髓过氧化物酶测定试剂盒.pdf

1、(10)申请公布号 CN 102426235 A (43)申请公布日 2012.04.25 CN 102426235 A *CN102426235A* (21)申请号 201010607498.X (22)申请日 2010.12.28 G01N 33/573(2006.01) G01N 33/536(2006.01) (71)申请人 四川省新成生物科技有限责任公司 地址 611731 四川省成都市高新区天辰路 88 号 (72)发明人 周方银 陈卫 周帅 谭韬 (74)专利代理机构 成都立信专利事务所有限公 司 51100 代理人 游兰 (54) 发明名称 髓过氧化物酶测定试剂盒 (57) 摘

2、要 本发明提供一种髓过氧化物酶测定试剂 盒。其特征在于包括两种试剂， 其配合比例按重 量百分数计是试剂 1 试剂 2=50 90 10 50， 其中， 按重量百分数计是， 试剂 1 组分为氯 化钠 110、 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0.410、 表面活性剂 0.052、 叠氮钠 0.020.2、 超纯水 77.898.53 ； 试剂 2 组分为抗体 - 纳米微球复 合物 0.01-5、 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0.410、 表面活性剂 0.052、 叠氮钠 0.020.2、 超纯水 82.899.52。该测定试剂盒测定时间短， 特异性 好， 精密度高， 准确度好， 且节约试剂位， 可普遍用 于

3、各类全自动化分析仪。 用于测定髓过氧化物酶。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 5 页 CN 102426242 A1/1 页 2 1. 一种髓过氧化物酶测定试剂盒， 其特征在于包括两种试剂， 其配合比例按重量百分 数计是试剂 1: 试剂 2= 50 90:10 50， 其中， 试剂 1 组分按重量百分数计是 ： 氯化钠 1.00 10.00， 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0.4010.00， 表面活性剂 0.052.00， 叠氮钠 0.020.20， 超纯水 77.8098.53 ； 试剂 2 组分按重量百分数计是 ：

4、 抗体 - 纳米微球复合物 0.01-5.00， 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0.4010.00， 表面活性剂 0.052.00， 叠氮钠 0.020.20， 超纯水 82.8099.52。 2. 如权利要求 1 所述的髓过氧化物酶测定试剂盒， 其特征在于抗体 - 纳米微球复合 物是兔抗人 MPO- 纳米复合物， 鸡抗人 MPO- 纳米复合物， 鸭抗人 MPO- 纳米复合物， 鹅抗人 MPO-纳米复合物， 羊抗人MPO-纳米复合物， 鼠抗人MPO-纳米复合物、 马抗人MPO-纳米复合 物中的一种， 其中纳米材料的直径是 50 5000nm 的微球。 3.如权利要求1所述的髓过氧化物酶测定试剂盒，

5、其特征在于表面活性剂是吐温-20， 曲拉通， EMULGEN120 中的一种。 权 利 要 求 书 CN 102426235 A CN 102426242 A1/5 页 3 髓过氧化物酶测定试剂盒 技术领域 0001 本发明涉及一种测定试剂盒， 特别是涉及一种髓过氧化物酶测定试剂盒。 背景技术 0002 髓过氧化物酶 (myeloperoxidase， MPO) 又称过氧化物酶， 是过氧化物酶家族中的 重要成员 , 是一种由活化的中性粒细胞、 单核细胞、 巨噬细胞分泌的白细胞酶， 是一种重要 的含铁溶酶体， 存在于髓系特异性标志， MPO 水平与中性粒细胞激活程度之间存在极显著的 相关性， 是

6、中性粒细胞的活化标志物。 现在， 国内外生产的髓过氧化物酶试剂盒大量采用了 ELISA方法和选择抑制法。 其中ELISA法是利用基本的抗原-抗体特异性反应的原理进行检 查， 但操作过程复杂而且会直接影响检测结果， 比如洗板的干净程度将直接影响测定结果， 并且该方法无法实现精确定量的目的， 测定一个标本需要 30 分钟数小时。选择抑制法， 因这种试剂盒采用三试剂三步测定的基本原理和计算模式， 只能在支持 （具有） 添加三种或 以上试剂同时检测 15 分钟反应的全自动生化分析仪测定， 使用极为复杂和不便， 而且试剂 中的抑制剂无法保证其对酶活性抑制的特异性和专一性， 测定的唯一性有待考究， 在实践

7、 的过程中发现其精密度较差。 发明内容 0003 本发明的目的在于克服上述缺点， 提供一种基于抗原 - 抗体特异性反应原理， 测 定时间短， 特异性好， 精密度高， 准确度好， 且节约试剂位， 可普遍用于各类全自动化分析仪 的髓过氧化物酶测定试剂盒。 0004 本发明髓过氧化物酶测定试剂盒包括两种试剂， 其配合比例按重量百分数计是， 试剂 1: 试剂 2= 50 90:10 50， 其中， 试剂 1 组分按重量百分数计是 ： 氯化钠 1 .0010.00， 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0.4010.00， 表面活性剂 0.052.00， 叠氮钠 0.020.20， 超纯水 77.8098.53 ；

8、 试剂 2 组分按重量百分数计是 ： 抗体 - 纳米微球复合物 0.015.00， 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0.4010.00， 表面活性剂 0.052.00， 叠氮钠 0.020.20， 超纯水 82.899.52。 0005 其中， 抗体 - 纳米微球复合物是兔抗人 MPO- 纳米复合物， 鸡抗人 MPO- 纳米复合 物， 鸭抗人 MPO- 纳米复合物， 鹅抗人 MPO- 纳米复合物， 羊抗人 MPO- 纳米复合物， 鼠抗人 说 明 书 CN 102426235 A CN 102426242 A2/5 页 4 MPO-纳米复合物， 马抗人MPO-纳米复合物中的一种。 其中， 纳米材料的直径

