一种沙门氏菌显色培养基.pdf

1、(10)申请公布号 CN 104278074 A (43)申请公布日 2015.01.14 CN 104278074 A (21)申请号 201410483147.0 (22)申请日 2014.09.18 C12Q 1/10(2006.01) (71)申请人 青岛永通电梯工程有限公司 地址 266000 山东省青岛市市南区香港中路 18 号 A 座 1801 室 (72)发明人 宋永光 吴联顺 丁兆年 (74)专利代理机构 北京科亿知识产权代理事务 所 ( 普通合伙 ) 11350 代理人 苏雪雪 (54) 发明名称 一种沙门氏菌显色培养基 (57) 摘要 本发明为微生物领域， 特别涉及一种沙

2、门氏 菌显色培养基， 所述培养基的组分包括糖发酵基 础肉汤、 2.0g/L 硫酸锰、 4.0g/L 月示胨、 5.2g/L 酵母浸粉、 10.0g/L 枸橼酸钠、 10g/L 硫代硫酸钠、 2.0g/L 磷酸氢二钠、 3.0g/L 磷酸二氢钠、 5.5g/ L 牛胆盐、 2.0g/L 去氧胆酸钠、 0.0055g/L 煌绿、 0.1g/L 显色剂， pH 值为 7.0-7.2。所述糖发酵 基础肉汤为每升糖发酵基础肉汤中含有胰蛋白 胨 12.0g、 葡萄糖 2.0g、 牛肉浸粉 5.0g、 亚硫酸盐 0.8g、 硫酸镁0.588g、 溴甲酚紫0.04g、 15.0g/L琼 脂， 其余为蒸馏水。本

3、发明培养基组方简单， 制备 操作方便， 成本低， 利于推广应用 ； 菌生长迅速， 变异率低 ； 便于观察， 分析。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 (10)申请公布号 CN 104278074 A CN 104278074 A 1/1 页 2 1. 一种沙门氏菌显色培养基， 其特征在于所述培养基的组分包括糖发酵基础肉汤、 2.0g/L 硫酸锰、 4.0g/L 月示胨、 5.2g/L 酵母浸粉、 10.0g/L 枸橼酸钠、 10g/L 硫代硫酸钠、 2.0g/L 磷酸氢二钠、 3.

4、0g/L 磷酸二氢钠、 5.5g/L 牛胆盐、 2.0g/L 去氧胆酸钠、 0.0055g/L 煌 绿、 0.1g/L 显色剂， pH 值为 7.0-7.2。 2. 根据权利要求 1 所述的沙门氏菌显色培养基， 其特征在于所述糖发酵基础肉汤为每 升糖发酵基础肉汤中含有胰蛋白胨 12.0g、 葡萄糖 2.0g、 牛肉浸粉 5.0g、 亚硫酸盐 0.8g、 硫 酸镁 0.588g、 溴甲酚紫 0.04g、 15.0g/L 琼脂， 其余为蒸馏水。 权 利 要 求 书 CN 104278074 A 2 1/2 页 3 一种沙门氏菌显色培养基 技术领域 0001 本发明为微生物领域， 特别涉及一种沙门氏

5、菌显色培养基。 背景技术 0002 沙门氏菌是具有共同特征的一大属革兰氏阴性肠道杆菌， 为美国病理学家沙门 (Daniel Elmer Salmon) 最早发现。 0003 沙门氏菌目前已经发现 1800 种以上， 按抗原成分可分为甲、 乙、 丙、 丁、 戊等基本 菌型。其中于人类疾病有关的主要有甲组的副伤寒甲杆菌， 乙组的副伤寒乙杆菌和鼠伤寒 杆菌， 丙组的副伤寒丙杆菌和猪霍乱杆菌， 丁组的伤寒和肠炎杆菌。 0004 大多数能引起家畜、 鼠类和禽类等动物的疾病， 少数种能引起人类的疾病， 但有时 人吃了含菌食物也引起食物中毒。 0005 世界上微生物间的多样化和变异性及物种生境的生态复杂性，

6、 带来了探讨、 了解 微生物的广泛性、 复杂性和长久性。 微生物的一个物种就是一个独特的基因库， 微生物的新 陈代谢是错综复杂的生命活动， 在长期的生物进化中， 形成了一套完整统一的灵敏调节系 统， 依靠这种调节系统， 严格控制各种代谢活动。有条不紊协调进行并灵活适应环境。不同 培养基， 因培养基配方不同， 影响其生长和变异情况。 0006 培养基 (Medium) 是供微生物、 植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料， 一般都含有碳水化合物、 含氮物质、 无机盐 ( 包括微量元素 ) 以及维生素和水等。有的培养 基还含有抗菌素和色素， 用于单种微生物培养和鉴定。 培养基由于配制的原料不同

