合成胆汁酸组合物、方法和制剂.pdf

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810072485.3 (22)申请日 2008.06.18 (30)优先权数据 08076150 2008.04.25 GB 60/945,035 2007.06.19 US 60/956,875 2007.08.20 US 12/035,339 2008.02.21 US 12/153,446 2008.05.16 US (62)分案原申请数据 200880019212.7 2008.06.18 (71)申请人 凯瑟拉生物制药有限公司 地址 美国加利福尼亚州 (72)发

2、明人 罗伯特M莫里亚蒂 纳撒尼尔E戴维 纳迪尔阿梅杜迪恩马哈茂德 阿昌佩塔拉坦普拉萨德 罗伊A小斯瓦尔英根 约翰格雷戈里里德 阿希拉库马尔萨胡 (74)专利代理机构 北京律盟知识产权代理有限 责任公司 11287 代理人 张世俊 (51)Int.Cl. C07J 13/00(2006.01) C07J 1/00(2006.01) C07J 9/00(2006.01) A61K 8/63(2006.01) A61Q 19/06(2006.01) (54)发明名称 合成胆汁酸组合物、 方法和制剂 (57)摘要 本发明涉及合成胆汁酸组合物、 方法和制 剂。 更具体而言， 本发明涉及脱氧胆酸和相关组

3、合物， 所述组合物不含任何动物源部分并且不含 致热原部分。 权利要求书5页 说明书56页 附图2页 CN 108191940 A 2018.06.22 CN 108191940 A 1.一种式2化合物 2.一种式3化合物 3.一种式6化合物 4.一种式7化合物 其中P是保护基团， 例如乙酰基。 5.一种式8化合物 其中P是保护基团， 例如乙酰基。 6.一种制备式11化合物的方法： 权利要求书 1/5 页 2 CN 108191940 A 2 其中P是保护基团并且R是烷基， 所述方法包含在氢化条件下使式10化合物 其中P和R如式11中所限定， 与H2反应以形成所述式11化合物。 7.一种制备式1

4、0化合物的方法： 其中P是保护基团并且R是烷基， 所述方法包含使式9化合物 其中P和R如式10中所限定， 与氧化剂反应以形成所述式10化合物。 8.一种制备式9化合物的方法： 其中P是保护基团， 例如乙酰基， 并且R是烷基， 所述方法包含在氢化条件下使式8化合 物 其中P和R如式8中所限定， 并且虚线是单键或双键， 与H2反应以形成所述式9化合物。 权利要求书 2/5 页 3 CN 108191940 A 3 9.一种制备式8化合物的方法： 其中P是保护基团， R是烷基， 并且虚线是单键或双键， 所述方法包含使式7化合物 其中P是保护基团， 在路易斯酸存在下与R为烷基的具有式CHCC(O)OR

5、的丙炔酸烷基 酯或具有式CH2CHC(O)OR的丙烯酸烷基酯反应以形成所述式8化合物。 10.一种制备式7化合物的方法： 其中P是保护基团， 所述方法包含将式6化合物 转化为所述式7化合物。 11.一种制备式6化合物的方法： 所述方法包含在烯烃形成条件下使式4化合物 权利要求书 3/5 页 4 CN 108191940 A 4 与二碳烯化剂反应以形成所述式6化合物。 12.一种制备式4化合物的方法： 所述方法包含使式3化合物 与还原剂反应以形成所述式4化合物。 13.一种制备式3化合物的方法： 所述方法包含使式2化合物 与酸反应以形成式3化合物。 14.一种制备式2化合物的方法： 权利要求书

6、4/5 页 5 CN 108191940 A 5 所述方法包含在氢化条件下使9 -羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮与H2反应以形成所述式2 化合物。 15.一种制备脱氧胆酸(DCA)或其医药上可接受的盐的方法： 所述方法包含使式12化合物 暴露于去保护条件以形成其酯和/或暴露于合适的水解条件下以形成脱氧胆酸或其医 药上可接受的盐。 权利要求书 5/5 页 6 CN 108191940 A 6 合成胆汁酸组合物、 方法和制剂 0001 本申请为申请日为2008年6月18日、 申请号为201610262072.2、 发明名称为 “合成 胆汁酸组合物、 方法和制剂” 的第一分案申请的第二分案申请。

7、母案为PCT申请PCT/US2008/ 067391进入中国国家阶段、 申请号为200880019212.7的发明专利申请。 0002 相关申请案交叉参考 0003 本申请案主张优先于在2007年6月19日申请的美国临时专利申请案第60/945,035 号和在2007年8月20日申请的美国临时专利申请案第60/956,875号； 优先于在2008年2月21 日申请的美国实用新型专利申请案第12/035,339号和在2008年5月16日申请的美国实用新 型专利申请案第12/153,446号； 并且优先于在2008年4月25日申请的英国专利申请案第 0807615.0号， 每个所述专利都是全文以引

