一种生育三烯酚的分离提纯方法.pdf

1、10申请公布号CN104262315A43申请公布日20150107CN104262315A21申请号201410453257222申请日20140905C07D311/72200601B01J20/10200601B01D15/2020060171申请人宁波大红鹰生物工程股份有限公司地址315200浙江省宁波市镇海区蟹浦北海路166号72发明人张源仁王嘉磊甄洪峰魏国华74专利代理机构余姚德盛专利代理事务所普通合伙33239代理人胡小永54发明名称一种生育三烯酚的分离提纯方法57摘要本发明公开了一种生育三烯酚的分离提纯方法，具体包括以下步骤1层析用填料制备；2柱层析；3分段收集洗脱液，根据TL

2、C检测合并相同组分洗脱液，经浓缩后得到生育三烯酚浓缩液；其中，柱层析填料采用硝酸银硅胶，在硝酸银硅胶的制备过程中，调节硝酸银与硅胶比例、加入的水和乙醇的比例、柱层析所采用的上柱量以及烘干时间等参数，并采用多种溶剂体系的依次洗脱，使得有效组分的洗脱更加完全，极大的提高了生育三烯酚的收率。该方法工艺简单、设备要求低、分离效率高。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104262315ACN104262315A1/1页21一种生育三烯酚的分离提纯方法，具体包括以下步骤1层析用填料制备按硅胶硝酸银25351M/M

3、的比例混合，加入硅胶质量112M/V蒸馏水及1153M/V乙醇，搅拌混合，减压蒸馏脱除溶剂，得流动样粉末于100120烘干1624H；2柱层析采用湿法装柱，将硝酸银硅胶用非极性溶剂浸泡后一次性转入层析柱，用所述非极性溶剂作为洗脱剂反复洗脱填料使硝酸银硅胶沉积压实，按硝酸银硅胶质量530的上柱量将样品转移至硅胶顶端，然后按051BV柱体积非极性溶剂、051BV柱体积510极性溶剂非极性溶剂的混合洗脱液、051BV柱体积50100极性溶剂非极性溶剂的混合洗脱液的顺序洗脱样品；3分段收集洗脱液，根据TLC检测合并相同组分洗脱液，经浓缩后得到生育三烯酚浓缩液。2根据权利要求1所述的一种生育三烯酚的分离

4、提纯方法，其特征在于，步骤1中，按硅胶硝酸银251M/M的比例混合。3根据权利要求1所述的一种生育三烯酚的分离提纯方法，其特征在于，步骤2中的非极性溶剂为正己烷、正庚烷或石油醚。4根据权利要求1所述的一种生育三烯酚的分离提纯方法，其特征在于，步骤2中的极性溶剂为乙酸乙酯、四氢呋喃或氯仿。5根据权利要求1所述的一种生育三烯酚的分离提纯方法，其特征在于，步骤2中的非极性溶剂为正己烷，极性溶剂为乙酸乙酯。6根据权利要求1所述的一种生育三烯酚的分离提纯方法，其特征在于，步骤2中按硝酸银硅胶质量5的上柱量将样品转移至硅胶顶端。7根据权利要求1所述的一种生育三烯酚的分离提纯方法，其特征在于，步骤2中，按1

5、BV柱体积非极性溶剂、1BV柱体积10极性溶剂非极性溶剂的混合洗脱液、1BV柱体积50极性溶剂非极性溶剂的混合洗脱液的顺序洗脱样品。8根据权利要求1所述的一种生育三烯酚的分离提纯方法，其特征在于，步骤3中的浓缩为分子蒸馏浓缩。权利要求书CN104262315A1/2页3一种生育三烯酚的分离提纯方法技术领域0001本发明属于化学工程领域，具体涉及一种生育三烯酚的分离提纯方法。背景技术0002维生素E是生育酚和生育三烯酚以及具有D生育酚生理活性的衍生物如酯类等的总称。目前已经从植物资源中分离出4种生育酚、和4种生育三烯酚、。生育三烯酚与生育酚结构上的主要区别在于类异戊二烯基侧链饱和程度不同。生育三

6、烯酚之所以不受重视有两方面原因一是在各种生育酚和生育三烯酚中，生育酚的生理活性最高，在人体中优先被吸收和利用，而生育三烯酚的生理活性相对较低；二是生育三烯酚的分布不广，仅存在与单子叶植物禾本科和棕榈科及少数双子叶植物中发现。0003目前，关于生育三烯酚的提取纯化研究报道很少，其提取分离的难度在于容易氧化损失；生育酚与生育三烯酚结构及性质相近，不易分离。其分离提纯技术包括皂化以除去植物油中的酯类物质，但皂化反应需要较高温度及在碱性条件下进行，生育三烯酚极易被氧化损失，因此需要添加抗氧化剂；超临界CO2萃取，该方法能够有效克服生育三烯酚分离过程中的易氧化、溶剂残留等缺点，但是所需设备成本较高；柱层

