一种水飞蓟宾注射剂及其制备方法.pdf

1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201510001635.8 (22)申请日 2015.01.05 A61K 9/08(2006.01) A61K 9/19(2006.01) A61K 31/357(2006.01) A61K 47/48(2006.01) A61P 1/16(2006.01) (71)申请人 天士力制药集团股份有限公司 地址 300410 天津市北辰区淮河道与汀江西 路交口天之骄园区法务中心知识产权 部 (72)发明人 陈建明 高保安 周琴琴 周水平 蔡楠 张元声 吴婵 余侬 陈丽娜 刘文丽 (74)专利代理机构 北京华科联合专利事务所 ( 普通合伙

2、) 11130 代理人 王为 (54) 发明名称 一种水飞蓟宾注射剂及其制备方法 (57) 摘要 本发明的一种水飞蓟宾注射剂， 是结合水飞 蓟宾固有的理化性质， 优选出了与之匹配的处方 组成与用量， 即是由水飞蓟宾、 磺丁基醚 - 环 糊精、 注射用有机溶媒组成， 必要时还可含有助溶 剂、 冻干支撑剂、 pH 调节剂、 注射用水等。本制剂 具有安全、 稳定、 载药量高的特点， 从根本上克服 了水飞蓟宾现有口服制剂生物利用度低的不足， 有望进一步最大化的发挥水飞蓟宾的药理作用， 为水飞蓟宾的临床应用与研究奠定了基础。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利

3、申请 权利要求书2页 说明书17页 附图6页 CN 105816422 A 2016.08.03 CN 105816422 A 1/2 页 2 1.一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是含有水飞蓟宾、 磺丁基醚 - 环糊精、 注射用有机 溶媒。 2.权利要求 1 所述的一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是含有水飞蓟宾、 磺丁基醚 - 环 糊精、 注射用有机溶媒、 助溶剂。 3.权利要求 1-2 任意一项所述的一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是由下列组分按照重量 体积比配制而成 ： 4.权利要求 3 所述的一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是由下列组分按照重量体积比配制 而成 ： 5.权利要求 4 所述的一种水飞蓟宾注

4、射剂， 其特征是由下列组分按照重量体积比配制 而成 ： 6.权利要求 1-5 任意一项所述的水飞蓟宾注射剂， 所述的注射用有机溶媒选自聚乙二 权 利 要 求 书 CN 105816422 A 2 2/2 页 3 醇200、 聚乙二醇300、 聚乙二醇400、 聚乙二醇600、 无水乙醇、 丙二醇中的一种或多种 ； 优选 聚乙二醇 400。 7.权利要求 2-5 任意一项所述的一种水飞蓟宾注射剂， 所述的助溶剂选自二硬脂酰磷 脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000、 吐温80、 聚氧乙烯蓖 麻油、 泊洛沙姆 188 中的一种或多种 ； 优选二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 -

5、 聚乙二醇 2000。 8.权利要求 3-5 任意一项所述的一种水飞蓟宾注射剂， 所述的冻干支撑剂选自甘露 醇、 乳糖、 右旋糖酐 20、 右旋糖酐 40、 右旋糖酐 70、 蔗糖、 木糖醇、 山梨醇、 海藻糖中的一种或 多种 ； 优选甘露醇、 乳糖、 右旋糖酐 40。 9.权利要求 3-5 任意一项所述的一种水飞蓟宾注射剂， 所述的 pH 调节剂选自枸橼酸、 盐酸、 冰醋酸、 磷酸、 磷酸氢二钠、 磷酸二氢钠、 磷酸氢二钾、 磷酸二氢钾、 枸橼酸二钠、 枸橼 酸三钠、 醋酸钠中的一种或多种 ； 调节pH值至2-8， 优选调节pH值至2-7 ； 再优选调节pH值 至 2.5-6.0。 10.权

6、利要求 1-9 任意一项所述的一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是一种水飞蓟宾注射 溶液。 11.权利要求 10 所述的一种水飞蓟宾注射剂， 其特征在于水飞蓟宾注射溶液的制备 方法包括如下步骤 ： 称取配方量的水飞蓟宾、 注射用有机溶媒， 必要时加入助溶剂， 混合， 在 40 70下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取配方量的磺丁基醚 - 环糊精置于适量注 射用水中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机相与水相混合， 混匀， 然后用注射用水定容至全量， 得 药物溶液 ； 用 pH 调节剂调节药物溶液的 pH 值至 2-8 ； 加入重量体积百分含量为 0.05 0.5的针用活性炭， 吸附1560分钟，