8、用方式并入本文中。 技术领域 0004 概括地说， 本发明涉及胆汁酸和相关组合物和方法。 在一方面中， 本发明涉及脱氧 胆酸和相关组合物、 可用中间体、 和其合成方法。 在另一方面中， 本发明涉及本发明组合物 的用途和用作医药组合物的方法以及制造其的方法。 重要的是， 本发明胆汁酸并非自天然 产生这些酸的哺乳动物和微生物分离， 并且因此不含任何与所述有机体相关的毒素和污染 物。 在另一方面中， 本发明涉及脱氧胆酸和其医药上可接受的盐和中间体的合成。 背景技术 0005 人们对研究胆汁酸和(尤其)胆汁酸化学的胆酸学的关注已延续了大半个世纪。 尽 管对胆汁酸化学已了解很多， 但其涉及众多种化学实体

9、， 其中许多具有惊人特性。 综述可参 见(例如)穆霍帕德亚， S.(Mukhopadhyay， S.)和U.麦特拉(U.Maitra.)， 当代科学(Current Science)87： 1666-1683(2004)( “胆汁酸化学和生物学(Chemistry and biology of bile acids)” )， 其是以引用方式并入本文中。 0006 胆汁酸的特征在于两个连接单元， 即刚性类固醇核和脂肪族短侧链(见本申请案 的图1)。 参见霍夫曼， A.F.(Hofmann， A.F.)等人。 胆汁酸的建议名称参见脂质研究期刊 (J.Lipid Res.)33： 599-604(1

10、992)。 核和侧链二者具有大量可能的立体排列方式。 可通过 个别环的扩展或收缩来改变核， 并且可使侧链缩短或延长。 此外， 胆酸分子的两部分都具有 大量可能的极性取代基。 电离基团可存于核或侧链上。 最后， 偶合基团可存于核上(例如硫 酸根、 葡萄糖醛酸酯、 磷酸根)或存于侧链上(甘氨酸或牛磺酸或其它氨基酸， 或甚至糖类)。 侧链结构决定了化合物的种类(胆酸或胆酸盐)。 0007 胆酸是两亲性化合物， 其具有兼性和两亲性 “面” ， 参见霍夫曼， A.F.， 生理科学新 闻报NewsPhysiol.Sci.)14： 24-29(1999)( “胆汁酸： 好的， 坏的， 和丑陋的(BileAc

11、ids： The good， the Bad， and the Ugly)” ， 第25页， 图1)。 0008 通常， 将疏水表面称作 “ 面” 并且将亲水表面称作 “ 面” 。 一般来说， 面为脂溶性 并且 面极性相对较强。 存在多种胆汁酸， 例如那些在疏水面和亲水面上具有极性基团(在 天然存在的胆汁酸中为羟基)者， 例如熊脱氧胆酸。 分子的两亲性使得其形成具有两亲性的 说明书 1/56 页 7 CN 108191940 A 7 水不溶性脂质的混合胶粒， 例如磷脂酰胆碱。 除非胆汁酸超过临界浓度(称作临界胶粒化浓 度)， 否则胆汁酸不能溶解呈混合胶粒形式的膳食脂质。 0009 在人体中所发

12、现的最主要胆汁酸是鹅脱氧胆酸和脱氧胆酸。 脱氧胆酸也称作脱氧 胆酸盐、 胆烷酸、 和3 ， 12 -二羟基-5 -胆烷酸盐。 在人体中， 脱氧胆酸用于乳化脂肪以供在 肠中吸收。 在研究中， 使用脱氧胆酸作为分离膜相关蛋白的温和洗涤剂。 当脱氧胆酸基本纯 净时， 其呈白色至灰白色晶体粉末形式。 脱氧胆酸是肝脏所产生四种主要酸之一。 其可溶于 醇和乙酸中。 脱氧胆酸的CAS号是83-44-3。 0010 快速去除脂肪是古老的理想， 并且人们已宣称很多物质可达成这种结果， 但很少 显示其真正起作用。 由于安全性和效能方面的问题，“美塑疗法(Mesotherapy)” 或使用注射 物来去除脂肪并未被从

13、业医师广泛接受， 但自20世纪50年代以来已主张采用顺势疗法和美 容疗法。 欧洲首先提出了美塑疗法， 其是采用含有多种治疗局部医学和美容状况的化合物 的混合物的皮肤注射剂的方法。 尽管在传统上采用美塑疗法来缓解疼痛， 但近来在美国人 们开始关注其美容应用， 尤其是脂肪和蜂窝组织的去除。 一种经如此报导的用于局部减少 脂肪的治疗(其在巴西很受欢迎并且采用磷脂酰胆碱注射剂)被误认为与美塑疗法含义相 同。 尽管其因被传言为 “脂肪溶解” 注射而具有吸引力， 但大多数患者和医师仍不明确这些 美容治疗的安全性和效能。 参见罗汤达， A.M.(Rotunda， A.M.)和M.卡罗尼(M.Kolodney

