一种赖诺普利中间体的制备方法.pdf

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610152897.9 (22)申请日 2016.03.17 (71)申请人 苏州引航生物科技有限公司 地址 215021 江苏省苏州市工业园区星湖 街218号C13栋4楼 (72)发明人 谢新开黄晓飞张金鑫张瑞杰 (74)专利代理机构 北京汇信合知识产权代理有 限公司 11335 代理人 吴甘棠 (51)Int.Cl. C07C 69/732(2006.01) C07C 67/08(2006.01) C12P 7/42(2006.01) (54)发明名称 一种赖诺普利中间

2、体的制备方法 (57)摘要 本发明提供一种赖诺普利中间体的制备方 法， 所述赖诺普利中间体为(R)-2-羟基-4-苯基 丁酸乙酯， 本发明的制备方法以廉价易得的苯甲 醛和丙酮酸为原料， 通过缩合， 生物酶催化不对 称还原， 双键氢化以及酯化四步高效的反应， 最 终以83的总收率得到光学纯的目标产物(R)- HPBE。 权利要求书2页 说明书7页 CN 105777546 A 2016.07.20 CN 105777546 A 1.一种赖诺普利中间体的制备方法， 所述赖诺普利中间体为(R)-2-羟基-4-苯基丁酸 乙酯， 其特征在于， 包括如下步骤： (1)苯甲醛与丙酮酸在强碱下反应， 得到的不

3、饱和酮酸盐； (2)用酮还原酶将步骤1)中得到的所述不饱和酮酸盐还原； (3)向步骤2)中还原反应得到的产物中加入催化剂， 在氢气下进行还原反应， 即得到 (R)-2-羟基-4-苯基丁酸； (4)使步骤3)中得到的所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸与乙醇发生酯化反应， 即得到所述 (R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯。 2.根据权利要求1中所述的赖诺普利中间体的制备方法， 其特征在于， 所述步骤1)中苯 甲醛与丙酮酸的摩尔比为1： (0.9-1.1)。 3.根据权利要求1或2中所述的赖诺普利中间体的制备方法， 其特征在于， 所述步骤1) 具体为： 在惰性气体下,取苯甲醛溶解在有机溶剂中,在-55

4、的温度下加入丙酮酸， 保持 温度低于或者等于15， 缓慢滴加强碱的甲醇溶液， 滴加完毕后， 保持2025的温度， 搅 拌反应512h， 反应结束后， 将反应液过滤， 得到的黄色固体用甲醇和乙醚洗涤， 即得到所 述不饱和酮酸盐。 4.根据权利要求3中所述的赖诺普利中间体的制备方法， 其特征在于， 所述有机溶剂为 甲醇； 所述惰性气体为氮气； 所述强碱为氢氧化钾或氢氧化钠。 5.根据权利要求1-4中任意一项所述的赖诺普利中间体的制备方法， 其特征在于， 所述 步骤2)具体为： 取步骤1)中得到的所述不饱和酮酸盐， 加入葡萄糖、 pH值为57且浓度为 0.10.3mol/L的PBS缓冲液， 将得到的

5、混合溶液的pH值调节至57， 在转速800900rpm、 温度2535下分别加入NADP+、 GDH以及酮还原酶酶粉， 保持pH值为57， 反应1230h， 再 调节得到的混合溶液的pH值至0.51.5， 加入乙酸乙酯， 搅拌0.5h以上， 过滤， 取有机相， 干 燥， 过滤， 脱溶， 即可。 6.根据权利要求1-4中任意一项所述的赖诺普利中间体的制备方法， 其特征在于， 所述 步骤2)具体为： 取步骤1)中得到的所述不饱和酮酸盐， 加入异丙醇、 pH值为57且浓度为 0.10.3mol/L的PBS缓冲液， 搅拌均匀， 将得到的混合溶液的pH值调节至57， 加入酮还原 酶粉、 NADP+， 在

6、温度2535下搅拌反应1230h， 再调节得到的混合溶液的pH值至0.5 1.5， 加入乙酸乙酯， 搅拌0.5h以上， 过滤， 取有机相， 干燥， 过滤， 脱溶， 即可。 7.根据权利要求1-6中任意一项所述的赖诺普利中间体的制备方法， 其特征在于， 所述 步骤3)具体为： 向步骤2)中还原反应得到的产物溶于乙醇， 加入催化剂， 保持体系的氢气压 力在1个大气压下进行还原反应， 在温度1535下， 搅拌12h， 抽滤， 浓缩， 即得到(R)-2- 羟基-4-苯基丁酸。 8.根据权利要求7中所述的赖诺普利中间体的制备方法， 其特征在于， 所述催化剂为 5钯碳。 9.根据权利要求1-8中任意一项所

