肽在控制辐射损伤中的用途.pdf

1、(10)授权公告号 CN 101443080 B (45)授权公告日 2015.01.14 CN 101443080 B (21)申请号 200780016562.3 (22)申请日 2007.03.06 60/779,896 2006.03.07 US 06076181.4 2006.06.07 EP 60/811,878 2006.06.07 US A61K 38/05(2006.01) A61K 38/07(2006.01) A61K 38/08(2006.01) A61K 38/10(2006.01) A61K 38/16(2006.01) A61P 39/00(2006.01) (7

2、3)专利权人 比奥滕普特公司 地址 荷兰库康厄 (72)发明人 R贝内 NA卡恩 RM卡尔顿 (74)专利代理机构 永新专利商标代理有限公司 72002 代理人 林晓红 EP 0572688 A1,1993.12.08, 说明书全文 . CN 1238217 A,1999.12.15, 说明书全文 . WO 01/51508 A1,2001.07.19, 说明书全文 . CN 1717587 A,2006.01.04, 说明书全文 . Husek P et al.Rapid screening of urinary proline-hydroxyproline dipeptide in bon

3、e turnover studies .Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences & Applications .2002, 第 767 卷 ( 第 1 期 ),169-174. Szinicz et al.History of chemical and biological warfare agents . Toxicology .2005, 第 214 卷 ( 第 3 期 ),167-181. (54) 发明名称 肽在控制辐射损伤中的用途 (57) 摘要 本发明涉及针对因暴露于高能电磁波 (X 射 线、 伽玛射线 ) 或粒子 ( 阿尔

4、法粒子、 贝塔粒子、 中子 ) 而引起的急性辐射损伤的药物研发领域。 迄今尚无有效的药物能够减轻意外暴露于电离照 射之后的辐射损伤。本发明提供用于治疗患有辐 射损伤的对象的方法， 其包含给所述对象施用小 于 30 个氨基酸的肽或其功能性类似物或衍生物。 此外， 本发明提供小于 30 个氨基酸的肽或其功能 性类似物或衍生物在制备用于治疗患有辐射损伤 或被认为患有辐射损伤的对象的药物组合物中的 用途。本发明具体提供抗辐射肽， 其针对急性伽 玛照射的剂量降低系数 (DRF) 为至少 1.10， 所述 DRF 可如下确定 ： 测试何种剂量的辐射在全身照 射 (WBI) 后 30 天导致测试组小鼠出现

5、50的死 亡率 (LD50/30)， 所述测试组小鼠在 WBI 后 72 小 时用所述肽进行处理 ； 测试何种剂量的辐射在全 身照射 (WBI) 后 30 天导致对照组小鼠出现 50 的死亡率 (LD50/30)， 所述对照组小鼠在 WBI 后 72 小时仅用所述肽的载体进行处理 ； 其中通过将 肽处理组动物的 LD50/30 除以载体处理组动物的 LD50/30 来计算所述 DRF。 (30)优先权数据 (85)PCT国际申请进入国家阶段日 2008.11.07 (86)PCT国际申请的申请数据 PCT/NL2007/050092 2007.03.06 (87)PCT国际申请的公布数据 WO

6、2007/102735 EN 2007.09.13 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 杨莹跃 权利要求书 1 页 说明书 37 页 附图 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书37页 附图4页 (10)授权公告号 CN 101443080 B CN 101443080 B 1/1 页 2 1. 肽在制备用于治疗患有辐射损伤或被认为患有辐射损伤的对象的药物组合物中的 用途， 所述肽选自以下组中 ： LQGV、 LAGV 和 AQGV， 所述辐射损伤是胃肠道综合征。 2. 权利要求 1 的用途， 其中所述肽的全部氨基酸是 L- 氨基酸

7、。 3. 权利要求 1 或 2 的用途， 其中所述肽是 AQGV。 4. 权利要求 1 或 2 的用途， 其中所述治疗包含皮下或肌肉内注射所述肽。 5. 权利要求 1 或 2 的用途， 其中所述药物组合物被置于自用式注射器中。 6. 权利要求 1 或 2 的用途， 其中所述治疗包括在照射后至少 30 分钟时施用所述肽。 权 利 要 求 书 CN 101443080 B 2 1/37 页 3 肽在控制辐射损伤中的用途 技术领域 0001 本发明涉及针对因暴露于高能电磁波 (X 射线、 伽玛射线 ) 或粒子 ( 阿尔法粒子、 贝塔粒子、 中子 ) 而引起的急性辐射损伤的药物研发领域。迄今尚无有效的

