CN02114971.2
2002.03.18
CN1369196A
2002.09.18
终止
无权
专利权的终止(未缴年费专利权终止)授权公告日：2004.9.8|||授权|||实质审查的生效|||公开|||实质审查的生效
A01H4/00
华南农业大学;
郭振飞; 卢少云
510642广东省广州市天河五山
广州粤高专利代理有限公司
伍宏达
本发明属于草坪草育种领域,通过诱导草坪草外植体产生愈伤组织,诱导细胞产生变异,从再生植物中筛选具有优良性状的变异体,进一步培育成新品种。该育种方法所需周期短,需要的空间小,节省人力和物力,突变率高。
1、体细胞无性系变异草坪草育种方法，其特征在于用草坪草的 节或萌发种子的胚作为外植体，外植体经消毒处理后，接种于固体培 养基上，诱导愈伤组织，再用相同成分的液体培养基进行悬浮培养或 继续以固体培养基培养，在培养期间给予40-50℃高温或0.2-1.0mol/L NaCl高盐物理胁迫处理，诱导细胞发生变异，或者反复继代培养， 使细胞自然变异，分化出再生植株，从再生植株中获得变异体，选 择具有优良性状的品系，即为新种。固体培养基成分为：N6培养基 的大量元素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷氨酰胺和脯 氨酸各0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏(Dicamba)或2， 4-D 0-10mg/L和6-BA 0-5mg/L。 2、根据权利要求1所说的体细胞无性系变异草坪草育种方法， 其特征在于：选用狗牙根营养体的节作外植体，以0.1％HgCl2消毒 10-15分钟后，用无菌水洗净，接种于固体培养基上，培养基含N6 培养基的大量元素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷氨酰 胺和脯氨酸各0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏(Dicamba) 或2，4-D 0-10.0mg/L和6-BA 0-5mg/L，诱导愈伤组织，再用相同 的培养基作进一步悬浮培养，在40-50℃高温培养5-30分钟后，自然 冷却至25-30℃，继续悬浮培养，剔除高温下死去的细胞，选择存活 的细胞，再生出植物。从中筛选出来的品系提高了抗冷性或抗热性， 即为新品种。 3、根据权利要求1所说的体细胞无性系变异草坪草育种法，其 特征在于：以草地早熟禾作外植体，以0.1％HgCl2消毒10-15分钟后， 用无菌水洗净，接种于固体培养基上。培养基含N6培养基的大量元 素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷氨酰胺和脯氨酸各 0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏(Dicamba)或2，4-D 0-10.0 mg/L和6-BA 0-5mg/L，取种子萌发后膨大的胚，诱导愈伤组织。 将愈伤组织移至含0.2-1.0 M NaCl的培养基培养5-10天后，继续用 不含NaCl的培养基培养，剔除高盐下死去的细胞，选择存活的细胞， 再生出植物。从中筛选出来的品系提高了抗盐性，即为新品种。
体细胞无性系变异草坪草育种方法本发明属于育种技术，特别涉及草坪草的育种。 草坪草育种多采用传统的父母本杂交法，筛选具有优良性状的杂 交后代培育成新品种。该方法需多世代筛选，时间长，消耗人力物力 多，育种周期长。采用植物组织和细胞培养技术，通过体细胞胚发生 途经可形成再生植物。在这个过程中部分细胞会出现变异，称为体细 胞无性系变异，目前，已利用体细胞无性系变异法，培育农作物新品 种，但尚未在草坪草育种中应用。 本发明的目的就是根据体细胞无性系变异的原理，将体细胞无性 系变异育种法应用于草坪草育种，培育草坪草新品种，为草坪草的育 种提供了一条新的育种途径。 本发明所提供的草坪草体细胞无性系变异育种法，是用草坪草的 节或萌发种子的胚作为外植体，外植体经消毒处理后，接种于固体培 养基上，诱导愈伤组织，再用相同成分的液体培养基进行悬浮培养或 继续以固体培养基培养，在培养期间给予40-50℃高温或0.2-1.0mol/L NaCl高盐物理胁迫处理，诱导细胞发生变异；或者反复继代培养， 使细胞自然变异，分化出再生植株，从再生植株中获得变异体，选 择具有优良性状的品系，即为新种。固体培养基成分为：N6培养基 的大量元素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷氨酰胺和脯 氨酸各0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏(Dicamba)或2， 4-D 0-10mg/L和6-BA 0-5mg/L。 本发明的主要特点就是利用植物体细胞在离体培养中会产生变 异的性质，选择有用的突变体，培育成品种。与传统育种方法相比， 具有下列优点：1、很容易诱导体细胞发生变异，增加了突变率；2、 细胞生长条件易控制，易重复选择；3、育种筛选所需空间小，节省 人力和物力；4、获得突变体所需时间短，大大缩短了育种周期。 实施例一：选用狗牙根营养体的节作外植体，以0.1％HgCl2消 毒10-15分钟后，用无菌水洗净，接种于固体培养基上，培养基含 N6培养基的大量元素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷 氨酰胺和脯氨酸各0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏 (Dicamba)或2，4-D 0-10.0mg/L和6-BA 0-5mg/L，诱导愈伤组 织，再用相同的培养基作进一步悬浮培养，在40-50℃高温培养5-30 分钟后，自然冷却至25-30℃，继续悬浮培养，剔除高温下死去的细 胞，选择存活的细胞，再生出植物。从中筛选出来的品系提高了抗冷 性或抗热性，即为新品种。 实施例二：以草地早熟禾作外植体，以0.1％HgCl2消毒10-15 分钟后，用无菌水洗净，接种于固体培养基上。