7、 然后将料液通过1m钛棒过滤除炭、 0.22m滤芯 除菌 ； 分装、 封口， 即得水飞蓟宾注射溶液。 12.权利要求 1-9 任意一项所述的一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是一种注射用水飞蓟 宾冻干粉针。 13.权利要求 12 所述的一种水飞蓟宾注射剂， 其特征在于注射用水飞蓟宾冻干粉针的 制备方法包括如下步骤 ： 称取配方量的水飞蓟宾、 注射用有机溶媒， 必要时加入助溶剂， 混 合， 在 40 70下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取配方量的磺丁基醚 - 环糊精、 冻干 支撑剂， 置于适量注射用水中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机相与水相混合， 混匀， 然后用注射 用水定容至全量， 得药

8、物溶液 ； 用 pH 调节剂调节药物溶液的 pH 值至 2-8 ； 加入重量体积百 分含量为 0.05 0.5的针用活性炭， 吸附 15 60 分钟， 然后将料液通过 1m 钛棒过 滤除炭、 0.22m 滤芯除菌 ； 分装、 冻干、 封口， 即得水飞蓟宾冻干粉针。 权 利 要 求 书 CN 105816422 A 3 1/17 页 4 一种水飞蓟宾注射剂及其制备方法 技术领域 0001 本发明涉及医药技术领域， 具体涉及一种水飞蓟宾注射剂及其制备方法。 背景技术 0002 水飞蓟宾 (Silybin) 是从菊科药用植物水飞蓟种子的种皮中提取所得的一种黄 酮化合物， 黄酮类化合物水溶性与脂溶性均

9、较差。其结构式如下 ： 0003 0004 水飞蓟宾具有明显的保肝作用， 对四氯化碳、 硫代乙酰胺、 毒蕈碱、 鬼笔碱、 猪屎豆 碱等肝脏毒物引起的各种类型肝损伤具有不同程度的保护和治疗作用， 并对四氯化碳所 引起的丙氨酸氨基转移酶的升高有一定的阻止作用。水飞蓟宾作为理想的肝损伤修复药 物， 临床上广泛用于治疗急慢性肝炎、 肝纤维化和早期肝硬化等肝病。由于药效高， 毒性低 ( 于乐成， 顾长海 . 水飞蓟素药理学效应研究进展 J. 中国医院药学杂志， 2001,21(8) ： 493-494.)， 水飞蓟宾从发现至今一直备受关注。 0005 目前， 国内上市的制剂有水飞蓟宾葡甲胺片 ( 批准文

10、号 ： 国药准字 H32026233 ； 厂家 ： 江苏中兴药业有限公司 ； 批准文号 ： 国药准字 H33022182 ； 厂家 ： 浙江东日药业有限 公司 ) 以及水飞蓟宾胶囊 ( 商品名 ： 水林佳 ； 批准文号 ： 国药准字 H20040299 ； 厂家 ： 天津 天士力制药股份有限公司 )， 该制剂均属口服制剂。但由于水飞蓟宾水溶性与脂溶性均 较差 ( 王鸿辰 . 水飞蓟素溶解性能的研究 J. 药学通报， 1983,19(12) ： 23-25.)， 导致 其口服生物利用度低， 有较大的首过效应。据报道， 水飞蓟宾经口服给药后的绝对生物利 用度仅为 0.95 (Wu JW,et al

11、.Analysis of silibinin in rat plasma and bile for hepatobiliary excretion and oral bioavailability applicationJ.J Pharm Biomed Anal,2007,45(4):635641.)， 严重削弱了水飞蓟宾口服制剂药效的发挥。 为此， 人们拟通 过提高水飞蓟宾的生物利用度， 使其药效得到进一步发挥。 0006 广大医药工作者采用成盐、 增溶、 固体分散体等技术， 拟提高水飞蓟宾的溶出度， 从而提高其口服吸收率， 但均未取得良好的效果。另外， 天津天士力制药股份有限公司开 发了一

12、种水飞蓟宾的磷脂复合物 ( 通用名 ： 水飞蓟宾胶囊 ； 商品名 ： 水林佳 ； 批准文号 ： 国 药准字 H20040299)， 已上市销售。研究表明， 其溶出度及生物利用度均较普通水飞蓟宾 口服制剂明显提高， 生物利用度提高了 3 5 倍 (Filburn CR,et al.Bioavailability of silybin-phosphatidylcholine complex in dogsJ.J Vet Pharmccol Ther,2007,30(2):132-138.silybin-phosphatidylcholine complexM.Altern Med Rev,ID:T

13、horne Research,Inc.2009,14(4):385-390.)， 但其生物利用度仍然不够理想。 为 此， 人们考虑将水飞蓟宾开发成注射剂， 从根本上解决口服生物利用度低的问题。 说 明 书 CN 105816422 A 4 2/17 页 5 0007 宋贇梅等 ( 宋贇梅等 . 水飞蓟宾纳米乳的制备及家兔体内药动学 J. 中国药科 大学学报， 2005， 36(5) ： 427.)， 研制了水飞蓟宾纳米乳， 由于水飞蓟宾溶解度较差， 处方中 添加了大量的聚氧乙烯蓖麻油 (Cremophor RH)， 该材料具有严重的过敏反应与溶血性， 安 全性较差 ； 另外， 由于水飞蓟宾在碱