8、药物能够减轻 意外暴露于电离照射之后的辐射损伤。 背景技术 0002 辐射损伤是暴露于辐射而引起的组织损伤。在此， 辐射指的是由高能电磁波 (X 射 线、 伽玛射线 ) 或粒子 ( 阿尔法粒子、 贝塔粒子、 中子 ) 产生的电离辐射。此类辐射由放射 性物质 ( 放射性同位素 ) 例如铀、 氡、 和钚释放。此类辐射也可由人造辐射源产生， 例如 X 射线和放疗仪器。辐射剂量的测量使用多种不同的单位， 但它们均涉及能量沉积的量。这 些单位包括伦琴 (R)、 戈瑞 (gray， Gy)、 和希沃特 (sievert， Sv)。希沃特与戈瑞类似， 不同 之处在于希沃特考虑到了不同辐射类型的生物学效应。

9、两种主要类型的辐射暴露是照射和 污染。许多辐射事故使得人同时暴露于这两种类型。 0003 照射是暴露于从体外直接穿透机体的辐射波。照射可立即致病 ( 急性辐射病 )。 此外， 照射、 特别是高剂量辐射， 可损害人的遗传物质(DNA)， 导致慢性(迟发性)疾病， 例如 癌症和先天缺陷。不过， 照射不会造成人或其组织具有放射性。污染是接触并滞留放射性 物质， 后者典型地是灰尘或液体的形式。 放射性物质可留在皮肤上， 并可以从皮肤掉落或擦 掉， 污染其他人和物体。这些物质也可以通过肺、 消化道或者皮肤破损处而被机体吸收。吸 收的物质被转运到机体的各个部位， 例如骨髓， 在该处继续释放辐射。 这种内在

10、化的辐射不 仅会引起急性辐射病例如内出血， 而且也会产生慢性疾病如癌症。 0004 人们长期暴露于低水平的天然辐射 ( 背景辐射 )。辐射来自于外层空间 ( 宇宙 辐射 )， 不过其大部分被地球大气层阻挡。在高放射性元素条件中生活或工作的人暴露于 更多的宇宙辐射， 特别是氡气， 其也存在于许多岩石和矿物中。这些元素最终出现在各种 物质中， 包括食物和建筑材料。此外， 人们还暴露于来自人造辐射源的辐射， 包括来自核武 器试验的环境辐射和来自各种医学检查和治疗的辐射。普通人每年受到总量为大约 3 到 4mSv(1mSv 1/1000Sv) 的来自天然辐射和人造辐射源的辐射。工作中接触放射性物质和

11、X射线源的人容易暴露于更高水平的辐射。 接受癌症辐射治疗的人可受到很高水平的辐射。 核武器释放大量的辐射。自 1945 年以来还没有对人类使用过此类武器。不过， 现在许多国 家拥有核武器， 而一些恐怖分子集团也在设法获得核武器， 这增加了此类武器有朝一日被 再次使用的可能性。 0005 辐射的损伤效应取决于多种因素， 包括暴露的量(剂量)和持续时间。 对整个机体 的快速的单一剂量辐射可以是致死性的， 而同一总剂量在数周或数月以上暴露则效应可明 显轻得多。对于一给定的剂量， 快速暴露更容易造成遗传学损害。辐射的效应也取决于机 体的暴露范围。 例如， 超过6Gy的辐射如果分散于全身则通常导致死亡

12、； 但如果仅集中于一 个小的区域， 例如象癌症放疗那样， 则可以施用3到4倍该剂量的辐射而对对象整体没有严 重的伤害。辐射的分布也是重要的， 因为机体的某些部分对辐射更加敏感。细胞迅速增殖 说 明 书 CN 101443080 B 3 2/37 页 4 的器官和组织例如肠道和骨髓， 比细胞缓慢增殖的器官和组织例如肌肉和肌腱更容易受到 辐射的损害。精子和卵细胞的遗传物质可被辐射破坏。因此， 在癌症放疗过程中， 要尽可能 遮蔽机体这些更加脆弱的部位使之免于辐射， 以便可以将高剂量的辐射主要施用于癌症。 0006 辐射暴露产生两种损伤 ： 急性 ( 即刻 ) 和慢性 ( 迟发性 )。急性辐射损伤通过

13、血 管内皮损伤导致血管渗漏而引发炎症。随后是血管应答和细胞应答。电离辐射抑制免疫力 并损害肠道上皮， 两者均促进微生物自肠道发生移位。 0007 癌症放疗主要在机体接受辐射的部位产生症状。 例如， 在直肠癌的放疗中， 由于辐 射对小肠的影响， 腹部绞痛和腹泻十分常见。 0008 第二次世界大战后不久便开始寻找非毒性的辐射防护剂， 以保护正常组织抵抗辐 射损伤。深入的放射生物学研究发现了多种防护剂， 如果在辐射暴露之前施用， 它们保护 动物 ( 主要是啮齿动物 ) 免于辐射损伤 PrasadKN.Handbook of radiobiology.2nd edn. Boca Raton， FL ：