7、述的赖诺普利中间体的制备方法， 其特征在于， 所述 步骤3)还包括将得到的所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸精制的步骤， 具体为： 将得到的所述 (R)-2-羟基-4-苯基丁酸加入到1,2-二氯乙烷中， 加热， 搅拌1060min， 缓慢降至0析晶， 抽滤， 烘干滤饼， 即得到精制的(R)-2-羟基-4-苯基丁酸。 10.根据权利要求1-8中任意一项所述的赖诺普利中间体的制备方法， 其特征在于， 所 权利要求书 1/2 页 2 CN 105777546 A 2 述步骤4)具体为： 使步骤3)中得到的所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸加入到乙醇中， 并在搅拌 下缓慢滴加硫酸。 权利要求书 2/2

8、 页 3 CN 105777546 A 3 一种赖诺普利中间体的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种赖诺普利中间体的制备方法， 属于生物制药和生物化工的技术领 域。 背景技术 0002 赖诺普利， 化学名称为N-N-(S)-1-羧基-3-苯丙基-L-赖氨酰-L-脯氨酸， 是用 于治疗各种程度的高血压和肾性高血压的药物， 也可单用或与利尿药和洋地黄合用， 治疗 充血性心力衰竭。 该药及复方制剂(加氢氯噻嗪)的品牌之一由美国默克公司研制， 分别于 1987年12月29日和1989年2月16日获FDA批准上市， 其商品名分别为Prinivil和Prinzide； 另一品牌为阿斯利康Zestr

9、il(捷赐瑞)， 该药于1993年6月9日获FDA批准上市。 本药物毒副 作用小， 药效高， 选择性好， 已经成为目前市场上治疗高血压、 急性心肌梗塞等心血管疾病 的最畅销的药物之一。 0003 在赖诺普利的合成过程中通常都会使用到一个关键的药物中间体(R)-2-羟基-4- 苯基丁酸乙酯简称为(R)-HPBE， 其结构式如下所示： 0004 0005 探索一种绿色环保、 生产成本较低的(R)-HPBE的制备方法有助于降低药物赖诺普 利的成本， 因此开发经济适用的(R)-HPBE工业化制备方法受到了广大化学生物工作者的关 注。 目前， 制备(R)-HPBE主要有以下几种方法： 0006 (1)采

10、用化学法或生物法对消旋的2-羟基-4-苯基丁酸乙酯进行拆分， 但是， 这类 方法存在的最大弊端是拆分后(S)-构型的产物作为副产物无法有效的利用， 进而成为了废 弃物。 0007 (2)从天然手性源出发通过多步的化学合成制备(R)-HPBE， 比如， 2001年， Tetrahedron:Asymmetry12(2001)15831587报道的从手性苹果酸出发通过多步化学合成 制备(R)-HPBE的方法， 其合成路线如下所示： 0008 说明书 1/7 页 4 CN 105777546 A 4 0009 此方法的主要缺点是反应步骤比较多， 工艺复杂， 不适合工业化的生产。 0010 (3)利用

11、不对称合成的手段制备(R)-HPBE， 这类方法主要是使用化学或生物法不 对称还原相应的潜手性的酮。 比如： 0011 a)化学法： 通过不对称氢化制备(R)-HPBE， 其合成路线如下所示： 0012 0013 此类方法存在以下不足之处： 1.需要使用价格昂贵的手性配体与贵金属催化剂； 2.需要特殊的高压设备； 3.最终产物的对映选择性只能达到94-96等； 由于上述不足， 使 得该方法还不适合工业化应用。 0014 b)生物法： 利用生物酶法还原潜手性的酮， 例如， 中国专利文献CN102618590A公开 的一种利用重组羰基还原酶催化制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的方法， 其合成

