毛蕊花糖苷在制备治疗肺炎药物中的应用.pdf

1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201510922082.X (22)申请日 2015.12.12 A61K 31/7034(2006.01) A61P 11/00(2006.01) A61P 31/04(2006.01) A61P 31/10(2006.01) (71)申请人 吉林大学 地址 130012 吉林省长春市前进大街 2699 号 (72)发明人 邓旭明 赵小然 牛效迪 李洪恩 (74)专利代理机构 长春市四环专利事务所 ( 普 通合伙 ) 22103 代理人 郭耀辉 (54) 发明名称 毛蕊花糖苷在制备治疗肺炎药物中的应用 (57) 摘要 本发明涉及毛蕊花

2、糖苷在制备治疗肺炎药物 中的应用， 通过绵羊红细胞溶血试验、 人肺上皮细 胞 (A549) 损伤的保护试验以及小鼠肺炎链球菌 肺炎模型证实其对肺炎链球菌感染的治疗作用。 与用抗生素治疗相比较， 使用毛蕊花糖苷治疗具 有无耐药性， 治愈率高的特点。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 CN 105412131 A 2016.03.23 CN 105412131 A 1.毛蕊花糖苷在制备治疗肺炎药物中的应用。 2.如权利要求1所述药物包括药学上可接受的剂型。 3.如权利要求1所述肺炎指细菌性肺炎和真菌性肺炎。 4.如权利要

3、求3所述细菌性肺炎是指由肺炎链球菌引起的肺炎。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 105412131 A 2 毛蕊花糖苷在制备治疗肺炎药物中的应用 技术领域 0001 本发明涉及毛蕊花糖苷在制备治疗肺炎药物中的应用， 属于医药领域。 一、 背景技术 0002 毛蕊花糖苷(Verbascoside)是从肉苁蓉、 紫珠叶提取分离出来的一种的苯乙醇苷 类化合物， 研究表明该药具有免疫调节、 神经保护、 肝脏保护、 补肾壮阳、 抗炎和抗血小板聚 集等药理作用。 但目前为止国内外未见毛蕊花糖苷用于治疗细菌性肺炎报道。 0003 细菌性肺炎是由肺炎链球菌、 流感嗜血杆菌、 金黄色葡萄球菌、 化脓性

4、链球菌、 军 团菌等感染所引起的疾病， 该病在儿童、 老年人和免疫缺陷患者中病死率极高。 近年来， 抗 生素的大量使用导致细菌耐药率增高， 使得细菌性肺炎的治疗面临无药可治的局面。 目前 临床上肺炎链球菌引起的肺炎病情在儿童和老年人群中较为严重， 尤其是已经出现了耐青 霉素甚至耐万古霉素的肺炎链球菌。 目前治疗肺炎链球菌肺炎的药物通常使用 内酰胺 类抗生素， 但由于耐青霉素和耐万古霉素的肺炎链球菌的出现， 常常会导致治疗失败。 因 此， 寻找新型、 安全的治疗药物迫在眉睫。 毛蕊花糖苷是来源于我国传统中药肉苁蓉、 紫珠 叶等的成分， 本发明研究证实了毛蕊花糖苷对细菌性肺炎， 尤其是肺炎链球菌引

5、起的肺炎 具有较好的治疗效果。 二、 发明内容 0004 毛蕊花糖苷的分子结构如下： 0005 0006 本发明通过绵羊红细胞溶血试验、 人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验以及小鼠 肺炎链球菌肺炎模型证实其治疗肺炎链球菌感染作用。 三、 具体实施方式 0007 1.溶血试验 0008 纯化的肺炎链球菌溶血素ply于96孔板中作连续的二倍稀释， 每个孔中加入107个 绵羊红细胞， 于37中孵育10min后离心。 使红细胞溶解的最高稀释倍数视为溶血滴度 (Hemolysis titre)。 0009 不加毛蕊花糖苷和加入不同浓度的毛蕊花糖苷后溶血素ply的溶血滴度如下表1： 0010 表1.毛

6、蕊花糖苷对肺炎链球菌溶血素溶血活性的抑制作用 说 明 书 1/2 页 3 CN 105412131 A 3 0011 0012 2.人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验 0013 A549细胞在DEMED培养基(含10胎牛血清)中于37， 通入5CO2培养， 以1.5 104个细胞/孔铺于96孔细胞培养板中， 每孔100 l。 细胞贴壁后， 加入0.5 l纯化后的肺炎链 球菌溶血素蛋白， 并加入不同浓度的毛蕊花糖苷， 置于细胞培养箱中于37， 5CO2共培养 6h。 加入live(green)/dead(red)试剂， 后于激光共聚焦显微镜(LSCM)下观察A549细胞的状 态， 活细胞显绿

7、色， 死细胞显红色。 0014 结果表明， 毛蕊花糖苷能够保护肺炎链球菌溶血素介导的人肺上皮细胞(A549)损 伤， 该作用呈现剂量依赖性。 0015 3.小鼠肺炎链球菌肺炎的实验治疗学研究 0016 3.1小鼠肺炎链球菌肺炎模型 0017 C57BL/6J小鼠(雌性， 18-22g)经乙醚麻醉后， 经鼻给予20 l含有5107 CFU的菌 悬液(肺炎链球菌D39)， 小鼠平躺直至苏醒， 建立小鼠肺炎链球菌肺炎的模型。 0018 3.2保护率试验 0019 小鼠接种肺炎链球菌后2h皮下注射100mg/kg(100 l)的毛蕊花糖苷， 每3h给药一 次。 不给药对照组给予100 l的生理盐水， 每组30只小鼠。 按给药方案给药后， 分别记录小鼠 感染肺炎链球菌24h、 48h、 72h、 96h、 120h后的死亡率。 0020 结果表明， 经毛蕊花糖苷治疗后， 可显著提高小鼠肺炎链球菌肺炎的存活率(P 0.05)。 如表2. 0021 表2.毛蕊花糖苷对小鼠肺炎链球菌肺炎存活率()的影响 0022 说 明 书 2/2 页 4 CN 105412131 A 4