14、)， 皮 肤外科学(Dermatologic Surgery)， 32： 465-480(2006)( “美塑疗法和磷脂酰胆碱注射： 历 史说明和回顾(Mesotherapy and Phosphatidylcholine Injections： Historical Clarification and Review)” )。 0011 WO 2006/133160(其包括图在内的全部内容以引用方式并入本文中)阐述脂肪雕 塑方法， 例如通过将神经肽Y受体拮抗剂投与脂肪储存位点来减小脂肪储存。 克罗宁M.G. (Kolonin M.G.)等人， 自然医学(Nat.Med.)6月10(6)： 62

15、5-32(2004)阐述具有有效脂肪细 胞杀灭效应的脂肪选择性促凋亡肽。 所述促凋亡肽需要到达脉管系统以实施杀灭。 0012 近期公开的文献报导， 当将脱氧胆酸注射至体内脂肪沉积中时， 脱氧胆酸具有脂 肪去除特性。 参见WO 2005/117900和WO 2005/112942， 以及美国专利第US2005/0261258号、 美国专利第US2005/0267080号、 美国专利第US2006/127468号、 和美国专利第 US20060154906号， 所有所述专利的包括图在内的全部内容都是以引用方式并入本文中。 注 射至脂肪组织中的脱氧胆酸盐具有两种效应： 1)其通过溶胞机制杀灭脂肪细胞

16、； 和2)其使 皮肤绷紧。 达成期望美容整形(即体形塑造)同时需要这两种效应。 由于注射至脂肪中的脱 氧胆酸盐因暴露于蛋白质中而迅速失活并且随后迅速返回肠内含物中， 因此其效应在空间 上受到限制。 由于此衰减效应可赋予临床安全性， 脂肪去除治疗通常需要4-6个疗程。 此无 需手术的局部脂肪去除不仅有利于病理性局部脂肪沉积(例如在治疗HIV时伴随医疗干预 的血脂异常)的治疗性治疗， 也有利于美容性脂肪去除， 并且不存在手术(例如抽脂法)中固 有的伴随风险。 参见罗汤达等人， 皮肤外科学， 30： 1001-1008(2004)( “脱氧胆酸钠的洗涤剂 效应是用于局部化脂肪溶解的可注射磷脂酰胆碱调

17、配物的主要特征(Detergent effects of sodium deoxycholate are a major feature of an injectable phosphatidylcholine formulation used for localized fat dissolution)” )和罗汤达 等人， 美国皮肤病学会杂志(J.Am.Acad.Dermatol.)2005： 973-978( “用皮下脱氧胆酸盐注 射来治疗脂肪瘤(Lipomas treated with subcutaneous deoxycholate injections)” )， 说明书 2/56

18、 页 8 CN 108191940 A 8 两个文献都是以引用方式并入本文中。 0013 医药级胆汁酸制剂可以相对低的成本在市场上购得。 此低成本是因为以下事实： 胆汁酸得自动物躯体， 尤其是诸如牛和绵羊等大型动物。 重要的是， 如同所有动物源药剂， 人们担心动物源胆汁酸产物可能含有动物病原体和其它有害因子， 例如动物或微生物代谢 产物和毒素， 包括诸如致热原等细菌性毒素。 0014 所述动物病原体可包括朊病毒， 其被视为可引发朊病毒疾病的传染性病原蛋白类 型。 朊病毒疾病是神经系统的变性病症。 人们认为一种此等疾病， 即 “疯牛” 病(被认为是克 罗伊茨费尔特-雅各布病(Creutzfeld

19、t-Jakob disease)(CJD)的变种)， 是由存于来自病牛 的食用牛肉中的朊病毒所引发。 大多数病例是具有未知传播模式的散发型； 某些病例是遗 传型； 并且少量病例是通过医疗程序传播。 人类朊病毒疾病通过消耗受感染材料而蔓延在 历史上与库鲁病(kuru)有关并且近年来与变种CJD有关。 其它动物朊病毒疾病(绵羊瘙痒 症、 传染性水貂脑病、 鹿类的慢性消耗性疾病、 和牛海绵样脑病)似乎都是通过接触受感染 动物或通过消耗受感染食物而横向传播。 由于传播模式不同、 种间屏障不可预测、 组织中感 染性的分布可变、 和在某些疾病中所发现的种系变异， 关于朊病毒疾病的风险评价和对未 来事件的预