12、路线如 下所示： 0015 0016 此类方法存在着操作简单、 条件温和、 对环境友好等优点， 但是由于该工艺路线的 原料2-氧代-4-苯基-丁酸乙酯是一个不稳定的高沸点液体， 提纯比较困难(目前工业生产 的纯度只有90)， 这增加了产品(R)-HPBE精制的难度， 给工业化生产带来了很大的不便。 发明内容 0017 本发明所要解决的技术问题是现有技术中的制备(R)-HPBE成本较高、 制备条件苛 刻、 制备工艺复杂、 产率低、 精制难度高的问题， 进而提供一种低成本、 易于制备、 产率高、 产 品纯度高的赖诺普利中间体的制备方法。 0018 为了解决上述技术问题， 本发明提供了一种赖诺普利中

13、间体的制备方法， 所述赖 诺普利中间体为(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯， 包括如下步骤： 0019 (1)苯甲醛与丙酮酸在强碱下反应， 得到的不饱和酮酸盐； 0020 (2)用酮还原酶将步骤1)中得到的所述不饱和酮酸盐还原； 0021 (3)向步骤2)中还原反应得到的产物中加入催化剂， 在氢气下进行还原反应， 即得 到(R)-2-羟基-4-苯基丁酸； 0022 (4)使步骤3)中得到的所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸与乙醇发生酯化反应， 即得 到所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯。 0023 所述的赖诺普利中间体的制备方法， 合成路线如下： 说明书 2/7 页 5 CN 105777

14、546 A 5 0024 0025 优选地， 所述步骤1)中苯甲醛与丙酮酸的摩尔比为1： (0.9-1.1)； 0026 优选地： 所述步骤1)具体为： 在惰性气体下,取苯甲醛溶解在有机溶剂中,在-55 的温度下加入丙酮酸， 保持温度低于或者等于15， 缓慢滴加强碱的甲醇溶液， 滴加完毕 后， 保持2025的温度， 搅拌反应512h， 反应结束后， 将反应液过滤， 得到的黄色固体用 甲醇和乙醚洗涤， 即得到所述不饱和酮酸盐； 0027 进一步优选地， 所述有机溶剂为甲醇； 所述惰性气体为氮气； 所述强碱为氢氧化钾 或氢氧化钠。 0028 优选地， 所述步骤2)具体为： 取步骤1)中得到的所述不

15、饱和酮酸盐， 加入葡萄糖、 pH值为57且浓度为0.10.3mol/L的PBS缓冲液， 将得到的混合溶液的pH值调节至57， 在转速800900rpm、 温度2535下分别加入NADP+、 GDH以及酮还原酶酶粉， 保持pH值为5 7， 反应1230h， 再调节得到的混合溶液的pH值至0.51.5， 加入乙酸乙酯， 搅拌0.5h以 上， 过滤， 取有机相， 干燥， 过滤， 脱溶， 即可。 0029 或者优选地， 所述步骤2)具体为： 取步骤1)中得到的所述不饱和酮酸盐， 加入异丙 醇、 pH值为57且浓度为0.10.3mol/L的PBS缓冲液， 搅拌均匀， 将得到的混合溶液的pH值 调节至57

16、， 加入酮还原酶粉、 NADP+， 在温度2535下搅拌反应1230h， 再调节得到的 混合溶液的pH值至0.51.5， 加入乙酸乙酯， 搅拌0.5h以上， 过滤， 取有机相， 干燥， 过滤， 脱 溶， 即可。 0030 优选地， 所述步骤3)具体为： 向步骤2)中还原反应得到的产物溶于乙醇， 加入催化 剂， 保持体系的氢气压力在1个大气压下进行还原反应， 在温度1535下， 搅拌12h， 抽 滤， 浓缩， 即得到(R)-2-羟基-4-苯基丁酸。 0031 进一步优选地， 所述催化剂为5钯碳。 0032 进一步优选地， 所述步骤3)还包括将得到的所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸精制的 步骤，

17、 具体为： 将得到的所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸加入到1,2-二氯乙烷中， 加热， 搅拌10 60min， 缓慢降至0析晶， 抽滤， 烘干滤饼， 即得到精制的(R)-2-羟基-4-苯基丁酸。 0033 优选地， 所述步骤4)具体为： 使步骤3)中得到的所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸加入 到乙醇中， 并在搅拌下缓慢滴加硫酸， 保持温度在6080继续搅拌13h， 降温至10以 下， 缓慢加入碱， 中和硫酸， 搅拌1015分钟， 抽滤， 除去不溶物， 滤液浓缩， 除去过量的乙 醇， 再向其中加入水， 并用乙酸乙酯萃取， 取有机相， 有机相分别用饱和碳酸氢钠溶液、 饱和 食盐水洗涤， 干燥，