14、性条件下溶于水， 故有科研工作者研制了水飞蓟宾葡甲 氨盐注射剂， 但水飞蓟宾在碱性环境下极不稳定， 致使该注射液长期储存稳定性较差， 极易 发生降解 ； 故又有人将水飞蓟宾的葡甲胺溶液制备成冻干粉针， 虽然可以解决其放置稳定 性问题， 但是水飞蓟宾葡甲氨盐水溶液的 pH 值在 11 左右， 注射时局部刺激性较大， 不良反 应较多。根据近年来水飞蓟宾的临床使用证实， 水飞蓟宾疗效确切且本身毒性极低， 而且 水飞蓟宾临床应用极其广泛， 若能开发一种安全、 可注射的水飞蓟宾制剂， 提高其生物利用 度， 充分发挥其药理作用， 从而大大提高药效， 必将产生极大的经济和社会效益。 0008 环糊精包合物，

15、 是将药物分子包裹在环糊精分子的空穴结构中， 以此来解决水难 溶性药物的溶解问题。但我们知道， 传统的环糊精类材料具有明显的溶血性或肾脏毒性， 如 - 环糊精、 羟丙基 - 环糊精等。中国专利申请 CN200410041364.0， 发明名称为 “一 种水飞蓟提取物环糊精包合物的制备方法及其药物制剂” ， 公开号为 CN159351A， 其核心技 术特征是将水飞蓟提取物与环糊精用乙醇或异丙醇一起溶解， 再减压蒸发去除乙醇或异丙 醇， 然后添加一些赋形剂制备成口服制剂或直接分装成注射用无菌粉末。其权利要求以及 说明书中记载的环糊精种类为 ： - 环糊精、 羟丙基 - 环糊精、 羟乙基 - 环糊精

16、、 甲 基 - 环糊精、 葡萄糖基 - 环糊精、 磺酸基 - 环糊精， 这些环糊精依然是毒副作用较 大的传统环糊精， 无法真正意义上得到可供静脉注射的制剂， 故整个实施例以口服制剂为 主， 且未进一步对上述环糊精进行匹配性研究。 试验证明， 该专利所明确的环糊精种类均不 能制备出稳定的水飞蓟宾注射液 ( 见本发明实施例 1) ； 中国专利申请 CN02125823.6， 发明 名称为 “含环糊精或其衍生物的水飞蓟素注射液” ， 公开号为 CN1391894A， 根据其说明书记 载的实施方案， 其核心技术特征是将水飞蓟素投入在含环糊精的水溶液中， 然后用氢氧化 钠调节溶液 pH 为碱性， 使水飞

17、蓟宾溶解， 再用盐酸调节 pH 值为 6.0-6.5， 即得水飞蓟素的 环糊精包合物， 其中环糊精种类与上述专利 ( 中国专利申请 CN200410041364.0) 申请完全 相同。 通过试验验证发现， 水飞蓟宾溶解在氢氧化钠的碱性水溶液过程中， 溶液颜色逐渐加 深， 最后变为黄绿色溶液， 通过全波长扫描， 除原有的 287.5nm 处有较大吸收外， 在 326.0nm 处又出现了更大的吸收峰， 说明氢氧化钠对水飞蓟素的结构有明显的破坏作用， 故该专利 申请所制备的水飞蓟素环糊精包合物质量存在一定的问题， 可能会影响安全性与有效性。 同时， 按该实施方案制备的冻干粉针剂， 冻干后无法完全复溶

18、(见本发明实施例33)。 另外， 其权利要求以及说明书中记载的环糊精种类依然是毒副作用大的传统环糊精， 存在溶血性 或肾毒性的安全隐患。 0009 磺丁基醚-环糊精(SBE-CD)是美国Cydex公司开发的一种离子化-环糊 精 (-CD)， 与上述传统的环糊精类材料相比， 具有水溶性好、 无肾毒性、 无溶血性的优点。 为此， 本发明结合水飞蓟宾的理化特性， 率先用磺丁基醚 - 环糊精 (SBE-CD) 来解决 水飞蓟宾的溶解问题。通过大量试验研究， 成功开发了一种水飞蓟宾的磺丁基醚 - 环糊 精包合物， 是一种安全的、 稳定的水飞蓟宾注射剂， 从根本上解决了水飞蓟宾口服生物利用 度低的不足，