7、， 使用要 求不同， 而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、 吸潮后， 易被细菌污染或分解变 质， 因此一般培养基必须防潮、 避光、 阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基 ( 如组织培 养基 )， 较长时间的贮存， 必须放在 3 6的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管， 现在 均改制成粉末。 0007 培养基根据化学分类为天然培养基、 组合培养基和半组合培养基 ； 根据物理分类 为液体培养基、 固定培养基和脱水培养基 ； 根据微生物分类为选择性培养基、 鉴别培养基。 0008 目前还不能完全从生化反应的基本原理来推断和计算出适合某一菌种的培养基 配方， 只能用生物化学、 细胞生物学、 微

8、生物学等的基本理论， 参照前人所使用的较适合某 一类菌种的经验配方， 再结合所用菌种和产品的特性， 采用摇瓶、 玻璃罐等小型发酵设备， 按照一定的实验设计和实验方法选择出较为适合的培养基。 0009 培养基设计的基本步骤是 ： 0010 根据前人的经验和培养基成分确定时一些必须考虑的问题， 初步确定可能的培养 基成分 0011 通过单因子实验最终确定出最为适宜的培养基成分 0012 当培养基成分确定后， 剩下的问题就是各成分最适的浓度， 由于培养基成分很多， 为减少实验次数常采用一些合理的实验设计方法。这些实验往往基于多因子实验， 包含均 匀设计、 正交实验设计、 响应面分析等。 说 明 书

9、CN 104278074 A 3 2/2 页 4 发明内容 0013 本发明克服现有技术中的不足， 提供一种沙门氏菌显色培养基。 0014 本发明运用生物化学， 微生物学及无机、 有机、 分析化学和荧光技术的原理， 对不 同的碳源、 氮源、 无机盐类、 维生素、 生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选， 对培养基 的pH值、 离子强度、 氧化-还原电势、 表面张力、 气体环境等物化因子进行了比较， 研究出了 本发明的培养基。 0015 本发明所采用的技术方案为 ： 0016 一种沙门氏菌显色培养基， 所述培养基的组分包括糖发酵基础肉汤、 2.0g/L 硫酸 锰、 4.0g/L 月示胨、 5.2

10、g/L 酵母浸粉、 10.0g/L 枸橼酸钠、 10g/L 硫代硫酸钠、 2.0g/L 磷酸氢 二钠、 3.0g/L磷酸二氢钠、 5.5g/L牛胆盐、 2.0g/L去氧胆酸钠、 0.0055g/L煌绿、 0.1g/L显色 剂， pH 值为 7.0-7.2。 0017 在以上方案的基础上， 所述糖发酵基础肉汤为每升糖发酵基础肉汤中含有胰蛋白 胨 12.0g、 葡萄糖 2.0g、 牛肉浸粉 5.0g、 亚硫酸盐 0.8g、 硫酸镁 0.588g、 溴甲酚紫 0.04g、 15.0g/L 琼脂， 其余为蒸馏水。 0018 称取本品 50.0g， 加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中， 水浴煮沸 2

11、-3 分钟， 分装无菌 试管， 每 10ml， 备用。 0019 注 ： 无需高压灭菌。 0020 本发明的有益效果 ： 0021 1、 培养基组方简单， 制备操作方便， 成本低， 利于推广应用 ； 0022 2、 菌生长迅速， 变异率低 ； 0023 3、 便于观察， 分析。 具体实施方式 0024 实施例 1 ： 0025 一种沙门氏菌显色培养基， 所述培养基的组分包括糖发酵基础肉汤、 2.0g/L 硫酸 锰、 4.0g/L 月示胨、 5.2g/L 酵母浸粉、 10.0g/L 枸橼酸钠、 10g/L 硫代硫酸钠、 2.0g/L 磷酸氢 二钠、 3.0g/L磷酸二氢钠、 5.5g/L牛胆盐、 2.0g/L去氧胆酸钠、 0.0055g/L煌绿、 0.1g/L显色 剂， pH 值为 7.0-7.2。 0026 所述糖发酵基础肉汤为每升糖发酵基础肉汤中含有胰蛋白胨 12.0g、 葡萄糖 2.0g、 牛肉浸粉5.0g、 亚硫酸盐0.8g、 硫酸镁0.588g、 溴甲酚紫0.04g、 15.0g/L琼脂， 其余为 蒸馏水。 0027 称取本品 50.0g， 加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中， 水浴煮沸 2-3 分钟， 分装无菌 试管， 每 10ml， 备用。 0028 注 ： 无需高压灭菌。 说 明 书 CN 104278074 A 4