20、测难于确定。 0015 一般来说， 动物产物可能会暴露于产生致热原(致发烧物质)的微生物中。 如肠出 血性大肠杆菌(E.coli.)对食物的污染所证实， 食物和/或医药产品的细菌污染物也是一个 严重问题。 在所述污染中涉及诸如牛肉等产品以及诸如苹果、 菠菜、 和类似物等作物。 在所 述案例中， 是细菌所产生的毒素(而非细菌自身)在人体中产生有害效应。 所述有害效应包 括严重腹泻、 肾衰竭和在极端情况下的死亡。 必须实质上除去所有医药组合物中的细菌性 内毒素(一类致热原)。 0016 动物产品一般是通过消除法来纯化， 即终产物是除去杂质后的剩余材料， 而非自 混合物选择终产物。 并且除了诸如病原

21、体等可能的动物部分外， 自动物源纯化的另一人为 因素是终产物是一或多种胆汁酸的混合物。 例如， 脱氧胆酸的市售制剂含有某些鹅脱氧胆 酸以及胆酸， 胆酸在哺乳动物胆汁酸合成中是脱氧胆酸和鹅脱氧胆酸二者的前体。 由于未 预先选定脱氧胆酸/鹅脱氧胆酸/胆酸的确切比例， 在意欲大量制造胆汁酸时此可导致批次 间差异。 所述批次间差异可能会造成问题并且在获得监管部门批准或品质控制中、 尤其在 制造医药组合物的努力中可能会需要额外步骤。 显然， 制造者在制造胆汁酸医药组合物时 需要批次间的可预测性。 0017 目前， 关于含有动物病原体和其它有害因子的动物源产品的问题已通过自经隔离 并且经检查的动物获得产物

22、来解决。 例如， 来自新西兰动物的脱氧胆酸是在美国管理制度 下用于人体的胆汁酸来源， 只要动物继续保持隔离或不含有可观察到的病原体即可。 0018 也就是说， 需要此类政府控制的管理制度以便在注射动物源药物时识别动物病原 体传播的固有风险。 倘若可获得非动物药物替代品， 则不再需要政府管理制度。 具有相关优 点的所述替代品(替代动物源药物的非动物性药物)实例是人用胰岛素。 美国已于1998年停 止制造牛胰岛素， 并且在2006年1月停止制造人用猪胰岛素。 尽管可自已知尚未接触过会引 发BSE的致病因子或其它致病因子的牲畜获得动物胰岛素， 但制造设施或制程可能会使动 物成份暴露于已接触过病原体的

23、动物中。 通过使用以重组方式或合成方式制造的胰岛素可 消除致病因子传播至人类的风险。 对于消费者来说， 胰岛素的情形具有指导性： 倘若可自由 说明书 3/56 页 9 CN 108191940 A 9 地获得合成物质， 则在理论上可消除动物病原体传播的风险。 对于制造者来说， 若能够制造 基本不含动物病原体物质的纯净化学实体则有利于达成安全、 优质、 和管理目的。 此外， 与 自生物来源获得的产品相比， 合成制程所提供的产品通常具有更高可重现性。 0019 目前， 由于动物躯体来源的胆汁酸相当丰富， 工业尚未进步至完全以化学方式来 合成胆汁酸， 或使用植物甾醇或微生物起始材料来制备胆汁酸。 并

24、且尽管已合成出胆汁酸 衍生物， 但由于动物材料成本低并且易于获得， 因此所述工作的类固醇化学仍主要使用动 物源胆汁酸作为起始材料。 尽管在历史上人们在植物甾醇研究中付出大量努力， 但仍未开 发出便于市售的植物甾醇源胆汁酸的医药级组合物。 参见(例如)穆霍帕德亚， S.和U.麦特 拉.， 当代科学87： 1666-1683， 1670(2004)(应注意， 根据1981年参考文献(龟谷(Kametani) 等人， 美国化学协会杂志(J.Am.Chem.Soc.)103： 2890(1981)( “(+)-鹅脱氧胆酸的第一次总 合成(First Total Synthesis of(+)-Chen

25、odeoxycholicAcid)” )， 此时尚未曾实施任何胆 汁酸的总合成)。 已使用诸如细菌等微生物所产生胆汁酸作为细菌产物在原位用于(例如) 海 洋 溢 油 清 除 中 。 参 见 马 尼 拉 ( M a n e e r a t ) 等 人 ， 实 用 微 生 物 生 物 技 术 (Appl.Microbiol.Biotechnol.)76： 679-683(2004)( “胆汁酸是海洋细菌香味菌属 (Myroides)菌株SM1的新产物(Bile acids are new products of a mariene bacterium， Myroides sp.Strain SM1