19、为临床研究与应用提供了新的制剂。 说 明 书 CN 105816422 A 5 3/17 页 6 发明内容 0010 本发明的目的是开发一种安全的、 稳定的水飞蓟宾注射剂。针对水飞蓟宾固有的 理化特性以及现有制剂存在的不足， 优选出了与之匹配的处方， 从而成功开发了水飞蓟宾 的注射剂。 0011 本发明提供了一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是含有水飞蓟宾、 磺丁基醚 - 环糊 精、 注射用有机溶媒。 其中注射用有机溶媒是用来溶解水飞蓟宾的， 将水飞蓟宾制备成分子 型溶液， 然后将该溶液与磺丁基醚 - 环糊精的水溶液混合， 方可将水飞蓟宾分子包裹在 磺丁基醚 - 环糊精分子中， 从而形成水飞蓟宾的磺

20、丁基醚 - 环糊精包合物。如果处 方组分中不含注射用有机溶媒， 按照常规的环糊精包合物的制备方法 ( 将药物粉末直接投 在环糊精的水溶液中搅拌至澄清)将无法得到水飞蓟宾包合物(见本发明实施例2)。 故本 发明将注射用有机溶媒与磺丁基醚 - 环糊精合用， 是制备水飞蓟宾包合物的必需条件 之一， 也是本发明的核心特征。 0012 本发明提供了的水飞蓟宾注射剂， 进一步还可以含有助溶剂。 其中助溶剂， 一方面 是可进一步提高水飞蓟宾的包合率， 另一方面是有助于冻干后样品快速良好的复溶。助溶 剂使本发明所制备的水飞蓟宾注射剂质量更加可靠。 故助溶剂也是本发明的一项重要技术 特征 ( 见本发明实施例 3

21、)。 0013 本发明提供了一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是由下列组分配制而成 ( 重量体积 比 ) ： 0014 0015 本发明提供了一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是由下列组分配制而成 ( 重量体积 比 ) ： 0016 说 明 书 CN 105816422 A 6 4/17 页 7 0017 本发明提供了一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是由下列组分配制而成 ( 重量体积 比 ) ： 0018 0019 本发明的水飞蓟宾注射剂， 其各种组分的百分含量均为重量体积比， 即单位体积 的液体所含的溶质的含量， 例如， 包括但不限于克/毫升， 千克/升等， 可进行同比的放大或 缩小， 比值不变。 0020

22、 所述的水飞蓟宾注射剂， 其中， 所述的注射用有机溶媒选自聚乙二醇 200、 聚乙二 醇300、 聚乙二醇400、 聚乙二醇600、 无水乙醇、 丙二醇中的一种或多种 ； 优选聚乙二醇400。 0021 所述的助溶剂选自二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 - 聚乙二醇 2000(DSPE-MPEG2000)、 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 - 聚乙二醇 5000(DSPE-MPEG5000)、 吐温 80、 聚氧乙烯蓖麻 油 (EL35)、 泊洛沙姆 188 中的一种或多种 ； 优选二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 - 聚乙二醇 2000(DSPE-MPEG2000)。 0022 所述的冻干支撑剂选自甘露醇、 乳糖、 右旋糖酐

23、 20、 右旋糖酐 40、 右旋糖酐 70、 蔗 糖、 木糖醇、 山梨醇、 海藻糖中的一种或多种 ； 优选甘露醇、 乳糖、 右旋糖酐 40。 0023 所述的 pH 调节剂选自枸橼酸、 盐酸、 冰醋酸、 磷酸、 磷酸氢二钠、 磷酸二氢钠、 磷酸 氢二钾、 磷酸二氢钾、 枸橼酸二钠、 枸橼酸三钠、 醋酸钠中的一种或多种 ； 调节 pH 值至 2-8， 优选调节 pH 值至 2-7 ； 再优选调节 pH 值至 2.5-6.0。 0024 本发明的一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是一种水飞蓟宾注射溶液。 0025 本发明的一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是一种注射用水飞蓟宾冻干粉针。 0026 本发明的一种

24、水飞蓟宾注射剂， 溶液型是无色澄清液体， 冻干粉针剂是白色固体。 0027 本发明的水飞蓟宾注射溶液的制备方法， 其特征在于包括如下步骤 ： 称取配方量 说 明 书 CN 105816422 A 7 5/17 页 8 的水飞蓟宾、 注射用有机溶媒， 必要时含有助溶剂， 混合， 在 40 70下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取配方量的磺丁基醚 - 环糊精， 置于适量注射用水中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机相与水相混合， 混匀， 然后用注射用水定容至全量， 得药物溶液 ； 用 pH 调节剂调节药 物溶液的 pH 值至 2-8 ； 加入重量体积百分含量为 0.05 0.5的针用活性炭，