培养基含N6培养基 的大量元素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷氨酰胺和 脯氨酸各0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏(Dicamba)或 2，4-D 0-10.0mg/L和6-BA 0-5mg/L，种子萌发后取膨大的胚，诱 导愈伤组织。将愈伤组织移至含0.2-1.0 M NaCl的培养基培养5-10 天后，继续用不含NaCl的培养基培养，剔除高盐下死去的细胞，选 择存活的细胞，再生出植物。从中筛选出来的品系提高了抗盐性，即 为新品种。 实例三：选用狗牙根营养体的节作外植体，以0.1％HgCl2消毒 10-15分钟后，用无菌水洗净，接种于固体培养基上，培养基含N6 培养基的大量元素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷氨酰 胺和脯氨酸各0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏(Dicamba) 或2，4-D 0-10.0mg/L和6-BA 0-5mg/L，诱导愈伤组织，再用相同 的培养基作进一步作悬浮培养，此后，反复继代培养10-20代，使细 胞在继代培养中发生变异。从再生植物中筛选出一个新品系，匍匐茎 节间长度减短了1/3，紧贴地面生长，表现为植株更矮，根系更发达。 延长了冬季绿期。
本发明属于育种技术，特别涉及草坪草的育种。
草坪草育种多采用传统的父母本杂交法，筛选具有优良性状的杂 交后代培育成新品种。该方法需多世代筛选，时间长，消耗人力物力 多，育种周期长。采用植物组织和细胞培养技术，通过体细胞胚发生 途经可形成再生植物。在这个过程中部分细胞会出现变异，称为体细 胞无性系变异，目前，已利用体细胞无性系变异法，培育农作物新品 种，但尚未在草坪草育种中应用。
本发明的目的就是根据体细胞无性系变异的原理，将体细胞无性 系变异育种法应用于草坪草育种，培育草坪草新品种，为草坪草的育 种提供了一条新的育种途径。
本发明所提供的草坪草体细胞无性系变异育种法，是用草坪草的 节或萌发种子的胚作为外植体，外植体经消毒处理后，接种于固体培 养基上，诱导愈伤组织，再用相同成分的液体培养基进行悬浮培养或 继续以固体培养基培养，在培养期间给予40-50℃高温或0.2-1.0mol/L NaCl高盐物理胁迫处理，诱导细胞发生变异；或者反复继代培养， 使细胞自然变异，分化出再生植株，从再生植株中获得变异体，选 择具有优良性状的品系，即为新种。固体培养基成分为：N6培养基 的大量元素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷氨酰胺和脯 氨酸各0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏(Dicamba)或2， 4-D 0-10mg/L和6-BA 0-5mg/L。
本发明的主要特点就是利用植物体细胞在离体培养中会产生变 异的性质，选择有用的突变体，培育成品种。与传统育种方法相比， 具有下列优点：1、很容易诱导体细胞发生变异，增加了突变率；2、 细胞生长条件易控制，易重复选择；3、育种筛选所需空间小，节省 人力和物力；4、获得突变体所需时间短，大大缩短了育种周期。
实施例一：选用狗牙根营养体的节作外植体，以0.1％HgCl2消 毒10-15分钟后，用无菌水洗净，接种于固体培养基上，培养基含 N6培养基的大量元素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷 氨酰胺和脯氨酸各0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏 (Dicamba)或2，4-D 0-10.0mg/L和6-BA 0-5mg/L，诱导愈伤组 织，再用相同的培养基作进一步悬浮培养，在40-50℃高温培养5-30 分钟后，自然冷却至25-30℃，继续悬浮培养，剔除高温下死去的细 胞，选择存活的细胞，再生出植物。从中筛选出来的品系提高了抗冷 性或抗热性，即为新品种。
实施例二：以草地早熟禾作外植体，以0.1％HgCl2消毒10-15 分钟后，用无菌水洗净，接种于固体培养基上。培养基含N6培养基 的大量元素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷氨酰胺和 脯氨酸各0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏(Dicamba)或 2，4-D 0-10.0mg/L和6-BA 0-5mg/L，种子萌发后取膨大的胚，诱 导愈伤组织。将愈伤组织移至含0.2-1.0 M NaCl的培养基培养5-10 天后，继续用不含NaCl的培养基培养，剔除高盐下死去的细胞，选 择存活的细胞，再生出植物。从中筛选出来的品系提高了抗盐性，即 为新品种。
实例三：选用狗牙根营养体的节作外植体，以0.1％HgCl2消毒 10-15分钟后，用无菌水洗净，接种于固体培养基上，培养基含N6 培养基的大量元素、B5培养基的微量元素、蔗糖20-30g/L，谷氨酰 胺和脯氨酸各0.1-2.0g/L，MS培养基的维生素，麦草畏(Dicamba) 或2，4-D 0-10.0mg/L和6-BA 0-5mg/L，诱导愈伤组织，再用相同 的培养基作进一步作悬浮培养，此后，反复继代培养10-20代，使细 胞在继代培养中发生变异。从再生植物中筛选出一个新品系，匍匐茎 节间长度减短了1/3，紧贴地面生长，表现为植株更矮，根系更发达。 延长了冬季绿期。
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本发明属于草坪草育种领域,通过诱导草坪草外植体产生愈伤组织,诱导细胞产生变异,从再生植物中筛选具有优良性状的变异体,进一步培育成新品种。该育种方法所需周期短,需要的空间小,节省人力和物力,突变率高。。
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