26、)” )。 0020 为实现脱氧胆酸去除脂肪的全部潜力， 必须进一步解决使用动物源产品的相关问 题。 显然， 业内需要适量的已知原本就不含动物源部分(或能作用于动物、 尤其哺乳动物并 且在用于人类时可对人类产生有害效应的病原部分)和其它有害因子(例如动物或微生物 代谢产物、 毒素， 包括诸如致热原等细菌性毒素)的有效胆汁酸和相关组合物(例如脱氧胆 酸)以供用作人用药物。 本发明通过提供以合成方式制备并且不具有动物病原体和其它有 害因子的潜在风险的胆汁酸组合物来解决此问题。 所揭示胆汁酸组合物可用于脂肪分解治 疗并且可用于局部脂肪去除领域的进一步研究和研发性工作中。 发明内容 0021 本文提供

27、足量适宜胆汁酸作为所定义医药组合物， 并且提供其合成方法。 由此提 供的胆汁酸组合物和方法并非自天然产生胆酸的哺乳动物或微生物分离。 在一方面中， 提 供不含任何动物源部分和哺乳动物和/或细菌致热原的特定脱氧胆酸医药组合物以及相关 制造方法和用途。 在另一方面中， 提供足量适宜脱氧胆酸作为所定义医药组合物， 其可用作 局部去除脂肪的可注射医药组合物， 并且提供相关组合物、 制造方法和使用方法。 本发明所 定义脱氧胆酸盐注射物可与通过正交机制消除脂肪的分子(例如NPY拮抗剂和/或脂肪选择 性促凋亡肽)组合来提供可用于以较少治疗疗程和更有效方式达成体形塑造的药剂。 在另 一方面中， 本发明提供与合

28、成脱氧胆酸和其医药上可接受的盐相关的方法和中间体。 以合 成方式制备的脱氧胆酸可用于去除脂肪的脂肪分解治疗。 附图说明 0022 图1是表现胆汁酸结构的图， 其包括胆酸骨架中碳的编号系统。 0023 图2展示用本发明合成脱氧胆酸钠处理后原代人脂细胞的细胞存活率的剂量依赖 性降低相对于牛源脱氧胆酸钠(西格玛(Sigma)的相似性。 说明书 4/56 页 10 CN 108191940 A 10 0024 图3展示胆酸是两亲性化合物， 其具有兼性和两亲性 “面” 。 具体实施方式 0025 以引用方式并入 0026 本说明书中所提及所有出版物和专利申请案都是以引用方式并入本文中， 其并入 程度如同

29、明确并且单独地指明以引用方式并入每一个别出版物或专利申请案一般。 具体实施方式 0027 0028 定义 0029 在整个本发明中， 各个出版物、 专利和公开专利说明书都是以等同引用方式来参 照。 此处， 这些出版物、 专利和所公开专利说明书的揭示内容都是以引用方式并入本发明中 以更充分地阐述本发明所属技术领域的状态。 0030 本文所用某些术语具有以下所定义含义。 除非上下文明确表示其它含义， 否则说 明书和权利要求书中所用单数形式 “一(a、 an)” 和 “所述” 包括单数和复数含义。 0031 除非另外说明， 否则说明书和权利要求书中所用表示成份数量、 反应条件等的所 有数值在所有情况

30、下均应理解为受术语 “约” 修饰。 因此， 除非表明相反含义， 否则以下说明 书和随附权利要求书中所述数值参数都是近似值。 至少应根据所报告有效数字位数并且通 过采用一般舍入技术来解释每一数值参数。 0032 术语 “乙酰化试剂” 是指可将乙酰基CH3C(O)-添加至分子的试剂。 0033 术语 “酸” 是指质子供体并且包括有机酸和无机酸二者。 0034 术语 “烷基” 是指具有1至10个碳原子并且优选地具有1至6个碳原子的单价饱和脂 肪族烃基。 此术语包括(例如)直链和具支链烃基， 例如甲基(CH3-)、 乙基(CH3CH2-)、 正丙基 (CH3CH2CH2-)、 异丙基(CH3)2CH-

31、)、 正丁基(CH3CH2CH2CH2-)、 异丁基(CH3)2CHCH2-)、 仲丁基 (CH3)(CH3CH2)CH-)、 叔丁基(CH3)3C-)、 正戊基(CH3CH2CH2CH2CH2-)、 和新戊基(CH3) 3CCH2-)。 0035 术语 “芳基” 是指具有6至12个碳原子的单价芳香族碳环基团， 其具有单环(例如苯 基)或多个稠环(例如萘基)。 0036 术语 “动物源” 是指源自包括多细胞生物和单细胞生物的生物界(动物界)中任一 种生物。 0037 术语 “脱水剂” 是指可与水反应的试剂。 在一方面中， 脱水剂可与自分子移除的水 反应。 0038 术语 “脱硫剂” 是指可与硫