25、吸附 15 60分钟， 然后将料液通过1m钛棒过滤除炭、 0.22m滤芯除菌 ； 分装、 封口， 即得水飞蓟宾 注射溶液。 0028 本发明的水飞蓟宾注射溶液的制备方法， 优选包括如下步骤 ： 称取配方量的水飞 蓟宾、 注射用有机溶媒， 必要时含有助溶剂， 混合， 在 50 60下加热搅拌， 使溶解， 得有机 相 ； 称取配方量的磺丁基醚 - 环糊精， 置于适量注射用水中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机 相与水相混合， 混匀， 然后用注射用水定容至全量， 得药物溶液 ； 用 pH 调节剂调节药物溶液 的 pH 值至 2.5-6.0 ； 加入重量体积百分含量为 0.1 0.3的针用活性炭， 吸

26、附 30 45 分钟， 然后将料液通过 1m 钛棒过滤除炭、 0.22m 滤芯除菌 ； 分装、 封口， 即得水飞蓟宾注 射溶液。 0029 本发明的注射用水飞蓟宾冻干粉针的制备方法， 其特征在于包括如下步骤 ： 称取 配方量的水飞蓟宾、 注射用有机溶媒， 必要时含有助溶剂， 混合， 在 40 70下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取配方量的磺丁基醚 - 环糊精、 冻干支撑剂， 置于适量注射用水 中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机相与水相混合， 混匀， 然后用注射用水定容至全量， 得药物溶 液 ； 用 pH 调节剂调节药物溶液的 pH 值至 2-8 ； 加入重量体积百分含量为 0.05

27、0.5的 针用活性炭， 吸附 15 60 分钟， 然后将料液通过 1m 钛棒过滤除炭、 0.22m 滤芯除菌 ； 分装、 冻干、 封口， 即得水飞蓟宾冻干粉针。 0030 本发明的注射用水飞蓟宾冻干粉针的制备方法， 优选包括如下步骤 ： 称取配方量 的水飞蓟宾、 注射用有机溶媒， 必要时含有助溶剂， 混合， 在 50 60下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取配方量的磺丁基醚 - 环糊精、 冻干支撑剂， 置于适量注射用水中， 搅拌溶 解， 得水相 ； 将有机相与水相混合， 混匀， 然后用注射用水定容至全量， 得药物溶液 ； 用 pH 调 节剂调节药物溶液的 pH 值至 2.5-6.0 ；

28、加入重量体积百分含量为 0.1 0.3的针用活 性炭， 吸附 30 45 分钟， 然后将料液通过 1m 钛棒过滤除炭、 0.22m 滤芯除菌 ； 分装、 冻 干、 封口， 即得水飞蓟宾冻干粉针。 0031 本发明的一种水飞蓟宾注射剂， 其特征是结合水飞蓟宾固有的理化性质， 优选出 了与之匹配的处方组成与用量， 从而成功开发了水飞蓟宾的注射剂， 具有安全的、 稳定的、 载药量高的特性， 从根本上克服了水飞蓟宾现有口服制剂制剂生物利用度低的不足， 有望 进一步最大化的发挥水飞蓟宾的药理作用， 为水飞蓟宾的临床应用与研究奠定了基础。 附图说明 ： 0032 图 1 ： 原料对照溶液 - 紫外扫描曲线

29、图 0033 图 2 ： 原料对照溶液 - 紫外扫描吸光度列表图 0034 图 3 ： 本发明供试品溶液 - 紫外扫描曲线图 0035 图 4 ： 本发明供试品溶液 - 紫外扫描吸光度列表图 0036 图 5 ： 对比专利供试品溶液 - 紫外扫描曲线图 0037 图 6 ： 对比专利供试品溶液 - 紫外扫描吸光度列表图 说 明 书 CN 105816422 A 8 6/17 页 9 具体实施方式 0038 现结合实施例对本发明作详细描述， 但本发明的实施不仅限于此。 0039 实施例 1 ： 环糊精种类的对比研究 0040 在中国专利申请 CN200410041364.0 中， 所记载的环糊精

30、种类为 ： - 环糊精、 羟 丙基 - 环糊精、 羟乙基 - 环糊精、 甲基 - 环糊精、 葡萄糖基 - 环糊精以及磺酸 基 - 环糊精。而本发明所选用的环糊精是磺丁基醚 - 环糊精， 是本发明的特定包合 材料。在对比试验时， 用同样的处方组成、 处方用量以及制备工艺， 分别制备含不同环糊精 种类的水飞蓟宾注射液。 室温放置一周， 随时间观察注射液的包合稳定性， 即以析出药物沉 淀的时间为考察指标， 对环糊精种类进行筛选。(1) 试验方案 0041 称取水飞蓟宾 20g、 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 - 聚乙二醇 2000(DSPE-MPEG2000)1g、 200g聚乙二醇400， 混合， 在55