14、 CRC Press， 1995。这些研究发现那些清除自由基和 / 或引起低氧的药剂 具有辐射防护价值。不过， 这些化合物的大多数在辐射防护剂量对人是有毒的。随着在冷 战过程中出现的核对抗的危险性的下降， 后来对辐射防护剂的研究兴趣显著下降。由于基 于 X 射线的诊断仪器的迅速增多以及放射学方法在疾病早期诊断中的应用在增加， 开始更 加关心频率日益增加的体细胞和遗传性突变， 其能够使当前的人们以及后代发生基因连锁 疾病的危险升高。 因此， 一定要保护正常组织使之免于潜在的辐射损伤， 哪怕这种损伤十分 微小。 0009 通常， 辐射防护剂被定义为这样的化合物， 所述化合物在暴露于电离辐射之 前施

15、用可降低辐射的损伤效应， 包括辐射引起的死亡 H.B.Stone etal.， Models for evaluating agents intended for the prophylaxis， mitigation andtreatment of radiation injuries.Report of an NCI Workshop， December3-4， 2003， Radiat Res162 ： 711-728.。它们可用于放射学恐怖主义、 军事事件、 临床肿瘤学、 空间旅行、 辐射点清 除 R.H.Johnson， Dealing with the terror ofnucle

16、ar terrorism， Health Phys87 ： S3-7.， F.A.J.Mettler， G.L.Voelz， Majorradiation exposure what to expect and how to respond， N Engl J Med346 ： 1554-1561， 2001C.K.Nair， D.K.Parida， T.Nomura， Radioprotectors inradiotherapy， J Radiat Res(Tokyo)42:21-37， J.K.Waselenko， T.J.MacVittie， W.F.Blakely， N.Pesik，

17、A.L.Wiley， W.E.Dickerson， H.Tsu， D.L.Confer， C.N.Coleman， T.Seed， P.Lowry， J.O.Armitage， N.Dainiak， Medical managementof the acute radiation syndrome ： Recommendations of the Strategic NationalStockpile Radiation Working Group， Ann Intern Med140 ： 1037-1051.。最近， 美国科学技术政策 局 (U.S.Offi ce of Science an

18、d Technology Policy) 和国土安全部 (Homeland Security Council)已经将开发新的辐射防护药物列为最优先研究项目。 尽管合成的辐射防护药物如 氨基硫醇类 (aminothiols) 可产生最高的防护系数， 但通常它们比天然存在的防护剂毒性 更大。通常， 最好的辐射防护剂也被认为可导致最高的毒性。 0010 在军事辐射事件中， 有效减轻辐射诱导的健康问题和战斗力下降效应可降低医学 救治处的伤亡负荷， 在辐射暴露事件后保持更加有效的行动力， 允许指挥官在辐射地环境 指导行动且受到急性组织损伤导致行动能力下降的危险减小， 并降低那些在被污染环境中 执行任务的

19、人员的负面心理创伤。理想的辐射防护剂应该是无毒的， 不会降低工作能力， 说 明 书 CN 101443080 B 4 3/37 页 5 并且单次施用之后即起效， 特别是在需要快速进入具有外部辐射危险区域的情况下尤为如 此。 0011 在 2005 年 6 月 21 日在美国马里兰州 Bethesda 召开的 NATO HumanFactors and Medicine Panel Research Task Group099 “Radiation Bioeffects andCountermeasures” 大会上报告 (Landauer et al.， NATO RTG-0992005) 并

20、发表于 AFRRI CD05-2 的一篇文章 中， 提出染料木黄酮 (genisteine) 可保护小鼠免于伽玛辐射诱导的死亡， 其在最佳剂量 (200mg/kg ； 在照射前24小时施用该剂量可获得最高的存活率)时的 “剂量降低系数” (dose reduction factor， DRF) 为 1.16。如果在全身照射 (WBI) 之前 1 小时施用则没有观察到辐 射保护作用。在第 51 届辐射研究学会 (2004 年 4 月 ) 上， 其他研究报告了代号为 ON-01210 的药物的辐射防护作用， 指出该药物 ON-01210( 与目前正在研究的针对辐射暴露的其他药 物类似 ) 仅在辐射

