+＝521.1
10
苯并[d]异噁唑-3-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氟-苯基)-2-甲 基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺
tR＝1.08min； [M+H]+＝505.2
11
苯并[d]异噁唑-3-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-环丙基-5-苯基- 噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺
tR＝1.12min； [M+H]+＝512.8
通过相应羧酸与2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸[(1S，3S，5S)-(2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基)甲基]-酰胺的反应合成羧基酰胺衍生物：
实例
名称
LC-MS：
12
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氯-苯基)-2-甲 基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺
tR＝1.05min； [M+H]+＝522.1
13
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-氟-苯基)-2-甲 基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺
tR＝1.02min； [M+H]+＝506.1
14
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(4-氟-苯基)-2-甲 基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺
tR＝1.02min； [M+H]+＝506.1
15
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-甲基-5-间-甲苯基- 噻唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺
tR＝1.04min； [M+H]+＝502.2
16
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[2-甲基-5-(3-三氟甲 基-苯基)-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰 胺
tR＝1.07min； [M+H]+＝556.2
17
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(4-溴-苯基)-2-甲 基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺
tR＝1.06min； [M+H]+＝566.1
18
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3，5-二甲基-苯 基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}- 酰胺
tR＝1.07min； [M+H]+＝516.2
19
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-溴-4-氟-苯 基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}- 酰胺
tR＝1.06min； [M+H]+＝584.1
20
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3，4-二氟-苯基)-2- 甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺
tR＝1.04min； [M+H]+＝524.2
21
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(2，4-二甲基-苯 基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}- 酰胺
tR＝1.08min； [M+H]+＝516.2
22
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3，4-二氯-苯基)-2- 甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}-酰胺
tR＝1.09min； [M+H]+＝556.1
23
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3，4-二甲基-苯 基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}- 酰胺
tR＝1.07min； [M+H]+＝516.2
24
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸{(1S，3S，5S)-2-[5-(3-乙酰氨基-苯 基)-2-甲基-噻唑-4-羰基]-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基}- 酰胺
tR＝0.92min； [M+H]+＝545.2
25
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-甲基-5-苯基-噻唑 -4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺
tR＝1.01min； [M+H]+＝488.2
26
2，3-二氢-苯并呋喃-4-羧酸[(1S，3S，5S)-2-(2-环丙基-5-苯基-噻 唑-4-羰基)-2-氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基甲基]-酰胺
tR＝1.07min； [M+H]+＝514.1
II-生物测定
式(I)的化合物的食欲素受体拮抗剂活性可通过如下的实验方法进行测定。
胞内钙离子测定
分别将表达人食欲素-1受体和人食欲素-2受体的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞培生长于含300μg/ml G418，100U/ml青霉素，100μg/ml链霉素和10％热灭活的胎牛血清(FCS)的培养基(具有的L-谷氨酰胺的Ham F-12)。将细胞以20,000细胞/微孔接种至384-孔黑色底部洁净的无菌平板(Greiner)上。接种的平板在37℃下5％CO2中孵育过夜。
将作为激动剂的人食欲素-A在MeOH∶水(1∶1)中配制为1mM的储备溶液，在含有0.1％牛血清白蛋白(BSA)、NaHCO3：0.375g/l和2mM HEPES的HBSS中稀释为终浓度3nM以供测定。
拮抗剂配制为10mM的DMSO储备溶液，然后在384-孔板中用DMSO稀释，然后将该稀释液转移进入含有0.1％牛血清白蛋白(BSA)、NaHCO3：0.375g/l和2mM HEPES的HBSS。在测定当日，向各个微孔添加50μl染色缓冲液(含1％FCS，2mM HEPES，NaHCO3：0.375g/l，5mM丙磺舒(Sigma)和3μM荧光钙离子抑制剂fluo-4AM(1mM储备溶液含于具有10％普朗尼克酸的DMSO)的HBSS)。将384孔板在37℃下5％CO2中孵育50分钟，然后在测量前在室温下平衡30-120分钟。
在荧光成像平板读取器(FLIPR2或FLIPR Tetra，MolecularDevices)中，向该平板添加体积为10μl/微孔的拮抗剂，孵育10分钟并最终添加10μl/微孔激动剂。以1秒的间隔检测各微孔的荧光，并将每个荧光峰的高度与用溶媒替代拮抗剂时3nM食欲素-A所诱导的荧光峰的高度相比较。检测各种拮抗剂的IC50值(抑制50％的激动响应所需的化合物的浓度)。计算得到的化合物的IC50值可随着每日细胞测定性能而变化。该种变化已为本领域技术人员所了解。
26种示范性化合物针对OX1受体的IC50值在4-2438nM范围内。所有种示范性化合物针对OX2受体的IC50值在11-1669nM范围内。表1显示了选定的化合物的拮抗活性。
表1
实例
OX1 IC50(nM)
OX2 IC50(nM)
1
17
40
7
18
95
9
275
283
16
111)
121)
19
371)
321)
26
481)
411)
表1中的值采用FLIPR2或采用1)FLIPR Tetra进行测定。