31、下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 分别称取上述环糊精50g， 置于1000ml注射用水中， 搅拌溶解， 得不同种类环糊精的水溶液， 作为水相(按该比例配制 时， 其中 - 环糊精不能完全溶于水， 故对 - 环糊精予以舍弃 ) ； 将有机相与水相搅拌混 合， 使成约 2mg/ml 的包合液， 用 0.22m 滤芯除菌过滤 ； 将滤液分装成 5ml/ 瓶， 得到 6 种不 同环糊精种类的水飞蓟宾注射液。 0042 将该注射液至于室温下放置一周， 分别随时间观察水飞蓟宾注射液的包合稳定 性， 即考察不同环糊精种类对水飞蓟宾的包裹稳定性的影响。 0043 (2) 实验结果 0044 表 1 不同环

32、糊精种类对水飞蓟宾的包裹稳定性考察结果 0045 说 明 书 CN 105816422 A 9 7/17 页 10 环糊精种类1 天2 天3 天4 天5 天7 天 羟丙基 - 环糊精澄明液体澄明液体略显浑浊浑浊明显浑浊明显析出沉淀 羟乙基 - 环糊精澄明液体澄明液体澄明液体略显浑浊浑浊明显析出沉淀 甲基 - 环糊精澄明液体略显浑浊浑浊明显析出沉淀析出沉淀析出沉淀 葡萄糖基 - 环糊精澄明液体澄明液体澄明液体略显浑浊浑浊明显析出沉淀 磺酸基 - 环糊精澄明液体澄明液体澄明液体略显浑浊浑浊明显浑浊明显 磺丁基醚 - 环糊精澄明液体澄明液体澄明液体澄明液体澄明液体澄明液体 0046 结果分析 ： 0

33、047 在同样的制备工艺以及同样的处方用量下， 所制备的不同环糊精种类的水飞蓟 宾注射液， 在室温下稳定性截然不同。中国专利申请 CN200410041364.0 中所记载的环糊 说 明 书 CN 105816422 A 10 8/17 页 11 精种类均不能制备出稳定的水飞蓟宾包合物溶液， 稳定时间只能维持 2-4 天， 但用磺丁基 醚 - 环糊精制备的水飞蓟宾包合物溶液， 至少在一周内未见有明显变化， 事实上该溶液 在室温下是相当稳定的。经过大量试验验证， 可见， 磺丁基醚 - 环糊精对水飞蓟宾而言， 是相对最优的包合材料， 故本发明选用磺丁基醚 - 环糊精对水飞蓟宾进行匹配性包合， 将是

34、最佳的选择。 0048 实施例 2 注射用有机溶媒对水飞蓟宾注射剂质量的影响 0049 (1) 不含注射用有机溶媒对水飞蓟宾注射剂质量的影响 0050 分别称取磺丁基醚 - 环糊精 100g、 200g、 300g、 400g、 500g， 分别用注射用水溶 解至 1000ml， 得到含磺丁基醚 - 环糊精 10、 20、 30、 40、 50的水溶液 ； 然后分 别称取 1g 水飞蓟宾， 投入上述系列不同磺丁基醚 - 环糊精含量的水溶液中， 搅拌， 随 时间观察溶液状态。以外观、 性状为指标， 判断不含注射用有机溶媒时水飞蓟宾在磺丁基 醚 - 环糊精中的包合情况， 结果见表 2。 0051

35、表 2 不含注射用有机溶媒对水飞蓟宾注射剂质量的影响 0052 0053 0054 结果分析 ： 0055 通过常规方法， 直接将水飞蓟宾投入磺丁基醚 - 环糊精溶液中搅拌使溶解。结 果显示， 当磺丁基醚 - 环糊精浓度在 10 -50的范围内时、 载药量仅为 1mg/ml 时， 搅 拌 24 小时， 溶液依然浑浊， 没有任何溶解的迹象。可见， 水飞蓟宾的理化性质较为特殊， 无 法通过直接加入法制备成环糊精包合物。 0056 (2) 含注射用有机溶媒对水飞蓟宾注射剂质量的影响 0057 分别称取磺丁基醚 - 环糊精 100g、 200g、 300g、 400g、 500g， 分别用注射用水溶

36、解至 1000ml， 得到含磺丁基醚 - 环糊精 10、 20、 30、 40、 50的水溶液 ； 称取水 飞蓟宾 6g、 120g 聚乙二醇 400， 混合， 在 55下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 分别取有机相 21g， 分别注入上述系列不同磺丁基醚 - 环糊精含量的水溶液中， 并搅拌， 随时间观察溶 液状态。以外观、 性状为指标， 判断含注射用有机溶媒时水飞蓟宾在磺丁基醚 - 环糊精 中的包合情况， 结果见表 3。 0058 表 3 含注射用有机溶媒对水飞蓟宾注射剂质量的影响 0059 说 明 书 CN 105816422 A 11 9/17 页 12 0060 结果分析 ： 00