21、暴露前施用才有保护作用。该药物具有巯基成分 (4-carboxystyrl-4-c hlorobenzylsulfone)， 可作为抗氧化剂起作用， 将辐射损伤细胞时产生的自由基清除掉。 0012 同样， 正如美国国防部大会的年度报告中所述 (March2005 ； http:/medchembio. amedd.army.mil/docs/CBDP_Report_To_Congress.pdf)， 目前还没有商品化的适合用于军 事行动环境中的无毒药物或诊断能力。氨磷汀 (amifostine) 是一种氨基硫醇类化合物， 已被 FDA 批准用于接受化疗或放疗的患者， 但其降低性能的毒性不良反应

22、使其无法用于合 适的战斗部队， 而其静脉施用途径需要专业医疗人员。其他药物如用于治疗骨髓损伤的造 血细胞因子可由各个医生根据不同病例的具体情况而使用标注外的剂量， 但此类用途的规 定限制使其难以用于处理军事行动中的大量伤亡人员。抗生素常用于治疗放射学损伤的 感染性后遗症， 但必须经过适当选择以有效治疗外源性和内源性全身性感染而同时几乎不 影响有益的肠道厌氧菌。为了解决目前可选择的医疗对策有限这一局面， Armed Forces RadiobiologyResearch Institute(AFRRI) 已经在研究新化合物 5- 雄烯二醇 (5-AED ； Whitnall et al.， Ex

23、perimental Biology and Medicine226 ： 625-627(2001)。 同样， 该化 合物在小鼠模型中在照射攻击之前施用可产生良好的辐射防护剂功效。 在伽玛照射小鼠之 前 24 小时和之后 2 小时皮下施用 AED 可提高存活率。从 WBI 之前施用的概率值存活曲线 计算出的剂量降低系数为 1.3。在随后接种或者不接种致死量肺炎克雷伯菌 (Klebsiella pneumoniae) 的雄性和雌性小鼠均观察到了保护作用。多种其他类固醇则没有观察到保护 作用 ： 去氢表雄酮 (DHEA)、 5- 雄甾烯 -3B， 7B， 17B- 三醇 (AET)、 雄烯二酮、

24、或雌二醇。不过， 在过去的一年中， 为了准备 IND 应用而在非人灵长类动物 (NHP) 模型上进行的深入研究证 实， 5-AED 作为辐射防护剂施用时远不及在小鼠模型上那样有效， 但在照射后不久以连续剂 量治疗性施用时在 NHP 模型上产生了良好的功效。 0013 急性辐射病。急性辐射病通常出现于全身暴露于辐射的人。急性辐射病的进展有 多个阶段， 开始为早期症状 (prodrome)， 随后是无症状阶段 ( 潜伏期 )。随后根据人所接受 的辐射的量而出现不同的症状 ( 症状谱 )。辐射量越大， 症状越严重， 且自早期症状进展至 急性综合征越快。对于特定的辐射暴露量， 不同人之间的症状和时间过

25、程是一致的。医生 根据症状的时间过程和性质能够判断出人的辐射暴露情况。根据受累的主要器官系统， 医 生将急性辐射综合征分为三组， 不过各组之间有重叠。 0014 造血综合征是由辐射对骨髓、 脾脏和淋巴结产生血细胞 ( 造血 ) 的主要部位 的影响引起的。食欲下降 ( 厌食 )、 嗜睡、 恶心和呕吐出现在暴露于 2Gy 或更高辐射后的 2 说 明 书 CN 101443080 B 5 4/37 页 6 到 12 小时。在暴露后的 24 到 36 之内， 这些症状缓解， 在一周或更长的时间内人会感觉良 好。在此无症状阶段中， 骨髓、 脾脏和淋巴结中的造血细胞开始耗竭并且没有更新， 导致白 细胞严重

26、缺乏， 随后缺少血小板， 再后是红细胞。缺少白细胞可导致严重感染。缺少血小板 可导致难以控制的出血。缺少红细胞 ( 贫血 ) 引起乏力、 虚弱、 苍白以及在体力活动时呼吸 困难。 4到5周后， 如果人能够存活下来， 则血细胞开始重新产生， 但人会感觉虚弱乏力达数 月。 0015 胃肠道综合征由辐射对消化道被覆细胞层(cells lining the digestive tract) 的效应引起。严重的恶心、 呕吐和腹泻出现在暴露于 4Gy 或更高辐射后的 2 到 12 小时。这 些症状可引起严重脱水， 但 2 天后这些症状缓解。在随后 4 到 5 天内人会感觉良好， 但通常 作为保护屏障的消化