18、 即得到所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯。 0034 需要说明的是， 所述NADP+的中文名称为烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸， 是还原型辅酶 II(NADPH)的氧化形式； 所述GDH是指葡萄糖脱氢酶； 所述PBS缓冲液是磷酸缓冲盐溶液。 0035 本发明与现有技术相比具有如下优点： 0036 (1)本发明所述的赖诺普利中间体的制备方法， 即(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的 说明书 3/7 页 6 CN 105777546 A 6 制备方法中， 产物及中间体的收率和纯度均较高， 中间体都是以固体形式存在有利于其纯 化， 整个工艺路线操作简单、 条件温和、 对环境友好， 大幅度降低了生产的成

19、本， 且易于实 现工业化； 0037 (2)本发明开发了一个高效合成光学纯(R)-HPBE的新路线， 以廉价易得的苯甲醛 和丙酮酸为原料， 通过缩合， 生物酶催化不对称还原， 双键氢化以及酯化四步高效的反应， 最终以83的总收率得到光学纯的目标产物(R)-HPBE(纯度99， 对映选择性99)； 0038 (3)本发明的赖诺普利中间体的制备方法中的各步反应都很高效， 收率均在90 以上， 并且所有中间体都是以固体形式存在， 这大大便利了中间体及产物的纯化。 整个工艺 路线中只需要对中间体(R)-2-羟基-4-苯基丁酸完成一次精制， 最终产品的纯度就能达到 99以上； 0039 (4)本发明的赖

20、诺普利中间体的制备方法开发了一种生物酶法选择性高效不对称 还原不饱和酮酸的酮羰基制备手性醇的方法， 此生物转化的底物浓度能达到100g/L， 反应 的转化率和对映选择性都在99以上， 有利于实现产业化。 0040 (5)本发明的赖诺普利中间体的制备方法， 采用生物酶法还原酮羰基， 使用辅酶的 再生体系为葡萄糖和葡萄糖脱氢酶体系或者异丙醇体系， 两种体系均适用于此工艺路线的 生物转化步骤。 具体实施方式 0041 以下结合实施例， 对本发明作进一步具体描述， 但不局限于此。 0042 实施例1 0043 本实施例中制备的赖诺普利中间体为(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯， 具有如下结 构： 00

21、44 0045 0046 上述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯以廉价易得的苯甲醛和丙酮酸为原料， 通过缩 合， 生物酶催化不对称还原， 双键氢化以及酯化四步高效的反应合成， 合成路线如下所示： 0047 0048 其制备方法具体为： 0049 (1)在氮气氛围下,取苯甲醛21.2g溶解在15mL的甲醇中,将反应体系降至0并保 持此温度加入丙酮酸17.2g。 缓慢滴加氢氧化钾的甲醇溶液(16.8g氢氧化钾溶解在60mL的 甲醇中)， 控制反应体系的温度在15以下。 滴加完毕， 反应体系缓慢升温至20-25， 保持 此温度搅拌过夜。 反应完毕， 过滤， 得到的黄色固体用甲醇和乙醚各洗涤一次， 产

22、品烘干得 说明书 4/7 页 7 CN 105777546 A 7 39.2g(收率91)， 无需纯化直接用于下一步反应； 0050 (2)取上述步骤1)中所得产品不饱和酮酸钾16g、 葡萄糖17g置于250mL的三口烧 瓶， 加入160mL的pH6.0且浓度为0.2mol/L的PBS缓冲液， 滴加当量浓度为6N的盐酸调节体 系的pH6.0。 将三口烧瓶放入反应锅中， 设置转速850rpm温度30。 然后分别加入0.016g NADP+,0.16gGDH(采购自苏州引航生物科技有限公司： 商品编号YH901)、 以及0.4g酮还原 酶酶粉(采购自苏州引航生物科技有限公司： 商品编号YHADH0