37、61 将水飞蓟宾溶解在注射用有机溶媒中， 然后注入磺丁基醚 - 环糊精溶液制备 包合物， 所达到的料液状态， 与不含注射用有机溶媒时的严重浑浊相比， 澄清度显著增大。 可见， 处方中的注射用有机溶媒可较好的将水飞蓟宾包裹在磺丁基醚 - 环糊精分子中， 显著的提高了包裹效果。虽然料液中有极少量药物未被包裹， 但通过添加适量的助溶剂予 以解决(见实施例3)。 故处方中的有注射用有机溶媒是结合水飞蓟宾特定的理化性质所必 须匹配的， 是本发明的重要技术特征之一， 否则将无法进行包裹。 0062 实施例 3 ： 助溶剂对水飞蓟宾注射剂制备的影响 0063 处方中的助溶剂， 一方面是用来解决制备包合物时包

38、裹不完全的问题， 即实施例 2 中所提到的料液出现个别细小微粒悬浮的现象 ； 另一方面是助溶剂的加入可保证冻干后样 品具有良好的复溶性。故助溶剂使本发明所制备的水飞蓟宾注射剂质量更加可靠。对比试 验时， 在相同的处方组成与用量下， 考察加助溶剂与不加助溶剂对水飞蓟宾注射剂的质量 影响， 以助溶剂二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 - 聚乙二醇 2000(DSPE-MPEG2000) 为例予以说明。 0064 (1) 不含助溶剂的水飞蓟宾注射剂的制备方法与结果 0065 称取水飞蓟宾2g、 20g聚乙二醇400， 混合， 在55下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取磺丁基醚 - 环糊精 50g、 甘露醇

39、50g， 加注射用水溶解至 1000ml， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机相与水相搅拌混合， 得包合液， 用 0.22m 滤芯除菌过滤， 进行中间体测定， 即取样 观察过滤前后的溶液状态与药物的标示百分含量 ； 将滤液分装成5ml/瓶、 冻干、 封口。 冻干 后加注射用水进行复溶， 在灯检仪下观察溶液状态， 并将复溶液过 0.22m 滤膜， 测定续滤 液中药物标示百分含量， 结果如表 4。 0066 表 4 不含助溶剂的水飞蓟宾注射剂的结果 0067 项目溶液状态标示含量百分比 包合液滤前基本澄清， 有少许细微粒悬浮99.76 包合液滤后完全澄清97.07 说 明 书 CN 105816422

40、 A 12 10/17 页 13 冻干复溶后有明显微粒悬浮， 显乳光95.33 0068 结果分析 ： 0069 不含助溶剂， 在制备过程中有部分药物不能完全包裹， 除菌过滤不顺畅， 阻力较 大， 对药物有截留， 不利于批量生产， 且冻干后不能完全复溶。 0070 (2) 含助溶剂的包合溶液的制备 0071 称取水飞蓟宾2g、 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-MPEG2000)0.1g、 20g 聚乙二醇 400， 混合， 在 55下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取磺丁基醚 - 环糊精 50g、 甘露醇 50g， 加注射用水溶解至 1000ml， 搅拌溶解， 得水相

41、； 将有机相与水相搅拌混合， 得包合液， 用 0.22m 滤芯除菌过滤， 进行中间体测定， 即取样观察过滤前后的溶液状态与 药物的标示百分含量 ； 将滤液分装成 5ml/ 瓶、 冻干、 封口。冻干后加注射用水进行复溶， 在 灯检仪下观察溶液状态， 并将复溶液过 0.22m 滤膜， 测定续滤液中药物标示百分含量， 结 果如表 5。 0072 表 5 含助溶剂的水飞蓟宾注射剂的结果 0073 项目溶液状态标示含量百分比 包合液滤前完全澄清100.04 包合液滤后完全澄清99.92 冻干复溶后完全澄清99.78 0074 结果分析 ： 0075 加助溶剂后， 在制备过程中药物包裹完全， 除菌过滤顺畅

42、， 过滤前后药物含量未见 明显变化， 且冻干后能够完全复溶。故处方中添加助溶剂是本发明的重要技术特征。 0076 实施例 4 一种水飞蓟宾注射剂 0077 称取水飞蓟宾2g、 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-MPEG2000)0.1g、 20g 聚乙二醇 400， 混合， 在 55下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取磺丁基醚 - 环糊精 40g、 甘露醇 60g， 置于 800ml 注射用水中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机相与水相混合， 混匀， 然 后用注射用水定容至 1000ml， 得药物溶液 ； 用枸橼酸调节药物溶液的 pH 值为 3.50 ； 加针用 活性炭