27、道被覆细胞层在死亡病脱落。此后， 再次出现严重的腹泻通常是血 性腹泻， 导致脱水。来自消化道的细菌侵入体内， 造成严重感染。接受这么强的辐射的人也 很可能发生造血综合征， 导致出血和感染， 并增加其死亡风险。 0016 辐射的总剂量超过 20 至 30Gy 时会出现脑血管 ( 脑 ) 综合征。人迅速发生意识模 糊、 恶心、 呕吐、 血性腹泻和休克。数小时内血压下降、 伴有抽搐和昏迷。脑血管综合征被认 为均是致死性的。 0017 辐射的慢性影响。辐射的慢性影响由分裂细胞中遗传物质的损伤引起。这些改变 可引起细胞生长异常， 例如癌症。 在受到严重照射的动物， 已经发现生殖细胞的损伤引起缺 陷后代

28、( 出生缺陷 )。不过， 在日本原子弹爆炸幸存者的后代中很少观察到照射引起的畸 形。原因可能是低于特定 ( 未知 ) 水平的辐射暴露不足以产生导致出生缺陷的遗传物质改 变。 0018 如果人在接受放疗或者意外暴露于辐射后生病， 则可能是照射损伤。没有特殊的 测试用于诊断这种病症， 不过某些测试可用于检测感染、 低血细胞计数或者器官功能异常。 为确定辐射暴露的严重程度， 医生会测量血液的淋巴细胞 ( 一种白细胞 ) 数量。暴露后 48 小时的淋巴细胞计数越低， 则辐射暴露越严重。 0019 不同于照射的是， 可通过能够检测辐射的 Geiger 计数器测量人体的放射性污染。 来自鼻部、 咽喉以及任

29、何伤口的拭子也可用于检查放射性。 0020 辐射损伤的后果取决于剂量、 剂量速率 ( 暴露发生的如何迅速 )、 以及在机体的分 布， 还取决于人原来的健康状态。总之， 绝大多数受到超过 6Gy 的 WBI 的人会死于胃肠道综 合征。 由于医生难以得知人受到的精确辐射量， 因此他们一般根据人的症状来判断结果。 脑 血管综合征通常在数小时至几天内导致死亡。胃肠道综合征通常在 3 到 10 天导致死亡， 不 过部分人能够存活数周。根据他们的总辐射量， 许多接受了适当医疗救助的人没有死于造 血综合征 ； 那些没有存活下来的人通常是在 8 到 50 天后死亡。 0021 照射目前没有急诊治疗， 但医生会

30、密切监测人出现的各种症状， 并在症状出现时 进行治疗。同时， 遗憾的是目前几乎没有什么对付由核攻击或放射攻击引起的各种急性和 长期毒性的医药产品。遇到污染时需要立即清除放射性物质以防止其被机体摄取。被放射 性物质污染的皮肤应该立即以大量肥皂和水或者以为此目的而设计的溶液 ( 如果有的话 ) 进行擦洗。小的破损伤口应该充分清洁以清除所有放射性颗粒， 尽管擦洗可引起疼痛。污 染的头发要剪掉而非刮掉， 刮可擦伤皮肤并使得污染物进入机体。擦洗要持续至 Geiger 计 数器显示放射性消失为止。如果人吞噬了放射性物质则要诱导呕吐。一些放射性物质具有 说 明 书 CN 101443080 B 6 5/37

31、 页 7 特殊的解毒剂， 可防止吞入的物质被吸收。大多数此类解毒剂仅用于暴露于显著放射性污 染的人， 例如是大的反应堆事故或核爆炸。碘化钾可防止甲状腺吸收放射性碘并降低发生 甲状腺癌的风险。其他药物， 例如二乙撑三胺五乙酸 (diethylene triaminepentaacetic acid， DTPA)、 乙二胺四乙酸 (ethylenediamine tetraacetic acid， EDTA)、 和青霉胺， 可静 脉施用以清除某些已经被吸收的放射性元素。 0022 当没有可疑污染时， 可通过使用预防呕吐的药物(止吐剂)来减轻恶心和呕吐 ； 这 些药物是进行放疗的患者的常规用药。脱水

32、可进行静脉补液治疗。 0023 发生胃肠道或造血综合征的人应该隔离以便他们不会接触感染性微生物。 可进行 输血和注射刺激血细胞产生的生长因子(如促红细胞生成素和集落刺激因子)以减少出血 并增加血细胞计数。如果骨髓严重受损， 这些生长因子是无效的， 有时需要进行骨髓移植， 不过成功率较低。 0024 出现胃肠道综合征者需要止吐剂、 静脉输液和镇静剂。 一些人可以吃清淡饮食。 可 施用抗生素如新霉素以杀死肠道内的可能侵入机体的细菌。 必要时静脉施用抗生素以及抗 真菌和抗病毒药物。脑血管综合征治疗的目的是通过缓解疼痛、 焦虑和呼吸困难而使得病 人舒适。可施用抗抽搐药。 0025 出现放疗引起的辐射的