23、47)。 开始反应， 反应过程中 用2M的NaOH溶液将pH维持在6.0左右， HPLC监测。 24小时后反应转化率99。 反应结束， 反 应体系中缓慢滴加6N的盐酸调节至PH1并加入60mL乙酸乙酯搅拌0.5小时， 过滤， 滤液分 层， 取有机相。 水相用60mL乙酸乙酯萃取两次， 分层， 取有机相。 合并有机相， 无水硫酸钠干 燥， 过滤， 脱溶， 得到产品13.0g， 收率98,对映选择性99， 产品无需纯化直接用于下一 步反应； 0051 (3)称取上述步骤2)中所得产品5g溶于50mL的无水乙醇并置于100mL的单口瓶中， 加入5的钯碳100mg， 体系用氢气置换3次， 保持体系的氢

24、气压力在1个大气压。 室温搅拌1- 2小时， 反应完毕， 抽滤(硅藻土助滤)， 减压浓缩， 得白色固体5g， 粗品收率100。 将上述粗 产品加入到50mL单口烧瓶中， 加入1,2-二氯乙烷10mL， 加热至回流， 继续搅拌30分钟， 缓慢 降至0析晶。 抽滤， 滤饼用少量冷的1,2-二氯乙烷洗涤， 滤饼烘干， 得白色固体4.6g， 总收 率92， 纯度99， 对映选择性99； 0052 (4)取上述步骤3)中精制的(R)-2-羟基-4-苯基丁酸2.89g加入到100mL单口烧瓶 中， 加入70ml的无水乙醇， 并在搅拌下缓慢滴加浓硫酸1.4g， 滴加完毕体系缓慢升温至70 。 保持70继续搅

25、拌， TLC监控反应。 2小时左右反应完毕， 停止加热， 降至0， 缓慢加入碳 酸氢钠固体2.4克中和浓硫酸， 加完后继续搅拌10-15分钟， 抽滤， 除去不溶物。 滤液浓缩， 除 去过量的乙醇。 蒸干后往体系中加入30mL水， 并用20mL乙酸乙酯萃取， 分液， 取有机相。 水相 用乙酸乙酯萃取(10mL*2)。 合并有机相， 有机相用饱和碳酸氢钠溶液10mL洗涤一次， 饱和食 盐水10mL洗涤1次， 无水硫酸钠干燥， 旋干， 得无色透明液体3.28g， 收率98。 纯度99,对 映选择性99。 0053 实施例2 0054 本实施例与实施例1中所述的(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的制备

26、方法相同， 区别 仅在于， 步骤(2)为： 取上述步骤1)中所得产品不饱和酮酸钾10g,异丙醇20mL加至装有80mL pH6.0， 0.2M的PBS缓冲液的250mL反应器中搅拌均匀， 滴加6N的盐酸调节体系的pH6.0。 依次加入酮还原酶粉(采购自苏州引航生物科技有限公司： 商品编号YHADH047)0.25g， NADP +0.01g,在30搅拌24h， HPLC监测反应转化率92。 反应结束， 反应体系中缓慢滴加6N的 盐酸调节至PH1并加入50mL乙酸乙酯搅拌0.5小时， 过滤， 滤液分层， 取有机相。 水相用 30mL乙酸乙酯萃取两次， 分层， 取有机相。 合并有机相， 无水硫酸钠

27、干燥， 过滤， 脱溶， 得到产 品7.5g， 收率90,对映选择性99， 产品无需纯化直接用于下一步反应。 0055 实施例3 0056 本实施例的(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的制备方法， 包括以下步骤： 0057 (1)在惰性气体下,取苯甲醛溶解在有机溶剂中,在0的温度下加入丙酮酸， 保持 温度15， 缓慢滴加强碱的甲醇溶液， 滴加完毕后， 保持20的温度， 搅拌反应12h， 反应结 束后， 将反应液过滤， 得到的黄色固体用甲醇和乙醚洗涤， 即得到所述不饱和酮酸； 说明书 5/7 页 8 CN 105777546 A 8 0058 其中， 所述有机溶剂为甲醇； 所述惰性气体为氮气； 所

28、述强碱为氢氧化钾； 0059 需要说明的是， 作为本实施例可替代的实现方式， 上述0可替换为-55中的 任意值； 上述15还可取低于15的任意值； 上述20可替换为2025中的任意值； 搅拌 反应时间12h可以取512h中的任意值； 0060 (2)取步骤1)中得到的所述不饱和酮酸盐， 加入葡萄糖、 pH值为6且浓度为0.2mol/ L的PBS缓冲液， 将得到的混合溶液的pH值调节至6， 在转速850rpm、 温度25下分别加入 NADP+、 GDH以及酮还原酶酶粉， 保持pH值为6， 反应30h， 再调节得到的混合溶液的pH值至1， 加入乙酸乙酯， 搅拌0.5h， 过滤， 取有机相， 干燥，

