一种人鼻咽癌细胞株及其用途.pdf

1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201510751274.9 (22)申请日 2015.11.05 CCTCCNO ： C2015134 2015.09.10 C12N 5/09(2010.01) C12Q 1/02(2006.01) C12R 1/91(2006.01) (71)申请人 钱朝南 地址 510000 广东省广州市东风东路 651 号 (72)发明人 钱朝南 (74)专利代理机构 广州三环专利代理有限公司 44202 代理人 刘孟斌 (54) 发明名称 一种人鼻咽癌细胞株及其用途 (57) 摘要 本发明提供了一种人鼻咽癌细胞株， 所述细 胞株在中国典型培养

2、物保藏中心保藏的保藏编号 为CCTCC NO ： C2015134。 通过使用所述细胞株， 可 以建立一个稳定有效的筛选抗肿瘤转移化合物的 系统， 为开发出一系列用于防治肿瘤转移的新型 抗癌药提供了关键的细胞模型。 (83)生物保藏信息 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 附图1页 CN 105441392 A 2016.03.30 CN 105441392 A 1.一种人鼻咽癌细胞株， 其特征在于， 所述细胞株在中国典型培养物保藏中心保藏的 保藏编号为CCTCCNO： C2015134。 2.如权利要求1所述的人鼻咽

3、癌细胞株在制备用于大规模筛选抗肿瘤药物的细胞模型 中的用途。 权利要求书 1/1 页 2 CN 105441392 A 2 一种人鼻咽癌细胞株及其用途 技术领域 0001 本发明涉及一种细胞株， 具体涉及一种人鼻咽癌细胞株及其用途。 背景技术 0002 现有的高通量筛选抗癌化合物的基本原理， 是通过检测IC50， 即癌细胞的增殖被 抑制50时的浓度。 IC50的值越低， 药物对肿瘤增殖的抑制作用越强。 这个旧有的原理无法 用于筛选抑制肿瘤转移的新药。 目前大部分癌症患者都死于远处转移。 市场上已经开发出 来的抗肿瘤药物都是基于它们对肿瘤生长或者对肿瘤血管生成的抑制作用， 而对肿瘤转移 往往无效

4、。 各大制药公司未能开发出用于抑制肿瘤转移的新药， 主要瓶颈在于缺乏一个高 通量的、 可用于筛选抗肿瘤转移化合物的稳定系统。 这个系统需要有高转移能力的细胞株 和低转移能力的细胞株。 发明内容 0003 本发明的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供了一种人鼻咽癌细胞株， 本发明还提供了所述细胞株的用途。 0004 为实现上述目的， 所采取的技术方案： 一种人鼻咽癌细胞株， 所述细胞株在中国典 型培养物保藏中心保藏的保藏编号为CCTCCNO： C2015134。 所述细胞株的保藏时间为2015 年9月10日， 保藏单位地址为中国武汉市武汉大学。 所述人鼻咽癌细胞株命名为人低分化鼻 咽癌细胞株

5、CNE2-S18,所述人鼻咽癌细胞株是从人鼻咽癌细胞株CNE-2中分离而来的细胞 株， 所述人低分化鼻咽癌细胞株CNE2-S18的迁移能力和侵袭能力都很高， 并且所述人低分 化鼻咽癌细胞株CNE2-S18出现了上皮-间充质转化( epithelial-mesenchymal transition,EMT)， 即间充质的标志物表达水平很高， 而上皮标志物的表达水平很低。 所述 人低分化鼻咽癌细胞株CNE2-S18可以在如下培养基中培养： DMEM+10FBS。 所述人低分化 鼻咽癌细胞株CNE2-S18可以在液氮中长期保存。 0005 本发明还提供了上述所述细胞株在制备用于大规模筛选抗肿瘤药物的

6、细胞模型 中的用途。 0006 本发明的有益效果在于： 本发明提供了一种人鼻咽癌细胞株， 通过使用所述细胞 株， 可以建立一个稳定有效的筛选抗肿瘤转移化合物的系统， 为开发出一系列用于防治肿 瘤转移的新型抗癌药提供了关键的细胞模型。 附图说明 0007 图1为本发明实施例1中细胞株CNE2、 S18、 S22和S26的癌细胞转移率的对比图； 0008 图2为本发明实施例1中细胞株S18、 S22和S26上皮-间充质转化标志物的表达水平 电泳图。 具体实施方式 说明书 1/2 页 3 CN 105441392 A 3 0009 为更好的说明本发明的目的、 技术方案和优点， 下面将结合具体实施例对

7、本发明 作进一步说明。 0010 实施例1 0011 人鼻咽癌细胞株CNE2的转移能力是很低的， 而从CNE2这一细胞株中分离出来的细 胞克隆S18、 S22和S26的转移能力并不相同， 将它们分别接种于裸小鼠足底来进行转移率计 算， 如图1所示， S18的转移能力很高， S22和S26的转移能力与亲本细胞CNE2一样低。 这些转 移能力的差异， 是非常稳定的， 经过超过一百代的细胞传代， 都没有改变。 将人鼻咽癌细胞 株S18在中国典型培养物保藏中心进行保藏， 命名为人低分化鼻咽癌细胞株CNE2-S18， 其保 藏编号为CCTCCNO： C2015134， 保藏时间为2015年9月10日，

8、保藏单位地址为中国武汉市武 汉大学。 0012 上述几种不同转移能力的癌细胞株/克隆， 其上皮-间充质转化标志物的表达水平 上存在明显差异。 检测的方法是蛋白质印迹。 如图2所示， 上述所述高转移细胞S18的间充质 标志物(Vimentin ,N-cadherin ,Fibronectin)的表达水平很高， 但上皮标志物(E- cadherin)几乎不表达。 上述所述低转移细胞S22和S26的间充质标志物表达水平很低， 但上 皮标志物的表达水平却很高。 这种上皮-间充质标志物表达水平的差异， 是非常稳定的， 经 过超过一百代的细胞传代， 都没有改变。 0013 最后所应当说明的是， 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保 护范围的限制， 尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明， 本领域的普通技术人员应当 理解， 可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质 和范围。 说明书 2/2 页 4 CN 105441392 A 4 图1 图2 说明书附图 1/1 页 5 CN 105441392 A 5