33、慢性影响或疾病的人接受的是对症治疗。 溃破或溃疡可进 行外科清除或修复并使用高压氧以促进愈合。辐射诱导的白血病以化疗治疗。血细胞可通 过输血来补充。不育症是无法逆转的， 但卵巢和睾丸功能异常导致的性激素水平降低可通 过激素替代进行治疗。研究者目前在研发采用细胞因子、 生长因子和各种其他治疗来预防 或降低辐射诱导的正常组织损伤的途径。 已经发现氨磷汀或盐酸毛果芸香碱能够降低接受 放疗的头颈部癌症患者的口干 ( 口腔干燥 ) 症状。 0026 关于辐射对细胞的急性和迟发性效应的临床和实验研究增强了我们在放射治疗 方面的知识， 使得现在能够优化辐射治疗方案和采用更加精确的辐射施用模式。不过， 由 于

34、正常组织和癌组织对辐射暴露具有相似的反应， 因此在放疗期间或者放疗完成之后可能 出现辐射引起的对正常组织的损伤。研究确实发现 NSAID 类和前列腺素具有放射保护性 的一些迹象。这两类药物均能够增加细胞的存活， 但机制却完全不同。细胞动力学研究发 现， 与 S 早期和 G1/G0 期的细胞相比， 处于细胞周期的有丝分裂期 (M) 和 G2 晚期的细胞通 常对辐射最为敏感。此外， 辐射导致细胞周期的有丝分裂延迟。因此， 限制细胞周期中 M 和 G2 期的细胞比例的化学剂或增强细胞快速生长的化学剂原则上可用来研究其在注射过程 中作为正常组织辐射防护药物的潜在用途。已经发现 NSAID 通过引起细胞

35、周期停滞使得细 胞趋向于静息状态 (G0/G1) 而发挥抗癌作用。在对正常组织的放射保护作用中观察到了相 同的作用机制。暴露于 NSAID 后花生四烯酸浓度的增加还导致产生凋亡诱导剂神经酰胺。 NSAID 还升高细胞内超氧化物岐化酶的水平。热休克蛋白被 NSAID 活化后可通过改变细胞 因子的表达而提高细胞的存活。NSAID 还可能具有通过抗血管生成机制而抑制细胞增殖的 作用。一些体内研究提供的证据提示 NSAID 可保护正常组织免受辐射损伤。前列腺素不调 节细胞周期， 但它们对细胞的生长和分化具有多种作用。 PGE2介导血管生成， 增加氧气和细 胞存活和生长所必需的营养素的供给。因此， PG

36、E2 在足够高的血浆浓度能够通过抑制促炎 细胞因子如 TNF-a 和 IL-1 而增强细胞存活。因此， PGE2 所起到的是炎症的调节物而非 介导物的作用。前瞻性研究提示照射之前施用米索前列醇 (misoprostol)， 即一种 PGE1 类 说 明 书 CN 101443080 B 7 6/37 页 8 似物， 在预防辐射诱导的不良反应方面具有潜在用途。目前对 NSAID 类和前列腺素类药理 学的理解说明， 当预防性使用时， 它们有可能将辐射对正常组织的不良反应最小化。 0027 除了瞬时抑制细胞周期进程和杀死那些能够增殖的细胞之外， 照射还干扰受细胞 间通信的内源性介导物 ( 组织应答于

37、辐射的体液成分 ) 影响的内稳态。介导物水平的变化 可通过促进恢复正常 ( 例如通过升高 H 型细胞系特异性生长因子 ) 或者通过加重损害而调 节辐射效应。后一种模式通过有关照射后类花生酸 (eicosanoid) 水平变化的报道以及有 关使用抗炎药物经验性治疗辐射损伤的结果的报道而阐明。辐射的前驱、 急性和慢性影响 伴随过量产生类花生酸类 ( 前列腺素、 前列环素、 血栓素和白三烯 )。这些炎症反应的内源 性介质可引起辐射暴露之后的血管扩张、 血管收缩、 微血管通透性增加、 血栓形成和趋化作 用。糖皮质激素通过干扰磷脂酶 A2 而抑制类花生酸合成， 而非甾体抗炎药通过抑制环加氧 酶而阻断前列