32、化物反应的试剂。 在一方面中， 脱硫剂可与含硫化物分 子反应以自分子移除硫化物基团。 0039 术语 “乙二硫醇或二噻烷前体” 是指通过与羰基反应可形成乙二硫醇或二噻烷的 试剂。 0040 术语 “亲电乙酰基” 是指作为亲电体的乙酰基， 亲电体是受电子吸引并且易于接受 电子的基团。 0041 术语 “氢化剂” 是指可向分子提供氢的试剂。 说明书 5/56 页 11 CN 108191940 A 11 0042 术语 “路易斯酸(Lewis acid)” 是指电子对受体。 路易斯酸包括有机金属试剂， 例 如烷基卤化铝(例如Et2AlCl和MeAlCl2)。 0043 术语 “哺乳动物源” 是指源

33、自任何哺乳动物。 术语 “哺乳动物” 是指以乳腺分泌的乳 汁养育幼仔的温血高等脊椎动物(例如胎生动物、 有袋类动物、 或单孔类动物)纲(哺乳纲)， 其皮肤通常或多或少经毛发覆盖， 并且包括人类。 0044 术语 “微生物源” 是指源自任何微生物。 术语 “微生物” 是指圆形、 螺旋形、 或杆形单 细胞原核微生物领域(细菌领域)， 其可能缺少细胞壁或若其具有细胞壁则为革兰氏(gram) 阳性或革兰氏阴性， 其经常聚集成菌落或可藉助鞭毛来移动， 其通常生存于土壤、 水、 有机 物质、 或植物和动物体内， 其营养方式通常是自养、 腐生或寄生， 并且其特征在于其生化效 应和致病性。 0045 术语 “

34、烯化剂” 是指与酮反应以形成对应烯烃的试剂。 术语 “烯烃形成条件” 是指实 施所述转化的适宜条件。 所述试剂的实例包括魏悌希(Wittig)试剂和魏悌希烯化条件。 0046 术语 “氧化剂” 是指可在氧化还原反应中接受电子的试剂。 以此方式， 可将卤素或 氧添加至分子中或可自分子移除氢。 0047 术语 “病原体” 是指疾病的具体致病因子。 0048 “医药上可接受的盐” 是指自业内熟知的各种有机和无机异荷离子衍生的医药上 可接受的盐， 并且包括(仅例如)钠盐、 钾盐、 锂盐、 钙盐、 镁盐、 铵盐、 和四烷基铵盐。 适宜盐 包括那些阐述于以下文献中者： P.海因里希斯塔尔(P.Heinri

35、ch Stahl)、 卡米尔G.韦穆特 (Camille G .Wermuth) (编辑) ， 药物盐特性、 选择和应用手册(Handbook of Pharmaceutical Salts Properties， Selection， and Use)； 2002。 这些医药上可接受的盐 可通过使DCA与适宜碱反应来制备。 出于例示性目的， 所述碱的实例包括氢氧化钠、 氢氧化 钾、 或氢氧化锂。 或者， 所述盐可通过用碱水解DCA的酯和省略任何可产生DCA的酸处理来制 备。 0049 术语 “还原剂” 是指在氧化还原反应中可提供电子的试剂。 以此方式， 可自分子移 除卤素或氧， 或可将氢添加

36、至分子中。 0050 组合物和使用方法 0051 在本文所述各方面中， 本发明提供用于医药用途的组合物(和可用中间体)、 其合 成方法、 和本发明医药组合物的使用方法。 0052 重要的是， 本发明胆汁酸组合物不具有自动物起始材料获得的材料中的固有风 险， 并且因此不需要针对动物源材料的详细检查和管控。 因此在一方面中， 本发明涉及不含 诸如哺乳动物病原体等动物源材料， 并且实质上不含诸如致热原等细菌源毒素的胆汁酸医 药组合物。 0053 脱氧胆酸钠是天然产生的胆酸盐， 其可在消化道内溶解膳食脂质。 其是通过复杂 的生物合成途径采用胆固醇作为起始材料在体内产生， 并且所述途径同时涉及人类和细菌

37、 酶二者。 脱氧胆酸盐的主要功能是通过溶解膳食脂质以促进吸收来辅助消化过程。 在体内， 脱氧胆酸盐的生物合成始于肝脏中胆固醇的酶促氧化、 异构化、 和还原， 从而形成胆酸， 其 是在结构上与其胆固醇母体类似的胆汁酸(史屈尔L(Stryer L)， 第27章： 膜脂和类固醇的 生物合成(Biosynthesis of Membrane Lipids and Steroids) ， 生物化学 (Biochemistry)， 1995， W.H.弗里曼公司(W.H.Freeman and Company)： 纽约， 第691-707 说明书 6/56 页 12 CN 108191940 A 12 页

38、)。 然后在肝脏中， 胆酸以化学方式连接两种氨基酸(牛磺酸或甘氨酸)之一而形成 偶合 胆酸(即L-甘胆酸盐和牛磺胆酸盐)。 然后这些偶合胆酸储存于胆囊中直至食用食物。 食用 食物后， 胆汁溶液自胆囊中释放至肠中， 其中偶合胆酸分子发生两次由肠道菌群所产生酶 介导的额外化学修饰(李德龙J.M.(Ridlon J.M.)、 康D.J.(Kang D.J.)和希尔梦P.B. (Hylemon P.B.)， 人类肠细菌的胆汁酸盐生物转化(Bile salt biotransformations by human intestinal bacteria)， 脂质研究期刊， 47(2)： 第241-59页