7、析色谱分离能够对生育酚和生育三烯酚进行粗分离，使大部分生育酚和生育三烯酚进行富集，但是无法使生育酚和生育三烯酚两者有效分离；制备型液相色谱能够得到高纯度的生育三烯酚，但是该方法成本高、设备要求高、产量小，不适宜工业化。发明内容0004为了克服上述现有技术之不足，本发明提供一种生育三烯酚的分离提纯方法，该方法工艺简单、设备要求低、分离效率高。0005本发明所采用的技术方案为，一种生育三烯酚的分离提纯方法，具体包括以下步骤00061层析用填料制备按硅胶硝酸银25351M/M的比例混合，加入硅胶质量112M/V蒸馏水及1153M/V乙醇，搅拌混合，减压蒸馏脱除溶剂，得流动样粉末于100120烘干16

8、24H；00072柱层析采用湿法装柱，将硝酸银硅胶用非极性溶剂浸泡后一次性转入层析柱，用所述非极性溶剂作为洗脱剂反复洗脱填料使硝酸银硅胶沉积压实，按硝酸银硅胶质量530的上柱量将样品转移至硅胶顶端，然后按051BV柱体积非极性溶剂、051BV柱体积510极性溶剂非极性溶剂的混合洗脱液、051BV柱体积50100极性溶剂非极性溶剂的混合洗脱液的顺序洗脱样品；00083分段收集洗脱液，根据TLC检测合并相同组分洗脱液，经浓缩后得到生育三烯酚浓缩液。0009优选的，步骤1中，按硅胶硝酸银251M/M的比例混合。说明书CN104262315A2/2页40010优选的，步骤2中的非极性溶剂为正己烷、正庚

9、烷或石油醚。0011优选的，步骤2中的极性溶剂为乙酸乙酯、四氢呋喃或氯仿。0012优选的，步骤2中的非极性溶剂为正己烷，极性溶剂为乙酸乙酯。0013优选的，步骤2中按硝酸银硅胶质量5的上柱量将样品转移至硅胶顶端。0014优选的，步骤2中的极性溶剂非极性溶剂的混合洗脱液为乙酸乙酯正己烷。0015优选的，步骤2中，按1BV柱体积非极性溶剂、1BV柱体积10极性溶剂非极性溶剂的混合洗脱液、1BV柱体积50极性溶剂非极性溶剂的混合洗脱液的顺序洗脱样品。0016优选的，步骤3中的浓缩为分子蒸馏浓缩。0017本发明分离的样品来源广泛，既可以来源于棕榈油和米糠油，也可以来源于谷物加工的下脚料中含有比较丰富的

10、生育三烯酚，含有一定浓度的生育三烯酚的待分离的样品均适用本发明的方法。样品来源也可以通过购买得到，如马来西亚CAROTECH公司生产的生育三烯酚原料其中混合生育三烯酚含量2532，生育酚含量69，另外含有其他成分包括角鲨烯、植物甾醇、辅酶Q10和混合型类胡萝卜素等。0018相比现有技术，本发明具有如下优势00191、柱层析填料采用硝酸银硅胶，在硝酸银硅胶的制备过程中，包括硝酸银与硅胶比例、加入的水和乙醇的比例以及烘干时间等参数，都是申请人经过长期创造性劳动摸索出来的最佳配比；柱层析所采用的上柱量以及多种溶剂体系的依次使用，即采用从非极性溶剂到浓度增加的极性溶剂非极性溶剂的混合洗脱液洗脱，使得有

11、效组分的洗脱更加完全，极大的提高了生育三烯酚的收率；00202、本发明的方法工艺简单、设备要求低、分离效率高，适宜于工业化。具体实施方式0021下面结合实施例对本发明作进一步描述0022实施例100231层析用填料制备取硅胶100G，硝酸银40G，加入100ML蒸馏水及150ML乙醇，搅拌混合，减压蒸馏脱除溶剂，得流动样粉末于120烘干20H；00242柱层析采用湿法装柱，将硝酸银硅胶用正己烷浸泡后一次性转入层析柱，用正己烷作为洗脱剂反复洗脱填料使硝酸银硅胶沉积压实，取7G样品转移至硅胶顶端，然后按正己烷1BV、10乙酸乙酯正己烷1BV、50乙酸乙酯正己烷1BV的洗脱剂顺序洗脱样品；样品来源通过购买得到，马来西亚CAROTECH公司生产的生育三烯酚原料其中混合生育三烯酚含量2532，生育酚含量69；00253分段收集洗脱液，根据TLC检测合并相同组分洗脱液，经浓缩后得到生育三烯酚浓缩液199G，其中生育三烯酚含量8557，收率810。0026以上实施例显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，而不是以任何方式限制本发明的范围，在不脱离本发明范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的范围内。说明书CN104262315A