9、中505000nm 的微球 ； 表面活性剂是吐温 -20， 曲拉通， EMULGEN120 中的一种。使用时， 按试剂 1: 试剂 2= 50 90:10 50 的比例范围， 分别取出试剂 1 和试剂 2， 混合后用于测定一份血清标本。 0006 本发明髓过氧化物酶测定试剂盒的优点在于测定时间短， 只需要 8-10 分钟， 特异 性好， 精密度高， 准确度好， 且节约试剂位， 可普遍用于各类全自动化分析仪， 测定髓过氧化 物酶。使用时将含有髓过氧化物酶或者怀疑含有髓过氧化物酶的血清样品与抗体 - 纳米微 球复合物结合， 产生不溶性的抗原 - 抗体复合物， 产生一定浊度。浊度高低反映样品中髓过

10、氧化物酶的含量， 通过与同样处理的髓过氧化物酶配套校准品比较， 即可计算出样品中髓 过氧化物酶的含量。 具体实施方式 0007 实施例 1 试剂盒按重量百分数计是试剂 1: 试剂 2=50:50。 0008 其中， 试剂 1 组分按重量百分数计是 ： 氯化钠 1.00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0.40 吐温 -20 0.05 叠氮钠 0.02 超纯水 98.53 将上述成分混合后即得试剂 1。 0009 试剂 2 组分按重量百分数计是 ： 兔抗人 MPO- 纳米复合物 0.01 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0.40 吐温 -20 0.05 叠氮钠 0.02 超纯水 99.52 将上述成分混合后即得

11、试剂 2。 0010 实施例 2 试剂盒按重量百分数计是试剂 1: 试剂 2=55:45。 0011 其中， 试剂 1 组分按重量百分数计是 ： 氯化钠 2.00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 1.00 曲拉通 0.10 叠氮钠 0.06 超纯水 96.84 将上述成分混合后即得试剂 1。 0012 试剂 2 组分按重量百分数计是 ： 鸡抗人 MPO- 纳米复合物 1.00 说 明 书 CN 102426235 A CN 102426242 A3/5 页 5 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 1.00 曲拉通 0.10 叠氮钠 0.06 超纯水 97.84 将上述成分混合后即得试剂 2。 0013 实施例 3

12、 试剂盒按重量百分数计是试剂 1: 试剂 2=60:40。 0014 其中， 试剂 1 组分按重量百分数计是 ： 氯化钠 3.00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 2.00 EMULGEN120 0.50 叠氮钠 0.10 超纯水 94.40 将上述成分混合后即得试剂 1。 0015 试剂 2 组分按重量百分数计是 ： 鸭抗人 MPO- 纳米复合物 1.80 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 2.00 EMULGEN120 0.50 叠氮钠 0.10 超纯水 95.60 将上述成分混合后即得试剂 2。 0016 实施例 4 试剂盒按重量百分数计是试剂 1: 试剂 2=65:35。 0017 其中， 试剂 1 组

13、分按重量百分数计是 ： 氯化钠 5.00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 3.00 吐温 -20 0.80 叠氮钠 0.14 超纯水 91.06 将上述成分混合后即得试剂 1。 0018 试剂 2 组分按重量百分数计是 ： 鹅抗人 MPO- 纳米复合物 3.00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 3.00 吐温 -20 0.80 叠氮钠 0.14 超纯水 93.06 将上述成分混合后即得试剂 2。 说 明 书 CN 102426235 A CN 102426242 A4/5 页 6 0019 实施例 5 试剂盒按重量百分数计是试剂 1: 试剂 2=70:30。 0020 其中， 试剂 1 组分按重量百分数计是

14、： 氯化钠 7.00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 4.00 曲拉通 1.20 叠氮钠 0.16 超纯水 87.64 将上述成分混合后即得试剂 1。 0021 试剂 2 组分按重量百分数数计是 ： 羊抗人 MPO- 纳米复合物 4.00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 4.00 曲拉通 1.20 叠氮钠 0.16 超纯水 90.64 将上述成分混合后即得试剂 2。 0022 实施例 6 试剂盒按重量百分数计是试剂 1: 试剂 2=80:20。 0023 其中， 试剂 1 组分按重量百分数计是 ： 氯化钠 8.00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 8.00 EMULGEN120 1.60 叠氮钠 0.18 超纯水 8

15、2.22 将上述成分混合后即得试剂 1。 0024 试剂 2 组分按重量百分数计是 ： 鼠抗人 MPO- 纳米复合物 4.50 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 8.00 EMULGEN120 1.60 叠氮钠 0.18 超纯水 85.72 将上述成分混合后即得试剂 2。 0025 实施例 7 试剂盒按重量百分数计是试剂 1: 试剂 2=90:10。 0026 其中， 试剂 1 组分按重量百分数计是 ： 氯化钠 10.00 说 明 书 CN 102426235 A CN 102426242 A5/5 页 7 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 10.00 EMULGEN120 2.00 叠氮钠 0.20 超纯水 77.80 将上述成分混合后即得试剂 1。 0027 试剂 2 组分按重量百分数计是 ： 马抗人 MPO- 纳米复合物 5.00 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 10.00 EMULGEN120 2.00 叠氮钠 0.20 超纯水 82.8 将上述成分混合后即得试剂 2。 说 明 书 CN 102426235 A