39、(2006)。 首先， 使偶合胆 酸去羟基以形成偶合脱氧胆酸盐。 然后使偶合脱氧胆酸盐去偶合以形成游离脱氧胆酸盐， 其与其它胆汁酸一起参与膳食脂质的溶解。 由于脱氧胆酸盐位于胆酸合成的下游， 因此胆 酸可能是存于脱氧胆酸盐天然来源中的杂质。 0054 脱氧胆酸盐在水中以333mg/mL溶解， 在醇中少量溶解， 并且在丙酮和冰乙酸中溶 解度甚至更低。 可以约2.4mg/mL的临界胶粒浓度以上的脱氧胆酸钠浓度和中性pH来达成胶 粒的可逆形成(松冈K， M.Y.(Matsuoka K， M.Y.)， 脱氧胆酸钠和乌索脱氧胆酸钠的胶粒形成 (Micelle formation of sodium de

40、oxycholate and sodium ursodeoxycholate)(部分 1)， 生物化学与生物物理学报(Biochim.Biophys.Acta.)， 1580(2-3)： 第189-99页(2002)。 在2.4mg/mL的临界胶粒浓度以上的浓度下， 脱氧胆酸盐可形成胶粒并且能溶解细胞、 脂质、 和蛋白质。 在诸如0.4mg/mL等较低浓度下(与禁食状态相当)和在26mg/mL白蛋白(其接近 35-50mg/mL的血清生理浓度)存在下， 98脱氧胆酸盐与白蛋白结合(洛达A.(Roda A.)等 人， 胆汁酸与人血清白蛋白交互作用的容量现象(Quantitative aspect

41、s of the interaction of bile acids with human serum albumin)， 脂质研究期刊， 23(3)： 第490- 5页(1982)。 0055 优选实施例涉及脱氧胆酸(DCA)或其前药、 或所述化合物或前药医药上可接受的 盐、 以及相关组合物和方法， 其中脱氧胆酸(DCA)是： 0056 0057 其中所述化合物并非自天然产生DCA的哺乳动物或微生物分离。 0058 其它优选实施例也涉及DCA的立体异构体和其医药上可接受的盐， 并且涉及合成 DCA和其立体异构体和盐时的中间体以及相关组合物和方法。 0059 任选地， 本发明胆汁酸医药组合物呈

42、盐形式， 并且任选地另外含有医药上可接受 的稀释剂、 赋形剂或载剂。 在一方面中， 本发明涉及化合物和医药上可接受的赋形剂， 所述 化合物是脱氧胆酸(DCA)或其前药、 或所述化合物或前药医药上可接受的盐： 说明书 7/56 页 13 CN 108191940 A 13 0060 0061 其中所述化合物并非自天然产生DCA的哺乳动物或微生物分离。 0062 盐制备的优选阳离子可选自由以下组成的群组： 钠(Na+)、 钾(K+)、 锂(Li+)、 镁(Mg2 +)、 钙(Ca2+)、 钡(Ba2+)、 锶(Sr2+)、 和铵(NH4+)。 也可自碱金属或碱土金属来制备盐。 碱金属可 选自钠(N

43、a+)、 钾(K+)、 和锂(Li+)。 碱土金属可选自由镁(Mg2+)、 钙(Ca2+)、 钡(Ba2+)、 和锶(Sr2 +)组成的群组。 用作局部去除脂肪的医药组合物的优选胆酸盐是脱氧胆酸钠。 0063 也涵盖各实施例中化合物的前药。 前药是活性或非活性化合物， 在将前药投与患 者后其通过体内生理作用(例如水解、 代谢和诸如此类)以化学方式被修饰为各实施例中的 化合物。 例如， 可制备本发明脱氧胆酸或其衍生物的C1-C10酯或酰胺， 从而通过细胞膜的破 裂和酯酶的释放来触发脱氧胆酸或其衍生物的释放。 伴随着酯酶的释放， 酯保护基团断裂， 从而使得脱氧胆酸活性形式或其衍生物原位存于期望位置

44、。 所述C1-C10酯任选地可包括1-4 个选自氧、 硫或氮的杂原子； 任选地具有1-4个选自氧、 硫或氮的杂原子的烷基， 例如甲基、 乙基、 异丙基、 丁基、 己基等； 在任何可接受取代点任选地具有1-4个杂原子并且总共具有最 多10个碳原子的烷基苯基， 例如苄基或乙基苯基； 和诸如苯基等芳基。 酰胺的实例包括(但 不限于)异羟肟酸盐。 涉及酯的前药的概述可参见斯文松(Svensson)和特内科(Tunek)， 药 物代谢评论(Drug Metabolism Reviews)165(1988)和班德格阿德(Bundgaard)， 药物设计 (Design of Prodrugs)， 埃尔塞维