38、腺素 / 血栓素合成。在照射后基于经验而施用属于这两类的药物均有助于在 人和动物中减轻辐射的前驱、 急性和慢性影响。 0028 Herron 的美国专利 5,380,668(Jan.10， 1995) 公开了各种具有 hCG 的抗原结 合活性的化合物等等， 在此通过引用将其全部内容并入本申请。其中一般性披露了所 述寡肽的诊断用途。Gallo 等的多个专利和专利申请 ( 如美国专利 5,677,275( 相应于 WO96/04008A1)、 美国专利 5,877,148( 也相应于 WO96/04008A1)、 WO97/49721A1、 美国专利 6,319,504( 相应于 WO97/493

39、73)、 美国专利申请 2003/0049273A1( 也相应于 WO97/49373)、 美国专利 5,968,513( 相应于 WO97/49418)、 美国专利 5,997,871( 相应于 WO97/49432)、 美国专利 6,620,416、 美国专利 6,596,688、 WO01/11048A2、 WO01/10907A2. 和美国专利 6,583,109) 涉及不同的寡肽及其用途， 如 “抑制 HIV 感染” 、“治疗或预防 HIV 感染” 、“治 疗或预防癌症” 、“治疗或预防特征在于体细胞量下降的病症” 、“治疗或预防与病理性血 管生成有关的病症” 、“治疗或预防造血缺陷

40、” 、“离体基因治疗” 、 体外扩增血细胞” 和 / 或 “将血细胞提供给患者” 。如 PCT 国际公开文本 No.WO03/029292A2( 公开日 ： April10， 2003)、 PCT 国际公开文本 No.WO01/72831A2( 公开日 ： October4， 2001) 和美国专利申请 出版物 20020064501A1( 公开日 ： May30， 2002)、 20030119720A1( 公开日 ： June26， 2003)、 20030113733A1( 公开日 ： June19， 2003) 和 20030166556A1( 公开日 ： September4， 20

41、03)、 美 国专利申请 No.11/249,541， 申请日 October13， 2005、 国际申请 No.PCT/EP2005/003707， 申请日 April8， 2005、 美国专利申请 No.10/821,256， 申请日 April8， 2004、 美国专利申请 No.10/262,522， 申请日 September30， 2002、 国际申请 No.PCT/NL01/00259( 国际公开文本 No.WO01/72831A2)， 申请日March3， 2001、 美国专利6,844,315和美国专利6,921,751所述， 含有一些在此所述的寡肽的组合物具有免疫调节活性，

42、 可由于例如治疗败血症和其他疾病 状态或者病症， 通过引用将上述所有文献的内容并入本申请。 0029 本发明涉及机体调节重要生理学过程的天然途径， 并基于 PCT 国际公开文本 WO99/59617 和 WO01/72831 和 PCT 国际申请 PCT/NL02/00639 中的认识， 在此通过引用将上 述文献的全部内容并入本申请。这些申请公开了存在于妊娠妇女体内的、 由胎盘促性腺激 素如 hCG 的蛋白水解断裂而产生的基因调节性肽。这些断裂产物的长度通常仅为 2 到 6 个 氨基酸， 已经发现它们具有优越的免疫活性， 所述活性是通过调节编码炎性介质如细胞因 子的基因表达而实现的。出乎意料的

43、是， 发现 hCG 的断裂产生了一系列有助于维持妊娠妇 女的免疫学内稳态的肽。这些肽平衡免疫系统以确保母体保持免疫学稳定， 同时其胎儿在 说 明 书 CN 101443080 B 8 7/37 页 9 孕期不会被排斥而是被安全地孕育直至出生。 0030 此外， 本发明涉及美国申请 10/821,240， 其提供了用于筛选和鉴定其他小的基因 调节性肽并使用根据此类筛选的结果例如来自参照肽的肽的方法。例如， 待分析的肽来自 C 反应蛋白 (CRP)( 如人 CRP)， 此类肽包括 LTSL、 FVLS、 NMWD、 LCFL、 MWDF、 FSYA、 FWVD、 AFTV、 和 WDFV ； 来自

44、 - 连环蛋白 ( 如人 CTNB) 的肽， 例如 GLLG、 TAPS、 VCQV、 CLWT、 VHQL、 GALH、 LGTL、 TLVQ、 QLLG、 YAIT、 LCEL、 GLIR、 APSL、 ITTL、 QALG、 HPPS、 GVLC、 LCPA、 LFYA、 NIMR、 NLIN、 LHPP、 LTEL、 SPIE、 VGGI、 QLLY、 LNTI、 LWTL、 LYSP、 YAMT、 LHNL、 TVLR、 和 LFYA ； 来自 -hCG( 如 人 CG) 的 肽， 例 如 GLLLLLLLS、 MGGTWA、 TWAS、 TLAVE、 RVLQ、 VCNYRDV、