29、 过滤， 脱溶， 即可； 0061 需要说明的是， 作为本实施例可替代的实现方式， 上述pH值为6可以取57中的任 意值； 上述PBS缓冲液的浓度可以取0.10.3mol/L中的任意值； 上述转速850rpm可替换为 800900rpm中的任意值； 上述25可替换为2535中的任意值； 上述反应30h， 可替换为 1230h中的任意值； 上述pH值至1可替换为0.51.5中的任意值； 上述搅拌0.5h， 可以替换 为0.5h以上的任意值； 0062 (3)向步骤2)中还原反应得到的产物溶于乙醇， 加入催化剂， 保持体系的氢气压力 在1个大气压下进行还原反应， 在温度25下， 搅拌1h， 抽滤，

30、 浓缩， 即得到(R)-2-羟基-4-苯 基丁酸； 0063 需要说明的是， 作为本实施例可替代的实现方式， 上述25可以替换为1535 中的任意值； 上述搅拌1h可替换为12h中的任意值； 0064 (4)使步骤3)中得到的所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸加入到乙醇中， 并在搅拌下缓 慢滴加硫酸， 保持温度在60继续搅拌3h， 降温至10以下， 缓慢加入碱， 中和硫酸， 搅拌15 分钟， 抽滤， 除去不溶物， 滤液浓缩， 除去过量的乙醇， 再向其中加入水， 并用乙酸乙酯萃取， 取有机相， 有机相分别用饱和碳酸氢钠溶液、 饱和食盐水洗涤， 干燥， 即得到所述(R)-2-羟 基-4-苯基丁酸乙

31、酯； 0065 需要说明的是， 作为本实施例可替代的实现方式， 上述60可替换为6080中 的任意值； 上述3h可替换为13h中的任意值； 搅拌15分钟可替换为1015分钟中的任意 值。 0066 实施例4 0067 本实施例与实施例3中所述的(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的制备方法相同， 区别 仅在于， 步骤(2)为： 取步骤1)中得到的所述不饱和酮酸盐， 加入异丙醇、 pH值为6且浓度为 0.2mol/L的PBS缓冲液， 搅拌均匀， 将得到的混合溶液的pH值调节至6， 加入酮还原酶粉、 NADP+， 在温度25下搅拌反应30h， 再调节得到的混合溶液的pH值至1.5， 加入乙酸乙酯，

32、搅 拌0.5h， 过滤， 取有机相， 干燥， 过滤， 脱溶， 即可。 0068 需要说明的是， 作为本实施例可替代的实现方式， 上述pH值为6可替换为57中的 任意值； 上述浓度为0.2mol/L可替换为0.10.3mol/L中的任意值； 上述25可以替换为25 35中的任意值； 上述搅拌反应30h可以替换为1230h中的任意值； 上述pH值至1.5可以 替换为0.51.5中的任意值； 上述搅拌0.5h可以替换为0.5h以上的任意值。 0069 实施例5 0070 本实施例与实施例4中所述的(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的制备方法相同， 区别 仅在于， 所述步骤(3)具体为： 向步骤2)中

33、还原反应得到的产物溶于乙醇， 加入催化剂， 保持 说明书 6/7 页 9 CN 105777546 A 9 体系的氢气压力在1个大气压下进行还原反应， 在温度15下， 搅拌2h， 抽滤， 浓缩， 即得到 (R)-2-羟基-4-苯基丁酸， 将得到的所述(R)-2-羟基-4-苯基丁酸加入到1,2-二氯乙烷中， 加热， 搅拌60min， 缓慢降至0析晶， 抽滤， 烘干滤饼， 即得到精制的(R)-2-羟基-4-苯基丁 酸。 0071 需要说明的是， 作为本实施例可替代的实现方式， 上述搅拌60min可替换为10 60min中的任意值。 0072 显然， 上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例， 而非对实施方式的限定。 对于 所属领域的普通技术人员来说， 在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变 动。 这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举， 而由此所引伸出的显而易见的变化或变 动仍处于本发明创造的保护范围之中。 说明书 7/7 页 10 CN 105777546 A 10