45、尔科学出版社(Elsevier)(1985)， 其是全文以引用方式 并入本文中。 脱氧胆酸的C1-C10酯或酰胺的合成为业内所熟知。 例如， 可在无机酸存在下于 酯化反应中通过脱氧胆酸与醇的反应来合成酯。 0064 脱氧胆酸和鹅脱氧胆酸的天然结构显示如下。 显示四个环(A、 B、 C、 D)以及自D环延 伸的羧酸侧链。 说明书 8/56 页 14 CN 108191940 A 14 0065 0066 脱氧胆酸和鹅脱氧胆酸(CDCA)或其衍生物的酯、 异羟肟酸盐、 和羟基酰胺的某些 实例非限制性地阐述于下文中。 通过D环侧链上羧基的酯化反应， 不同官能团可附接至脱氧 胆酸或鹅脱氧胆酸上来生成前

46、药。 这些D环侧链酯的某些实例非限制性地展示于表1中。 0067 表1.与脱氧胆酸和鹅脱氧胆酸的D环侧链偶合的官能团 0068 说明书 9/56 页 15 CN 108191940 A 15 0069 0070 脱氧胆酸或鹅脱氧胆酸和其衍生物的释放可通过细胞膜的破裂和酯酶的释放来 触发。 伴随着酯酶的释放， 酯保护基团可断裂从而使得脱氧胆酸或鹅脱氧胆酸的活性形式 或其衍生物原位存于期望位置。 0071 脱氧胆酸、 鹅脱氧胆酸和其衍生物的前药也包括可能具有与天然分子相反的立体 化学的差向异构体。 这些差向异构体分子的实例展示于表2中。 0072 表2.脱氧胆酸、 鹅脱氧胆酸和其衍生物的差向异构体

47、 0073 说明书 10/56 页 16 CN 108191940 A 16 0074 0075 注射本发明实施例的胆汁酸组合物后可能出现局部刺激， 并且因此需要同时或依 次投与局部麻醉剂。 例如， 利多卡因(lidocaine)通常用于人体中， 并且可作为共调配物(存 于相同容器中并且同时注射)或共注射物(自不同容器注射)来投与。 诸如利多卡因等麻醉 剂可通过诸如贴剂或软膏剂等局部制剂来投与。 0076 对于较深组织来说， 可将麻醉剂更深地注射至目标组织中或全身性投与(例如全 身麻醉、 硬膜外麻醉或其它已知方法)。 0077 存于本发明溶液中的胆汁酸或胆汁酸盐的浓度可为约0.001-10、

48、0.01-5、 或0.1- 2(w/w、 w/v、 或v/v)。 优选地， 存于上述溶液中的胆酸或胆酸盐的浓度可为约0.1-5w/w 或更优选为约1w/w。 在某些实施例中， 脂肪溶解溶液最多包含100、 50、 20、 10、 5、 2、 1、 0.5、 0.2、 0.05、 0.02、 或0.01克的一或多种洗涤剂、 胆汁酸和/或胆汁酸盐， 例如脱氧胆酸或其盐 或脱氧胆酸钠。 0078 在优选实施例中， 本发明溶液不包括任何脂质、 磷脂或磷脂酰胆碱。 在某些实施例 中， 本发明溶液最多包括5(w/w、 w/v、 或v/v)脂质、 磷脂或磷脂酰胆碱。 0079 在某些实施例中， 上述溶液可另

49、外包含选自由以下组成的群组的第二治疗药剂： 抗微生物剂、 血管收缩药、 抗血栓药、 抗凝血药、 抑泡剂(suds-depressant)、 消炎剂、 镇痛 药、 分散剂、 抗分散剂、 渗透促进剂、 类固醇、 镇静剂、 肌肉松弛剂、 和抗腹泻药。 在某些实施 例中， 溶液存于最多可含500mL溶液的容器中。 所述容器可为注射器或可装载注射器的容 器。 0080 在某些实施例中， 组合物和方法另外包含已知可通过正交机制消除脂肪的分子。 说明书 11/56 页 17 CN 108191940 A 17 所述分子包括神经肽Y(NPY)受体拮抗剂， 包括(但不限于)NPY受体拮抗剂， 例如BIBP-3226 (阿目金(Amgen)、 BIBO-3304(柏林格殷格汗(Boehringer Ingleheim)、 BMS-192548和AR- H040922(百时美施贵宝(Bristol-Myers Squibb)、 LY-357897(礼来(Eli Lilly)、 1229U91 和GW438014S(葛兰素史克(GlaxoSmithKli