43、1g， 吸附 30 分钟， 然后将料液通过 1m 钛棒过滤除炭、 0.22m 滤芯除菌 ； 分装、 冻 干、 封口， 即得水飞蓟宾冻干粉针剂。 0078 实施例 5 一种水飞蓟宾注射剂 0079 称取水飞蓟宾2g、 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-MPEG2000)0.1g、 20g 聚乙二醇 400， 混合， 在 55下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取磺丁基醚 - 环糊精 40g， 置于 900ml 注射用水中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机相与水相混合， 混匀， 然后用注射用 水定容至 1000ml， 得药物溶液 ； 用枸橼酸调节药物溶液的 pH 值为 3.50

44、 ； 加针用活性炭 1g， 吸附 30 分钟， 然后将料液通过 1m 钛棒过滤除炭、 0.22m 滤芯除菌 ； 分装、 封口， 即得水 飞蓟宾注射液。 0080 实施例 6 一种水飞蓟宾注射剂 说 明 书 CN 105816422 A 13 11/17 页 14 0081 称取水飞蓟宾10g、 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-MPEG2000)10g、 100g 聚乙二醇 400， 混合， 在 60下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取磺丁基醚 - 环糊 精 300g、 木糖醇 50g、 山梨醇 50g、 甘露醇 100g， 置于 350ml 注射用水中， 搅拌溶解， 得

45、水相 ； 将有机相与水相混合， 混匀， 然后用注射用水定容至 1000ml， 得药物溶液 ； 用磷酸二氢钾、 磷酸氢二钾调节药物溶液的pH值为8.00 ； 加针用活性炭5g， 吸附15分钟， 然后将料液通过 1m 钛棒过滤除炭、 0.22m 滤芯除菌 ； 分装、 冻干、 封口， 即得水飞蓟宾冻干粉针剂。 0082 实施例 7 一种水飞蓟宾注射剂 0083 称取水飞蓟宾 8g、 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 - 聚乙二醇 2000(DSPE-MPEG2000)5g、 50g 聚乙二醇 50， 混合， 在 70下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取磺丁基醚 - 环糊精 200g、 蔗糖50g、 甘露醇

46、100g， 置于550ml注射用水中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机相与水相混 合， 混匀， 然后用注射用水定容至 1000ml， 得药物溶液 ； 用磷酸二氢钠、 磷酸氢二钠调节药 物溶液的 pH 值为 7.00 ； 加针用活性炭 3g， 吸附 20 分钟， 然后将料液通过 1m 钛棒过滤除 炭、 0.22m 滤芯除菌 ； 分装、 冻干、 封口， 即得水飞蓟宾冻干粉针剂。 0084 实施例 8 一种水飞蓟宾注射剂 0085 称取水飞蓟宾 5g、 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 - 聚乙二醇 2000(DSPE-MPEG2000)3g、 20g 聚乙二醇 400， 混合， 在 50下加热搅拌， 使溶解，

47、 得有机相 ； 称取磺丁基醚 - 环糊精 100g、 海藻糖 40g、 甘露醇 60g， 置于 700ml 注射用水中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机相与水相 混合， 混匀， 然后用注射用水定容至 1000ml， 得药物溶液 ； 用盐酸、 枸橼酸调节药物溶液的 pH值为2.00 ； 加针用活性炭2g， 吸附30分钟， 然后将料液通过1m钛棒过滤除炭、 0.22m 滤芯除菌 ； 分装、 冻干、 封口， 即得水飞蓟宾冻干粉针剂。 0086 实施例 9 一种水飞蓟宾注射剂 0087 称 取 水 飞 蓟 宾 0.5g、二 硬 脂 酰 磷 脂 酰 乙 醇 胺 - 聚 乙 二 醇 2000(DSPE-M

48、PEG2000)0.01g、 5g 聚乙二醇 400， 混合， 在 40下加热搅拌， 使溶解， 得有机 相 ； 称取磺丁基醚-环糊精20g， 置于950ml注射用水中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将有机相与 水相混合， 混匀， 然后用注射用水定容至 1000ml， 得药物溶液 ； 用磷酸、 磷酸氢二钾调节药 物溶液的 pH 值为 6.00 ； 加针用活性炭 0.5g， 吸附 60 分钟， 然后将料液通过 1m 钛棒过滤 除炭、 0.22m 滤芯除菌 ； 分装、 封口， 即得水飞蓟宾注射液。 0088 实施例 10 一种水飞蓟宾注射剂 0089 称取水飞蓟宾1g、 10g聚乙二醇400， 混合， 在50下加热搅拌， 使溶解， 得有机相 ； 称取磺丁基醚 - 环糊精 30g、 甘露醇 40g， 置于 900ml 注射用水中， 搅拌溶解， 得水相 ； 将 有机相与水相混合， 混匀， 然后用注射用水定容至 1000ml， 得药物溶液 ； 用盐酸、 枸橼酸、 枸 橼酸二钠调节药物溶液的 pH 值为 2.50 ； 加针用活性炭 1