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本发明公开了一种基于非均匀样本插值的眼动仪定标方法。首先选取注视屏幕上不同行、不同列的多个点作为定标点,记录其屏幕上的真实坐标,利用椭圆拟合的方法提取出眼睛瞳孔中心坐标,将瞳孔中心坐标和屏幕真实坐标一一对应作为参考插值点。然后注视屏幕上任意一点作为测试点,按照非均匀样本插值的思想,计算出测试点在屏幕上的真实坐标,实现视线跟踪。本发明避免了现有技术考虑眼球物理模型和眼睛成像的非线性特性等难点,通过非。