45、FESI、 RLPG、 PRGV、 NPVVS、 YAVALS、 LTCDDP、 EMFQ、 PVVS、 VSYA、 GVLP、 FQGL、 和 AVAL ； 来自布鲁顿型酪氨酸激酶 (Bruton styrosine kinase)( 如人 BTK) 的肽， 例如 LSNI、 YVFS、 LYGV、 YVVC、 FIVR、 NILD、 TIMY、 LESI、 FLLT、 VFSP、 FILE、 TFLK、 FWID、 MWEI、 QLLE、 PCFW、 VHKL、 LYGV、 LESI、 LSNI、 YVFS、 IYSL、 和NILD ； 以及来自基质金属蛋白酶-2(如人MM02)的肽， 例

46、如FKGA、 FFGL、 GIAQ、 LGCL、 YWIY、 AWNA、 ARGA、 PFRF、 APSP、 CLLS、 GLPQ、 TFWP、 AYYL、 FWPE、 CLLG、 FLWC、 RIIG、 WSDV、 PIIK、 GLPP、 RALC、 LNTF、 LSHA、 ATFW、 PSPI、 AHEF、 WRTV、 FVLK、 VQYL、 KFFG、 FPFR、 IYSA、 和 FDGI， 等 等。 发明内容 0031 本发明涉及针对因暴露于高能电磁波 (X 射线 / 光子和 / 或天然伽玛射线 ) 和 / 或其他高能电离粒子 ( 阿尔法粒子、 贝塔粒子、 中子、 质子、 - 介子 )

47、 而引起的急性辐射损 伤的药物研发领域。迄今尚无有效的药物能够在意外暴露于电离照射之后， 或者在治疗性 辐射过程中或放射性模拟剂造成正常组织损伤之后减轻辐射损伤 ； 也没有有效的预防性药 物能够在事件之前 ( 例如， 第一应答者 ) 施用来预防此类损伤或者使之最小化。本发明人 出乎意料地观察到相对小的非毒性肽可有效地用作抗辐射损伤药物。重要的是， 本发明的 抗辐射肽不仅可用作预防剂， 当在暴露于辐射后数小时施用时还具有保护作用。这使得它 们特别适合用于军事辐射事件， 例如用于对付核恐怖主义的恐怖活动。 因此， 本发明提供用 于预防或治疗有需要的对象的辐射损伤的方法， 包括给所述对象施用小于 3

48、0 个氨基酸的 肽或其功能性类似物。 优选地， 在辐射后给所述对象施用所述肽或其功能性类似物， 即在所 述对象暴露于辐射源之后。此外， 本发明提供小于 30 个氨基酸的肽或其功能性类似物在制 备用于治疗患有辐射损伤或被认为患有辐射损伤的对象的药物组合物中的用途。具体地， 本发明提供抗辐射肽， 其针对急性全身照射的剂量降低系数(DRF)为至少1.10， 所述DRF可 如下确定 ： 测试何种剂量的全身照射 (WBI) 在 WBI 后 30 天导致测试组实验啮齿动物 ( 如小 鼠 ) 出现 50的死亡率 (LD50/30)， 所述测试组在 WBI 后立即或最多 72 小时内用所述肽进 行处理， 与

49、WBI 后 30 天导致未处理对照组出现 50的死亡率 (LD50/30) 的 WBI 剂量相比， 其中通过将肽处理组动物的LD50/30辐射剂量除以载体处理组动物的LD50/30辐射剂量来 计算所述 DRF。 0032 本发明提供治疗患有辐射损伤或被认为患有辐射损伤的对象的方法， 该方法包括 给所述对象提供药物组合物， 所述药物组合物包括小于 30 个氨基酸的抗辐射肽。目前的辐 射保护剂是非肽性的或者包括大的蛋白质如细胞因子。 本发明公开了可用于防护和治疗辐 射损伤的小于 30 个氨基酸的肽， 例如 MTRVLQGVLPALPQVVC。这是首次发现在已经暴露于辐 说 明 书 CN 101443080 B 9 8/37 页 10 射之后施用肽类药物能够降低辐射的损伤效应。例如， 所述抗辐射肽由至多 29、 至多 28、 至 多 27、 至多 26、 至多 25、 至多 24、 至多 23、 至多 22、 至多 21、 至多 20、 至多 19、 至多 18、 至多 17、 至多 16 或至多 15 个氨基酸组成。 0033 不过， 所述肽优选地小于 15 个氨基酸。例如， 所述抗辐